一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

通过正交优化试验对一株枯草芽孢杆菌的发酵培养基进行优化,结果发现,当培养基中豆粕液为20 g/L,葡萄糖浓度为5 g/L,玉米粉浓度为2 g/L时,在接种量为5 %的情况下,采用此种配比的发酵培养基37 ℃培养24 h,活菌数最高,可达4.0×109 CFU/mL.     

一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

采用正交试验对1株枯草芽孢杆菌的发酵培养基进行优化。确定了最佳的培养基配方为:葡萄糖25g/L,豆粕粉60g/L,玉米浆8g/L,在接种量为2%的情况下,发酵温度37℃,发酵时间24h,所获得活菌数约为5.3×109CFU/mL。     

地衣芽孢杆菌M109高密度发酵条件的优化

试验旨在筛选一株地衣芽孢杆菌M109(Bacillus licheniformis M109)进行培养基和发酵条件的优化。采用单因素试验方法筛选出最佳碳源和氮源的培养基,并利用正交试验方法确定其最佳的碳氮比。为了继续提高地衣芽孢杆菌M109的发酵水平,研究其在发酵过程中的生长曲线、pH和溶氧(DO)水平的变化曲线,通过对发酵过程中生长参数的测定,优化了地衣芽孢杆菌M109最佳的接种量和最适pH。结果发现,溶氧限制是地衣芽孢杆菌M109生长的关键因素;在限定通风量的条件下,通过调节搅拌转速的方法来提高培养基中的溶氧水平,提高发酵密度;通过流加培养基的方法也能提高地衣芽孢杆菌M109的发酵水平。因此,通过对培养基和发酵条件的优化,使地衣芽孢杆菌M109的发酵水平由最初的1.0×10⁹ CFU/mL提高到1.2×10¹⁰ CFU/mL,芽孢形成率为88%。     

以柿子为基料生产枯草芽胞杆菌的技术研究

试验以柿子为基料,对l株枯草芽胞杆菌的发酵培养基进行了优化。结果表明,成熟柿子匀浆100g/L、大豆粉20g/L,接种量5％,37℃培养24h,活茵数可达4．7×1010cfu／mL。     

猪A型多杀性巴氏杆菌培养基改良的初步探讨

采用改良猪肺疫和常规猪肺疫疫苗用两种培养基培养猪A型多杀性巴氏杆菌,对其培养液进行活菌数测定。实验结果表明,运用改良猪肺疫培养基培养,小批量与反应罐试验测得活菌数分别可达1.3×109～1.7×109CFU/mL、6.8×108～7.5×109CFU/mL;运用常规猪肺疫培养基培养,小批量与反应罐试验测得活菌数分别可达8.0×108～1.0×109CFU/mL、3.5×109～3.7×109CFU/mL,可选择改良猪肺疫培养基替代常规猪肺疫培养基培养,用于制备A型猪多杀性巴氏杆菌病疫苗。     

饲用枯草芽孢杆菌SR096产孢培养基及培养条件的优化

试验旨在为了降低枯草芽孢杆菌SR096的工业生产成本和提高发酵液的芽孢含量,采用单因素试验和响应面法试验设计对菌株SR096的培养条件和发酵培养基组分优化,优化后的培养基组分为:葡萄糖7.5 g/L、玉米粉15.7 g/L、黄豆粉45.0 g/L、柠檬酸钠4.5 g/L、碳酸钙2.0 g/L、硫酸镁1.0 g/L,经验证在5 L发酵罐中以接种量3%、37℃、250 r/min条件下培养30 h,枯草芽孢杆菌SR096发酵液的活菌含量为1.67×10^10 CFU/mL,芽孢含量为1.56×10^10 CFU/mL,芽孢率为93.3%,为枯草芽孢杆菌SR096后期的产业化放大和推广应用奠定基础。     

青贮用黄曲霉毒素降解菌株的产芽胞条件优化

[目的]利用正交试验设计对青贮用黄曲霉毒素降解菌株N-1a产芽胞条件进行优化。[方法]以菌株的菌体生物量和芽胞形成率作为考察指标,利用单因素试验和正交试验设计优化菌株N-1a的发酵用培养基组成和培养条件。[结果]优化后的N-1a最佳产芽胞培养基组成配比为：玉米粉2.0%,黄豆饼粉1.0%,MnSO4·H2O 0.10%,MgSO4·5H2O 0.01%;最佳产芽胞条件为：p H值为7.0,发酵时间48 h,接种量4%,装液量75 m L/250 m L培养基;在该条件下,N-1a的菌体生物量为6.08×10^8cfu/m L,芽胞形成率为81.25%。[结论]菌株N-1a的摇瓶产芽胞条件为其中试生产提供了实验依据。     

