阿尔泰瑞香提取物的体外抗炎及抗氧化活性

目的 探讨阿尔泰瑞香二氯甲烷提取物（Da-Dm）的体外抗炎及抗氧化活性。方法 以不同浓度（1、6、30 μg/mL）的Da-Dm作用于脂多糖（LPS,1 μg/mL）诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用CCK-8法测定Da-Dm对细胞增殖的影响;Griess法检测细胞上清液中一氧化氮（NO）的释放量;ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的分泌量。以维生素C为对照,采用FRAP法、DPPH法评价Da-Dm总抗氧化能力。结果 Da-Dm在浓度为30 μg/mL及以下时对RAW264.7细胞增殖没有影响。与LPS组比较,1~30 μg/mL的Da-Dm可明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞分泌炎症因子NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量（P<0.05,P<0.01）,并呈现浓度依赖性。Da-Dm对DPPH自由基有较好的清除能力,其清除率的IC50为318.1 μg/mL,在FRAP实验中其对Fe²⁺离子具有较强的还原能力。结论 Da-Dm可以抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应,它的抗炎作用可能与抑制NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的释放有关。Da-Dm具有较好的抗氧化活性。     

加速溶剂萃取GC-MS快速分析烟叶中的西柏三烯二醇

采用加速溶剂萃取（ASE）结合衍生化气相色谱质谱（GC-MS）检测，建立烤烟烟叶中α-西柏三烯二醇（α-CBD）和β-西柏三烯二醇（β-CBD）两种化合物的定量分析方法。对比研究了液固萃取（LSE）、超声辅助萃取（UAE）、索氏提取（SE）和ASE 4种不同样品前处理方法对目标物萃取效果的影响，优选出ASE方法应用于烟叶中CBD的提取。优化设定ASE的工作参数，萃取剂为二氯甲烷，萃取温度50 ℃，静态萃取时间5 min，循环萃取次数为2次。对分析方法的线性范围、检出限、定量限、回收率和精密度等进行了实验验证，结果表明，目标成分α-CBD和β-CBD的线性关系良好，线性范围分别为1.0 ~ 200.0 μg·g^?1和1.0 ~ 160.0 μg·g^?1，相关系数（R）分别为0.999 2和0.999 6。两种目标物的最低检出限（LOD）和最低定量限（LOQ）分别为0.3 μg·g^?1、0.2 μg·g^?1和0.85 μg· g^?1、0.66 μg·g^?1。回收率分别在93.2% ~ 103.3% 和91.6% ~ 99.1% 之间。检测α-CBD和β-CBD的相对标准偏差（RSDs，n = 5）分别在2.59% ~ 3.13%和2.11% ~ 2.84% 范围内。方法快速、准确，在对不同地区、不同部位烤烟烟叶中西柏三烯二醇含量的比较分析中取得良好结果，适用于烟叶中西柏三烯二醇的分析检测。     

响应曲面优化甜椒中维生素C的提取工艺研究

以甜椒为材料,采用单因素试验和响应面分析法优化提取甜椒中维生素C的工艺条件,研究提取液的种类、浓度、pH值、提取温度、时间对其维生素C提取量的影响,应用荧光分光光度法测定甜椒中维生素C的含量。得出甜椒中维生素C的最佳条件为：提取液为偏磷酸-乙酸、提取液浓度为0.02g.mL_^-1, pH值为2,提取温度为25℃,提取时间为30min,含量为97.34mg.100g_^-1。该方法简便、准确且提取率高,为进一步开发利用利用果蔬提取维生素C提供技术依据。     

