HPLC-ELSD法测定木薯叶片中海藻糖的含量

建立了一种高效、快速的分析木薯叶片中海藻糖含量的方法,即高效液相色谱-蒸发光散射检测法(High Performance Liquid Chromatography with Evaporative Light Scattering Detector,HPLC-ELSD).样品由水抽提,采用Xbridge-NH2色谱柱,流动相为乙腈/水加0.1％ NH4OH(30/70,v/v),流速1.0 mL/min,柱温25.0℃,ELSD检测器漂移管温度为85.0℃,氮气流速为2.0 L/min,增益为2.该条件下海藻糖标准品和木薯叶片中海藻糖的分离效果均良好,在1 ～20 μg质量范围内呈良好的线性关系(R2=0.9952).该方法精密度实验结果RSD=3.1％,表明仪器精密度良好,海藻糖的平均回收率为100.7％,符合回收率在95％～105％的要求,稳定性试验的RSD为3.1％.表明样品较为稳定.     

HPLC—ELSD测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量

为建立一种简便、准确、灵敏测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖含量的高效液相色谱蒸发光散射检测方法。使用Phenomenex-NH2(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱分离,以乙腈∶水(80∶20,V∶V)为流动相,流速为1.5 mL/min,ELSD为检测器,漂移管温度45℃,N2流量3.5 bar。结果表明：果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖在50～2 000 μg/mL内呈良好线性关系,4种糖的回收率均为96.1%～100.4%,测定的相对标准偏差为0.2%～0.9%。此方法操作简便、快捷、准确,用于实际样品的测定后,获得了令人满意的结果。     

HPLC法测定菠萝果实中8种维生素含量的研究

优化了利用高效液相色谱法测定菠萝果实中脂溶性维生素（VA、VE）和水溶性维生素（VC、 VB3、 VB12、 VB6、 VB2、 VB1）的方法; 脂溶性维生素以甲醇 ∶ 乙酸乙酯（V甲醇 ∶ V乙酸乙酯=95 ∶ 5）溶液为流动相, 流速为1.0 mL/min, 柱温25 ℃, 检测波长275 nm。 水溶性维生素以0.005 mol/mL己烷磺酸钠（pH3.2）∶ 甲醇（V乙烷磺酸钠∶ V甲醇=7∶ 3）为流动相, 流速为1.0 mL/min, 柱温30 ℃,于254 nm处测定吸光值。试验结果表明： 其线性相关系数在0.999 7～1.000 0之间, 线性关系良好。VA、 VE的峰面积RSD分别为1.48％、1.31％;VC、 VB3、 VB12、 VB6、 VB2和VBl的峰面积RSD分别为1.35％、 1.78％、 1.50％、 1.52％、 0.93％和1.10％。VA、 VC、 VB3、 VB6的平均加样回收率分别为94.2％、 102.3％、 91.0％、 95.2％。     

超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用法测定甘蔗中噻虫胺 的残留

本研究建立了超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）法检测甘蔗中噻虫胺残留量的方法。甘蔗植株、茎 秆及嫩稍样品经乙腈-水（V∶V=2∶1）提取,Envi-Carb 复合 PSA 固相萃取小柱净化,ACQUITY UPLC BEH C18 色谱 柱分离,电喷雾正离子源（ESI+ ）多反应监测（MRM）模式检测,外标法定量。结果表明：采用 Envi-Carb 固相萃取 小柱,以乙腈为淋洗液,在小柱中添加 PSA 净化效果最好。在甘蔗植株、茎秆及嫩稍中分别添加 0.04、0.4、1 mg/kg 噻虫胺,平均回收率为 81.4%~109.1%,相对标准偏差（RSD）为 0.9%~10.9%。该方法的最小检出量为 0.4 ng,在甘蔗 中的最低检出浓度（LOD）为 0.04 mg/kg,能满足农药残留检测的要求。     

