间充质干细胞因子群对角膜损伤药效研究及临床初探

间充质干细胞因子群是干细胞分泌的蛋白产物,具有促修复、调节免疫、抑制瘢痕产生等许多干细胞的生物学特性。试验应用干细胞因子对大鼠角膜化学烧伤进行治疗,结果表明干细胞因子可以促进角膜修复,缩短愈合时间,改善角膜透明度和水肿情况,同时抑制新生血管的过度生长。临床案例证明干细胞因子可以加速角膜损伤的愈合,使用简单、安全。     

干细胞分泌因子对皮肤创伤犬的治疗作用

探讨干细胞分泌因子对犬皮肤创伤的治疗作用,建立犬皮肤损伤模型,观察其治疗犬皮肤创伤的临床效果。将皮肤创面为30mm×30mm的9只损伤模型幼犬,随机分为3组,分别为骨髓间充质干细胞分泌因子(BMSCF)治疗组、常规治疗组和对照组,取BMSCF加于皮肤损伤的犬创面,以平均愈合时间、愈合残留面积为指标,观察各组动物损伤皮肤的修复情况。结果显示,BMSCF治疗组皮肤平均修复时间为27.66d±0.87d,愈合残留面积分别为(8.043±0.124)cm~2/10d、(3.317±0.105)cm~2/20d、0cm~2/30d,相对于其他两组治疗时间明显缩短,创面愈合效果好(P0.05)。皮肤组织切片结果显示,BMSCF治疗组皮肤组织结构愈合完整、快速、瘢痕面积小。结果表明相对于常规治疗,干细胞分泌因子对犬创面愈合治疗效果显著、疗程短,通过干细胞分泌因子治疗临床上犬难愈性创面是一种切实可行的新途径。     

犬间充质干细胞的研究进展和临床应用

间充质干细胞是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的多能干细胞,在兽医临床逐渐成为研究的热点。犬是一种理想的实验动物模型,经常被用于新药或治疗方法的疗效与安全性测试。犬间充质干细胞在犬病治疗上的应用将有助于人类疾病的研究,而目前犬间充质干细胞的分离方法、培养条件、纯化技术、鉴定方法等基础性研究仍较少,临床应用的标准还没有建立,治疗疾病的范围仅限于骨与软骨损伤的修复和炎症性疾病等。为此,综述犬间充质干细胞的来源、鉴定方法、临床应用和存在的问题,以期为相关研究人员提供参考。     

环孢霉素A与妥布霉素地塞米松联合用药对犬高危穿透性角膜移植术免疫排斥的作用

使用环孢霉素A(CSA)滴眼液和妥布霉素地塞米松滴眼液联合用药,对犬高危穿透性角膜移植手术术后进行抗免疫排斥治疗,以探讨其对该手术术后的疗效.选择30只健康本地犬建立犬角膜高危病理模型,继而行穿透性角膜移植手术,术后将试验犬随即分为2组,生理盐水对照组15只,环孢霉素A滴眼液+妥布霉素地塞米松滴眼液组15只,分别于术后第2天进行滴眼治疗,6次/d,2滴/次,用药组进行交替药物滴眼,两次滴眼间隔2h,并对术眼进行眼压测定、组织病理学检查和裂隙灯检查,观察术后各组角膜免疫排斥情况和角膜组织结构情况.试验结果显示,用药组角膜发生免疫排斥的平均时间为49.33±9.61d,生理盐水组角膜发生免疫排斥的平均时间为10.83±2.93d,两组相比差异性极显著(P＜0.01).术后第5天测定所有术犬术眼眼压,结果均在正常范围内(10～20 mmHg).生理盐水组角膜组织结构发生了严重的变化和破坏,随着时间的推移呈严重发展趋势,用药组整个观察期角膜组织结构未发生明显变化.     

大泡技术辅助下深板层角膜移植术治疗犬角膜损伤的术式探讨

本试验对大泡技术辅助深板层角膜移植术(DLK)治疗犬角膜高危损伤的术式进行初步探讨。随机选择6只健康本地犬构建角膜重度碱烧伤模型,进行大泡技术辅助下的深板层角膜移植术,并详细记录手术过程。分别于术后第3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d、49 d、56 d、63 d对术眼角膜移植片的透明度、角膜新生血管情况、角膜水肿情况、角膜浑浊度、角膜上皮缺损程度以及眼压、泪液量等进行观察、测量,并记录结果。结果表明,术后42 d,6只试验犬的RI指数5,角膜上皮缺损情况分值处于较低水平,角膜上皮爬行良好,植片保持透明,眼压值及泪液值稳定。采用大泡技术辅助下的深板层角膜移植术治疗犬高危角膜损伤,其临床效果理想,术后排斥反应率低,可作为犬角膜溃疡等严重角膜损伤疾病的理想治疗手段。     

