从加拿大引进的长白猪中发现染色体13/17易位

1989年秋,我们在进行东北地区几个主要家猪品种间Ag-NORs多态性的研究中,从4头由加拿大引进的长白种公猪的后裔中发现1头具有异常核型,经染色体常规分析、G-分带及C-分带分析,确定为13/17易位,其核型为37,XY,rob     

家猪染色体13/17易位的发现及表型效应的研究——Ⅱ.家猪染色体13/17易位的表型效应

对13/17易位杂合子猪与同场同期同品种非易位猪的繁殖力、生长发育进行了统计分析.13/17易位杂合子公猪的窝产仔数、初生窝重、20日龄窝重、断奶窝重、窝断奶头数,无论纯繁还是杂交,与非易位猪均无显著性差异(P>0.05).13/17易位杂合子母猪作为杂交母本,其繁殖力与同场同期同品种非易位母猪无显著性差异(P>0.05).在13/17易位杂合子公猪的后裔中,13/17易位杂合子猪的20日龄重、断奶重都与非易位猪差异不显著(P>0.05).13/17易位杂合子公猪6月龄的体高显著高于非易位公猪的体高(P<0.05),但体重、体长和胸围均无显著性差异(P>0.05).13/17易位公猪的女儿与非易位公猪的女儿6月龄的体重与体尺也无显著性差异.本文还提出了对家畜染色体易位的育种措施.     

13/17易位纯合子猪培育成功

1990年10月我们用2头13/17易位杂合子公猪与4头13/17易位杂合子母猪交配,其中3头受孕.1991年2月相继产仔,3窝共产仔29头,到2月龄存活24头.经核型分析,发现有3种核型,其中13/17易位纯合子猪8头,其核型为:2n=36,XX或XY,rob(13/17);13/17易位杂合子猪10头,其核型为:2n=37,XX或XY,rob(13/17);正常核型猪6头,其核型为:2n=38,XX或XY.     

13/17染色体易位纯合子猪(2n=36)与正常核型家猪(2n=38)的杂交试验

用13/17染色体易位杂合子猪互交获得的1头13/17染色体易位纯合子公猪[2n=36,XY,rob(13/17)]与4头正常核型母猪(2n=38,XX)交配,结果4头母猪全部妊娠并正常分娩.其产仔数分别为13,16,12,11,产活仔数分别为12,13,12,11;窝断奶头数分别为12,13,9,10.经核型鉴定,其后代全部为13/17易位杂合子[2n=37,XX或XY,rob(13/17)].此结果表明,13/17易位染色体的遗传完全符合孟德尔的遗传规律,13/17易位纯合子公猪具有正常的繁殖力.本杂交试验所产活仔48头,其性别比例为35?:13?,接近3:1的比例,经X~2检验不符合1:1的理论比率(X~2=10.08,P<0.01).此外,本杂交试验所产仔猪生长发育正常,并具有一定的杂合优势,这一结果为13/17易位纯合子猪的进一步推广应用,尤其是作为商品猪生产的杂交父本提供了可靠依据.     

猪单条13/17罗伯逊易位染色体的显微分离与LA-PCR扩增

以13/17罗伯逊易位纯合子猪［2n=36，XY或XX，rob(13;17)］为试验材料，制备其有丝分裂中期染色体，利用显微分离技术对13/17罗伯逊易位染色体进行分离，并将单条染色体进行LA-PCR扩增，其扩增片段大小主要在200~2800 bp；对LA-PCR扩增产物用猪13、17号染色体近着丝点微卫星标记SWR1941和SWR1120与Southern杂交2种方法进行鉴定，结果表明LA-PCR产物来源于13/17罗伯逊易位染色体。该方法的成功建立为进一步从分子水平上研究家猪13/17罗伯逊易位所引起的表型效应的遗传机制以及筛选猪13和17号染色体上新的分子遗传标记奠定了基础。     

13/17罗伯逊易位猪成纤维细胞系的建立

为了在细胞水平上研究13/17罗伯逊易位猪群这一种质资源,试验采用组织块分离法对13/17罗伯逊易位杂合子猪、纯合子猪及正常核型家猪耳组织进行了分离培养,构建了3个成纤维细胞系,并对其进行了形态学、生长动力学、核型分析、绿色荧光蛋白报告质粒转染和微生物污染检测等生物学特性研究。结果表明:3种核型家猪细胞形态均为标准成纤维细胞形态,细胞内波形蛋白呈现阳性表达;细胞生长曲线均呈"S"型;杂合子猪细胞染色体2n=37所占比例为92.5%,纯合子猪细胞染色体2n=36所占比例为93.8%,正常核型家猪细胞染色体2n=38所占比例为96.3%;外源质粒能在细胞中进行稳定表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测结果呈阴性。说明本研究已成功建立13/17罗伯逊易位猪成纤维细胞系。     

