沙棘微扦插不定根发生的形态解剖学研究

利用石蜡切片法对沙棘微扦插不定根的发生进行形态解剖学研究。结果表明:沙棘属于诱导型生根,观察到其不定根原基起源于2个区域,一部分根原基起源于维管形成层细胞,另一部分起源于韧皮部薄壁细胞区域。沙棘不定根原基继续发育时,一部分沿射线向外生长,另一部分向外生长的同时会与茎段的髓连接起来,这种现象在其他树种中尚未发现。沙棘插穗不定根的发生整体上可分为4个阶段:1）维管形成层细胞和韧皮部薄壁细胞分裂出一些排列紧密、细胞质浓、具有分生组织特点的薄壁细胞团;2）新形成的薄壁细胞团不断分裂并且脱分化,形成具有很强分生能力的不定根原基发端细胞;3）根原基发端细胞继续分裂,沿着射线向远离轴心的方向伸展,从而形成根原基;4）根原基穿过韧皮射线和皮层,向外继续朝皮孔方向发展,最终从皮孔伸出形成不定根,不定根伸出皮孔前内部维管系统发育完善并与茎部维管系统相连接。      

马尾松组培苗不定根诱导及不定根解剖观察

对马尾松优良种源组培苗不定根诱导进行了研究.采用L16(45)正交设计的方法研究了NAA、IBA和基本培养基对组培苗生根的影响,结果表明:最适生根培养基组合是1/3DCR+NAA0.15 mg·L-1+蔗糖2+琼脂0.6,2个月最高生根率达到51.7,须根多,根系质量高.马尾松组培苗嫩茎元潜伏根原基,不定根由诱导根原基发育形成,诱导根原基源于髓射线细胞的分化.     

苹果花芽孕育蛋白质组学初步分析

 【目的】苹果为中国乃至世界最主要果树之一，但由于童期长、其育种工作一直落后于其它作物。本研究旨在揭示苹果花芽分化机理，缩短苹果童期，加速苹果育种进程。【方法】运用蛋白质组学研究技术（双向电泳技术、生物质谱技术、生物信息学技术）对富士苹果树短枝停长后3～9周的花芽、叶芽进行蛋白质分析研究。【结果】短枝停长后第7周花芽形态分化开始，第7周花芽较叶芽的2-DE图谱有283个蛋白点在表达上有明显的质和量的变化。4个蛋白点（16.4、30.2、40.3、65.1 kD）为花芽形态分化开始时初前（花序原始体出现）花芽2-DE图谱所特有；3个蛋白点（39.3、60.2、66.3 kD）为初后（侧花出现）花芽2-DE图谱所特有，1个蛋白点（77.1 kD）为萼片期花芽2-DE图谱所特有。对富士苹果花芽形态分化开始时的4个特异蛋白点用基质辅助激光解吸P电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行肽质量指纹谱分析，并通过检索不同的数据库进行蛋白质鉴定与功能预测，初步认为第256号（16.4 kD）、298号（30.2 kD）蛋白点是未知蛋白，第327号（40.3 kD）蛋白点是与合成酶有关的蛋白，第367号蛋白点（65.1 kD）是一个与转录有关的RNA结合蛋白。【结论】富士苹果花芽形态分化开始时有16.4、30.2、40.3、65.1 kD 4个特异蛋白、侧花出现时有39.3、60.2、66.3 kD 3个特异蛋白、萼片出现时有77.1 kD 1个特异蛋白出现。16.4、30.2 kD是未知蛋白，40.3 kD是与合成酶有关的蛋白，65.1 kD是一个与转录有关的RNA结合蛋白。     

耐盐性不同的大豆品种幼苗的蛋白质组学比较研究

为了探讨大豆品种耐盐性的抗性机理,应用蛋白质组学技术,对耐盐大豆品种Lee68和盐敏感大豆品种N2899萌发期幼苗的蛋白质组成进行比较分析。用三氯乙酸/丙酮法提取大豆幼苗的蛋白质,双向电泳技术分离,考马斯亮蓝染色,在pH 4.0～7.0的2-DE胶上平均可检测到约650个的蛋白质点。比较Lee68和N2899幼苗的2-DE图谱,有52个差异表达蛋白点。选取6个蛋白质点,用MALDI-TOF-MS测定肽质量指纹图谱,搜索大豆UniGene库,成功鉴定出4个蛋白质,分别是GST 9、GST 10、种子成熟蛋白PM36和26 ku未知蛋白;并对这些蛋白质在耐盐性不同品种中可能作用进行讨论。     

