稀有放线菌的选择性分离、鉴定及生物活性研究

聚乳酸(PLA)和丝蛋白粉分别作为选择性碳、氮源可以有效提高稀有放线菌的分离效率,同时海洋环境中蕴藏着丰富的活性稀有放线菌,是发现新药的有效途径。为了筛选并鉴定海洋环境中产生活性物质的稀有放线菌,以聚乳酸和丝蛋白粉分别作为选择性碳、氮源,配制6种分离培养基,用平板稀释法分离放线菌;并用滤纸片法和MTT法对供测菌株发酵产物进行活性筛选。结果表明:共分离出96株稀有放线菌,分属于11个属;其中,80株菌对7种靶标菌显示出一定的抗菌活性;78株菌对肿瘤细胞具有不同程度的细胞毒活性。另外,比较了6种培养基对稀有放线菌的分离效果。从分离结果来看,最理想的是聚乳酸培养基。     

几种利用预处理分离稀有放线菌的方法

稀有放线菌是生物活性物质的重要来源.本文主要从物理处理、化学处理、生物学处理等方面,介绍几种通过预处理选择性分离稀有放线菌的有效方法.     

海南省土壤拮抗放线菌分离方法初探

针对海南土样拮抗放线菌的分离,实验初步解决了土样中的细菌和真菌在放线菌分离培养中的污染问题。研究测定了细菌和真菌抑制剂K2Cr2O7的最佳使用浓度、土样稀释浓度、土样加热和风干处理以及土样的贮存时间等对放线菌分离培养的影响。结果表明:K2Cr2O7在一定的浓度范围内使用可以明显抑制细菌的生长,对放线菌的生长无明显的影响,浓度在50μg/ml时效果最佳。当K2Cr2O7的使用浓度在70μg/ml时放线菌生长受到抑制,使用浓度在30μg/ml时对细菌的抑制效果不明显;土样溶液涂抹平板培养时,土样溶液浓度在10-3～10-4时平板内长出的菌落在30～40个间,菌落的重叠率在20%左右,分离效率较高,是理想的浓度;在土样放置一个星期的自然风干后,同时使用细菌抑制剂K2Cr2O7可得到较理想的培养效果;对土样进行加热处理后,可明显降低细菌的数量,但同时也会降低放线菌数量,分离效率过低。     

禽粪好氧堆肥发酵高温阶段微生物的分离及其作用

文章对禽粪好氧堆肥发酵高温阶段微生物数量趋势及其对堆料中主要有害物质的降解作用进行了研究。微生物数量趋势排序为细菌>放线菌>霉菌。各类微生物降解情况为:淀粉类主要由细菌降解,放线菌次之,霉菌无效;蛋白类也主要是细菌降解,放线菌和霉菌均有一定作用;填充料秸秆中的纤维素类降解主要是放线菌和霉菌,细菌并未表现出效果。     

红碱淖湖滨土壤微生物及稀有放线菌研究

【目的】分析陕西神木红碱淖湖滨土壤理化性质、微生物资源及稀有放线菌资源的分布,为沙化环境下放线菌资源利用及红碱淖地区生态保护与植被恢复提供科学依据。【方法】2009-09,在红碱淖的北岸、西岸、南岸共采集12个土样,对土样的理化性质和微生物区系进行分析,并采用5种放线菌培养基对该地区土壤中的放线菌进行了分离,对具有特殊形态的13株放线菌进行16SrDNA鉴定。【结果】①红碱淖地区土壤pH值均在8.2以上,最高值接近10,土壤中碱解氮、速效钾、速效磷含量分别在7.00～79.10,24.84～71.73,2.34～5.30mg/kg。②红碱淖地区土壤细菌、放线菌和真菌数量分别为105～107,102～104,101～103 CFU/g;微生物生物量碳含量在43.94～608.80mg/kg,其与土壤微生物数量之间相关性达极显著水平(P<0.01)。③改良HV琼脂培养基对红碱淖地区放线菌具有较好的分离效果。④16SrDNA测序比对结果显示,红碱淖地区放线菌资源以诺卡氏菌属(Nocardia)和链霉菌属(Streptomyces)为主;稀有放线菌占到23.08%,分属于拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)、糖丝菌属(Saccharothrix)和Actinophytocola。【结论】红碱淖地区的土壤属于碱性或者强碱性,土壤肥力较低;该地区蕴含着丰富的放线菌资源。     

