鸡转移因子(TFu)的特性及其临床应用的研究(第一报)

本文详细地介绍了以鸡血为原料用超滤器制备鸡转移因子(TFu)的方法,并对转移因子的生物学特性、理 化性质,以及应用酸性α-醋酸萘脂酶(Acid a-naphthyl ecetate estenase,简称ANAE>标记T淋巴细胞测 定细胞免疫功能。此外,还使用TFu来预防人工复制的禽巴氏杆菌病及治疗鸡白痢病试验。结果表明,TFu蛋白 定性为阴性,本品中含有多肽、RNA、DNA以及赖氨酸、丙氨酸、脯氨酸等十七种氨基酸.每毫升注射液含多 肽786±0.75μg,RNA201.22±19.7μg,DNA340±12.2μg,动物试验安全,无抗原性及过敏性.临床应用后, 明显地提高了外周血中T淋巴细胞的百分率,增强和调整了机体免疫功能,对预防禽出败人工复制病例和治疗鸡 白痢病,有明显的效果.     

雏鸡感染法氏囊病病毒后免疫器官中T细胞的变化

本项研究对人工感染法氏囊病病毒(IBDV)的1日龄雏鸡和未感染 IBDV 对照雏鸡的免疫器官组织——胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺和法氏囊中 ANAE~+淋巴细胞总数、颗粒型 ANAE~+淋巴细胞、弥漫型 ANAE~+淋巴细胞和淋巴细胞总数及其分布的动态变化进行了检测。结果表明,1日龄雏鸡感染 IBDV 后,免疫器官组织中 ANAE~+淋巴细胞总数、颗粒型 ANAE~+淋巴细胞数明显低于对照雏鸡,淋巴细胞总数也呈现不同程度的减少。ANAE~+淋巴细胞的上述变化在胸腺髓质、脾脏动脉周围鞘和红髓,盲肠扁桃体弥散区、哈德尔腺集合小管和排泄管周围及法氏囊淋巴小结皮质等区域较明显。表明1日龄雏鸡感染 IBDV 后,机体的细胞免疫机能明显降低。     

鸡屎藤蒸馏物的免疫增强效果评价

在对鸡进行新城疫免疫的同时,利用鸡屎藤蒸馏物滴鼻,研究了鸡屎藤蒸馏物对雏鸡脾脏、法氏囊等免疫器官和机体抗体水平的影响。研究结果表明,鸡屎藤蒸馏物可显著促进雏鸡脾脏(P0.05)、法氏囊(P0.01)等免疫器官的发育和增长,显著提升雏鸡抗体水平(P0.01)。因此,鸡屎藤蒸馏物可显著增强鸡新城疫疫苗的免疫效果,可开发为鸡新城疫疫苗的免疫佐剂。     

艾维茵肉鸡锌中毒的动态病理学研究

将1日龄艾维茵肉鸡健雏100羽随机分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组,含Zn 100 mg/kg)和基础日粮+Zn 2400 mg/kg(试验组),试验期7周,进行雏鸡锌中毒的动态病理学研究。结果:锌中毒雏鸡的生长发育受阻,双腿无力,跛行或呈犬坐姿势。尸体剖检见胸腺充血和水肿,腔上囊体积变小,脾脏、心脏和肝脏见坏死灶,肌胃角质层溃疡。病理组织学观察可见免疫器官的淋巴细胞减少,淋巴滤泡形成较少。外周血T淋巴细胞ANAE+显著降低,血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量和CD4+/CD8+降低,雏鸡红细胞C3b受体花环率下降和免疫复合物花环率升高。结果表明:日粮高锌可对雏鸡免疫器官等产生毒害作用,导致机体细胞免疫、体液免疫和红细胞免疫功能降低。     