富血小板纤维蛋白促进犬角膜溃疡修复的临床疗效分析

将富血小板纤维蛋白(PRF)应用到促进犬角膜溃疡的修复上,通过模型建立、临床观察及组织病理学分析,评价PRF对犬角膜溃疡的修复作用,探讨角膜损伤修复的安全、有效治疗方法。将32只试验犬建立角膜碱烧伤模型后按随机数字表法分为A、B、C、D组,每组8只。A、D组分别使用生理盐水、妥布霉素点眼,每日6次,每次1滴,连续2周;B组使用自体PRF膜,C组使用自体PRF膜联合妥布霉素,B、C组分别将相应PRF膜覆盖、固定于角膜表面,并行上下眼睑暂时缝合术,C组妥布霉素于试验眼内眼角滴入,点眼方法同A、D组。于治疗前及治疗后3、7、14 d进行角膜溃疡及炎症评分、泪液量测试,组织病理学观察。结果表明,治疗14 d后,B、C组角膜溃疡评分均显著低于A、D组(P0.05),B、C、D组角膜炎症评分均显著低于A组(P0.05);各组新生血管长度及面积基本呈现先增加后降低趋势;组织病理学观察可见,B、C组处于角膜修复后期,A组处于炎症和溃疡期,D组处于溃疡期。研究表明,自体PRF对犬角膜碱烧伤组织具有良好的修复作用,是一种安全、有效的新型眼表修复医学材料。     

犬穿透性角膜移植手术方法的研究

为了研究犬穿透性角膜移植手术(penetrating keratoplasty,PKP)的关键技术,为其在小动物临床中的开展奠定基础,试验选取9只试验用比格犬,随机分为供体组和受体组,供体组3只,受体组6只。受体组进行PKP及第三眼睑遮盖术,术后试验犬局部应用妥布霉素地塞米松滴眼液和环孢霉素A滴眼液,全身应用头孢噻呋、氟尼辛葡甲胺和地塞米松,每天用裂隙灯检查创口和角膜愈合情况。结果表明:4只受体犬角膜愈合良好,无角膜浑浊和新生血管,2只受体犬因术后并发症导致角膜愈合不良。说明PKP是治疗严重角膜疾病的有效方法,但仍有很多细节有待研究和改进,以促进其在临床更好地应用。     

Dermafuse组织粘合剂在犬角膜穿孔手术中的应用

组织粘合剂是外科手术中帮助软组织粘合修复的一种人工制剂,常用于止血,闭合伤口和瘘管修复等。组织粘合剂大约分五种类型:氰基丙烯酸酯及其衍生物、纤维蛋白胶、硫酸软骨素乙醛、水凝胶和多糖类等,临床应用最多的为α-氰基丙烯酸酯。犬角膜损伤主要由外伤、细菌感染、病毒感染等引起,常需外科手术进行修补。1试验材料1.1试验动物体重3~5 kg、5月龄的本地家犬2只。1.2药品Dermafuse组织粘合剂,硫酸阿托品,异氟烷,丙泊酚,新洁尔灭、阿莫西林、氯霉素滴眼液、复方托吡卡胺滴眼液等。1.3器械与设备眼睑撑开器、留置针、手术刀、眼科手术器械、眼科显微镜、呼吸麻醉机等。2试验方法2.1动物饲养与分组犬饲喂常规商品狗粮,自由采食、饮水,单笼饲养。     

犬脂肪间充质干细胞的分离培养及分化潜能研究

为获得犬脂肪间充质干细胞,本试验取犬腹股沟皮下脂肪组织,分别利用组织培养法和酶消化法分离犬脂肪来源间充质干细胞,对比观察不同来源细胞的形态和增殖特征,并通过诱导液促进细胞向成骨细胞和成脂细胞方向分化,检测其分化潜能。结果表明,通过组织培养法培养的青年犬脂肪组织,可获得大量脂肪间充质干细胞,该细胞生长旺盛,形态均一,可分化为碱性磷酸酶染色阳性的成骨细胞和油红O染色阳性成脂细胞。组织培养法分离培养犬脂肪间充质干细胞操作简单,可为细胞移植治疗等研究提供充足的细胞来源。     