退化高寒草原土壤微生物变化特性研究

对藏北退化高寒草原土壤微生物群落数量的研究结果表明：①相对于正常草地，轻度退化草地土壤细菌、放线菌、真菌数量均呈不同程度的提高；中度退化和严重退化草地土壤细菌和真菌数量则呈显著下降趋势，而土壤放线菌数量显著升高。②土壤真菌与土壤细菌表现为极显著正相关（P≤o．01）；而与放线菌则为负相关；土壤放线菌和土壤细菌间则为显著负相关（P≤0．05）。③土壤细菌、放线菌和真菌与土壤有机质均呈显著相关，r值分别为0．7256、-0．7533、0．7215。④不同退化程度高寒草地土壤微生物数量以细菌占绝对优势，放线菌和真菌较少，并有不同的变动规律。⑤西藏高原高寒、干旱条件下，轻度退化草地一定程度的沙化所导致的土壤通透性能的改善对土壤微生物的繁殖与活动具有重要的促进作用。     

有机肥料施用量对烟田土壤微生物的影响

对不同有机肥料施用量的烟田土壤中细菌、固氯菌、放线菌和真菌进行了分离,对不同微生物种群进行了数量和多样性分析.结果表明,有机肥料施用量对烟田根际土中微生物数量有一定的影响,在有机肥料施用量为0-30000 kg/hm~2的范围内,细菌、固氮菌、放线菌和真菌的数量随着有机肥料施用量的增加而呈现增长趋势,细菌、固氮菌、放线菌和真菌的根土比随着有机肥料施用量的增加而呈现增加趋势,施用有机肥料的烟田微生物多样性指数H和均匀度E低于未施用有机肥料的.     

9株土壤放线菌分离鉴定及抗菌活性

初步研究了贵州习水国家级自然保护区土样放线菌。用改良HV培养基分离放线菌,对9株放线菌进行了形态学、生理生化和分子鉴定,系统发育分析和抗菌活性检测。结果显示:1株为小单孢菌属(Micromonospora),相似性97%;8株为链霉菌属(Streptomyces),相似性96%~99%。抗菌活性检测发现,链霉菌C2对3株供试细菌有抑菌作用,抑菌圈直径8.5~12 mm;链霉菌C12对5株供试细菌具有抑菌效果,抑菌圈直径17~20 mm。研究结果表明,小单孢菌为稀有放线菌,链霉菌为优势放线菌;C2和C12相比,C2抑菌作用弱,C12抑菌作用强,C12抑菌谱更广,效果更好。     

土壤放线菌分离中抑制剂的应用研究

为了提高从土壤中分离放线菌的效率，解决土壤中的细菌和真菌对放线菌分离培养中的污染问题，研究了重铬酸钾、放线菌酮、制霉素和多菌灵等4种抑制剂对细菌、真菌及放线菌的作用。结果表明，重铬酸钾、放线菌酮对土壤真菌、细菌有明显抑制作用，而且可显著提高土壤放线菌的分离效益；其中重铬酸钾对放线菌有一定刺激生长的作用，是一种高效、方便廉价的抑制剂。     

土壤消毒对马铃薯连作田土壤微生物数量的影响

利用高温和药剂处理马铃薯连作土壤后种植薯块,采用稀释平板法研究土壤消毒对马铃薯生育期可培养土壤微生物数量的影响。结果表明,各处理马铃薯根际真菌数量随马铃薯生长发育呈上升趋势,细菌数量、放线菌数量随马铃薯生长发育呈先上升后下降趋势;高温处理和正茬处理的细菌数量相对重茬对照变化显著,放线菌数量变化不显著;药剂处理细菌数量、放线菌数量变化幅度平缓;高温处理、正茬土壤、药剂处理土壤真菌数量低于重茬对照。     