苦马豆素对小鼠细胞免疫功能的影响

【目的】探索苦马豆素(SW)对小鼠免疫器官发育、外周血液中细胞数及淋巴细胞增殖功能的影响,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将80只昆白系小鼠随机分为8组,其中5个试验组按0.05,0.2,0.8,3.2和6.4 mg/kg剂量每天灌服不同质量浓度的SW生理盐水溶液,连续21 d;其他3组均为对照组(分别为生理盐水组、环磷酰胺组和空白对照组)。检测小鼠胸腺和脾脏指数,用细胞分析仪检测外周血液中白细胞、红细胞及淋巴细胞数;用MTT法检测脾脏淋巴细胞的增殖活化。【结果】在SW剂量为0.2~0.8 mg/kg,小鼠脏器(胸腺和脾脏)指数及外周血液中的细胞数均增加;SW单独作用或其协同刀豆蛋白A(ConA)和植物血凝素P(PHA-P)刺激时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性增强,SW协同脂多糖(LPS)刺激时,小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性降低。SW剂量为6.4mg/kg时,小鼠的脏器指数和外周血液中的细胞数均减少;无论小鼠脾脏淋巴细胞受丝裂原刺激与否,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性均降低。【结论】SW可以通过提高小鼠脏器指数及外周血液中细胞数提高淋巴细胞的增殖活性,增强小鼠的细胞免疫功能;SW剂量为6.4 mg/kg对小鼠细胞免疫功能有抑制作用,提示SW对小鼠细胞免疫功能的影响具有选择性和双向调节作用。     

黑果枸杞色素对三黄鸡体液免疫、细胞免疫的影响

为测定黑果枸杞色素对鸡体液免疫、细胞免疫的影响。选用黑果枸杞色素饲喂雏鸡。用ND微量HI血凝抑制试验、EY玫瑰花环试验、红细胞C3b受体花环试验分别测定雏鸡血清HI效价,T、B淋巴细胞数目及雏鸡红细胞免疫黏附功能。结果表明:黑果枸杞色素能明显的增强雏鸡的免疫功能。     

黄芪多糖和香菇多糖对雏鸡IL-2活性和淋巴细胞增殖反应的影响

以ＡＡ肉用雏鸡为试验动物,对雏鸡注射黄芪多糖和香菇多糖,检测脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２诱生活性和淋巴细胞增殖反应。结果表明,黄芪多糖和香菇多糖注射组雏鸡,ＩＬ－２诱生活性和淋巴细胞增殖反应均高于或显著高于对照组雏鸡。     

猪胸腺素的制备及其生物活性测定

<正> 胸腺是人和动物最重要的中枢免疫器官,可分泌一系列具有免疫活性的多肽类物质(胸腺素),直接调节和控制T淋巴细胞的分化、成熟及其功能的表达,对机体免疫系统起着重要的作用。所以,近年来不少人试用胸腺素预防和治疗因免疫缺陷招致的各种感染,但材料来源多为犊牛胸腺组织。为了广开来源,本试验以屠宰猪胸腺组织为原料,制备胸腺素,并对其免疫学功能进行了测定。     

中药“增免散”对免疫抑制鸡免疫功能的影响

将300只1日龄雏鸡随机分成正常对照组、中药“增免散”组、环磷酰胺组、环磷酰胺组 左旋咪唑组、环磷酰胺 “增免散”组,6日龄用鸡新城疫LaSota疫苗免疫点眼滴鼻,14、21、28、35日龄测定鸡血液ND抗体效价、免疫器官指数、细胞免疫功能、红细胞免疫粘附功能等,探索中药“增免散”的免疫增强机理。结果表明:中药“增免散”不但能显著提高Lasota活苗接种雏鸡的特异性HI抗体水平,延长其持续时间,能促进雏鸡免疫器官的生长发育,能显著增高雏鸡外周血T淋巴细胞ANAE阳性率,并对雏鸡红细胞免疫粘附功能具有显著促进作用,而且对环磷酰胺的免疫抑制有部分拮抗作用。     

