乳酸菌活载体疫苗研究进展

乳酸菌以其益生性、佐剂效应、制备简单及生产成本低等优点被广泛用于各种病原抗原的传递载体研究。乳酸菌活载体疫苗能同时激发机体的体液免疫、黏膜免疫和细胞免疫反应,是目前疫苗研究领域的一个热点。作者分别对乳酸菌活载体疫苗的作用机理、传递外源抗原的形式进行概括,对其在预防各种病毒性、细菌性和寄生虫性等疾病的研究进行综述,并对其存在的问题、应用前景进行分析和展望。     

乳酸菌口服疫苗在猪病防治中的应用研究

乳酸菌口服疫苗能够诱导机体产生有效的黏膜免疫、体液免疫和细胞免疫应答,具有其他疫苗不可比拟的优势,目前已成为疫苗研究领域的一个热点。本文综述了乳酸菌口服疫苗的作用机理、特点及其在猪病防治中的应用研究,并对其存在的问题及应用前景进行分析和展望,以期为更好地防治猪病提供参考。     

转基因植物口服疫苗

将病原微生物的抗原编码基因进行克隆重组,导入植物细胞生成转基因植物,其表达产物作为口服疫苗可激发粘膜免疫,以此制备的口服疫苗具有价廉、质优、安全等特点,具有较好的应用前景。本文就转基因口服疫苗植物的建立、口服疫苗介导的免疫反应及其发展现状和展望进行了综述。     

杨倩:益生菌诱导抗原“抓”力牵系黏膜免疫的启动

正益生菌具备多种免疫学活性,作为口服疫苗载体具有很好的安全性。但是不同益生菌诱导启动黏膜免疫的能力不同,这是选择口服疫苗载体时必须考虑的因素。在本刊记者的调查过程中,发现一些疫苗研发者看好口服疫苗领域但并不十分了解。以华威特(北京)生物科技有限公司总经理赵建增博士为代表的传统疫苗企业,向乳酸菌载体口服疫苗提出了一些求证问题,在记者看来,这些问题涉及免疫学和微生物工程学多个领     

犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测

本研究旨在克隆犬细小病毒VP2(CPV-VP2)基因,构建乳酸菌重组表达载体,以乳酸菌表达CPV-VP2目的蛋白,通过重组目的蛋白检测及分析,为CPV乳酸菌口服疫苗研究提供支撑。以PCR方法扩增CPV-VP2编码目的基因,纯化后连接表达载体pMG36e,构建重组乳酸菌表达载体p MG36e-VP2,电转至乳酸球菌MG1363感受态,经PCR鉴定、双酶切鉴定及测序分析,挑选阳性重组菌株,命名为:pMG36e-VP2-MG1363。使用诱导剂Nisin诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定重组蛋白。结果显示,成功构建重组表达载体pMG36e-VP2,SDS-PAGE,结果表明,重组目的蛋白分子大小约65 kD,与理论值相符; Western Blotting结果表明,重组目的蛋白可被犬源CPV阳性血清所识别,具有良好免疫反应性。本研究用乳酸菌成功表达犬细小病毒蛋白,为该病新型疫苗的研究提供基础。     

重组乳酸菌口服疫苗在预防仔猪腹泻疾病中的应用

正在通过革兰氏染色呈阳性的厌氧菌中,存在一种能够产生乳酸的常见细菌-乳酸菌。最佳生存pH值为5.5～6.0,但在pH值较低时也可生存,是无芽抱杆菌中耐酸能力最强的细菌。乳酸菌广泛的分布于动物口腔、胃、肠道及粪便等部位,可调节宿主肠道内正常菌群的平衡,抑制肠道内有害菌的定植和有毒物质的产生,使得近几年来,以乳酸菌为表达载体,通过肠道黏膜免疫递呈抗原而构建的重组乳酸菌口服疫苗成为研究热门。1 重组乳酸菌口服疫苗的特点在对于载体的研究     

减毒沙门氏菌在疫苗和疫苗载体方面的研究进展

沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小;此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。文章对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。     

蜂胶对鸡新支二联活疫苗免疫后靶器官形态结构的影响

蜂胶作为一种具有广泛应用前景的天然保健物质,其生物活性正越来越被人们所重视,为探究蜂胶对新城疫-传染性支气管炎二联疫苗免疫反应的影响,本研究将1日龄试验用鸡分为4组,每组80只,分别设蜂胶喷雾+疫苗组、蜂胶口服+疫苗组、疫苗组和空白对照组,以进行蜂胶对鸡新城疫-传染性支气管炎疫苗免疫反应的试验。结果发现:蜂胶产品可有效控制新城疫-传染性支气管炎二联疫苗引起的以呼吸道症状为主的疫苗反应,并对呼吸道黏膜具有保护作用,其中以喷雾效果最佳。     