大棚辣椒和小白菜根际土壤微生物的研究

通过稀释涂布平板法对大棚辣椒和小白菜根际土壤中的细菌、真菌和放线菌进行分离、培养、计数和初步鉴定。结果表明:两种蔬菜根际土壤中放线菌数量呈显著性差异,细菌和真菌数量差异性不显著;两种蔬菜根际土壤中均为细菌数量最多,放线菌次之,真菌最少。     

井冈山植物根际土壤微生物的初步研究

利用选择性培养基,对井冈山自然保护区8种不同植物根际土壤的细菌、真菌和放线菌进行了分离和测数,根据菌体形态、培养特征以及生理生化指标,对部分优势菌株进行了初步鉴定。结果表明,8种植物根际土壤微生物以细菌数量最大,真菌数量和放线菌数量相差不大;根际土壤微生物的组成较复杂,细菌共分离到9个属,其中以芽孢杆菌属、土壤杆菌属为主;真菌共分离到11个属,其中以青霉属、毛霉属、曲霉属和木霉属占主要优势;放线菌中链霉菌属占主要优势。     

大棚辣椒和小白菜根际土壤微生物的研究

通过稀释涂布平板法对大棚辣椒和小白菜根际土壤中的细菌、真菌和放线菌进行分离、培养、计数和初步鉴定。结果表明：两种蔬菜根际土壤中放线菌数量呈显著性差异,细菌和真菌数量差异性不显著;两种蔬菜根际土壤中均为细菌数量最多,放线菌次之,真菌最少。     

珠穆朗玛峰自然保护区土壤放线菌的生态分布及拮抗性研究

[目的]探究珠穆朗玛峰自然保护区土壤放线菌的生态分布及抑菌活性,为放线菌新药物先导化合物筛选提供资源。[方法]采用稀释平板法及琼脂块法对珠穆朗玛峰自然保护区土壤放线菌进行分离及拮抗性测定。[结果]珠穆朗玛峰自然保护区植被类型不同,放线菌的数量分布均有明显差异。农田土放线菌数量最多,人工林与原始森林土壤放线菌数量最少。在同一剖面内表层放线菌数量最高,随着土层加深,有机质含量减少,放线菌数量亦相应降低。该区放线菌种类较复杂,共分离到10个属,其中链霉菌属占绝对优势。链霉菌属分离到11个类群,以白孢类群、灰褐类群和粉红孢类群为主。供试菌株抗病原真菌强于细菌,抗革兰氏阳性细菌强于抗革兰氏阴性细菌。[结论]珠穆朗玛峰自然保护区土壤蕴含着种类和拮抗活性丰富的放线菌,可进一步用于生物农药的开发利用。     

死海嗜盐耐盐放线菌分离方法研究

【目的】探讨死海高盐地区分离嗜盐耐盐放线菌的最佳方法,为高盐地区放线菌的分离提供理论依据。【方法】采用物理方法（微波）、化学方法（加入孢子活化剂）、富集培养法及3种方法的组合共计9种方法,对死海地区土样进行预处理,然后在3种复合盐含量（150,225,300 g/L）及不同培养基（ISP5、CMKA、HV）条件下,研究复合盐含量及培养基对分离放线菌种类和数量的影响,并筛选嗜盐耐盐放线菌的最佳分离方法。【结果】①在3种培养基上,对土样采用9种方法进行预处理,其中物理+化学方法处理后分离的放线菌种类明显高于其他预处理方法;富集培养法预处理土样分离的放线菌种类明显较少。②不同复合盐条件下,3种培养基分离的放线菌种类和数量表现为CMKA>HV>ISP5。③不同培养基上,3种复合盐条件下分离的放线菌种类总体上表现为300 g/L>225 g/L>150 g/L,分离的放线菌数量总体表现为150 g/L>225 g/L>300 g/L。【结论】比较筛选得到了分离死海高盐地区嗜盐耐盐放线菌的最佳方法,即土样经微波与化学孢子活化剂共同处理后,在含225 g/L复合盐的CMKA培养基上培养。     

