保存与现配红细胞悬液在新城疫血凝与血凝抑制中的对比试验

为了研究红细胞悬液保存时间对新城疫血凝与血凝抑制试验的影响,同时比较用卵黄和血清检测新城疫抗体水平的结果差异,笔者在不同地区随机选取72份鸡蛋（其中16份鸡蛋对应16份血清）,用保存1周的红细胞悬液和现配红细胞悬液进行了对比试验。结果显示：在新城疫血凝与血凝抑制试验中,保存1周的红细胞悬液HA试验的结果比现配红细胞悬液低2个滴度;用4单位工作量进行HA试验时,得到了相同的结果;用卵黄测得的新城疫抗体水平稍低于用血清测得的结果,但差异不明显。表明用保存1周的红细胞悬液测定卵黄中新城疫的抗体水平比用现配红细胞悬液所测得的抗体水平低接近1个滴度,并且可以用卵黄代替血清检测新城疫抗体水平。     

冷藏保存BHK21细胞悬液及复苏试验

采用方瓶存放BHK21细胞悬液,在2℃～8℃冰箱存放不同时间后,按常规方法进行细胞复苏和传代。对比存放不同时间后细胞复苏时的驯化次数、细胞数量和细胞活力,寻求最佳存放时间和复苏代次以指导生产。同时将2℃～8℃冷藏保存方法与液氮冻存细胞方法在细胞复苏周期和达到所需扩繁细胞数方面进行比较。结果表明,方瓶冷藏保存BHK21细胞悬液最长可存放60d,经2—5代驯化后,细胞形态和活力恢复正常,细胞数量与收悬液前细胞数量无显著差异,并能稳定传20代以上。与液氮冻存细胞方法相比,该方法在快速恢复细胞产量时有较大优势,在生产周期紧张的情况下可作为辅助方法保障细胞传代的延续。     

不同保存方式对猪伪狂犬活疫苗病毒含量的影响

为了探究猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗及专用稀释液的最佳保存温度及保存时间,试验取40瓶山东某生物公司生产的猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗(批号为20190801,-20℃保存)进行试验,其中20瓶用专用稀释液稀释,20瓶不稀释,分别在4℃、37℃存放,并分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时测病毒含量;取不同温度(4℃、23℃、38℃)保存的稀释液对-20℃保存的疫苗进行稀释,每个温度稀释2瓶,当稀释后的疫苗温度为37℃时测定病毒含量。同时从-20℃保存的疫苗中取出2瓶作为对照,测定病毒含量。结果表明:疫苗在稀释前低温冷冻保存最好,如果4℃存放,不要超过8 h;稀释后的疫苗要及时使用,若不能及时使用,可于4℃保存,保存时间不超过8 h。室温保存尤其是天气炎热的夏季保存时间不要超过6 h。猪伪狂犬病活疫苗专用稀释液的保存温度以23℃为最佳。     

不同精液稀释液对海扬黄鸡配套系亲本精液品质的影响

为探究鸡适宜的精液稀释液配方以及稀释液最佳保存时间,本实验采集50只海扬黄鸡精液,测定比较3种不同的精液稀释液(基础稀释液、BPSE稀释液、自配稀释液)稀释后体外不同存放时间(0.5、1.5 h)以及对自配稀释液在100℃灭菌和加双抗条件下不同存放天数(3、6 d)稀释后的精液品质。结果表明:存放0.5 h后,自配稀释液稀释后的精子活力较BPSE稀释液提高了2.29%(P<0.05),自配稀释液稀释后的精子活率较基础稀释液、BPSE稀释液分别提高0.65%(P<0.05)、0.66%(P<0.05);存放1.5 h后自配稀释液稀释精子活力较基础稀释液提高了4.61%(P<0.05),精子活率较基础稀释液和BPSE稀释液分别提高0.98%(P<0.05)、1.12%(P<0.05);BPSE稀释液稀释后的精子畸形率在存放0.5 h和1.5 h后均为最高;3种稀释液稀释后的精液在体外存放0.5和1.5 h之后,精液死精率均无显著差异,但在1.5 h时自配稀释液死精率最低;100℃煮沸和加双抗的稀释液在4℃冰箱中存放3 d和6 d后稀释的各精液品质指标间均无显著差异。综合上述,自配稀释液稀释后精液品质优于基础稀释液、BPSE稀释液,可作为海扬黄鸡的精液稀释液;煮沸或加入双抗的自配稀释液保存6 d之内对所测精液品质指标没有影响。     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

