一氧化氮研究方法评析

本文介绍目前国内外研究一氧化氮(NO)的主要方法,包括电子顺磁共振成像技术(EPR Imaging technique)、液内分光光度检测法、NADPH-d 组织化学法、一氧化氮合酶—Ⅰ(NOS-Ⅰ)免疫细胞化学法及 NOS-Ⅰ免疫荧光技术等。     

一氧化氮对小鼠胚胎附植影响的研究

采用子宫角注射方法研究了一氧化氮(N0)对小鼠胚胎植入的影响,并采用组织切片的方法,光镜观察了一氧化氮对小鼠子宫及其内膜形态变化及脱膜化的影响。结果表明,与对照侧相比,L-NAME 0.2 mg/只处理组植入胚胎数降低,在L-NAME中加入NO供体硝普钠(SNP)时,则不影响胚胎植入数;附植过程中,妊娠侧的子宫内膜发育明显,上皮细胞增高,腺体发达,间质疏松,间质细胞增大,发生明显的蜕膜样变。抑制侧子宫内膜柱状上皮细胞相对较低,腺体数少,子宫内膜在附植后期出现较明显退行性变化,基质变得紧密。一氧化氮作为一种内源性平滑肌松驰剂和血管扩张剂,对子宫内膜MMP-9mRNA的表达有着极为显著的调节作用,在附植过程中一氧化氮合酶受到抑制后能显著降低MMP-9基因的表达,并进一步影响子宫内膜发育和胚胎的附植。     

补锌对白内障大鼠肾组织NO和NOS的影响

目的:探讨补锌对白内障大鼠肾组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法:应用硝酸还原酶法对模型组、治疗组及对照组大鼠肾匀浆中NO含量和NOS活性进行测定.结果:模型组及治疗组与对照组比较,肾匀浆中NO含量和NOS活性差异均无显著性意义(P＞0.05).结论:给白内障大鼠眼内补锌对其肾组织中NO含量和NOS活性无明显影响.     

身痛逐瘀汤通过调控P38 MAPK信号通路抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞一氧化氮的分泌

为研究身痛逐瘀汤对LPS诱导的巨噬细胞一氧化氮(NO)分泌的抑制作用及其机制。结果表明:身痛逐瘀汤选择性地抑制P38 MAPK信号通路,从而发挥明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞一氧化氮的分泌、一氧化氮合成酶(i NOS)蛋白质表达以及巨噬细胞内活性氧(ROS)水平的作用。     

一氧化氮自由基的检测

一氧化氮(nitric oxide,NO)在机体很多生理过程如血压调节、机体防御和神经信号传导等过程中发挥着重要的作用。本文综述了一氧化氮的常用检测方法,例如Griess试剂法、ESR自旋捕集技术、化学发光法和电化学检测法等。     

一氧化氮对小鼠胚胎发育的影响研究进展

一氧化氮(nitric oxide，NO)发挥信号传递作用的发现为研究机体细胞功能开辟了一个崭新的领域。动物胚胎的发育是个体发育的重要阶段，其发育过程受到体内各种因素的调节和影响，近几年人们对胚胎发育过程中NO的作用进行了许多的研究，明确了NO对小鼠胚胎发育的作用及其检测方法。     

藏雪莲水提取物对小白鼠组织中一氧化氮含量的影响

[目的]研究藏雪莲水提取物对小白鼠组织中一氧化氮含量的影响,为藏雪莲抗缺氧机制的研究提供参考。[方法]将100只小白鼠随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组,连续24 d分别灌服不同剂量的藏雪莲水提取物和生理盐水,然后处死小白鼠快速采取肝、肺、心肌和骨骼肌,测定各组织内一氧化氮的含量。[结果]结果表明,高剂量组的肝、肺和骨骼肌和中剂量组的肝中一氧化氮含量中显著高于对照组和低剂量组,差异极显著(P<0.01);中剂量组的肺和骨骼肌中一氧化氮含量高于对照和低剂量组,差异显著(P<0.05);对照组的心肌中一氧化氮含量高于各药物组,差异极显著(P<0.01)。[结论]藏雪莲能够提高小白鼠肝、肺和骨骼肌中一氧化氮的含量,降低心肌中的含量。     

外源一氧化氮在植物抗旱过程中的作用

一氧化氮(NO)调节着植物的生长、发育,是植物逆境胁迫防御响应的信号分子。近年来,许多研究表明外源一氧化氮在提高植物抗旱能力方面具有重要作用。主要从植物种子萌发、光合利用率、活性氧清除、细胞膜结构及相关基因表达等方面,对外源一氧化氮在植物抗旱过程中的作用研究进展进行综述,并提出现阶段研究存在的问题及今后的研究方向,为今后这一领域的研究提供相关的理论参考。     

已烯雌酚对贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶活性的影响

采用比色法测定已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对性未成熟贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性的影响.结果表明:DES能够使贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性显著增强(p＜0.01).睾丸中NOS和cNOS的活性在DES用量为0.3 mg/kg时最强(p＜0.01);当增大到3 mg/kg用量时,二者活性又降低(p＜0.01).诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性在DES为0.03 mg/kg时最强(p＜0.01);当DES在0.3 mg/kg和3 mg/kg时,其活性显著降低(p＜0.01).DES使附睾中NOS活性显著减弱(p＜0.01),随着DES用量的增多,附睾中NOS活性增强.主要表现在对结构型一氧化氮合成酶(cNOS)活性有显著增高作用(p＜0.01),但其活性还是低于对照组(p＜0.01).研究结果认为DES能增强性未成熟贵州香猪睾丸中NOS的活性而抑制附睾中NOS的活性.     