家猪13/17罗伯逊易位染色体遗传规律的研究

本研究采用微量全血培养法对１３／１７ 染色体易位猪的５ 种交配组合所产３４２ 头后代的染色体组型进行了分析。结果表明,家猪１３／１７ 罗伯逊易位染色体的遗传符合孟德尔遗传规律,且具有稳定的遗传性。１３／１７ 易位纯合子互交后代仍然为１３／１７ 易位纯合子;１３／１７ 易位杂合子互交后代出现１３／１７ 易位纯合子（２ｎ ＝ ３６） ,１３／１７ 易位杂合子（２ｎ ＝ ３７） 和正常核型家猪（２ｎ ＝ ３８） 三种核型,经卡方检验符合１ ２ １ 的理论比值。本文还讨论了家猪和野猪的染色体进化,１３／１７ 罗伯逊易位染色体的应用。     

猪13/17罗伯逊易位染色体的显微分离及DOP-PCR扩增

以13／17罗伯逊易位杂合子猪[2n=37，XY或XX，rob（13：17）]为材料，制备其有丝分裂中期染色体，利用显微分离技术对13／17罗伯逊易位染色体进行分离，并将单条染色体进行简并寡核苷酸引物PCR（degenerate oligonucleotide primer-PCR．DOP-PCR）扩增，其扩增片段大小主要在0．2～2．5kb之间；以DOP-PCR扩增产物为模板，分别以猪13、17号染色体近着丝点微卫星标记S0282和SW335为扩增目的基因，对D0P-PCR扩增产物进行鉴定，结果表明DOP-PCR产物来源于13／17罗伯逊易位染色体。该方法的成功建立为进一步从分子水平上研究家猪13／17罗伯逊易位所引起的表型效应的遗传机制以及筛选猪13和17号染色体上新的分子遗传标记奠定了基础。     

13／17染色体易位纯合子猪（2n=36）与正常核型家猪（2n=38）杂交试验

用１３／１７染色体易位杂合子猪互交获得的１头１３／１７染色体易位纯合子公猪［２ｎ＝３６，ＸＹ，ｒｏｂ（１３／１７）］与４头正常核型母猪（２ｎ＝３８，ＸＸ）交配，结果４头母猪全部妊娠并正常分娩。其产仔数分别为１３，１６，１２，１１，产活仔数分别为１２，１３，１２，１１；窝断奶头数分别为１２，１３，９，１０。经核型鉴定，其后代全部为１３／１７易位杂合子［２ｎ＝３７，ＸＸ或ＹＹ，ｒｏｂ（１３／１７）］。     

13/17罗伯逊易位猪生长抑素基因的多态性研究

采用微量全血培养法制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的309头后代进行核型鉴定,结果样本中存在3种核型的猪：正常核型猪（2n=38）、易位杂合子猪（2n=37）和易位纯合子猪（2n=36）;利用PCR SSCP技术检测发现生长抑素基因外显子1不存在多态性;其内含子的266～602 bp片段存在2个突变位点(T520C,G521T),但仅检测到2种基因型：AA和AB。遗传多态性分析结果表明,不同杂交组合后代及不同核型的猪群中AA基因型频率（频率范围为0.58～0.77）和A等位基因频率（频率范围为0.79～0.90）均显著高于其AB基因型频率（0.23～0.42）和B等位基因频率（0.10～0.21）;易位杂合子猪的AB基因型频率（0.42）均高于正常猪（0.25）及易位纯合子猪（0.40）。经卡方检验,差异不显著（P>0.05）,群体的基因型频率处于哈代－温伯格平衡状态。     

13/17罗伯逊易位猪SRY基因的克隆及其序列分析

以13/17罗伯逊易位纯合子(2n=36)、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]及正常猪为试验材料,根据猪SRY基因蛋白质编码区的核心序列,设计PCR引物,扩增得到SRY基因片段,随机选取克隆质粒进行测序分析。结果表明,13/17罗伯逊易位纯合子猪与正常猪的SRY基因的核心序列相比有1个碱基发生突变;而13/17罗伯逊易位杂合子猪与正常猪SRY基因的核心序列相比有5个碱基发生突变。     

科尔沁牛染色体14/24易位的初步研究

对内蒙古哲盟地区的5头科尔沁牛进行了细胞遗传学检查。结果:3♀和1♂核型全为2n=60,可配成30对,29对常染色体和1对性染色体,性染色体X为大型亚中着丝粒,Y为小型亚中着丝粒染色体;1♂的核型为异常核型,59,XY,t(14:24)。14/24易位是单独发生的。     