不同采收期老翘中化学成分含量测定

[目的]通过对不同采收期老翘内连翘苷、连翘酯苷A、浸出物的含量测定,为老翘适宜采收期的确定提供科学依据。[方法]采用HPLC法测定不同采收期老翘果实中连翘苷、连翘酯苷A的含量;采用《中国药典》2010版一部(附录ⅩΑ)项下醇溶性浸出物冷浸法测定;以Luna5uC18(2)100A(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,连翘苷测定流动相为乙腈-水(25∶75,V∶V),检测波长为277 nm,柱温为室温,流速为1.0 mL/min;连翘酯苷A测定流动相为乙腈-0.4%冰醋酸溶液(15∶85,V∶V),检测波长为330 nm,柱温为室温,流速为1.0mL/min。[结果]连翘苷在3.33~13.32μg范围内线性关系良好(R2=0.999 7),平均回收率为98.9%,RSD=1.8%;连翘酯苷A在4.17~6.69μg具有良好的线性关系(R2=0.999 7),平均回收率为101.7%,RSD=0.9%。[结论]连翘苷、连翘酯苷A、浸出物在老翘整个采收期试验过程中都呈现不断下降的趋势,其中连翘苷的含量测定结果在老翘整个采收期试验过程中都达不到2010版药典的规定标准,连翘酯苷A、浸出物的含量结果分别在2013年1月20日、2月25日采集的样品测定结果中达不到2010版药典的规定标准。     

高效液相色谱法测定胡椒叶片中6-BA与GA3激素含量

采用Waters nova-pak C18色谱柱(3.9 cm×15 cm,5 μm),87双波长紫外检测器,以甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)＝15∶15∶70(体积比)为流动相,流速0.8 mL/min,柱温35℃,检测波长210 nm的条件下同时分离测定胡椒叶片中GA3、6-BA植物激素。GA3和6-BA各峰分离效果理想,加标回收率分别为90.80%和88.78%。     

HPLC法测定白藜芦醇在大鼠肝微粒体体外代谢含量

目的建立HPLC法测定白藜芦醇在大鼠肝微粒体体外代谢的方法。方法采用依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)进行分离,以乙腈-水(35∶65,V∶V)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为306nm,进样体积20μL。结果白藜芦醇在300~12.5μmol/L范围内呈良好线性,线性相关系数为0.9991,平均回收率为98.78%,相对标准偏差(RSD)小于9.13%。结论结果表明该方法操作简单、稳定可靠,可满足实验要求。     

HPLC法测定红麻青贮饲料中的有机酸

运用高效液相色谱法对红麻青贮饲料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸4种有机酸的含量进行同时测定。采用0.02 mol/L NaH_2PO_4(pH=2.70)与甲醇作为流动相,在Dionex Ultimate 3000液相色谱仪,色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18柱,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm,进样体积20μL条件下对青贮样品有机酸含量进行定性分析。结果表明,4种待测有机酸在预定检测范围内线性关系良好(R2≥0.9982),精密度变异系数5%,样品回收率在98.73%~102.79%之间。该方法操作简单准确,重复性好,可用于红麻青贮饲料中有机酸的测定。     

HPLC-MS/MS测定人参中噁霉灵农药残留量

目的 建立一种高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人参中噁霉灵农药残留的方法。方法样品经乙腈匀浆提取,过C₁₈小柱后浓缩定容至1mL,0.22μm滤膜过滤,液相色谱-质谱法测定噁霉灵的残留量。液相色谱-质谱仪带电喷雾离子源,色谱柱：Agilent InfinityLab Poroshell 120SB-C₁₈(2.1mm×100mm,2.7-Micron),流动相：以乙腈、甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速0.25mL/min。柱温：40℃。结果 噁霉灵在0.005～0.4μg/mL范围内线性良好,相关系数r为0.998。样品加标回收率为80.9%～100.1%。结论 本方法可适用于人参中噁霉灵残留量的检测。     