羊附红细胞体解离方法的比较研究

本试验为建立一种高效的羊附红细胞体解离方法,采集红细胞感染率大于90%的阳性抗凝血,分别应用水浴法和药物体外驱虫法对羊附红细胞体进行解离,观察分离前后附红细胞体感染率、红细胞感染强度、附红细胞体数、杂质含量和附红细胞体的运动性5项指标;提取附红细胞体抗原,制备全蛋白悬液,测定蛋白质含量,比较解离效果。将两种方法制备的羊附红细胞体抗原全蛋白进行SDS-PAGE试验,观察条带是否一致。结果显示,200 mL血液中加入1 mL双向红莲灭,4℃作用36 h,即可达到较好分离效果。与水浴法相比,解离后,红细胞感染率和感染强度明显下降,蛋白含量增加,收率高,纯度好。SDS-PAGE结果显示,体外驱虫法所制的羊附红细胞体抗原全蛋白悬液,其抗原蛋白带与水浴法相同,因此可用于粗制羊附红细胞体抗原。     

茨城病病毒血细胞凝集素的理化特性

茨城病病毒血细胞凝集素(HA 素)能迅速吸附在置于37、22或4℃高渗稀释液(0.6M 的氯化钠,pH7.5)中的牛红细胞上。吸附在红细胞上的这种 HA 素即使经过等渗磷酸盐缓冲液重新悬浮,37或50℃培养或在有神经氨酸苷酶存在时培养均不能从细胞上洗下。HA 素在0.6M的氯化钠溶液中的效价比在0.2M 中的高     

应用卵黄液4℃保存驴精液效果及受孕率研究

为了对驴精液保存、应用及配种进行系统研究,试验采用卵黄稀释液4℃保存驴精液,并用4℃保鲜精液进行配种,探究4℃保鲜精液用于人工授精的可行性。结果表明:驴精液应用卵黄液4℃保存24~48 h快速前进的精子活力均在0.3以上(种公驴847除外),可以用于输精,部分驴精液保存48~72 h快速前进精子活力仍在0.3以上;同一时间段内4℃保鲜精人工授精配种91头,受孕27头,情期受胎率为29.7%;鲜精配种309头,受孕109头,情期受胎率为35.2%。说明4℃保鲜精液可以用于输精,但受胎率显著低于鲜精(P0.05),有待于进一步改善和提高。     

野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代精液冷冻保存技术研究

为了充分利用野生动物资源,本试验首次对野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代公羊精液低温和冷冻保存方法进行了研究。结果:在低温(4±0.5)℃条件下稀释保存F1代羊精液,其中采用葡萄糖-蔗糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(III液)低温保存绵羊精子的时间和活率(168 h,0.35)显著优于葡萄糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(II液)(72 h,0.30)、葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(IV液)(48 h,0.35)和葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(I液)(18 h,0.42);采用4种不同冷冻稀释液制作杂交F1代公羊细管冻精,用III液冷冻保存后解冻效果最佳,解冻后精子活率为(48.6±0.4)%,畸形率为(11.20±2.02)%、顶体完整率为(58.4±3.68)%。     

犬附睾尾部精液低温保存效果的研究

为了进一步研究犬体外受精技术,试验以犬附睾为材料,在对附睾各区段精液品质分析的基础上,分别采用3种稀释液对犬附睾尾部精子进行低温(4℃)保存并观察效果。结果表明:犬附睾尾部精子活率和密度分别为39.70%、4.94×108个/mL,高于附睾头、附睾体和输精管,差异极显著(P0.01);精子活力在0.3以上时,稀释液Ⅲ保存时间为93.18 h,极显著高于稀释液Ⅰ和稀释液Ⅱ(P0.01)。     

美国家禽改良计划条文内容(连载七)

<正>(上接第12期第41页)(3)在待检血清稀释液中加入25μL50%红细胞悬液;(4)轻柔涡旋混匀;(5)4℃孵育1h;(6)进行红细胞离心;(7)采用上清液进行HI试验。更改试验中的稀释程序需要考虑最初的1:5稀释液的配备。对于1:5稀释程序来说,不要在A列中加入PBS,而是加入50μL处理过的上清液,对A列到H列进行25μL倍比稀释后,B列到H列的稀释度分别为1:10到1:640。147.8诊断用蛋黄样品的准备程序     