高效液相色谱法测定猪排泄物中帕托珠利

目的 建立高效液相色谱(HPLC)结合二极管阵列检测器(PDA)检测猪排泄物中帕托珠利的方法。方法 尿液样品用0.2%(φ)乙酸酸化乙腈和二氯甲烷进行2次提取;粪便样品经乙腈涡旋提取,亲水−亲油平衡(HLB)固相萃取柱净化。流动相为0.005 mol/L磷酸二氢钾溶液(A)?乙腈(B),尿液和粪便样品的流动相比例V(A)∶V(B)分别为55∶45和56∶44。检测波长为255 nm,柱温为35 ℃,进样量为30 μL。结果 猪尿液中帕托珠利的检测限和定量限分别为0.02和0.05 μg/mL,在0.05~5.00 μg/mL范围内呈良好的线性关系,决定系数(R²)为0.999 8;在3个添加剂量(0.05、1.00和5.00 μg/mL)下,帕托珠利在猪尿液中的平均回收率为93.49%~99.16%,批内和批间相对标准偏差(RSD)为0.97%~7.62%。猪粪便中帕托珠利的检测限和定量限分别为0.10和0.25 μg/g,在0.25~100.00 μg/g范围内呈良好的线性关系,R²为0.999 5;在3个添加剂量(0.25、25.00、100.00 μg/g)下,帕托珠利在猪粪便中的平均回收率为89.55%~95.88%,批内和批间RSD为1.76%~3.63%。帕托珠利在尿液和粪便样品中的提取回收率均大于89.50%,批内和批间RSD均小于8%。结论 本研究方法对样品的前处理操作简单、灵敏度高,可用于猪排泄物中帕托珠利的检测分析。     

番茄农艺性状与果实主要营养成分相关性分析

以36份国内外番茄品种资源为材料,研究番茄的13个农艺性状与果实中可溶性糖含量、维生素C含量和番茄红素含量的相关性,以筛选出影响番茄果实营养品质的主要农艺性状,从而为番茄果实品质性状的早期评价提供依据。结果表明,果形指数与番茄中可溶性糖含量呈极显著正相关,且直接通径系数达0.899;每花序结果数与维生素C含量呈极显著正相关,且直接通径系数达0.854;果实a^*/b^*值与番茄红素含量呈极显著正相关,且直接通径系数达0.800。此外,分别以可溶性糖、维生素C和番茄红素含量为因变量,建立了根据农艺性状估测其含量的回归方程。经过验证,所得的估测值与实测值无显著差异。在本研究中,果形指数是影响番茄果实中可溶性糖含量的主要农艺性状,每花序结果数、果形指数、果实a^*/b^*值、果实色光值是影响番茄果实中维生素C含量的主要农艺性状,果实a^*/b^*值是影响番茄果实中番茄红素含量的主要农艺性状,利用上述农艺性状可以分别估测番茄果实中可溶性糖、维生素C和番茄红素含量。说明,在不损坏果实的基础上,可以利用农艺性状快速而简便地对果实主要营养成分进行早期估测。     

多酸修饰电极对深色果蔬中维生素C的测定

【目的】制备磷钼酸复合膜修饰电极,并对其电化学性质和果蔬维生素C含量的测定进行相关探究,为深色果蔬中维生素C的测定提供理论依据。【方法】利用电化学沉积法在E=+0.26 V恒电位下制备磷钼酸复合膜修饰电极,并在不同条件下对其电化学性质进行检测,再以水果和蔬菜为研究对象,检验磷钼酸复合膜修饰电极对维生素C含量测定的效果。【结果】制备所得的磷钼酸具有稳定的Keggin结构;磷钼酸修饰后的电极在-0.4~+0.6 V内具备可逆的氧化还原峰;磷钼酸复合膜修饰电极的电催化能力与磷钼酸浓度呈正相关,且在高酸环境中电化学催化能力更强;该修饰电极对维生素C的氧化催化活性较明显,氧化催化活性随磷钼酸氧化程度和扫速的增加而提高,在连续增加维生素C浓度的过程中,修饰电极能快速响应维生素C,最短响应时间仅需3 s;以该电极为工作电极检测获得橙子、胡萝卜和青椒3种样品维生素C含量分别为45.32、71.16和96.99 mg/100 g,3次测定结果平均值的相对标准偏差（RSD）均未超过5.0%,且最低检测限为1.1×10-8 mol/L（S/N=3）。【结论】磷钼酸复合膜修饰电极的氧化催化活性良好,对深色果蔬维生素C的检测具有灵敏度高、检出限低和测定结果误差较小等特点。     

基于B646L、EP402R、MGF360/505基因的非洲猪瘟病毒ERA检测方法的建立

目的 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) DNA快速检测方法。方法 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列,设计特异性的ERA探针和引物,经过反应条件的优化,建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法。结果 ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即可得出检测结果;特异性强,对阳性样品拷贝数的检测下限均为10² μL⁻¹;与我国非洲猪瘟诊断技术标准中的方法对比,结果符合率为100%。结论 本研究建立的 ERA检测方法可以用于ASFV的快速检测,为流行病学调查和现场检测提供了一种快速有效的检测方法。     