凝结芽孢杆菌工业培养基的优化

采用单因素试验和正交试验设计的方法 ,优化凝结芽孢杆菌发酵培养基。结果表明,最佳培养基组成为玉米粉5 g/L、小麦麸皮10 g/L、氯化铵7.5 g/L、豆粕粉7.5 g/L、Na Cl 5 g/L、Mn SO4·H2O 0.3 g/L、K2HPO4·3H2O 1 g/L,最适装液量为35 m L。此条件下经摇瓶培养,菌种数可以达到2.20×109cfu/m L,芽孢数为2.02×109 cfu/m L。     

唾液乳杆菌FDB86小试高密度发酵培养基的优化研究

唾液乳杆菌FDB86是一株具有优良功能的益生菌。为了实现菌株的产业化应用,本研究对该菌株小试高密度发酵培养基进行了优化。以唾液乳杆菌FDB86的活菌浓度为评价指标,以MRS培养基为基础培养基,利用正交试验的方法,对培养基中碳源、氮源以及无机盐添加量进行了优化,确定活菌浓度最佳的培养基配方为:蛋白胨5.0g/L,酵母粉7.5g/L,牛肉膏10.0g/L,葡萄糖15.0g/L,无水乙酸钠8.0g/L,七水合硫酸镁1.0g/L,四水合硫酸锰0.1g/L,柠檬酸氢二铵2.0g/L,磷酸二氢钾2.0g/L,吐温-80 1.0g/L。对优化完成的培养基进行50L发酵罐小试试验,结果表明唾液乳杆菌FDB86约在6h达到稳定期,菌体浓度可以达到7.5×109CFU/m L,与基础培养基培养结果(2.4×109CFU/m L)相比有显著的提高,具有实际应用价值。     

乳双歧杆菌U9高密度发酵培养基的优化研究

乳双歧杆菌U9是一株具有优良功能和产业化应用前景的益生菌。为了更好地实现该菌株产业化应用,对该菌株高密度发酵培养基进行了优化。以乳双歧杆菌U9的活菌浓度为评价指标,以改良MRS培养基(添加L-半胱氨酸)为基础培养基,利用正交试验,对增殖培养基中氮源、促生长因子以及无机盐的添加量进行了优化,确定最佳活菌浓度时的培养基配方为:蛋白胨7.5 g/L,酵母粉10 0 g/L,牛肉膏7 5 g/L,西红柿汁30 g/L,葡萄糖20.0 g/L,无水乙酸钠5.0 g/L,七水合硫酸镁0.6 g/L,一水合硫酸锰0.1 g/L,柠檬酸氢二铵2.0 g/L,磷酸二氢钾2.0 g/L,吐温-80 1.0 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐0 5 g/L。对优化后的培养基进行50 L发酵罐小试试验。试验结果表明,乳双歧杆菌U9在10 h左右达到稳定期,菌体浓度可达4 2×10~9CFU/mL,与基础培养基培养结果(1.1×10~9CFU/mL)相比,菌体浓度显著提高,具有实际应用价值。     

禽呼肠孤病毒ZJS株种毒的纯净性鉴定

将禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(弱毒)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代,对其CI、C2、C3代种毒进行了无菌和支原体污染检验,对C5、C8和C10代种毒进行了外源病毒污染检验,对C3、C8和C10代种毒还进行了特异性鉴定,以确定禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(弱毒)作为种毒的可行性.结果显示,禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(...     

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联浓缩油乳剂灭活疫苗的研制

利用PALL滤器分别对鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感4种病毒进行10倍浓缩,然后按照一定比例将抗原浓缩液与油佐剂配比,制备了四联油乳剂灭活疫苗。通过了实验室检查,田间试验表明:开产前种鸡免疫后第4周,新城疫和禽流感的HI抗体滴度在10.2log2以上、传染性支气管炎和减蛋综合征均大于9.5log2,且抗体高峰维持时间长;SPF鸡免疫后4周进行攻毒保护试验,结果免疫攻毒组保护率100%,对照组攻毒发病率100%。试验结果表明:采用抗原浓缩技术制备的四联苗抗体水平高,维持时间长,能够有效地保护鸡群。     

Brucella melitensis infection in dog: a critical issue in the control of brucellosis in ruminant farms

Canine brucellosis is a contagious disease associated with health implications for humans as well as for a wide range of wild and domesticated animals. In this study, 173 dog blood specimens were sampled from herding dogs in three different provinces including Tehran (n = 127), Qom (n = 40) and Alborz (n = 6) provinces. The presence of Brucella antibodies was determined using Rose Bengal plate test (RBPT), slow agglutination test (SAT) and 2-mercaptoethanol (2-ME), respectively. The seropositive samples were further screened using blood culture and PCR tests to identify and differentiate the implicated Brucella species. According to our results, 24.3% (42/173), 13.8% (24/173) and 6.3% (11/173) of blood samples were tested positive using RBPT, SAT and 2-ME, respectively. However, among 42 seropositive samples, only 38.1% (16/42) and 14.2% (6/42) were positive by PCR and culture, respectively. Brucella melitensis biovar 1 and biovar 2 was isolated from the bacterial cultures of 6 blood samples and confirmed by biotyping, AMOS PCR and Bruce-ladder PCR assays. These findings highlight the potential risk of Brucella transmission from dog to humans along with other livestock and reflect the critical role of infected dogs in the persistence of Brucella infections among ruminant farms. This study stresses the need for further epidemiological investigations on canine brucellosis among herding dogs and suggests the systematic screening of the disease among companion animals such as dogs in order to improve brucellosis surveillance and control programs.     