不同采样量、保存时间和温度对猪血常规测定结果的影响

为了提高猪血常规测定结果的准确性,试验采集6头广西巴马小型猪血液,利用全自动血细胞分析仪测定并分析了采血量、冷藏保存时间、冷冻温度对猪血常规测定结果的影响。结果表明:采血量较大(3 mL左右)时血常规测定结果的稳定性更差;血样采集后在4℃保存4 h内测定对血常规指标没有显著影响,8 h以后测定对白细胞指标有显著影响;-20℃、-40℃、-80℃冷冻后测定血常规均会对大多数指标有极显著影响;液氮冷冻30 min对猪血液红细胞总数、血红蛋白浓度、血红蛋白含量、血小板总数等指标没有显著影响。说明测定猪血常规应采集较少量(1 mL左右)血液于4℃保存并于4 h内完成测定。     

犬精液液态保存稀释液及温度筛选试验

试验研究了 8种稀释液在 5℃、10℃、15℃、2 0℃下保存犬精液的效果。结果表明 ,15℃为犬精液液态保存的较适温度 ,3号液为优等液 ,其中 3号液在 15℃精子的存活时间为 10 5h± 10h ,与对照液在 15℃的保存效果差异极显著 (P <0 0 1)。 2、4、5号液是良等液 ,在 15℃精子的存活时间是6 4h± 8h ,与对照液在 15℃的保存效果差异显著 (P <0 0 5 )。中等液为 6号液 ,在 15℃、2 0℃保存时与对照液没有统计学上的差异 (P >0 0 5 ) ,在其他 2种温度保存时不及对照液。 7、8号液为差等液 ,在 15℃保存时与对照液差异不显著 (P >0 0 5 ) ,在其他 3种温度时不及对照液     

猪精液在不同温度下的保存时间对受胎率的影响

随着养猪业的不断发展，猪人工授精越来越受到人们的重视，技术要求越来越高。为此，我们曾对猪精液在不同温度下不同配方的稀释液能保存的最长时间进行了试验。１方法１．１选择三种不同配方的稀释液１．２将上述三种稀释液分别对一头苏白公猪的精液进行稀释，分装成每份２０mL装入瓶内，贴上标签，间隔１h的自然降温后，放进装有自然温度水的器皿内，再放进８℃～１４℃和１５℃～２２℃的恒温箱内水浴保存，每隔２４h检查一次精子的活力，直到活力低于６０％为止。通过以上试验，证明Ⅰ号稀释液的效果最好，在８℃～１４℃时可保存２４…     

简述影响禽流感HA和HI试验准确性的因素

为了提高禽流感HA-HI试验的准确性,笔者分析了可能影响禽流感HA和HI试验结果的9个因素:阿氏液和PBS液的配制、血凝板、待检血清、1%鸡红细胞悬液、冻融标准抗原和阳性血清、正确使用多道移液器、平行对照、抗原返滴和结果判定,以期为禽流感HA-HI试验研究提供参考。     

辽宁绒山羊冻精稀释液冷冻保存法

目前,人们习惯把辽宁绒山羊冻精稀释液在配制后放于0℃～4℃条件下保存,以备后用。然而这种保存的方法只能保存冻精稀释液1～2d,且配制需大量时间,受温度影响又大,严重影响配种的工作效率。为了延长稀释液的保存时间、方便冻精生产,笔者进行了将冻精稀释液在-5℃～-20℃、-196℃下进行冷冻保存试验及反复冷冻—解冻试验,现将试验结果简述如下。1 稀释液在-5℃～-20℃下保存 将配制好的稀释液盛于100～300ml的锥形瓶里,置于冰箱中,用MCT—200超低温温度仪测得冰箱内温度为-5℃～-20℃。待稀释液完全形成冰块后取出解冻,在显微镜下观察稀释液:溶质均匀呈透明状     