红景天苷对UVB辐射HaCat细胞活性及Caspase-3/9蛋白表达的影响

目的 研究红景天苷对中波紫外线（ultraviolet B, UVB）辐射HaCat细胞增殖及Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的作用。方法 将HaCat细胞分为6组：即正常对照组（Ⅰ组）、红景天苷中剂量组（Ⅱ组）、UVB辐射组（Ⅲ组）、UVB+红景天苷低剂量组（Ⅳ组）、UVB+红景天苷中剂量组（Ⅴ组）、UVB+红景天苷高剂量组（Ⅵ组）,Ⅰ组未经任何处理,Ⅱ组加入40 μg/mL的红景天苷,Ⅲ组接受200 mJ/cm²剂量紫外线照射,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别加入10、40、80 μg/mL红景天苷并进行200 mJ/cm²紫外线照射。HaCat细胞培养24 h后,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪观察细胞周期,Western blotting法检测Caspase-3、Caspase-9表达的蛋白水平。结果 MTT结果显示随着红景天苷浓度的增加,HaCat细胞的生存率逐渐增加;流式细胞仪检测细胞周期显示HaCat细胞的S峰值随着红景天苷浓度的增加呈现上升趋势,Ⅵ组S峰值高于Ⅱ组;Western blotting显示Ⅵ组Caspase-3/9的蛋白表达量均有下降。结论 红景天苷可通过抑制Caspase-3和Caspase-9蛋白表达,减少UVB诱导HaCat细胞凋亡。     

原花青素促进三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用机制研究

目的 研究原花青素（Procyanidins,PC）对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖及细胞凋亡的作用及其机制。方法 常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、对照组和PC10、20、40、80、160、320 μg/mL组。MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测FoxA1蛋白及抗凋亡蛋白bcl2、UCP2表达。结果 PC各剂量组均可显著抑制抑制MDA-MB-231细胞增殖（P<0.05）;PC（10-160 μg/mL）组剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖（P<0.05）,PC（40-320 μg/mL）可以时间依赖性抑制细胞增殖（P<0.05）;PC320 μg/mL组各时间点细胞抑制率与PC160 μg/mL组差异无显著性（P>0.05）;160 μg/mL PC可以时间依赖性促进MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.05）;160 μg/mL PC作用24 h后,FoxA1蛋白表达显著上升（P<0.05）,同时bcl2及UCP2表达降低（P<0.05）。结论 PC抑制MDA-MB-231细胞,促进MDA-MB-231细胞凋亡,升高其FoxA1表达,同时降低bcl2及UCP2表达,表明PC可能通过促进FoxA1表达发挥促进MDA-MB-231细胞凋亡的作用。     

超高效液相色谱串联质谱法测定番茄和土壤中咯菌腈残留量

建立了超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）法测定番茄和土壤中咯菌腈残留的检测方法。用乙腈水溶液提取样品中的咯菌腈,经PSA（N-丙基乙二胺）和硅镁型吸附剂净化后,以C₁₈柱为分析柱、乙腈-甲酸水溶液为流动相,采用超高效液相色谱串联质谱多反应监测,电喷雾负离子源,外标法定量。咯菌腈在0.01~2.00 mg·L^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=3 412.6x+163.95,r²=0.999 5。向对照番茄果实和对照土壤中分别添加咯菌腈标样,添加水平分别为0.01、0.10、2.00 mg·kg^-1时,平均回收率分别为95.96%~103.17%和88.21%~106.88%,相对标准偏差分别为1.8%~4.6%和1.1%~6.2%。番茄和土壤中咯菌腈的检出限均为0.4 μg·kg^-1,定量限分别为1.4 μg·kg^-1和1.3 μg·kg^-1。该方法简单、快速,准确度和灵敏度都较高,适用于番茄和土壤中咯菌腈的残留分析。     

产销通路的建立及招商引资意见

针对大陆农业发展存在的不足有必要建立产销通路 ,并提及物流在流通环节的重要性。最后就大陆各地的招商引资提出了意见     

秸秆切碎灭茬机的设计与试验

针对双轴击切式破碎秸秆和根茬所存在的问题，本文提出单轴压切原理和非等长刀切碎模型，并对秸杆切碎灭茬机的关键参数进行了优化设计。该机田间试验表明切碎率达91．4％，根茬破碎率达86．5％。该机的应用必将促进一年两熟平作旱区保护性耕作技术的发展。     