观赏羽扇豆离体培养生根关联酶活性及可溶性蛋白含量变化规律研究*

 对观赏羽扇豆尖塔和奖品离体培养生根过程中叶片过氧化物酶（POD）、吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、多酚氧化酶（PPO）3种氧化酶活性和可溶性蛋白含量进行了动态跟踪分析。结果表明：尖塔和奖品的POD活性均出现两个高峰,第1个高峰出现的时间一致,在培养后第5天;第2个高峰,奖品出现在第15天,比尖塔早5d。IAAO活性和PPO活性发展趋势相反。培养后,两个品种的IAAO活性呈现“升高〖FY（*2〗〖FY）〗降低”的趋势;PPO活性呈现“降低〖FY（*2〗〖FY）〗升高”的趋势。可溶性蛋白总体呈现波动下降趋势。研究还认为观赏羽扇豆离体培养生根过程可分为根原基诱导期、不定根表达期和不定根伸长期3个时期。根原基诱导期,POD和IAAO活性升高有利于根原基诱导。不定根表达期和伸长期,POD和IAAO活性下降,PPO活性和可溶蛋白含量维持在较高水平,有利于不定根的生长和发展。     

马铃薯扦插苗不定根生根过程的解剖学观察

采用常规石蜡切片方法,观察了扦插于珍珠岩中的马铃薯品种"东农303"顶芽苗不定根生成的形态解剖学特征。结果显示:扦插苗茎内无潜伏根原基,马铃薯不定根属于诱导型生根;大部分根原基起源于维管形成层细胞和临近薄壁细胞区域,极少数起源于皮层薄壁细胞区域。马铃薯扦插苗不定根的发生,整体上可分为3个阶段:(1)维管形成层细胞和临近薄壁细胞分裂出细胞质浓、具有分生组织特点的薄壁细胞团;(2)新形成的薄壁细胞团不断分裂并脱分化,形成具有分生能力的根原基;(3)根原基分别向轴心、远离轴心方向分裂,轴心方向分裂的细胞最终与茎内的维管束相连,远离轴心的方向分裂的细胞穿过皮层,向外继续朝表皮方向发展,最终穿破表皮伸出不定根。     

油茶组培苗不定根形成过程酶的活性变化分析

[目的]分析油茶组培苗不定根发生过程中酶的变化规律,为油茶种苗培育提供参考依据.[方法]以广西主栽油茶无性系岑软2号油茶、桂无1号油茶和桂普24号油茶组培苗为材料,测定其生根过程中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性.[结果]岑软2号和桂无1号油茶组培苗易生根,培养至50 d生根率大于84.0%,而桂普24号油茶组培苗培养至50 d生根率仅52.7%,属难生根无性系.在组培生根过程中,岑软2号和桂无1号油茶的POD、PPO和IAAO活性在根原基诱导期均呈急剧上升的变化趋势,在根原基形成约20 d达最高峰;桂普24号油茶的POD活性在整个生根期变化不明显,PPO活性明显低于岑软2号和桂无1号油茶,IAAO活性前期不断降低,有利于吲哚乙酸(IAA)的累积,容易形成愈伤组织.[结论]油茶组培苗生根诱导前期提高其POD、PPO和IAAO活性,有利于根原基的诱导,生根诱导后期降低其POD、PPO和IAAO活性有利于不定根伸长.生产上培育油茶组培苗时在培养基中调整外源激素和外源酚等物质的用量可提高组培苗的生根率.     

杨树叶片酚类物质对秋季温度骤降的响应

秋季,在黑林五号杨、黑林三号杨和中绥杨尚未进入休眠期时对其进行了温度骤降处理,观测温度骤降对黑林五号杨、黑林三号杨和中绥杨叶片的膜透性以及叶片中酚类物质含量、多酚氧化酶活性的影响.结果表明:A5叶片细胞膜对低温伤害的自我保护功能最强,A43次之,中绥最弱.此外,抗冻性较弱的中绥叶片中总酚、木质素、缩合单宁含量较低,而多酚氧化酶活性较高.3种杨树叶片中总酚、黄酮、木质素的含量在温度骤降时均无显著变化,叶片中缩合单宁含量和多酚氧化酶活性变化因杨树的抗冻性而不同.     

