甘肃棘豆中苦马豆素的分离与鉴定

4.5kg甘肃棘豆用 2 0mL/L稀乙酸和氯仿的混合溶液 (5∶4)浸提 48h,过滤 ,分层。取酸水层用氯仿萃取 ,弃去氯仿层以除杂质 ,然后酸水层用氢氧化钠调pH为 9～1 1 ,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。正丁醇部分经硅胶柱层析 ,氯仿∶甲醇∶氨水∶水 (70∶2 6∶1 0∶1 0 )液洗脱分离、纯化得到一白色针状结晶体 ,TLC鉴定分析初步确定为苦马豆素 ,提取率为3 .2 0 μg/g。正丁醇部分苦马豆素含量气相色谱测定为 1 3 .1 4 8%± 0 .852 % ,折算全草苦马豆素含量为 0 .0 69%。     

牛羊肉中氯氰碘柳胺残留检测ＨＰＬＣ法的研究

对牛、羊肉中氯氰碘柳胺(Closantel)残留的检测方法进行了研究.取2 g动物组织样品用乙腈提取,正己烷脱脂,于50℃减压蒸干.残留物用2 mL甲醇-正己烷(8∶ 2)溶解,通过氧化铝B柱,用2 mL正己烷淋洗,不收集;该柱用10 mL甲醇洗脱,收集洗脱液于50℃减压蒸干后,残留物用1.0 mL的流动相溶解并用带有紫外检测器的高效液相色谱仪于221 nm波长处测定;流动相为乙腈∶水(85∶ 15),含有0.05%二乙胺并用磷酸调整pH值至3.氯氰碘柳胺浓度在200～8 000 ng/mL时,呈线性关系,检测限量为25 μg/kg.本方法平均回收率为87.8%±7.5%(牛肉)、83.2%±10.0%(羊肉).     

薄层扫描测定5种疯草中苦马豆素含量

称取甘肃棘豆粉200g，变异黄芪粉200g，茎直黄芪粉171g，毛瓣棘豆粉174g，冰川棘豆粉200g，甲醇渗漉，回收甲醇，浸膏用1mol/L HCl溶解，过阳离子交换柱，洗脱液75℃水浴挥干，残留物先用甲醇溶解，回收甲醇后再用氨性氯仿溶解，回收氯仿，分别得到总生物碱214、117．5、75．4、33．1、10．5mg。甲醇溶解总生物碱与苦马豆素标准品，定量点样于硅胶板，显色后薄层扫描得出甘萧棘豆、变异黄芪、茎直黄芪、毛瓣棘豆和冰川棘豆中苦马豆素的含量分别为0．106、0．030、0．053、0．032、0．020mg/g.     

斜茎黄芪生物碱成分GC-MS分析

采用生物碱系统提取、薄层色谱和GC-MS分析技术,研究斜茎黄芪生物碱成分.结果表明,4.5 kg斜茎黄芪得到酸性和碱性氯仿部分生物碱分别为5.4g和3.6g,提取率为1.3％和0.8％；薄层色谱分析,酸性和碱性氯仿部分生物碱分别在氯仿∶甲醇=15∶1(Ⅴ∶ Ⅴ)和甲醇∶氨水=10∶1(Ⅴ∶Ⅴ)展开体系展开效果最佳,均呈现5个显色斑点；GC-MS分析,酸性和碱性氯仿部分各鉴定出7种生物碱,酸性氯仿部分以别隐品碱(34.84％)、原阿片碱(31.36％)和坎那定(21.46％)含量较高,碱性氯仿部分以别隐品碱(71.74％)、Oxyhydrostinine (7.45％)和坎那定(5.35％)含量较高.斜茎黄芪含有生物碱,且以别隐品碱、原阿片碱、坎那定碱和Oxyhydrostinine为主.     