分散固相萃取法测定黄瓜中的喹啉铜残留量

建立了分散固相萃取（d-SPE）-高效液相色谱（HPLC）分析测定黄瓜中喹啉铜残留量的方法。样品采用乙腈和0.1 mol/L盐酸混合溶液提取,C₁₈填料净化,高效液相色谱仪分离,紫外检测器检测。其色谱条件为：色谱柱SunFireC₁₈（4.6×150 mm,5 μm）,流动相为十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲液-乙腈（65∶35）体系,流速0.6 mL/min,检测波长250 nm。结果表明：在0.02、0.2、2 mg/kg三个添加水平下,喹啉铜回收率在92.3%~107.7%之间,相对标准偏差（RSD）在2.0%~7.7%之间。该方法操作简单、灵敏度和准确度高,能够用于黄瓜中喹啉铜的残留分析。     

基于HPLC法的‘迷你红柚’果实中类胡萝卜素组成分析

为研究‘迷你红柚’果实发育过程中的类胡萝卜素组分与含量变化,本研究采用正乙烷-无水乙醇-丙酮（2∶1∶1）萃取法对‘迷你红柚’果实中的类胡萝卜素进行快速提取,利用高效液相色谱（HPLC）测定了果实海绵层、囊衣和汁胞及其不同发育时期的类胡萝卜素组分和含量。结果表明,流动相为乙腈-甲醇-四氢呋喃（90∶5∶5）,流速0.3 mL/min,进样量10 μL,柱温40 ℃,样品室温度20 ℃,检测波长450 nm,3种类胡萝卜素8 min内即可较好地分离;‘迷你红柚’成熟果实中含有3种类胡萝卜素,含量从高到低依次是番茄红素、β-胡萝卜素和玉米黄素;类胡萝卜素主要积累在汁胞中,番茄红素是红色的汁胞、囊衣和海绵层中最重要的色素;随着果实的发育成熟,类胡萝卜素的含量逐渐升高,番茄红素和β-胡萝卜素在汁胞和囊衣中随着果实的发育而累积,玉米黄素只在成熟阶段的果实中检测到,且含量显著低于番茄红素和β-胡萝卜素。研究结果为‘迷你红柚’果实品质评价和开发利用提供科学依据。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定茶叶中单糖和双糖

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）测定茶叶中单糖和双糖的检测方法。采用Shodex NH₂P-50-4E（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,梯度洗脱程序为：0~14 min,85%乙腈;14~16 min,85%~70%乙腈;16~28 min,70%乙腈;28~32 min,70%~85%乙腈,流速：1.0 mL/min,柱温：20℃,雾化管温度为30℃,漂移管温度为70℃,氮气压力为310.275 Pa。鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖在3.202~184.828 μg范围内程良好的线性关系,8种糖的加标回收率在90.97%~105.07%之间,最低检测限（S/N=3）范围在6.976~1376.297 ng。该方法具有操作简便,分离效果好等特点。     

茶类胡萝卜素的高效液相色谱测定法

应用高效液相色谱法，研究分离测定茶类胡萝卜素的结果表明：采用己烷∶丙酮∶乙醇∶甲苯（１０∶７∶６∶７）与４０％甲醇氢氧化钾浸提皂化１２ｈ制备样品，使用Ｎｏｖａ－ＰａｋＣ１８不锈钢柱（３．９×１５０ｍｍ），乙腈∶三氯甲烷∶叔丁醇（８３∶１５∶２）作流动相，流量线性梯度洗脱，柱温２５℃等色谱条件，在４４０ｎｍ波长下检测，使茶叶中的４种主要类胡萝卜素（β－胡萝卜素，叶黄质，堇黄质，新黄质）在１０ｍｉｎ内得到了较好的分离。其分辨率高，分析时间短，重现性与线性关系良好，适合于大量试样的分析。     

大豆异黄酮的提取优化与测定

试验优化了大豆异黄酮的提取方法,建立了一套适用于实验室提取、测定异黄酮含量的高效液相色谱法(HPLC)标准体系。优化后建立的提取条件为:脱脂大豆样品粉末,加入体积浓度为80%的色谱级甲醇10 mL,室温下放置2 h,置于超声功率200 W条件下80℃水浴12 h,12 000 r·min~(-1)离心15 min,取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,待测液4℃保存。优化后的HPLC法:流动相选择甲醇-水(体积比30∶70),柱温设置40℃,波长为254 nm,流速为1 mL·min~(-1),进样体积10μL,进样时间26 min,采用峰面积法计算。结果表明:优化的HPLC法提取大豆异黄酮的效率高、精度高,可为实验室内高效提取大豆异黄酮提供技术参考。     