低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白表达研究

[目的]研究低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白的表达。[方法]分别用TCA/丙酮法和酚抽提法提取桂蕉6号幼苗叶片总蛋白;用2-DE电泳分析低温胁迫处理和常温下桂蕉6号叶片差异蛋白的表达。[结果]酚抽提法提取的总蛋白垂直电泳效果更好;从2-DE图谱中获得了一些具明显差异表达的蛋白点16个,其中表达上调的8个,表达下调的7个,低温处理幼苗叶片特有蛋白1个;成功鉴定9个。[结论]酚抽提法更适合提取香蕉叶片总蛋白。     

黑林1号杨抗病虫害基因研究

黑林1号杨是一种人工杂交杨树品种,以小黑杨为母体,波兰15A为父体。黑林1号杨根系较发达,生长速度快,且抗旱抗寒性能强,适应性强,是目前东北区域广泛推广和种植的杨树品种。黑林1号杨在生长过程中受病虫害的影响给其生长和园林绿化、生态环境等造成巨大损失。本文主要对黑林1号杨的病虫害基因进行研究,将外源抗病虫害基因导入林地,以培育出新的黑林1号杨品种,以便更好地防治病虫害对其生长过程的侵害,提高黑林1号杨的生长发育质量。     

垂丝海棠插穗扦插生根过程解剖学研究

从解剖学的角度观察垂丝海棠插穗不定根的发育过程,结果表明:垂丝海棠2年生插穗茎内无潜伏根原基,不定根由诱生根原基发育形成,诱生根源于愈伤组织自身形成的初生射线与维管形成层交汇处细胞的分裂分化。大约经40 d,不定根原基发育为幼小不定根并伸出周皮之外。并且愈伤组织内有些细胞分化为具螺纹加厚的厚壁细胞,在愈伤组织内产生根原基。     

艾纳香插条不定根发生与发育的解剖学观察

以四年生艾纳香当年生枝条为研究对象,采用硬组织切片法对艾纳香插穗进行解剖学观察,研究艾纳香茎的次生结构及不定根的发生及发育过程,探讨影响不定根发生的因素。结果表明,从外部形态观察,艾纳香属于皮部生根型;从解剖学角度观察,艾纳香插穗内未发现潜伏根原基,属于诱导生根型。艾纳香茎的次生构造从外至内由表皮、皮层和维管柱3部分组成。不定根发育过程分为4个阶段:①维管形成层与木射线交叉处的细胞活动,产生薄壁细胞团;②薄壁细胞不断分裂,形成不定根原基原始细胞;③不定根原始细胞继续分裂分化,形成不定根原基;④不定根原基分裂,形成不定根,并突破皮层。     

利用双向电泳技术分离桃不同生长型差异蛋白

采用双向电泳技术(2-DE)对桃4种生长型的叶片蛋白质进行了分离,通过TCA/丙酮沉淀法,以180 μg上样量进行双向电泳,成功获得桃不同生长型的2-DE图谱.经Image Master 2D软件分析,发现大多数蛋白点分布于pI 4～7,分子量在14.3～66.4 kD 范围内;普通型(毛桃、大久保)2-DE图谱间蛋白点匹配率为64.86%,垂枝型(红垂枝、朱粉垂枝)为71.62%,矮化型(红寿星、粉红寿星)为70.28%,紧凑型(豫矮砧1号、紧凑罗曼)为53.92%;初步鉴定出9个差异蛋白点,其中包括1个普通型特异蛋白,3个垂枝型特异蛋白,1个矮化型特异蛋白,1个豫矮砧1号特异蛋白.     

巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和双向凝胶电泳（2-DE）的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE（双向电泳）图谱效果更好（7cm,考染）。根据预实验结果,选用17cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基和F1104．2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。     

油茶扦插生根过程的生理生化基础研究

以湘林系列油茶Camellia oleifera品种XL1与XL4插穗为材料,研究了其扦插生根过程中可溶性蛋白、可溶性糖及过氧化物酶（POD）活性变化。结果表明:①油茶属于愈合组织生根类型;②XL1可溶性蛋白及可溶性糖在整个生根过程中始终高于XL4,可溶性蛋白均为N型变化趋势,可溶性糖呈现先上升后下降的趋势,两者的积累为不定根的形成提供营养物质;③XL4的POD活性始终大于XL1,POD活性在愈合组织形成期和不定根诱导期出现高峰,利于根原基的诱导;POD活性在愈合组织和不定根表达期下降,利于根原基发育及不定根的伸长。图4表1参20     