菌类抑制剂在菌根际土壤真菌与放线菌分离中的应用研究

文章采用稀释平板涂布法,研究了几种菌类抑制剂在菌根际土壤真菌及放线菌分离时的作用效果。试验选用6种抑制剂,每种抑制剂设4个浓度梯度,另外,设1个未加抑制剂的作对照。结果表明:在真菌分离培养过程中,阿米卡星浓度在0.05m l.L-1时分离出的真菌数量和种类分别达3.6&#215;105个.g-1和13种,比未加抑制剂的分离效果还好。放线菌分离培养最佳抑制剂为重铬酸钾,重铬酸钾在浓度为10mg.L-1~30mg.L-1时对细菌的抑制作用均较好,并且对放线菌抑制作用很小,尤其在浓度为10mg.L-1时分离出的放线菌数量可达4.8&#215;105个.g-1,与未加抑制剂的处理分离的数量无显著差异。     

小麦黄花叶病毒病不同发生度土壤的微生物多样性研究

2016年于山东省临沂市、枣庄市、济宁市采集3组小麦黄花叶病毒病发生严重度不同地块的土壤,采用平板稀释分离法分别分离其中的真菌、细菌和放线菌,统计土壤微生物总量及3种可培养微生物的种类和数量,研究其与小麦病毒病发生程度的关系。结果表明,同一地块中细菌数量占绝对优势,其次为放线菌,真菌最少;但是分离得到的可培养真菌的种类和数量最多,其次为细菌,放线菌数量最少;并且发病严重地块的土壤微生物总量均高于轻病地块,其中发病严重地块的真菌数量和种类增加的最为显著,其次为细菌,放线菌基本无变化。     

喷浇臭氧水对果实表面微生物数量的影响

果实表面微生物的种群和数量是影响其贮藏时间和品质的原因之一。为探讨臭氧水在果实贮藏方面的应用效果,本试验采用稀释涂布平板法进行果实表面微生物的分离与培养,研究喷浇臭氧水前后草莓、番茄、黄瓜表面细菌、真菌和放线菌数量的变化规律。结果表明:果实表面细菌、真菌和放线菌数量因臭氧水浓度而发生变化,臭氧水浓度越高,微生物数量越低;以喷浇无菌水处理组作为对照,高浓度臭氧水处理组在草莓、番茄和黄瓜中对细菌的抑制率分别为67.96%、80.30%和85.45%,对真菌的抑制率分别为79.17%、69.70%和56.52%,对放线菌的抑制率分别为46.15%、53.13%和56.25%,由此可知,臭氧水对果实表面细菌的抑制作用最强,真菌次之;其抑菌效果与果实种类也有一定关系,果实表面越光滑,其对微生物抑制作用越明显。综上,喷浇臭氧水可以有效降低果实表面微生物的数量,进而具有延长果实贮藏时间,提高果实品质的潜力。     

不同生长年限茶树根际微生物分布的差异

利用选择性培养基对铜仁地区二年生和十年生茶园的茶树根际细菌、放线菌和真菌进行了分离.根据菌体形态学特征和生理生化特征分别对根际细菌、放线菌和真菌进行了鉴定和分类,以研究不同生长年限的茶树根际细菌在不同深度土层数量的变化、每个茶园不同季节根际细菌的变化以及根际放线菌数量、根际真菌的数量差别.结果表明,十年生茶园比二年生茶园土壤细菌多;相同生长年限的茶园,根际细菌在10 cm深度土壤中含量最多,20 cm次之,0 cm和30 cm较少;夏秋两季最多,春冬两季较少.二年生茶园根际放线菌数量明显高于十年生茶园.十年生茶园根际真菌数量比二年生茶园多.     

几种培养基选择性分离稀有放线菌的方法

介绍了几种培养基选择性分离稀有放线菌的有效方法,如采用葡萄糖-天门冬酰胺改良培养基、淀粉-甘油培养基和甘油-酪素培养基从沙漠土样分离稀有放线菌;利用吉兰糖胶选择性分离Sporichthya,Planobispora,Planom-onospora,Actinomadura rugatobispora等。