西藏冰川棘豆生物碱的提取,分离及毒性研究初报

西藏冰川棘豆干粉经甲醇渗漉,酸溶,阳离子交换,水及丙酮洗,氨水碱化,丙酮洗。薄层层析显示粗提物中存在两种能与改良碘化铋钾显色的生物碱。经氧化铝柱层析,氯仿洗脱所两种物质对小鼠腹腔注射有毒,中毒症状与自然病例及实验山羊中毒十分相似。     

冰川棘豆生物碱分析及苦马豆素的分离、鉴定

冰川棘豆干粉,经甲醇提取,盐酸酸化,酸水液用氯仿萃取数次,NaOH调pH至9～10,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取.称重表明生物碱多集中在正丁醇组分,且以大极性生物碱为主.薄层层析检查结果显示,氯仿组分有10种生物碱,乙酸乙酯组分有7种生物碱,正丁醇组分有5种生物碱.将正丁醇组分经硅胶柱层析,乙酸乙酯一甲醇系统梯度洗脱,每30～50 mL收集1份,薄层层析监测,同类合并.Ehrlich＇s试剂显色明显段油浴升华,得到白色针状结晶,与苦马豆素标准样品进行薄层层析对照,其斑点形状、颜色相同,Rf值相近.通过熔点和IR、MS、^1HNMR、^13CNMR等鉴定其化学结构,为苦马豆素.     

变异黄芪中苦马豆素的分离与鉴定

目的：研究变异黄芪的生物碱成分。方法：变异黄芪经甲醇热回流提取，回收甲醇至浸膏。浸膏用1mol／l盐酸研溶至生物碱沉淀反应为阴性，过滤，所得滤液氯仿萃取除去色素等杂质，然后用氢氧化钠碱化调pH为9～11，依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。采用薄层层析技术分析各部分生物碱成分。正丁醇部分经硅胶柱层析进行分离，纯化。所得化合物通过熔点和波谱技术(IR、MS、^1HNMR、^13CNMR)鉴定其化学结构。结果：从正丁醇部分分离、纯化得到一种白色针状晶体25．3mg，结构鉴定为苦马豆素。计算变异黄芪中苦马豆素的提取率为0．0013%。     

博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究

建立博落回药材中四种生物碱的薄层色谱(TLC)鉴别方法。开展利用二甲苯-甲醇(5∶1)展开剂分离鉴别博落回中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱;利用氯仿-二甲苯-甲醇-氨水(50∶10∶1∶0.1)展开剂分离鉴别博落回中血根碱和白屈菜红碱;利用环己烷-丙酮(3∶2)展开剂分离鉴别博落回中原阿片碱和别隐品碱的系统研究。结果表明建立的薄层方法简便,准确和稳定,可以用于控制博落回药材的质量。     

高效液相色谱法检测蓖麻粕中的蓖麻碱

本试验建立了蓖麻粕中蓖麻碱的甲醇提取和高效液相色谱测定方法。蓖麻粕经甲醇80℃水浴回流提取,提取时间在2h之后蓖麻碱的得率保持稳定。使用AtlantisTMdC18色谱柱(5μm,4.6×150mm),乙腈和水(15 85)为流动相,1.0ml/L的流速等度洗脱10min,紫外检测波长308nm,经0.45μm滤膜过滤的蓖麻粕甲醇提取液中蓖麻碱得到完全分离。方法在考察的蓖麻碱质量浓度范围内为(0.005￣500μg/mL)保持良好线性,r2>0.99,实际样品测定时蓖麻碱的检出限不大于0.5μg/g。     

高效液相色谱法测定芬苯达唑原料中的有关物质

用高效液相色谱法测定芬苯达唑原料中可能存在的2种杂质的含量.采用Inertsil ODS-3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水-冰醋酸(30∶70∶1,V/V)为流动相A和甲醇-水-冰醋酸 (70∶30∶1,V/V)为流动相B梯度洗脱,检测波长280 nm, 流速1.0 mL/min,进样量10μL.用归一化法计算原料中杂质的含量,与外标法结果比较无显著性差异.     