一头染色体易位（1q^＋;14q^—）公猪导致窝产仔数降低

首例猪染色体相互易位是1964年由Henrieson&Backstrom发现的,此后报道有猪的染色体相互易位及着丝点融合易位近45例,所有这些都是在生殖力低下公猪中和引起与配母猪的胚胎早期死亡的公猪中发现的。鉴于此,一些国家(例如法国)已开始执行一项全国性的计划去测定和消除由于带有异常染色体畸变的公猪所造成窝产仔数减少而引起的经济损失。然而在美国,猪繁育站只进行了一些零星的局部的细胞遗传学研究。1988年.McFeely等报道了一例13/17CF易位产仔数低下母猪。     

13/17染色体易位纯合子猪群随机扩增多态性DNA指纹分析

利用 6 0条随机引物对 13/ 17罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的群体基因组 DNA进行了RAPD分析 ,筛选出 2 2个产生多态性的随机引物 ,计算出 3个群体间及群体内的共有带率 (F)及遗传距离指数 (D) ,并以此绘制出群体的亲缘关系树状图。对群体的遗传多样性进行了研究 ,计算出遗传多样性指数 (Ho) ,并在此基础上进行了 t检验 ,结果表明了该群体的变异情况。该群体的变异主要来源于群体间的变异 ,群体间的变异大于群体内的变异。利用 RAPD技术可快速有效地检测亲缘关系较近的猪群体的 DNA多态性 ,RAPD技术在猪的基因组研究中有广阔的应用前景     

13/17易位杂合子猪互交后代主要生理生化指标测定

1991年2月我们获得3窝13/17易位杂合子猪互交后代,经核型鉴定发现有3种不同核型,即正常核型(2n=38,XX或 XY)、13/17易位杂合子[2n=37,XX或XY,rob(13/17)]、13/17易位纯合子[2n=36,XX或XY,rob(13/17)].为了进一步探明13/17易位纯合子及杂合子的种质特性,我们对这3种核型的11项生理生化指标进行了测定.     

猪的染色体相互易位

本文评论了猪的29种相互易位的发生率和效应。结论是这些易位杂合子会引起繁殖率严重下降。染色体异常似乎是自发地发生,已证实低产公猪的42％～50％是易位动物,一般群体中易位的发生率是0.6‰。Henricson等1964年报道第一例易位以来,已发现了29种相互易位(表)。     

13／17染色体易位猪群Amy—2的多态性

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定了１３／１７染色体易位的纯合子，杂合子及染色体数正常猪群的血液淀粉酶－２（Ａｍｙ－２）的遗传多态性，结果：３群猪均表现出特殊的Ａｍｙ－２多态性分丰，其Ａｍｙ－２位点有２对等位基因控制，除测得Ａｍｙ－２＾Ａ，Ａｍｙ－２＾Ｂ基因控制的Ａ、Ｂ带外，还测得１对迁移率比Ａ、Ｂ带快的Ｃ、Ｄ带；２对等位基因呈现出共显性特征，但除个别个体２对等位的基因所控制的表型染色强度相同外，大部分个     

河流型水牛种公牛染色体罗伯逊易位筛查

为了筛查河流型水牛种公牛染色体罗伯逊易位,试验采用常规微量全血培养和空气干燥制片法对摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、地中海水牛及其杂交后代共49头河流型水牛种公牛进行染色体的遗传检测和分析。结果表明:河流型水牛种公牛染色体数目均为2n=48+XY,包含5对双臂(中部、亚中部或亚端部)常染色体、19对端部着丝粒常染色体和1对性染色体,未发现染色体罗伯逊易位现象。     

内蒙西门塔尔牛染色体1/29易位的初步研究

对内蒙哲里木盟家畜改良站的10头德国西门塔尔公牛,12头苏联西门塔尔公牛和4头西门塔尔杂种公牛进行了细胞遗传学检查。发现4头苏联西门塔尔种公牛具染色体1/29易位。其中3头为易位杂合体公牛,1头为易位纯合体公牛。讨论了染色体1/29易位对繁殖力的影响问题。建议对西门塔尔公牛的染色体检查列入育种常规。提出应对我国黄牛中是否存在染色体1/29易位进行研究。     

西门塔尔牛染色体易位并XX/XY嵌合体一例

<正> 染色体是遗传物质的携带者。关于牛染色体异常,进而影响繁殖性能的报道,资料颇多。其中以牛染色体易位、异性孪生性染色体嵌合为主要。国内已有内蒙西门塔尔牛染色体易位的报道,以及西门塔尔牛、黑白花奶牛XX/XY性嵌合体的报道,但关于常染色体易位并性染色体嵌合现象,国内外至今未见报道。我们检查了一对异性孪生西门塔尔牛,发现它们带有染色体易位和性染色体嵌合两种染色体畸形,现将检查结果报道如下。