基因工程重组乳酸菌防控动物疫病的研究进展

大多数传染性病原体通过黏膜表面进入宿主,因此除了传统诱导系统免疫的注射疫苗外,还应该开发能诱导黏膜免疫的疫苗,从而在黏膜侵入点建立第一道防线,阻止病原体侵入机体。乳酸菌是人和大多数动物肠道内常见的益生菌,具有营养、免疫、抗感染等作用。自20世纪90年代以来,乳酸菌便作为食品级载体用作外源基因的表达,其可刺激机体产生针对其表达的外源蛋白的免疫反应,因而基因工程重组乳酸菌可作为潜在的黏膜免疫候选疫苗。乳酸菌作为疫苗载体具有许多有吸引力的优势：使用方式简单、非侵入性（通过口腔或鼻内）、能接受基因修饰且遗传稳定、表达蛋白不需纯化、成本相对较低、安全性能最高、在体内长期存活并不断表达外源蛋白、单次接种即可产生持久的免疫应答等。目前,选择正常菌群的乳酸菌为载体,构建重组乳酸菌已在预防细菌、病毒、寄生虫等病原感染宿主方面迅速开展起来,将它们用于预防相应疫病模型中均已取得了较好的防治效果。作者就近5年来基因工程重组乳酸菌的制备及其在防控动物疫病方面的研究进展作一综述。     

基因工程重组乳酸菌防控动物疫病的研究进展

大多数传染性病原体通过黏膜表面进入宿主,因此除了传统诱导系统免疫的注射疫苗外,还应该开发能诱导黏膜免疫的疫苗,从而在黏膜侵入点建立第一道防线,阻止病原体侵入机体。乳酸菌是人和大多数动物肠道内常见的益生菌,具有营养、免疫、抗感染等作用。自20世纪90年代以来,乳酸菌便作为食品级载体用作外源基因的表达,其可刺激机体产生针对其表达的外源蛋白的免疫反应,因而基因工程重组乳酸菌可作为潜在的黏膜免疫候选疫苗。乳酸菌作为疫苗载体具有许多有吸引力的优势:使用方式简单、非侵入性(通过口腔或鼻内)、能接受基因修饰且遗传稳定、表达蛋白不需纯化、成本相对较低、安全性能最高、在体内长期存活并不断表达外源蛋白、单次接种即可产生持久的免疫应答等。目前,选择正常菌群的乳酸菌为载体,构建重组乳酸菌已在预防细菌、病毒、寄生虫等病原感染宿主方面迅速开展起来,将它们用于预防相应疫病模型中均已取得了较好的防治效果。作者就近5年来基因工程重组乳酸菌的制备及其在防控动物疫病方面的研究进展作一综述。     

沙门氏菌载体在疫苗应用中的研究进展

沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。其主要优点包括:沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小。此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。作者对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。     

乳酸菌对鸡新城疫HI效价及粪便菌群数量的影响

乳酸菌是鸡肠道内一类重要的菌群,具有提高机体免疫力等多种益生功能,为检测乳酸菌制剂对鸡新城疫疫苗协同免疫效果及其对肠道菌群的影响,本实验给7日龄雏鸡饲喂植物乳杆菌,并接种新城疫疫苗(IV系),通过监测抗体水平,比较乳酸菌制剂对新城疫疫苗免疫效果的影响;并通过检测粪便大肠杆菌及乳酸菌的数量,初步研究乳酸菌对肠道菌群的影响。结果表明,乳酸菌制剂能够协同增强新城疫疫苗的抗体水平,显著降低粪便中大肠杆菌的数量、增加乳酸菌的数量,初步表明植物乳杆菌能够增加肠道益生菌的数量,揭示了乳酸菌对鸡新城疫疫苗的免疫效果具有良好的促进作用。     