小花棘豆生物碱对小白鼠血细胞的影响

采用全自动兽用血细胞分析仪检测小白鼠胃内灌服苦马豆素、黄花碱及这2种生物碱混合物后的血常规指标,以探讨小花棘豆生物碱对小白鼠血液学的影响。结果表明,苦马豆素组在低剂量时能提高血细胞的数量,在高剂量时能降低血细胞的数量,且差异明显。黄花碱组在低剂量时几乎不影响血细胞的数量,而在高剂量时也能够显著降低红细胞、白细胞、粒细胞、淋巴细胞的数量,但对血红蛋白含量的影响不显著。2种生物碱混合组在低剂量时随着试验时间的延长,血细胞数目逐渐增多;相反,高剂量时却又逐渐降低血细胞的数目。     

毛瓣棘豆中苦马豆素的纯化与鉴定

毛瓣棘豆草粉(3.28 kg)经95%乙醇加热回流提取,回收溶剂,浓缩得浸膏。浸膏用蒸馏水混悬,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;剩余水溶液用HC l酸化后经氯仿萃取,酸水液用NaOH调pH 12~14得碱水液。碱水液依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到碱性正丁醇萃取物5.7 g。碱性正丁醇萃取物经硅胶柱层析,用氯仿-甲醇梯度洗脱,TLC(薄层色谱)检测,合并相同组份,其中101~200份含有苦马豆素。将101~141份用氨性氯仿处理,减压升华,得到白色针状结晶34 mg。经TLC(薄层色谱)检查、熔点测定和质谱分析可确定该白色针状结晶为苦马豆素。     

连续液相萃取法提取豆类丝核菌培养液中苦马豆素

探索从豆类丝核菌培养液中分离苦马豆素的有效方法。豆类丝核菌经改良的Czapek's培养液培养14 d后,所得培养液经浓缩、超声波-水提法、三氯甲烷萃取及二氯甲烷连续液相萃取(60～70 h)等一系列操作后,得到淡黄色粗品,粗品在90℃下减压升华得到白色晶体5 mg。经薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(GC)检测其含有苦马豆素。确定使用连续液相萃取法可以从豆类丝核菌培养液中提取分离出苦马豆素。     

Study on the TLC Identification of Effective Components in the Sihuangzhili Granules

In order to establish and perfect the quality standard of Sihuangzhili granules, this experiment was conducted to identify coptidis rhizome, cortex phellodendri, rhubarb, scutellaria baicalensis, and radix isatidis in Sihuangzhili granules. We used TLC identification method to investigate the factors such as the developing agent, the expansion temperature, the expansion of the humidity, the source of the thin layer, the batch number and the color developing conditions.In the experiment, the mixture of cyclohexane, ethyl acetate, isopropyl alcohol, methanol, water, and triethylamine (3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1) as the developing agent, was put into the expansion cylinder with the pre-saturated ammonia vapor, and was used to identify coptidis rhizome and cortex phellodendri under the UV lamp(365 nm);The mixture of ethyl acetate, butanone, formic acid and water (5∶3∶1∶1) as developing agent, sprayed with 2% ethanol solution of ferric chloride, was used to identify scutellaria baicalensis;At last, n-butanol, acetic acid, and water (19∶5∶5) as developing agent, dried and sprayed with indene ketone solution, heated at 105 ℃, was used to identify radix isatidis. The test results showed that under the test condition, the target spot was clear, with no tail, and the experiments were specifically suited in this test with strong specificity and good reproducibility.     

白花草木樨与燕麦混合青贮的研究

试验设置了单贮白花草木樨(Melilotus albus)、单贮燕麦(Avena sativa)、70%白花草木樨和30%燕麦混贮、50%白花草木樨和50%燕麦混贮与30%白花草木樨和70%燕麦混贮5个处理组,贮后分别测定其发酵品质和化学成分,由此找出白花草木樨和燕麦混合青贮的最佳比例.结果表明,单贮白花草木樨的pH值...     