5种常见犬病的临床处置与救治

<正>1眼睛损伤眼睛损伤多见于眼球大而突出的犬种。眼睛损伤常因宠物犬相互打斗撕咬,以及外来的暴力因素所致。轻者眼角膜或结膜损伤,重者角膜穿孔,甚至眼球脱出于眼眶之外。患犬痛苦异常,骚动不安,如处置得当,可保住患犬眼球,并恢复一定视力。     

熊胆滴眼液对兔角膜烧伤和角膜翳的治疗实验研究

为研究熊胆滴眼液对角膜烧伤和角膜翳的治疗效果 ,采用“电热角膜瘢痕复制器”制作家兔角膜烧伤与斑模型 ,以生理盐水、去熊胆滴眼液、氯霉素眼药水和狄奥宁眼药水作对照 ,用熊胆滴眼液进行治疗实验。实验结果表明 :熊胆滴眼液对家兔角膜烧伤及并发结膜炎的治疗效果显著 ,优于去熊胆滴眼液和氯霉素眼药水 (P<0 .0 5 ) ;对角膜翳的治疗效果非常显著 ,优于去熊胆滴眼液和狄奥宁眼药水 (P<0 .0 1)。扫描电镜观察了熊胆滴眼液对角膜翳的治疗作用 ,结果显示 :治疗 2月后 ,角膜上皮细胞呈现更新速率较快的结构像 ,治疗 5月后 ,上皮细胞表面的微皱襞及微绒毛排列规则、细密 ,与正常角膜上皮细胞的超微结构相一致。表明复方熊胆滴眼液具有使角膜翳处的角膜上皮恢复正常的作用。     

细胞生长因子在小动物角膜损伤修复中的作用

小动物(尤其犬和猫)角膜损伤在兽医临床上十分常见。角膜损伤治疗不当或愈合延迟会导致视力障碍,甚至失明。研究表明,在角膜损伤的修复中细胞生长因子有成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、转化生长因子-β、角质细胞生长因子、血小板衍生生长因子和神经生长因子等,起着重要的调节作用。这些细胞生长因子通过自分泌或旁分泌作用于角膜组织细胞相应受体,并经多种信号转导通路影响其下游产物的表达,调控角膜细胞的增殖、迁移、分化和凋亡。细胞生长因子及其受体在角膜组织各层的分布、数量和作用的时序性差异决定着损伤角膜的有效修复。体内及体外研究显示,细胞生长因子将在小动物临床上有广阔的应用前景。     

不同药物治疗犬高危穿透性角膜移植术后角膜的组织学观察

本试验选择犬为试验动物,构建角膜高危病例后进行穿透性角膜移植术(PKP).术后将45只犬随机分为3组,分别使用环孢霉素、雷帕霉素滴眼液和生理盐水进行滴眼治疗,并分别于术后10 d、30 d和60 d三个时间点每组随机抽取3只术犬,摘眼后进行角膜组织切片,对角膜各层组织结构的形态进行观察.结果显示,生理盐水组术犬角膜随着时间推移,出现了结构层次的变化,细胞破裂、丢失,大量新生血管浸润,内皮细胞丢失.环孢霉素组术犬角膜组织结构无明显改变,基质层出现少量红细胞,内皮细胞轻微丢失.雷帕霉素组术犬角膜组织结构无明显改变,未见新生血管浸润.     

脱细胞羊膜基质负载BMSCs和EPCs修复犬尿道缺损

旨在研究使用犬BMSCs和EPCs接种的脱细胞人羊膜基质修复犬长段管状尿道缺损的可行性,评估其修复效果。选取15只健康成年雄性杂种犬,随机分为5组,每组3只。建立会阴部3cm管状尿道缺损模型后,分别用负载骨髓间充质干细胞(BMSCs)、血管内皮祖细胞(EPCs)、BMSCs和EPCs混合的脱细胞羊膜基质修复缺损部位;用未种植细胞的脱细胞羊膜修复和缺损后不修复的犬只作为对照。通过术后排尿观察,尿道造影,剖检观察和组织学观察来评估修复效果。结果显示:BMSCs+EPCs混合组的犬只在术后排尿正常,新生尿道管腔光滑平整,无尿道狭窄,组织学观察显示新生上皮完整;BMSCs组的犬只尿道有小范围狭窄,剖检发现新生段有瘢痕;EPCs组的犬只排尿时间延长,新生尿道段狭窄,剖检显示新生段粗糙,瘢痕较多;组织学观察显示新生段上皮化不完整;羊膜修复组和自体修复组的犬只排尿异常,新生尿道段狭窄,剖检显示新生段瘢痕化严重,有多处皱缩,组织学观察显示上皮化不完整,仅为单层上皮,自体修复组的犬只尿道新生段几乎无上皮细胞覆盖。结果表明:证明用负载BMSCs和EPCs 2种细胞的脱细胞人羊膜基质可成功修复犬长段管状尿道缺损。     