GM-CSF与生长抑素融合表达质粒对小鼠生长抑素抗体及IgG亚型的影响

将70只小鼠,随机分为7组,每组10只,雌雄各半。第1组为对照组,第2～4组分别肌肉注射pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF加pcS/2SSDNA疫苗;第5～7组分别口服以减毒沙门氏菌为载体的pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF加pcS/2SSDNA疫苗。结果表明：肌肉注射和口服pGM-CSF/SS和pGM-CSF加pcS/2SSDNA免疫小鼠均能有效激发免疫系统产生较强的免疫应答,与对照组相比,生长抑素抗体P/N值都有提高,且随着免疫时间的延长,呈现不断增高的趋势;同种疫苗以肌肉注射或口服途径免疫小鼠,血浆生长抑素抗体P/N值变化不显著;阳性鼠的比例以肌注pGM-CSF/SS为最高,达60%,pcS/2SS肌注组仅30%,其他各组分别为40%～60%,对照组没有出现阳性鼠;试验各组IgG1抗体的免疫反应高于IgG2a抗体,且IgG1的免疫反应,pcS/2SS和pGM-CSF/SS组高于pGM-CSF加pcS/2SS组;IgG2a的免疫反应,pGM-CSF/SS组高于pcS/2SS和pGM-CSF加pcS/2SS组。口服免疫组的IgG1和IgG2a免疫反应强于肌肉注射免疫组。说明基因佐剂GM-CSF可增强生长抑素基因疫苗的免疫反应,口服免疫pGM-CSF/SS、pGM-CSF加pcS/2SS可同时激发Th1型和Th2型免疫应答,GM-CSF和SS的融合表达质粒的免疫反应优于pGM-CSF和pcS/2SS的共免疫。     

口服疫苗背后的真相

正最近有公司推出"含疫苗的教槽料"新产品,实现"不打针也可免疫"的功能,使得教槽料具有营养、免疫、保健功能,我们追踪该公司,被告知是使用乳酸菌作为抗原递送载体,在三种乳酸菌质粒中分别插入传染性胃肠炎、流行性腹泻和圆环病毒的抗原,并在体外表达产物后,与一些酶和肽制剂添加入教槽料中,原理就是口服了含乳酸菌、肽制剂和乳酸     

乳酸菌抗幽门螺旋杆菌感染的研究进展

综述了近年来对乳酸菌抗幽门螺旋杆菌感染的研究进展,内容包括乳酸菌抗幽门螺旋杆菌感染的机制及应用、乳酸菌抗原递送载体、乳酸菌疫苗等。     

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

PEDV COE基因重组乳酸菌在小鼠体内定植规律研究

选用pNZ8149-COE NZ3900重组乳酸菌作为绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的表达载体,制成活菌制剂,口服免疫小鼠,以GFP基因作为标记跟踪重组菌在小鼠体内的定位,并利用荧光定量PCR技术对各部位菌定量分析。结果表明,研究构建的重组乳酸乳球菌PEDV-COE-GFP NZ3900可较长时间定植于胃肠黏膜表面,为基因工程重组乳酸菌口服疫苗的研究奠定了基础。     

表达猪传染性胃肠炎S-AD片段的重组乳酸菌对小鼠的免疫原性影响

将已证实能稳定复制猪传染性胃肠炎S基因AD片段的重组乳酸菌口服免疫BALB/c小鼠,每组于免疫前和免疫后的第7天、第14天、第21天分别取3只小鼠眼球采血、取肠道内容物、分离脾细胞,于免疫的第28天将剩下的小鼠全部取眼球采血、取肠道内容物、分离脾细胞,用于ELISA抗体、肠黏膜SIgA水平及淋巴细胞增殖的检测。经细胞免疫和体液免疫检测,该乳酸菌口服疫苗具有良好的免疫效果。     

鸭淀粉样变的病理学研究——Ⅲ、体液免疫研究淀粉样变对鸭的疫苗免疫反应功能的影响

通过淀粉样变人工诱发试验鸭的疫苗免疫保护试验及检测其免疫前、后的血清γ球蛋白水平,了解淀粉样变对鸭的疫苗免疫反应功能的影响,结果是试验鸭和对照鸭的免疫保护率无明显差异,试验鸭免疫后血清γ球蛋白群体水平的升高不会比对照鸭的低,表明淀粉样变对鸭的疫苗免疫反应功能的影响看来不大。     

CpG序列对猪伪狂犬疫苗免疫效果的影响

将CpG DNA同猪伪狂犬疫苗联合免疫接种初生仔猪,检测仔猪的体液及细胞免疫反应,试验结果表明,CpG DNA与猪伪狂犬疫苗共同免疫的仔猪,其特异性抗体滴度、淋巴细胞白介素-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反应均显著高于伪狂犬疫苗免疫组和对照组,证明CpG DNA能显著增强仔猪对常规疫苗的细胞和体液免疫反应.