支原体检验用培养基的研究

水质和血清对比试验结果表明：以水质电导率低于0．5μs／cm、猪血清总蛋白不低于49g／L、胆固醇不高于1．66mmol／L为标准制备的改良Frey培养基和支原体培养基活菌滴度均达10^9CCU／mL。对滑液支原体GX11-T株及猪鼻支原体BTS-7株1—5代对数生长期培养物检测,均达10^9CCU／mL。改良Frey培养基与支原体培养基经反复冻融8次;或改良Frey培养基经37℃保存24h;支原体培养基37℃保存8h均不影响灵敏度。改良Frey培养基在鸡胚成纤维细胞及鸡胚尿囊液中最小检测量分别为4CCU／mL和2CCU／mL;支原体培养基在BHK：,细胞中最小检测量为8CCU／mL。改良Frey培养基和支原体培养基4℃有效期为1个月,-20℃为12个月。     

不同稀释液对绵羊精液4℃保存效果的影响

本实验旨在比较研究3种不同组成成分的绵羊精液低温稀释液对绵羊精子4℃保存效果的影响,3种稀释液分别是以三羟甲基氨基甲烷（Tris）-卵黄-柠檬酸-葡萄糖为基础配方的稀释液1、以脱脂奶粉-大豆卵磷脂-果糖为基础配方的稀释液2和以Tris-卵黄–柠檬酸-果糖为基础配方的稀释液3。通过假阴道方法采集健康成年绵羊精液,用3种不同稀释液按照精液:稀释液=1:8的比例稀释后在4℃环境进行保存,分别在0、24、72、120 h和168 h后检测分析精子活力、运动参数、顶体完整性、线粒体膜完整性、精子总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和细胞丙二醛（MDA）浓度。结果表明：精液保存168 h时,稀释液3组的保存效果最好,其总运动精子比例为54.91%、前向运动精子比例为43.27%、快速运动精子比例为19.73%、线粒体完整性为68.03%,均高于稀释液1和稀释液2组（P<0.05）;稀释液3组的顶体完整率为60.55%,高于稀释液2组（P<0.05）。保存120 h时,稀释液3组T-AOC为0.76 mmol/mg prot,高于稀释液2组（P<0.05）;稀释液3...     

不同稀释液对藏獒精液保存效果的影响

比较了8种稀释液在藏獒精液冷冻保存和低、常温保存(5 ℃,10 ℃,15 ℃,20 ℃)的效果.结果表明:2号和8号稀释液在冷冻保存时效果最好,精子活力和顶体完整率分别达到0.40和49%,与对照组相比差异显著(P<0.05).在藏獒的低温、常温保存试验中,所有稀释液在15 ℃时保存时间最长,综合考虑,7号液保存效果最好;在15℃时精子平均存活时间为103 h,显著高于对照组和其它稀释液(P<0.05).     

红景天多糖对娟珊牛改良西藏黄牛F_3代精液4℃保存效果的影响

试验旨在研究红景天多糖对高海拔环境中娟姗牛改良西藏黄牛F_3代精液4℃保存效果的影响。采用假阴道法采集体格健硕的娟姗牛改良西藏黄牛F_3代精液,在改进的奶牛精液低温稀释液基础液中,添加红景天多糖0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL,比较添加不同浓度红景天多糖对高海拔环境的娟姗牛改良西藏黄牛F_3代精液4℃保存48 h后精子质量的影响,以精子活力、精子顶体完整率为评价精液品质指标,以谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)活性为评价抗氧化保护作用指标,探讨红景天多糖对高海拔环境的娟珊牛精液4℃保存效果的影响。结果显示:在稀释液中添加红景天多糖,娟姗牛改良西藏黄牛F_3代精液4℃保存48 h,红景天多糖0.08 mg/mL添加组精子活力较其他添加组和对照组高,达到极显著差异(P0.01)水平;0.08 mg/mL添加组顶体完整率较0.06 mg/mL和0.10 mg/mL添加组差异显著(P0.05),较其他组差异极显著(P0.01);0.08 mg/mL添加组精子GR酶活性和CAT值达72.39 U/L和5.79 U/mL,较其他添加组和空白对照组差异达极显著(P0.01)水平。总之,在改进的奶牛精液稀释液中添加0.08 mg/mL的红景天多糖可明显改善4℃环境保存娟姗牛改良西藏黄牛F_3代精液品质和增强抗氧化保护作用。该试验为今后娟珊牛改良西藏黄牛后代、娟珊牛,乃至黑白花奶牛精液低温保存的生产应用奠定了基础。