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| 巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析 | |
| 引用本文： | 林秀琴,邓军,袁坤,王真辉,杨礼富.巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析[J].热带农业科学,2009,29(4):1-6. |
| 作者姓名： | 林秀琴 邓军 袁坤 王真辉 杨礼富 |
| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737 2. 海南大学农学院,海南儋州,571737 3. 中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室,海南儋州,571737 |
| 基金项目： | 中国热带农业科学院科技项目，中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金，和公益性行业科研专项基金 |
| 摘 要： | 采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白，蛋白溶解后，用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和双向凝胶电泳（2-DE）的结果均表明，所制得的蛋白样品质量较高，并且纯化过的蛋白样品2-DE（双向电泳）图谱效果更好（7cm，考染）。根据预实验结果，选用17cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验，采用快速银染法进行染色，随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索，鉴定了3个蛋白，它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2，核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基和F1104．2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。 |
| 关 键 词： | 巴西橡胶树 蛋白样品 双向凝胶电泳(2-DE) MALDI-TOF MS |
Preparation and Mass Spectrometry Primary Analysis of Protein Samples of Rubber Tree Leaves |
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| LIN Xiuqin,DENG Jun,YUAN Kun,WANG Zhenhui,YANG Lifu.Preparation and Mass Spectrometry Primary Analysis of Protein Samples of Rubber Tree Leaves[J].Chinese Journal of Tropical Agriculture,2009,29(4):1-6. | |
| Authors: | LIN Xiuqin DENG Jun YUAN Kun WANG Zhenhui YANG Lifu |
| Institution: | 1 Rubber Research Institute;Chinese Academy of Tropical Agriculture sciences;and Ministry of Agriculture Key Laboratory for Rubber Tree Biology;Danzhou;Hainan 571737;2 College of Agronomy;Hainan University;Hainan 571737 |
| Abstract: | The method for improved TCA-acetone precipitation was used to extract proteins from rubber tree(Hevea brasiliensis) leaves,and the protein supernatant samples were purified and quantified by kits(Bio-Rad).The result of SDS-PAGE and two-dimensional gel electrophoresis(2-DE) both showed that the protein samples prepared were good in quality and that the purified protein samples had a better 2-DE map when compared with the nonpurified one(7 cm,Coomassie brilliant blue stained).Purified protein samples were sep... |
| Keywords: | MALDI-TOF MS |
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