杂色鲍对底泥悬浮物胁迫的生理响应

研究了不同浓度的底泥悬浮物(100、200、300、400 mg/L)对杂色鲍Haliotis divericolor的急性毒性以及对其血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的影响。分别在处理后24、48、72、96 h从杂色鲍足部取血,测定其血清中NO含量和NOS、SOD、CAT活性,并记录了24、48、72、96 h时杂色鲍的存活情况。结果表明:在处理后96 h内,对照组和试验组的杂色鲍均未出现死亡,但300 mg/L和400 mg/L试验组鲍的活性明显下降;用悬浮物处理后,杂色鲍血清中NO含量及NOS活力显著高于对照组(P<0.05),且NOS活性的最大值出现的较NO最大值早;试验组SOD活性和CAT活性在24 h后显著低于对照组(P<0.05)。表明底泥悬浮物浓度对杂色鲍的生理生化存在一定影响。     

一氧化氮合成酶抑制剂对宰后成熟过程中牦牛肉品质的影响

【目的】研究一氧化氮对宰后牦牛肉品质的影响,为牦牛肉品质改善提供理论依据。【方法】以3—5岁去势甘南牦牛肉为材料,取其背最长肌,剔除筋膜、脂肪等,切成大小均匀的薄片（8 cm×8 cm）,用20 G针均匀穿刺,分别采用去离子水（对照组）和1、10、100 mmol·L ^-1一氧化氮合成酶（NOS）抑制剂（N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐）在4℃条件下1﹕1（V/m）浸泡肉样1 d,然后在4℃条件下成熟,测定成熟期间（0、1、3、5和7 d）NOS活性与一氧化氮含量、肌原纤维小片化指数（MFI）、总巯基含量、羰基含量、pH、色度等指标。【结果】NOS抑制剂处理后的牦牛背最长肌NOS活性和一氧化氮含量显著降低,成熟第7天时,处理组的NOS活性分别比对照组低30.9%、43.6%、74.7%,一氧化氮含量分别比对照组低4.7%、12.5%、21.5%。处理后的牦牛肉pH显著降低,第7天时,处理组分别比对照组低0.8%、5.7%、15.2%,其中10和100 mmol·L ^-1 NOS抑制剂处理组显著低于对照组。处理显著降低了牦牛肉羰基含量,成熟第7天时,处理组分别比对照组低4.1%、19.0%、22.2%。此外,处理组MFI显著上升,成熟第7天时,处理组分别比对照组低31.1%、23.3%、9.6%。处理组牦牛肉总巯基含量显著上升,第7天时,对照组比NOS抑制剂处理组分别低3.2%、3.7%、2.7%。成熟过程中,NOS抑制剂处理使肉色a ^*值显著降低,肉色L ^*值显著升高,第7天时,处理组的肉色a ^*值分别比对照组低7.1%、40.2%、30.7%,肉色L ^*值分别比对照组高1.1%、2.0%、1.1%。【结论】一氧化氮促进宰后牦牛肉蛋白质氧化,抑制牦牛肉嫩化,使肉色L ^*值降低,a ^*值升高,对宰后牦牛肉的品质产生负面影响,而NOS抑制剂能降低肌肉中NOS活性。     

一氧化氮合酶异构体在不同毛色羊驼皮肤毛囊中的存在差异

【目的】研究羊驼皮肤毛囊中一氧化氮合酶(nitric oxide synthases,NOS)的存在差异。【方法】Dopa染色定位黑色素细胞;利用免疫组化和免疫印迹技术对不同毛色羊驼皮肤毛囊中NOS进行定位与定量分析,分析NOS在不同毛色羊驼皮肤毛囊中表达的差异。【结果】Dopa染色显示黑色素细胞存在于羊驼毛囊鞘和毛乳头中。免疫组化结果显示3种NOS在白毛组和棕毛组皮肤毛囊中均有阳性产物。NOS1和NOS3表达呈弱阳性,NOS2表达呈强阳性;NOS1在毛乳头细胞无阳性产物,在白毛组毛囊鞘细胞与棕毛组无显著差异(P0.05);NOS2在棕毛组毛囊鞘细胞与白毛组无显著差异(P0.05),在棕毛组毛乳头细胞极显著高于白毛组(P0.01);NOS3在毛囊鞘细胞无阳性产物,在白毛组毛乳头细胞与棕毛组无显著差异(P0.05)。免疫印迹显示NOS2在棕毛组显著高于白毛组(P0.05)。【结论】NOS2参与调节羊驼毛色形成,为NO信号调节羊驼毛色形成机制的研究提供试验数据。     