布氏菌活疫苗皮内与皮下接种的免疫效果评价

将布氏减毒活疫苗通过皮内注射和皮下注射方式免疫小鼠,比较2种方式的免疫效果。用布氏菌活疫苗,通过皮内和皮下注射免疫小鼠,免疫4周后分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中总IgG抗体;ELISPOT法检测分泌IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目,同时用ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFN-γ、IL-4的水平;用流式细胞仪对T淋巴细胞亚群进行分类;用羊布鲁氏菌弱毒株M5攻击免疫动物,通过脾脏细菌计数评价布氏活疫苗的免疫保护作用。ELISA、ELISPOT和T淋巴细胞亚群分类结果显示,2种免疫途径均能诱导较强的体液免疫和细胞免疫应答,但两者间无显著差异;BALB/c小鼠攻毒试验显示皮内注射组脾脏中布氏菌数量的对数值为0,皮下注射组为2.27±0.21,阴性对照组为5.13±0.16。由此可知,2种免疫方法均能诱导较强的体液免疫和细胞免疫应答,但皮内注射组的免疫保护作用显著优于皮下注射组,提示通过皮内注射布氏疫苗可能是安全、高效的免疫途径。     

沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响

【目的】探索沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响.【方法】将50只试验小鼠随机分为空白组、免疫抑制组、黄酮Ⅰ组、黄酮Ⅱ组及黄酮Ⅲ组,每组10只,灌胃给药.试验28 d后,分别测定脏器指数(胸腺、脾脏)并采集样品进一步采用石蜡包埋切片和染色技术、免疫组织化学分析技术等,探讨胸腺、脾脏中淋巴细胞活性的变化.【结果】小鼠免疫抑制模型复制成功,CTX显著诱导小鼠免疫器官淋巴细胞凋亡.同时,不同剂量沙冬青种子总黄酮灌胃试验组,能不同程度促使免疫抑制小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞增殖,进而促使胸腺皮质和脾脏白髓面积增大,尤其总黄酮灌胃剂量150 mg/(kg·d)组小鼠表现最明显,胸腺皮质和脾脏白髓面积分别达到(83.11±1.25)μm~2、(47.00±1.55)μm~2,显著高于免疫抑制组(P0.01).免疫组化分析显示,不同剂量沙冬青种子总黄酮灌胃试验组,能不同程度促使免疫抑制小鼠脾脏和胸腺CD3阳性T淋巴细胞及CD20阳性B细胞增殖,尤其在总黄酮灌胃剂量150 mg/(kg·d)组增殖效果最突出,均显著高于免疫抑制组(P0.01).【结论】沙冬青种子总黄酮可显著促进免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞增殖,修复受损免疫器官,从而改善和增强机体免疫功能.     

蒲公英多糖对雏鸡外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的影响

为研究蒲公英多糖对雏鸡免疫功能的调节作用机制,采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺处理雏鸡在服用蒲公英多糖[剂量80 mg/(kg·d)]和不服用蒲公英多糖情况下,外周血CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴细胞数量的动态变化.结果发现蒲公英多糖能显著提高健康雏鸡外周血CD4<'+>T淋巴细胞数量(P<0.05),但对CD8<'+>T淋巴细胞数量及CD4<'+>/CD8<'+>T淋巴细胞比值作用不显著(P>0.05);能够提高环磷酰胺诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴细胞数量(P<0.05),且对环磷酰胺诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4<'+>/CD8<'+>T淋巴细胞比值降低效果显著(P<0.05).本研究表明蒲公英多糖通过上调雏鸡血液中CD4<'+>T淋巴细胞水平,增强机体对抗原的免疫应答反应,从而增加机体免疫抵抗力,促进动物的生长和发育.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因对猪的DNA免疫