扁桃砧木试管苗不定根发生发育的解剖学观察

以扁桃砧木品种‘Nemaguard’试管嫩茎为试材,在生根培养基上诱导生根,同时对其试管苗不定根发生发育过程进行了研究.结果表明:试管嫩茎不定根的发育过程可分为3个时期:形成层细胞分裂期,不定根原基形成期,不定根的分化形成期.扁桃砧木不定根根原基起源于形成层与射线交接处,根的发生与愈伤组织的形成没有直接关系。     

桃豫矮砧1号矮化相关蛋白的双向电泳分析

为研究豫矮砧1号的矮化机理,以豫矮砧1号和毛桃不同生长时期(6,8,9月)的叶片为材料,运用双向电泳技术分析差异表达的蛋白。结果表明:添加硫脲的裂解液提取蛋白效果较好,以90μg蛋白上样量进行双向电泳,背景少、蛋白质斑点清晰、重复性高;用Image Master 2D软件对图谱进行分析,在豫矮砧1号6,8,9月份材料的2-DE图谱上分别检测到557,554,441个蛋白点,在毛桃6,8,9月叶片材料的2-DE图谱上分别检测到548,529,427个蛋白点;检测出16个差异表达蛋白,其中12个蛋白在豫矮砧1号6月份材料中特异表达,3个蛋白在豫矮砧1号8月份材料中特异表达,1个蛋白在豫矮砧1号和毛桃8,9月份叶片中均有不同水平的表达。     

兔眼蓝浆果粉蓝嫩枝扦插生根的形态和解剖研究

通过对兔眼蓝浆果品种粉蓝嫩枝扦插生根过程中插条愈伤组织及不定根发生的形态和解剖观察,研究了粉蓝扦插生根诱导方式、生根部位、愈伤组织形成以及不定根发生和发育过程。结果表明,在扦插前,粉蓝插条内无潜伏根原基存在,不定根由扦插后形成的诱生根原基发育而成,属诱导生根型树种;在扦插过程中,除了在维管形成层及附近薄壁区域产生根原基外,还可见少量愈伤组织分化成不定根,但维管形成层生根的数量和质量明显高于愈伤组织生根。     

油松针叶束离体培养下器官建成的解剖学研究

油松针叶束经离体培养形成幼苗的整个过程，可划分为三个阶段，即愈伤组织的起源与形成；根原基的发生和不定根的形成；芽的萌动与生长。发生在针叶束切口上的愈伤组织起源于形成层和韧皮部的薄壁细胞，经脱分化恢复分生组织的生理机能，并进行分裂活动形成愈伤组织。根原基主要是从愈伤组织内发生，属于愈伤组织生根类型。在愈伤组织内分化出来的分生组织结节和维管组织结节，经单向极性分裂活动形成根原基，并继续生长突破愈伤组织成为不定根。芽在愈伤组织出现后起动，生长锥进行缓慢的分裂活动，由扁圆形芽体变为长圆形，并形成初生叶原基与幼叶紧包生长锥。移植后芽生长迅速，长出数枚窄条状初生叶，不久即抽梢。     

新疆野生樱桃李扦插繁殖不定根的形成及生长调节剂对扦插成活率的影响

利用扦插繁殖研究新疆野生樱桃李绿枝扦插的生根机制及不同生长调节剂处理对硬枝扦插生根的影响。结果显示:扦插前,新疆野生樱桃李的茎中没有根原始体细胞,属于诱导型生根。其生根形式主要是愈伤组织生根和皮部生根。绿枝扦插生根包括切口处愈伤组织的形成、根原基的形成和不定根的发育3个过程。愈伤组织由形成层细胞分裂形成,并对不定根的形成起诱导和促进作用;不定根原基起源于形成层,发生部位是形成层与韧皮部射线相交叉的区域。外源生长素类生长调节剂能够促进硬枝扦插的成活率,其中IBA+NAA(1∶1)2 000mg/L蘸根处理插条成活率为30.2%,并且蘸根处理时间以20s为宜。生长调节剂处理后平均根数、平均根长和平均根径变化不大,但平均生根率与成活率的关系密切,说明生长调节剂主要诱导不定根的形成,对根后期发育影响不大。