影响精胺/一氧化氮加合物释放一氧化氮的因子及园艺产品吸收一氧化氮的特性

 【目的】研究影响精胺/一氧化氮加合物（SPER/NO）释放NO的因子及园艺产品吸收NO的特性,为SPER/NO应用于园艺产品的贮藏保鲜提供理论依据。【方法】合成SPER/NO,用电化学传感器检测介质、湿度、添加物等对SPER/NO释放NO的影响以及园艺产品吸收NO的特性。【结果】SPER/NO在高湿度酸性介质中能快速释放一氧化氮,添加淀粉能延缓一氧化氮的释放。园艺产品能快速吸收SPER/NO释放的NO,其吸收速率氮气氛围高于空气氛围;【结论】SPER/NO与柠檬酸的混合物在高湿度环境中能释放NO,园艺产品可快速吸收所释放的NO。     

半滑舌鳎组织器官中一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的测定

[目的]研究半滑舌鳎不同组织器官中一氧化氮（NO）含量和不同类型一氧化氮合酶（NOS）活性。[方法]采用Griess试剂法测定NO含量,采用化学比浊法测定NOS的活性。[结果]诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在肌肉组织中活性最高,为28.774±4.10 U/mgprot,依次为肠、脑、肝脏、头肾、鳃、中肾、脾脏、心脏。肠和脑之间以及肝脏和头肾之间iNOS的活性不存在显著性差异,而其他组织器官之间iNOS的活性都存在显著性差异。结构型一氧化氮合酶（cNOS）在肠组织中活性最高,为55.979±5.048 U/mgprot。所测组织器官中cNOS活性都存在显著性差异。NO含量在脾脏中最高,为38.540±4.535μmol/L。脾脏、头肾、肝脏之间,以及脑、心脏、中肾之间NO含量不存在显著性差异,而其他组织器官之间NO含量都存在显著性差异。[结论]不同组织器官中NO含量和NOS活性不同,这可能与组织器官功能有着密切联系。     

植物细胞的皂苷反应研究进展

天然皂苷具有广泛的药理学性质,细胞毒性和皂苷化学预防的作用由一个信号传导途径来调节,这在动物细胞中的作用十分显著。一氧化氮、锌和金属硫蛋白是机体内重要的生物活性因子,它们之间存在着相互作用,一氧化氮能够与金属硫蛋白形成稳定的化合物,引起蛋白质的构象变化和锌的选择性释放,同时参与细胞氧化应激反应,金属硫蛋白除了在重金属解毒上的作用外,还具有抗氧化作用,锌和一氧化氮可以调控金属硫蛋白的表达。植物细胞和动物细胞在皂苷反应方面有共同特点,但植物细胞对皂苷和相关信号传导通路的反应很少,机制也不明确,有待进一步研究。就一氧化氮、金属硫蛋白和锌在植物细胞皂苷反应中的作用加以论述。     

碱性成纤维细胞生长因子对酒精中毒鼠小脑颗粒细胞存活的影响及作用机制的研究

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对鼠小脑颗粒细胞(CGC)存活的影响及作用机制。方法：通过光学显微镜观察bFGF、酒精及一氧化氮酶(NOS)抑制剂NG—硝基—L—精氨酸(N^G—nitro-L-arginine methyl ester,NAME)对CGC产生的影响。结果：bFGF能在无酒精的环境下，促进CGC的生存，使细胞数高于空白对照组(P＜0．01)，并能减少酒精对细胞的杀死，令CGC损失率较酒精空白对照组低(P＜0．01)，从而对细胞产生保护作用。但NAME却能抑制bFGF的作用。结论：bFGF通过一氧化氮酶促进CGC的存活并对抗酒精对CGC的毒性作用。     

4株癌细胞产生一氧化氨水平的观察

目的：观察体外培养不同癌细胞系的一氧化氮生（ＮＯ）成量。方法：用Ｇｒｉｅｓｓ试剂测定癌细胞系经２４ｈ培养后一氧化氮的生成量。结果：不同癌细胞的ＮＯ产量不同,其中ＨＬ－６０细胞的产量最高,Ｋ５６２细胞次之,Ｈｅｌａ细胞产量最低。结论：ＮＯ的产量与癌细胞的种类、分化程度可能有一定关系。     

外源微生物诱导中华绒螯蟹血清中一氧化氮合酶活性研究

[目的]研究不同类型外源微生物对中华绒螯蟹血细胞产生一氧化氮合酶（NOS）活力的影响。[方法]采用1×10^7bacteria/ml菌液对中华绒螯蟹分别进行嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母注射感染,取血淋巴分别检测血清NOS活力。[结果]除产朊假丝酵母外,嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌感染中华绒螯蟹均明显地诱导了血清中NOS活性。[结论]中华绒螯蟹血细胞存在可诱导的NOS活性,该NOS活性呈现诱导源的差异。