【目的】检测PRRSV GP5 DNA重组质粒在猪体诱导的免疫反应以及细胞因子的佐剂效应。【方法】将表达PRRSV GP5的DNA重组质粒与表达3种细胞因子的重组质粒联合免疫SPF猪，经3次免疫后人工感染PRRSV，检测体液免疫、细胞免疫以及攻毒保护性反应。【结果】重组质粒pCI-GP5可诱导免疫猪产生中和抗体，效价达1:19.2，并可诱导机体产生较强的细胞免疫，攻毒后组织中PRRSV核酸的检出率下降39%，表明表达PRRSV GP5的DNA重组质粒pCI-GP5可诱导一定的免疫效力。pcDNA-IL-4与pCI-GP5共免可将中和抗体效价提高到1:35.5，且可增强细胞免疫反应，与对照组相比，病毒血症的出现频率减少17%，PRRSV阳性组织检出率下降64%；pcDNA-IL-2与pCI-GP5共免也可增强猪的细胞免疫，与对照组相比，病毒血症的出现频率下降50%，PRRSV阳性组织检出率减少59%； pcDNA-IFN- 与pCI-GP5共免对病毒血症的出现及病毒在组织中的分布均没有抑制作用。【结论】动物试验结果表明IL-4及IL-2可作为PRRSV GP5 DNA重组质粒的免疫佐剂。     

家蝇幼虫血淋巴对鸡免疫功能的影响

将100只1日龄雏鸡随机分为4组,用家蝇幼虫血淋巴按不同剂量给鸡灌服,用药一定时间后,对21,35,50日龄鸡分别随机抽取8只进行称重、颈静脉采血和剖杀,取脾脏、法氏囊进行称量,测定血淋巴对鸡体重及免疫器官的影响,并利用E一花环形成试验、鸡新城疫血凝抑制(ND-HI)试验检测血淋巴对鸡的细胞免疫、体液免疫功能的影响．结果表明：血淋巴对鸡体重、脾脏、法氏囊重各组间差异均不显著．E-花环试验中21,35日龄各组间差异显著,50日龄各组间差异极显著;ND-HI试验中21,35日龄各组间差异不显著,50日龄各组间差异极显著．说明家蝇幼虫血淋巴在增强鸡的细胞免疫与体液免疫功能方面具有明显的促进作用．     

猪囊虫病免疫刺激复合物疫苗免疫机理研究

猪带绦虫六钩蚴重组抗原与皂素、胆固醇、胆碱按一定比例制成猪囊虫病免疫刺激复合物疫苗.用该疫苗分别免疫昆明鼠和夏约克猪,在免疫后不同时期分别测定各动物的细胞免疫和体液免疫反应。免疫3d 后昆明鼠脾脏重量开始增大,CD8~+T 淋巴细胞阳性率为31%～66.3%,而铝胶苗和正常对照的阳性率仅为1.1%～6.6%,第21d 检测到抗体.免疫猪7d 后外周血 ANAE~+淋巴细胞增高,淋转试验显示淋巴     

雏鸡对新城疫疫苗的免疫应答及其免疫保护机理

本实验共用240只1日龄健康雏鸡,分别于14,14和28日龄点眼滴鼻接种 Lasota 疫苗,在免疫后不同时期,采取实验鸡血液、泪液、肠液、气管液和胆汁、脾脏、法氏囊、胸腺、盲肠扁桃体、丕氏斑、十二指肠及哈德尔腺、支气管,检测了相应的 IgG,IgA,IgM 和 HI 滴度。T,B 细胞数量和功能,淋巴细胞数量以及浆细胞和酸性α-萘酚酯酶阳性 T 细胞(ANAE~+T)数量的动态变化。实验结果,雏鸡免疫后,脾脏、法氏囊和胸腺中 ANAR~+T 细胞与浆细胞显著增加,消化道和呼吸道相关局部免疫组织中的浆细胞、ANAE~+T 细胞数量也明显上升;与此相应,血液 T 细胞和脾脏 B 细胞免疫功能显著增强;血液 T,B 细胞、淋巴细胞数量显著升高;血清、泪液、气管液、胆汁和肠液中的 IgG,IgA,IgM 含量和 HI 滴度均程度不同地增加。免疫鸡脾脏、盲肠扁桃体和丕氏斑的淋巴小结数量增多,直径增大。这些表明免疫鸡不仅全身和局部的体液免疫反应,而且其细胞免疫应答也显著增强。雏鸡新城疫二免后,其免疫器官和局部免疫组织的浆细胞和 ANAE~+T 细胞进一步增多,血液 T 细胞和脾脏 B 细胞免疫功能也增强;血液 T 细胞。B 细胞与淋巴细胞数及 IgG,IgA,IgM含量和 HI 滴度程度不等地增加;泪液、气管液、肠液和胆汁的前述指标均升高,说明雏鸡 ND二免产生了显著的体液免疫和细胞免疫增强作用。新城疫强毒攻击后,对照鸡免疫器官组织和相应体液中的免疫指标均明显降低。呈现全身和局部免疫机能衰竭,全部死亡。与此相反,二免鸡免疫应答水平进一步提高,明显优于一免鸡,获得可靠的免疫保护,这与其显著增强的全身和局部细胞免疫和体液免疫反应密切相关。     