《机械原理》与《机械设计》实验教学改革实践

《机械原理》和《机械设计》两门课程的实验教学在培养学生的综合设计、创新设计能力等方面,有其他课程不可替代的重要作用,针对两门课程传统实验教学中存在的问题,提出了以独立设课为中心的实验教学改革和实践方案,取得了显著的效果。     

副猪嗜血杆菌分离鉴定与PCR检测方法的建立及应用

从养猪场送检的猪肺病料中分离到3株疑似副猪嗜血杆菌(HPS)可疑菌株。经形态镜检、染色特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPS。在细菌学鉴定基础上,设计合成3对引物,分别以3株分离菌株的DNA为模板进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp8、24 bp和1.9 kb的预期特异性条带。以HPS GD株作为参考阳性菌株,以P1、P2为引物,设计优化PCR反应程序,建立HPS PCR检测方法,并应用于临床病料检测。结果表明,所建立的HPS PCR检测方法特异与敏感性高、适用性强,可应用于HPS感染的诊断和检测。     

万寿菊病虫害的发生与防治措施

万寿菊又名金盏花、臭芙蓉 ,千寿菊、蜂窝菊 ,属菊科万寿菊属一年生草本植物。黑龙江省八五三农场人工栽培万寿菊主要是取其花朵作为提取黄色素的原料。在正常条件下 ,种植万寿菊可实现公顷产鲜花 2 2 .5t以上、产值可达 135 0 0元左右、利润可达6 0 0 0元左右 ,经济效益较好。     

苦荞的成分功能研究与开发应用

苦荞具有丰富的营养价值 ,它既能食用 ,又能防病、治病 ,为许多其它主要食物所不及。我国有丰富的苦荞资源 ,对苦荞的深入研究和开发应用有利于改善和提高人们的食物结构 ,同时也有助于促进贫困山区的脱贫致富。本文就苦荞的营养价值、药用价值和开发应用等方面的问题进行了阐述     

植物学与分子生物学研究创新型实验项目的设计与实施

以农杆菌渗入烟草表皮瞬间表达绿色荧光蛋白的观察实验为例,对植物学与分子生物学研究创新型实验的选题设计、教学过程和效果进行了探讨。该实验项目的实施培养了学生的团队精神、科学素养和创新意识,提高了实验设计和实际操作能力,是生物科学特色专业实验教学改革的有益尝试。     

耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192的筛选、鉴定及酶学性质

为了提高厌氧水解效率,采用双层平板法筛选出一株耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192.经形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),对其产酶条件进行了初步研究.结果表明,该茵的最适生长温度为30℃,生长8～12h达对数期,初始pH 7.5时酶活力最高.蛋白酶最适反应温度为45℃、pH 7.0,酶活力最高达39.3 U/mL.该酶在50℃以下,pH 6.0～9.0性能稳定.在60℃以上热稳定性很差,70℃保存lh酶活力全部丧失.     

灌水和过量施钾对烤烟养分含量及烟叶产量品质的影响

采用田间试验研究了灌水和过量施钾对烤烟（Nicotiana tabacum L.)养分含量和产量品质的影响。结果表明，在烤烟N：K2O用量比达到1：3的基础上随钾用量增加，烟株体内营养元素含量、烟叶产量和化学成分均没显著差异，灌水可以显著提高烟叶产量和上等烟比例，但灌水与钾用量互作对烤后烟叶养分含量和化学成分的影响不显著。     

猪蓝耳病和猪瘟疫苗免疫后抗体检测分析

[目的]仔猪在14日龄接种蓝耳病毒疫苗,25日龄接种猪瘟疫苗,检测接种蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗后的免疫合格率。[方法]采用猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒检测抗体表达量。[结果]猪蓝耳病疫苗免疫3 d后,6.7%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,26.7%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,85%免疫个体为抗体阳性,免疫后30 d 100%免疫个体为抗体阳性;猪瘟疫苗免疫3 d后,13%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,40%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,58.3%免疫个体为抗体阳性,免疫30 d后,83.3%免疫个体为抗体阳性。[结论]仔猪在蓝耳病疫苗免疫3 d后抗体效价最低,30 d后免疫效果很好,接种猪瘟疫苗3 d后抗体效价最低,仔猪不足以抵抗病毒侵袭,虽然蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗接种后30 d,抗体水平都达到了农业部规定的70%的标准,但是猪瘟疫苗免疫效果不能达到100%理想效果。