犬前十字韧带断裂的自身韧带囊内囊外修复

本文介绍1例前十字韧带断裂患犬病例,通过利用该犬自身韧带对其进行囊内囊外修复,疗效确实;同时避免了使用人工韧带修复所造成的排斥反应、骨损伤及骨关节病的发生,此方法可应用于宠物临床。     

宠物犬猫角膜损伤的临床外科治疗

犬猫角膜损伤的临床表现随受伤的深度、大小和污染程度不同而不同。依角膜的损伤程度可分为 :表层的损伤、深层的损伤和全层的损伤。应根据具体情况实施相应的手术方案 ,同时介绍了术后护理方法及预后情况     

崂山奶山羊脂肪间充质干细胞系的建立及鉴定

旨在建立崂山奶山羊脂肪间充质干细胞系并对其进行初步鉴定.采集崂山奶山羊脂肪组织,在Ⅰ型胶原酶的分解消化作用下,将脂肪组织中的单核细胞进行分离并扩增培养;测定其生长曲线,利用Real time RT-PCR技术对其表达的干细胞因子进行鉴定;将传至第3代的脂肪间充质干细胞进行成骨诱导分化,利用茜素红染色进行鉴定.结果显示,崂山奶山羊脂肪间充质干细胞形态为长梭形、星形等成纤维细胞样细胞形态,但比成纤维细胞饱满,第3代细胞生长至3 d左右时细胞进入指数生长期,生长至6~7 d时进入平台期;经成骨诱导分化后,经茜素红染色可见骨结节被染成深红色.综上提示,崂山奶山羊脂肪间充质干细胞具有诱导分化潜能.     

间充质干细胞在动物临床上的应用前景

间充质干细胞(MSC)是一种在治疗组织损伤和修复方面极具潜力的“种子细胞”,因而受到人们的广泛关注。目前,对于人间充质干细胞的分离、鉴定、培养方法与技术已经成熟,且在临床上的应用也在积极推进当中。相比于人源间充质干细胞,家畜间充质干细胞目前受到较少的关注,其很多重要的参数数据鲜见报道。但是,将家畜的间充质干细胞应用于临床治疗和动物养殖业中时,它能创造出的医疗价值和经济价值是非常可观的。因此,间充质干细胞在家畜上的应用,必定会对整个畜牧业有着积极促进作用。论文通过对比人与家畜间充质干细胞的分离、培养和鉴定方法,阐述家畜间充质干细胞的分离培养和鉴定,以期为相关研究提供参考和借鉴。     

犬骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定

为了证明全骨髓贴壁法分离培养犬骨髓间充质干细胞的可行性,为后续移植试验提供活性良好的种子细胞,试验采用全骨髓贴壁法分离纯化犬骨髓间充质干细胞,并通过细胞形态观察、表面标记流式分析、体外诱导分化对细胞进行鉴定。结果表明:分离培养的原代骨髓间充质干细胞呈梭形、集落样生长,表面标记CD44呈阳性,CD34、CD45呈阴性,能够向成骨细胞和心肌样细胞分化。说明全骨髓贴壁法便捷可行,获得的犬骨髓间充质干细胞纯度高,增殖旺盛,分化能力良好。     

骨髓间充质干细胞及其分泌因子对治疗犬股骨头缺血性坏死的效果观察

小动物临床上,犬的股骨头缺血性坏死称为累卡佩斯病(Legg-calvé-perthes disease,LCPD),犬股骨头部分骨骺由于失去血液的供应造成了骨的坏死,随之股骨头发生塌陷,引起髋关节畸形。本试验通过人工液氮冷冻方法建立犬股骨头坏死模型,对比治疗发现骨髓间充质干细胞及其分泌因子可以促进成骨细胞增殖分化,其中干细胞疗法可以直接增加股骨头坏死区内的干细胞数量,而干细胞分泌因子则是通过促进内源性干细胞的增殖分化来增加干细胞数量。此方法可以加速股骨头内血供恢复,对治疗犬股骨缺血性坏死效果明显。