紫花苜蓿种子活力测定方法的比较

采用标准发芽法、胚根突出法、低温发芽法、电导率法对紫花苜蓿(Medicago sativa)10个种子样品的种子活力进行了测定,结果表明,基于标准发芽法的发芽率和活力指数,可将10个种子样品的种子质量分为3级;基于胚根突出法中胚根突出数可将其分为6级,计数胚根突出数的最适时间为24和28h;基于低温发芽法的活力指数和发芽势可将其分为6级;而电导率法可将其分为7级。因而,电导率法作为紫花苜蓿种子活力评价指标最为敏感,其次为胚根突出法和低温发芽法,标准发芽法最不敏感。     

氟苯尼考悬乳剂的安全试验研究

通过试验研究对氟苯尼考悬乳剂的安全性进行评价。采用豚鼠和家兔分别进行本品的全身用药过敏性和肌肉局部刺激性、红细胞体外溶血性试验。结果显示本品临床给药剂量对豚鼠无全身过敏性、对家兔肌肉注射给药无明显局部刺激性、对家兔红细胞无体外溶血性。表明本品的安全性良好,为实际应用提供了依据。     

猪链球菌2型分离株的生物学特性试验

对从济南某猪场急性死亡的病例中分离得到的猪链球菌2型病原菌,进行生化试验、药敏试验及致病性试验研究。生化试验表明其各项指标均符合链球菌的标准,药敏试验结果表明该菌对多种抗菌素均有耐药性,对复方新诺明、氨苄西林、恩诺沙星等高度敏感,动物致病性试验表明能100%致死小白鼠。     

禽波氏杆菌病病原性的研究

从患眼炎、鼻窦炎的不同地点、不同时间、不同发病鸡群的病料共分离到１７株细菌，经形态学、培养特性、生化试验和动物回归试验等结果表明，该细菌能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌，即禽波氏杆菌。该菌在鲜血平板上产生β溶血，在麦康凯平板上生长良好，形成光滑中央突起的珍珠状菌落。不利用糖类，不能在６．５％ＮａＣｌ培养基中生长，尿素酶和硝酸盐还原试验均呈阳性，能凝集豚鼠和其他动物红血球。人工接种细菌均能使雏鸡发生相似于自然病例的临床症状和死亡，并且从病变部位回收到相应细菌。     

重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)对绵羊的安全和效力试验

为了验证表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)的安全性和免疫原性,将10只5～6月龄健康绵羊分成三组,安检组(3只)肌注108.0PFU/只、效检组(4只)肌注106.0 PFU/只,3只作为不接种对照组.接种后14 d,效检组与对照组每只臀部肌注伪狂犬病病毒"双城系"猪源强毒S株103 LD50,结果效检组全部保护,对照组全部死亡,安检组未见异常.结果表明,重组病毒完全符合伪狂大病活疫苗制造及检验规程中对疫苗的安全和效力检验标准.     

Comparison between IMMUNODOT tests and the intradermal skin test in atopic dogs

This study evaluated a new perspective in the diagnosis of dermatitis in dogs with signs suggestive of allergic skin disease. The results obtained with CMG IMMUNODOT tests using the technique of allergen-specific strip tests, as employed for human allergy diagnosis, were compared with those obtained by the intradermal skin test (IDST). Forty-eight cases completed the diagnostic evaluation, which included IDST, flea-control program, exclusion of sarcoptes and, for some cases, a 1- to 2-month stabilization period on a restricted protein source diet and testing the serum in the presence of allergen-specific IgE and total IgE. The most common disorders included house and storage dust mites, allergic dermatitis and flea-allergic dermatitis together with atopy. This was confirmed serologically. In the case of positive IDST to pollens, Aspergillus spp. and cat epithelium, CMG IMMUNODOT strip tests were negative. A total of 25% of cases were considered to be primarily associated with food hypersensitivity, but only 4% were confirmed serologically. This study emphasizes the value of CMG IMMUNODOT tests as a support in the diagnosis of dog allergy.     

应用琼脂免疫扩散试验检测猪伪狂犬病抗体的研究

建立了ＡＧＩＤ用于猪伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ,Ｐｒ）的诊断。对９８份被俭血清的ＡＧＩＤ结果与ＳＮ结果比较,当ＳＮ滴度大于１：８时两者的阳性检出符合率为１００％,ＳＮ滴度小于或等于１：８时,两者的阳性检出符合率为８７．５％,ＡＧＩＤ和ＳＮ总的阳性符合率为９４．４％,结果表明,ＡＧＩＤ对Ｐｒ可进行特异性诊断,流行病学调查和免疫动态监测。