泰地罗新原料药细菌内毒素检查方法学研究

本文建立了泰地罗新原料药细菌内毒素检查方法。根据《中国兽药典》2015年版一部附录1143细菌内毒素检查法(凝胶法)的要求[1],通过干扰试验确定样品最大不干扰浓度,并进行方法学验证。结果显示泰地罗新质量浓度小于0.4mg/mL时,不会干扰内毒素和鲎试剂的反应;泰地罗新内毒素应小于1.25EU/mg。结论:可以采用此法对泰地罗新原料药进行细菌内毒素检查。     

高效液相色谱法测定泰地罗新的研究

本文建立高效液相色谱法测定泰地罗新含量的检测方法。色谱条件为:Waters XBridge TM C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(p H=7.00)=(35∶30∶35),流速为1.0 m L/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。研究表明:泰地罗新质量浓度在0.1 mg/m L-2 mg/m L范围内具有良好的线性关系(r=0.999 6)。该方法简单,准确,灵敏度高,重现性好,可用于泰地罗新含量的检测。     

超高效液相色谱法测定紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量

为了快速测定紫锥菊根末中主成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量建立了超高效液相色谱法（UPLC）。采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm)为分离柱,柱温：35℃;以乙腈-0.4%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;流速：0.35 mL/min;进样量：1 μL;检测波长为330 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对单咖啡酰酒石酸和菊苣酸进行定性定量检测。单咖啡酰酒石酸在0.5~25 μg/mL的范围内线性关系良好（R2>0.999）;方法检出限为0.5 μg/mL,方法定量限为1 μg/mL; 菊苣酸在1~50 μg/mL的范围内线性良好（R2>0.999）;方法检出限为1 μg/mL,方法定量限为2 μg/mL,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的定性定量检测。     

超高效液相色谱法测定原料药中加米霉素的含量

研究建立超高效液相色谱-光电二极管阵列法（UPLC-PDA）测定加米霉素原料中主成分加米霉素的含量。采用反相超高效液相色谱法对加米霉素进行色谱分离和快速定量测定。方法采用ACQUITY UPLCTM CSH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm)为分离柱,柱温：35℃;以氨水(0.1:30)-乙腈为流动相（30:70）进行等度洗脱;流速：0.45 mL/min;进样量：1 μL;检测波长为208 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对加米霉素进行定性、定量检测。加米霉素在80~1600 μg/mL的范围内线性关系良好（R2=0.9996）;方法检测限为40 μg/mL、定量限为80 μg/mL,系统适应性试验色谱柱耐受性良好,添加回收率99.80%,完全满足检测需求。研究建立的UPLC方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于加米霉素原料中主成分加米霉素含量的检测。     

UPLC-PDA联合UPLC-MS/MS法确证一批未知药品中的卡那霉素

采用UPLC-PDA联合UPLC-MS/MS方法确证了未知药品中的卡那霉素。样品经提取稀释后,采用ACQUITY UPLC T3色谱柱为分离柱,UPLC-PDA初步筛查,再用正离子扫描,液相色谱串联质谱仪上机测定。结果显示,未知物确证是卡那霉素;样品检出限为0.1 μg/mL,定量限为0.2 μg/mL。本方法快速、灵敏、重现性好,适用于此批次未知药品中卡那霉素的检测。     

UPLC-MS/MS法测定猪组织中泰地罗新残留量

为了检测猪组织中泰地罗新残留量,试验采用70%乙腈提取,HLB固相萃取柱净化,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,经BEH C_(18)色谱柱梯度洗脱,电喷雾正离子扫描和多反应监测模式对泰地罗新进行质谱分析,建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。结果表明:在25～1 000μg/kg范围内,泰地罗新特征离子质谱响应值与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999;检测限在4.5～7.5μg/kg,定量限15.0～25.0μg/kg;加标回收率为90.5%～98.3%,相对标准偏差为0.5%～3.7%。说明该法准确度高、回收率好,适用于猪组织中泰地罗新残留量的测定。     

HPLC法测定恩诺沙星可溶性粉含量

采用HPLC法测定恩诺沙星可溶性粉的含量,色谱柱选用Waters Symmetry C18柱（4.6×150mm,5μm）,流动相为0.025 mol/L磷酸（用三乙胺调节pH至3.0）—乙腈（83∶17）,检测波长为278 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min.结果表明恩诺沙星在20～80 μg/mL的范围内,呈现良好的线性关系,平均回收率为99.3％.通过试验确定本法的检测限为15 μg/mL,定量限为50 μg/mL,且具有良好的专属性和耐用性.运用本法对来自四个不同厂家的恩诺沙星可溶性粉进行含量测定,并与紫外分光光度法测定结果比较,说明HPLC法能准确测定恩诺沙星可溶性粉的含量.     

泰地罗新注射液对猪传染性胸膜肺炎的临床疗效试验

将泰地罗新注射液分为高、中、低（8、4、2 mg /kg bw）3个剂量组分别肌肉注射治疗猪传染性胸膜肺炎,同时设默沙东动物保健品有限公司的泰地罗新注射液为对照组,按4mg /kg bw给药,给药一次。结果表明,泰地罗新注射液中（4mg/kg bw）、高（8mg/kg bw）剂量对人工感染传染性胸膜肺炎病猪的有效率和治愈率无显著差异（P＞0.05）,与默沙东动物保健品有限公司生产的泰地罗新注射液推荐剂量（4mg/kg bw）的效果相当。试验结果表明泰地罗新注射液按一次量,每1 kg体重4mg肌注,对猪传染性胸膜肺炎有良好的治疗效果。     

泰地罗新注射液在猪体内的药代动力学及绝对生物利用度研究

为了研究泰地罗新注射液肌内注射和静脉注射在猪体内的药动学特征和绝对生物利用度,16只健康猪采用随机单剂量、平行试验设计,分别以4 mg/kg BW肌内注射和以1 mg/kg BW静脉注射泰地罗新注射液。采用超高效液相色谱-串联质谱法测定猪血浆中泰地罗新的浓度,以药动学分析软件WinNolin 6.4非房室模型计算药动学参数。结果显示,猪肌内注射泰地罗新注射液的药动学参数分别为Tmax(0.58±0.36)h,Cmax(0.88±0.17)μg/ml,AUClast(11.00±4.05)μg.h/mL,T1/2λz(33.58±22.01) h,MRTlast(35.60±10.00 )h。猪静脉注射泰地罗新注射液的药动学参数分别为AUClast(3.56±1.62)μg.h/mL,T1/2λz(50.91±23.47)h,MRTlast(37.53±4.52 )h,Vz(17.59±8.09)L/kg,Cl(0.31±0.14)L/h.kg。肌内注射泰地罗新注射液的绝对生物利用度77.15%,在猪体内的药动学特征是吸收迅速,血浆达峰时间短,消除半衰期长,绝对生物利用度高。     

离子对HPLC法测定猪饲料中3-吡啶甲醇含量

建立了猪饲料中3-吡啶甲醇含量测定方法.取氨基柱作为色谱柱,以磷酸二氢钾（0.025 mol/L）：乙腈：庚烷磺酸钠（0.25 mol/L）=25： 75： 0.4（V/V,pH4.50）为流动相,检测波长260 nm,流速为0.5 mL/min.饲料中3-吡啶甲醇的检测限为0.032 μg/g,定量限为0.12 μg/g.回归曲线方程为A=24.75C＋0.43,r＝0.999 3.平均回收率为80%～85%.