漳平水仙茶饼多酚的纯化及其体外活性研究

为了研究大孔树脂对水仙茶饼多酚的纯化效果,试验以水仙茶饼多酚粗提液为原料,比较了9种不同型号大孔树脂对水仙茶饼粗多酚的静态吸附和解吸性能,再以吸附率和解吸率为指标通过静态、动态吸附解吸试验。考察了各因素对LX-28树脂纯化水仙饼茶粗多酚的影响,最后探讨了纯化前后的水仙茶饼多酚的体外抗氧化和抑菌效果。结果表明:最佳纯化树脂LX-28,最佳吸附和解吸条件为1.5 mg/mL的质量浓度的水仙茶饼多酚粗提取液(pH4.0~5.0)以2.0 mL/min的流速上样95 mL,吸附平衡后去离子水冲洗至无色,再用70 mL,65%体积分数乙醇溶液(pH6.0)为洗脱剂,以3.0 mL/min流速洗脱,在此纯化条件下LX-28树脂对水仙茶饼多酚的吸附率和解吸率分别为(93.587±0.379)%和(95.330±1.282)%,树脂可重复使用4次,纯度提高了约3.04倍;对DPPH·和ABTS+·自由基清除率的IC50值分别从纯化前的1.279、3.682 mg/mL降低到0.295、1.525 mg/mL;对供试的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、米根霉和紫红曲霉均有不同程度的抑制作用,纯化后的水仙茶饼多酚的抑菌效果优于纯化前。     

响应面法优化海南可可豆中原花青素的提取工艺

本研究采用响应面分析法确定海南可可豆中原花青素提取的最佳工艺条件,对提取得率的影响因素进行单因素分析后,探讨料液比、乙醇浓度、提取时间和温度间的显著性影响和交互作用。结果表明：可可原花青素的最优提取工艺条件为乙醇浓度67%、料液比1∶20（g/mL）、提取时间88 min、提取温度76 ℃。此工艺条件下,可可原花青素提取得率为6.21%。此结果为海南可可豆的开发利用提供基础理论依据。     

配体交换色谱手性流动相法拆分和定量茶氨酸对映体

建立了配体交换色谱手性流动相法拆分茶氨酸对映体的方法。采用Polaris C₁₈柱;流动相为L-脯氨酸：Cu²⁺（摩尔比）为2:1,Cu²⁺浓度为0.5βmmol/L,pH6.8,甲醇的加入体积比为2%;波长254βnm;流速0.9βml/min;柱温30℃。L-茶氨酸的进样量在0.09542βμg~4.241βμg范围内峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.45%~100.4%之间;D-茶氨酸的进样量在0.08486βμg~4.243βμg范围峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.07%~100.1%之间。该方法通用,准确。     

响应面法优化枇杷花总黄酮超声波辅助提取工艺的研究

采用超声波辅助提取枇杷花中的总黄酮,研究超声波功率、乙醇浓度、提取温度、提取时间、液料比及提取次数对总黄酮提取得率的影响。根据单因素试验,选择在超声波功率80 W、一次浸提条件下优化提取工艺;采用Box-Behnken中心组合试验设计原理,设计4因素3水平试验,以响应面分析法优化乙醇浓度、提取温度、提取时间及液料比4个因素对总黄酮提取得率的影响。结果表明：当超声波功率为80 W时,枇杷花中总黄酮超声波辅助提取的优化工艺参数为：乙醇浓度47.33％、提取温度58.42 ℃、提取时间12.01 min、液料比（mL ∶ g）45.56 ∶ 1,在此条件下枇杷花总黄酮一次浸提的提取得率可达10.48％。