用ANAE染色法测定鹅鸡兔外周血液中T-淋巴细胞值及其影响因素的探讨

T 淋巴细胞是参与细胞免疫的免疫活性细胞,机体内T细胞值的高低直接决定着机体的细胞免疫功能状态。实验室测定T细胞的方法多用E玫瑰花结试验、淋巴细胞转化试验、免     

法氏囊提取物对小鼠免疫功能的影响

ICR小鼠用伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）灭活苗免疫，同时每只分别注射0.1,0.25和1mg或口服0.25mg法氏囊（bursa of fabricius,BF）提取物（相对分子质量小于1000）。对各试验组小鼠器官指数、白细胞数、淋巴细胞非特异酯酶染色阳性数（acid α-naphthyl acetatc esterase,ANAE^ ）、PRV抗体水平、脾脏组织学变化和攻毒试验结果等各种免疫学指标进行检测和比较，探讨法氏囊提取物对试验个体的免疫力影响，结果表明：中等剂量（每只0.25mg）的法氏囊提取物能够不同程度地提高小鼠的体液免疫力和细胞免疫力，注射途径较口服的好；而高剂量（每只1mg）的法氏囊提取物可提高小鼠的体液免疫，但对机体的细胞免疫却有抑制作用。法氏囊提取物对小鼠免疫功能的影响与接种的剂量、途径及时间有关。     

雏鸡感染法氏囊病毒后免疫器官对新城疫免疫的应答

本项研究对1日龄感染和未感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)雏鸡接种ND疫苗后,其法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺等免疫器官组织中的各型浆细胞、ANAE~+淋巴细胞和淋巴细胞数量及其分布进行了检测。结果表明,1日龄感染IBDV雏鸡接种ND疫苗后,无论中枢免疫器官(法氏囊和胸腺),还是外周免疫器官组织(脾、盲肠扁桃体和哈德尔腺)中浆细胞总数和成熟浆细胞数、ANAE~+淋巴细胞总数和颗粒型ANAE~+淋巴细胞数以及淋巴细胞数量,与未感染IBDV对照组雏鸡比较,均呈现程度不同的减少。所得结果揭示,1日龄雏鸡感染IBDV后,其免疫器官组织对ND疫苗的体液免疫和细胞免疫应答功能明显降低。     

马齿苋多糖对雏鸡胸腺免疫功能的影响及其机制

为了观察马齿苋多糖(Portulace oleracea polysaccharide,POP)对雏鸡胸腺免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制,试验通过对雏鸡灌注不同剂量的POP,测定雏鸡胸腺指数,应用MMT(四甲基偶氮唑盐比色法)方法测定雏鸡胸腺淋巴细胞转化率,利用流式细胞器测定雏鸡胸腺淋巴细胞周期与胸腺T淋巴细胞亚群的变化.结果表明,POP能显著增加雏鸡胸腺淋巴细胞转化率和胸腺指数(P＜0.05),淋巴细胞增殖指数显著提高(P＜0.05),CD4+T淋巴细胞含量显著增加(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞数量变化不明显,CD4+/CD8+T淋巴细胞比值显著升高(P＜0.05).POP可通过调节雏鸡胸腺内细胞水平的变化,增强雏鸡细胞免疫功能,促进免疫系统发育.