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1.
泡桐丛枝植原体抗原膜蛋白抗血清的制备及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
根据报道的泡桐丛枝植原体(Paulownia witches’-broom phytoplasma,PaWB)抗原膜蛋白(antigenic membrane pro-tein,AMP)基因的核苷酸序列设计引物,提取发病泡桐总DNA,经PCR扩增并成功克隆泡桐丛枝植原体amp基因。序列分析表明,amp基因由696个核苷酸组成,编码231个氨基酸残基,与GenBank中登录的2个泡桐丛枝植原体的膜蛋白核苷酸序列同源性为100%。将amp基因91-604 nt部分序列(命名为ampd)克隆到原核表达载体pGEX-4T-3,诱导后,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以纯化的带GST标签的AMPD融合蛋白为抗原免疫德国大白兔,制备了PaWB-AMPD抗血清。利用该血清,通过Western印迹、点印迹、ELISA、间接免疫荧光和免疫捕获PCR试验均能在发病泡桐组织中特异检测到泡桐丛枝植原体。 相似文献
2.
本研究成功建立了玉米细菌性枯萎病菌的PCR检测方法.该方法根据细菌ITS序列的特异性,设计了对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变的特异性引物及探针,并对5株玉米细菌性枯萎病菌及18种植物原性细菌的DNA进行了PCR、实时荧光PCR及PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)检测.结果表明,几种方法特异性强,检测灵敏度均为菌液浓度102 cfu/mL,PCR-DHPLC技术具有检测成本较低、高通量、自动化程度高、污染风险小及鉴定结果准确等特点,能够满足快速、准确诊断玉米细菌性枯萎病菌的要求. 相似文献
3.
天池自然保护区位于天山博格达峰北麓 ,面积4 0 0 4 9公顷 ,举世闻名的天池就处在该保护区功能区天池风景区内 ,海拔 1910米 ,距乌鲁木齐 10 0公里。天池现已成为著名的风景名胜游览区 ,每年接纳中外游客 30余万人次 ,是新疆旅游的明珠 ,也是区外人士了解新疆的一个窗口。但是 ,近几年逐年暴发的山洪对天池及其源头生态环境造成了很大的破坏 ,应引起重视。天池是一个高山湖泊 ,面积 2 4 8公顷 ,它的形成与当地古地质构造运动有关。在江河流域第四纪时期古冰川的作用下 ,加上最新一次槽谷内经历的新构造运动 ,巨大冰川席卷巨石覆盖于坝体上 ,… 相似文献
4.
5.
6.
中草药青蒿(Artemisia annua L.)的实时荧光PCR检测 总被引:1,自引:0,他引:1
中草药青蒿,学名黄花蒿(Artem isia annuaL.),属于中国独有的抗疟药用植物资源之一。根据蒿属植物rDNA ITS序列多态性设计TaqM an探针及引物,通过实时荧光PCR方法对黄花蒿进行检测。结果表明:该组探针-引物对黄花蒿有很强的特异性,除黄花蒿外,其余8种对照蒿属材料均未检测到荧光信号。该方法快速、简便、安全、准确,适用于黄花蒿的出入境检验。 相似文献
7.
采用不同种植规格氮肥减量的试验设计,研究了不同种植规格氮肥减量对烟株农艺性状、烟叶外观质量、内在化学成分、中性致香物质含量、感官评吸质量及经济效益的影响.结果表明:1.3 m×0.55 m种植规格下氮肥减量15%,烟株的农艺性状较好、外观综合质量提升、内在化学成分协调、中性致香物质总量提升、感官评吸质量改善和经济效益增加.烟叶有效叶数为21.7,叶面积系数为3.3,中部和上部烟叶外观质量评价综合得分分别为79.0和76.5分,中上部烟叶的中性致香物质含量丰富,分别为642.86μg/g和619.60μg/g,中部和上部烟叶感官质量评价得分分别为85.0和83.5分,产量、均价、产值和上等烟比例分别为2830.5 kg/hm2、29.6元/kg、83782.8元/hm2和68.4%.1.3 m×0.55 m种植规格下氮肥减量15%的生产技术在澄江抚仙湖径流区具有良好的推广应用价值和前景. 相似文献
8.
9.
PCR-ELISA法对大豆品种的转基因定性检测研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增,对PCR扩增的固相和液相产物分别进行杂交和凝胶电泳检测的PCR-ELISA法,对黑龙江省常规选育品种合丰35和黑农37、外源DNA直接导入大豆的分子育种所获品种黑生101、及大连进口的美国2号等大豆,进行转基因定性检测.结果表明:该方法高效可靠,可作为一种快速定性检测转基因产品的方法;检测结果:美国2号为转基因大豆,黑生101、合丰35和黑农37为非转基因大豆.上述结果对分子育种、生态保护、安全监测及对建立黑龙江省非转基因大豆生产保护区等具有重要意义. 相似文献
10.
选用86头哺乳母猪,随机分为2组,对照组喂基础日粮,试验组于产后10日内在基础日粮中添加2.5%的中药复合添加剂(乳泉I号)。结果表明,试验组仔猪20日龄窝重和35日龄断奶窝重分别较对照组提高25、59%和25.90%(P<0.01);仔猪断奶个体重提高18.56%(P<0.01);哺乳期平均日增重提高22、76%(P<0.01);哺乳期仔猪成活率提高8.0%(P<0.01)。 相似文献