检测猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR的建立及应用

根据GenBank上猪传染性胃肠炎病毒S基因的保守序列,设计1对引物,建立了检测猪群中的猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR方法.试验结果表明,该RT-PCR方法敏感、特异,适于临床样品检测,为猪传染性胃肠炎病毒的临床诊断和流行病学调查奠定了基础.     

基于便携式荧光定量PCR仪的猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒现场检测方法的建立及应用

为建立猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒一步法荧光RT-PCR鉴别检测方法。本研究参照Gen Bank中猪流行性腹泻病毒以及传染性胃肠炎病毒特异性基因序列,设计特异引物和Taq Man探针,通过优化反应条件,建立了检测猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒的一步法荧光RT-PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒灵敏度分别可达0.32 TCID_(50)/100μL和1.58 TCID_(50)/100μL,该法对猪轮状病毒(RV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。本试验建立的Taq Man一步法荧光定量RT-PCR检测方法可对猪流行性腹泻和传染性胃肠炎进行快速诊断,适合现场检测,为猪病毒性腹泻的诊断和防控奠定了基础。     

3种致猪腹泻病毒的多重RT-PCR检测

试验建立了用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的三重RT-PCR方法,以调查猪群中腹泻病毒感染情况.通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测,结果表明,猪流行性性腹泻病毒阳性率为33.7%,猪传染性胃肠炎病毒阳性率为4.2%,猪轮状病毒阳性率为20%;猪流行性性腹泻病毒和猪轮状病毒混合感染率为8.4%,猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染率为2.1%.     

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二联RT-PCR检测方法的建立

为了研究出一种快速、敏感、特异的诊断猪传染性胃肠炎和猪流行腹泻的方法,试验参照国内外已发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因序列及其相关的RT-PCR检测方法,根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白基因和猪流行性腹泻病毒s蛋白基因各设计1套特异性通用引物,扩增目的带分别为426 bp和584 bp.结果表明:建立的猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二联RT-PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,可为猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的检测、流行病学调查及疫苗使用等奠定基础.     

四川省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

为弄清猪传染性胸膜肺炎在四川省的流行状况,笔者利用猪传染性胸膜肺炎抗体检测正向间接血凝试剂盒对在不同时间采集的、不同地区和不同来源的1062份非免疫猪血清进行了检测。结果不同地区猪群的猪传染性胸膜肺炎抗体阳性率不同,从1%-37%,平均阳性率为18.5%。其中,30日龄以内未断奶仔猪阳性率为1%、30-70日龄保育仔猪阳性率为23%、70-150日龄育肥猪阳性率为27%、后备母猪阳性率为8%、经产母猪阳性率为3%。以上结果表明猪传染性胸膜肺炎在四川省各地都有发生,且发生与猪的日龄、饲养方式有关。     

一起猪传染性胸膜肺炎的诊治

结合一例猪传染性胸膜肺炎的诊治情况,介绍了猪传染性胸膜肺炎的临床症状、病理变化及实验室检测方法。同时,从加强消毒、加强饲养管理与保健、药物治疗等方面阐述了猪传染性胸膜肺炎的预防与治疗措施,旨在为猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗提供参考依据。     

北京部分地区猪传染性胸膜肺炎血清学调查

采用间接血凝试验,对北京地区11个区县未用过猪传染性胸膜肺炎疫苗的部分规模化猪场的1 980份血清样品,进行了猪传染性胸膜肺炎感染抗体检测.结果显示,猪传染性胸膜肺炎总阳性率为25.35%,其中断奶仔猪阳性率为17.68%,育肥猪阳性率为33.03%,育肥猪的感染阳性率高于断奶仔猪,19个猪场中有13个为猪传染性胸膜肺炎阳性猪场;猪传染性胸膜肺炎在冬春季节的感染率较高,1月～3月的阳性率高于4月～6月.     

青海互助猪传染性胸膜肺炎的血清学检测

用猪传染性胸膜肺炎间接血凝试验（IHA）,对采自青海省互助县某猪场饲养的70份互助猪的血清,进行了猪传染性胸膜肺炎血清抗体的检测。结果：检出29份阳性血清。阳性率为41．43％,表明：青海省互助猪的猪群中存在猪传染性胸膜肺炎的流行。     

猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起猪只的一种高度接触性胃肠道传染病,临床症状主要表现为腹泻、呕吐和脱水,该病为影响养猪业健康发展的重要疫病之一,世界动物卫生组织将其列为法定报告的B类动物疫病。近年来,国内外许多研究者在对猪传染性胃肠炎的诊断与检测方法上进行了大量的研究,并建立了相关的实验室诊断检测技术,这些检测技术主要包括病理诊断、病毒的分离鉴定、电镜检测、血清学诊断和分子生物学诊断方法等。本文对猪传染性胃肠炎主要的诊断技术进行了综述,以期为该病在临床的快速诊断及防控提供参考。     

贵州省猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

为检测贵州省猪传染性胸膜肺炎感染情况，试验采用猪传染性胸膜肺炎ELISA试验，对贵州省8个地、州、市部分集约化猪场的675份猪血清进行检测。结果表明：非免疫猪群APP抗体阳性率为42．2％％（248／587），免疫猪群APP抗体阳性率为63．64％（56／88）。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒的研制

根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为50 CFU/mL,而对金黄色葡萄球菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。-20℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对41份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与细菌学检测结果相一致。结果表明,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒能够对APP临床样品进行快捷、灵敏、准确的检测。     

抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制备及其临床应用研究

本研究旨在制备猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体,研究其治疗效果。以猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻二联灭活苗免疫产蛋鸡,琼脂扩散方法检测抗体效价达到1∶64时,收集卵黄,采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化卵黄抗体,进行微生物学检测、安全性试验,通过人工感染治疗试验和临床应用,观察其治疗效果。结果人工感染治愈率为100%,临床应用治愈率为88.0%,表明制备的卵黄抗体对猪传染性胃肠炎和流行性腹泻具有显著的治疗效果。     

应用套式PCR检测和区分猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的试验

根据猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的S基因核苷酸序列，设计合成了2对引物，以猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒细胞培养物为模板，进行PCR特异性片段扩增，猪传染性胃肠炎病毒扩增片段大小为886bp，猪呼吸道冠状病毒扩增片段大小为214bp。建立的套式PCR经过特异性、敏感性试验及对临床送检样品检测，证明本法具有快速、特异和高度敏感的特点。     

仔猪传染性胸膜肺炎的防治

正1猪传染性胸膜肺炎的治疗措施1.1西医方法的治疗因为一些猪养殖户对于生猪的免疫、引种、环境卫生的消毒以及饲养管理等环节的重视程度不够多,这使得猪的传染性胸膜肺炎的发病率相当高。根据报告表明,美国的猪群中检测出猪传染性胸膜肺炎的阳性率大约是32.1%,而加拿大的育肥猪检测该疾病的阳性率为34.3%,日本对于该疾病的阳性率高达66%,这对现代化的猪养殖产业造成了非常严重的影响,也引起了相关     

放线杆菌血清抗体与阿米卡星偶联物靶向性研究

为了探讨偶联物的靶向性,对偶联物进行间接免疫荧光及免疫电镜检测。间接ELISA检测表明:二者的偶联对抗体的抗原性没有影响;免疫荧光及免疫电镜显示偶联物具有猪传染性胸膜肺炎放线菌特异性靶向性。偶联物与猪传染性胸膜肺炎放线菌菌液混合3min后,偶联物能与猪传染性胸膜肺炎放线菌作用;偶联物与猪传染性胸膜肺炎放线菌菌液混合7min后,偶联物能进入猪传染性胸膜肺炎放线菌菌体内。     

猪传染性胸膜肺炎流行病学调查与防治试验

猪传染性胸膜肺炎是威胁养猪业效益的主要传染病之一,造成的经济损失十分严重。对猪传染性胸膜肺炎的流行病学进行了介绍,并对阳春市部分地区养猪场进行了猪传染性胸膜肺炎的抗体检测,对检测结果进行了分析。     

天津部分猪场副猪嗜血杆菌病与猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

为了解天津部分猪场副猪嗜血杆菌病(HPs)和猪传染性胸膜肺炎(PCP)的流行情况,利用间接血凝试验对采自9个规模猪场的178份猪血清样品进行副猪嗜血杆菌抗体检测,对采自8个规模猪场的166份猪血清样品进行猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗体检测。结果表明:副猪嗜血杆菌阳性率为18.54%(33/178),其中断奶仔猪和保育阶段猪阳性率为23.58%(25/106);猪传染性胸膜肺炎的阳性率为21.08%(35/166),其中断奶仔猪阳性率为20.93%(9/43),育肥猪阳性率为27.66%(13/47),种猪阳性率为21.62%(8/37)。说明天津地区部分猪场的副猪嗜血杆菌病和猪传染性胸膜肺炎呈地方性流行。     

湖南省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

为了解猪传染性胸膜肺炎在湖南省的流行状况,采用正向间接血凝试剂盒对在不同时间、不同地区和不同猪场采集的的267份非免疫猪血清进行了猪传染性胸膜肺炎抗体检测.结果发现,上述被检样品的总阳性率为34.46％,其中母猪阳性率最高为61.67％,30日龄猪阳性率为48.57％、60日龄猪阳性率为7.76％、90日龄猪阳性率为2...     

河南省猪传染性胃肠炎血清流行病学调查分析

正为了解河南省猪传染性胃肠炎的流行情况和流行规律,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对河南省36个规模化养猪场的2536份血清样本进行传染性胃肠炎抗体水平检测。结果表明,河南省猪传染性胃肠炎抗体总阳性率为1.5%,成年猪抗体阳性率为1.1%,仔猪抗体阳性率为0.4%,无效血清52份,其余2447份血清为阴性。猪传染性胃肠炎抗体阳性率较低,但病毒仍然在猪场存在,因此仍应该重视对该病的防治。     

周口市猪传染性胸膜肺炎流行病学调查

为了弄清猪传染性胸膜肺炎在河南省周口市养猪业中的流行情况,笔者对周口市所有县、市、区的畜牧兽医站与养猪协会和38个不同规模类型的猪场进行了问卷调查和实地走访,并时5个未免疫猪场的814份猪血清抗体进行检测.分析猪传染性胸膜肺炎在周口市养猪业中的流行与感染状况.结果表明,周口市2005-2007年猪的呼吸道病发病起数占传染性疾病发生起数的23.71%:对38个不同猪场检测感染猪传染性胸膜肺炎的病猪数占饲养猪总数的比例在0～64.45%范围内.发病猪主要是外来品种,猪发生传染性胸膜肺炎主要在冬春季节,并且与引种有很大关系.