四黄止痢颗粒中几种有效成分的薄层鉴别研究

为建立和完善四黄止痢颗粒的质量标准,本试验采用薄层色谱法对四黄止痢颗粒中的黄连、黄柏、大黄、黄芩、板蓝根进行鉴别,对展开剂、展开温度、展开湿度、薄层板来源、薄层板批号、显色条件等因素进行考察。试验以环己烷－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水－三乙胺（3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1）为展开剂,置氨蒸气预饱和的展开缸内展开,置紫外光灯（365 nm）下检视鉴别黄连、黄柏;以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）为展开剂展开,喷以2%三氯化铁乙醇溶液检测黄芩的存在;以正丁醇-冰醋酸-水（19∶5∶5）为展开剂展开,热风吹干后喷以茚三酮试液,在105 ℃加热检视鉴别板蓝根。试验结果表明,在考察条件下,目标物斑点清晰、无拖尾,阴性对照无干扰,方法专属性强,重现性好。     

小花棘豆与玉米混贮微生物特性及脱除苦马豆素乳酸菌的筛选

旨在探讨小花棘豆与玉米按不同比例混贮对微生物特性及乳酸菌多样性影响,挖掘具有脱除苦马豆素活性的乳酸菌,为小花棘豆青贮饲料的开发利用提供理论参考。以小花棘豆和全株玉米为原料,按不同比例10:0(T₁)、9:1(T₂)、8:2(T₃)7:3(T₄)、6:4(T₅)、5:5(T₆)、4:6(T₇)、0:10(T₈)混合青贮,室温发酵60 d,检测青贮前、后微生物种类、数量变化,鉴定分离出的乳酸菌,并测定其对苦马豆素的脱除率。试验结果:1)原料中乳酸菌数量随着玉米混入量的增加逐渐升高,青贮饲料各处理间乳酸菌数量无显著差异;原料中的肠细菌各处理间无显著差异,经过青贮发酵后肠细菌均未检测到;好氧细菌数量在原料和青贮饲料中均随着玉米比例的增加逐渐减少;酵母菌数量在各处理间均无显著差异;原料中的霉菌数量随着玉米混入比例增加逐渐增加,而青贮饲料中的霉菌数量均在检出线以下。2)从小花棘豆与玉米混贮的原料中共分离得到乳酸菌菌株4株,经鉴定属于Lactococcus lactis subsp. hordniae、Lactococcus lactis subsp. lactis和Lactococcus taiwanensis 3种;从青贮饲料中分离出乳酸菌菌株9株,经鉴定属于Lactobacillus plantarum subsp. plantarum、Lactobacillus brevis、Lactobacillus pentosus和Lactobacillus amylovorus 4种,当玉米混入比例升高时,原料中乳酸菌多样性有所增加,而青贮饲料中乳酸菌多样性有所下降。3)不同乳酸菌菌株对苦马豆素的脱除率均高于85%,其中菌株JD6E、JD4D、JD10D、JD2E和JD1F对苦马豆素的脱除率高达100%。经过热处理后,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的脱除率分别为100%和97.76%,而其他菌株对苦马豆素的脱除率下降31.76%~100%,其中菌株JD6D和JD1E经过热处理后对苦马豆素的脱除率分别下降到2.17%和0。结果表明,小花棘豆与玉米混贮可以增加青贮原料中乳酸菌的数量及多样性,降低青贮饲料和原料中好氧细菌的数量,有助于提高青贮成功率;乳酸菌对苦马豆素具有良好的脱除效果,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的吸附脱除作用最强,而菌株JD6D和JD1E对苦马豆素的降解作用最强,均可用作小花棘豆青贮脱除苦马豆素的发酵菌株。     

绵马贯众药材的快速多信息薄层鉴别方法研究

为建立快速多信息薄层鉴别方法,采用薄层色谱,分别以三氯甲烷-乙酸乙酯-浓氨试液(10∶1∶0.1)、环己烷-乙酸乙酯-甲酸(12∶2∶0.2)、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(4∶2∶4∶0.5)和三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(1∶2∶4∶0.5)为展开剂,通过紫外光灯365 nm、254 nm、日光和灯光检视,共检出绵马贯众脂溶性、中极性和水溶性成分斑点18个。该方法简便、快捷、实用,可多指标、快速控制绵马贯众药材的质量,辨别其真伪。     

薄层色谱和液相色谱法鉴别中兽药散剂中掺加的磺胺喹噁啉钠

对磺胺喹噁啉钠采用硅胶GF254板为固定相,以正丁醇-浓氨水(15∶3)为展开剂,用薄层色谱鉴别中兽药散剂中磺胺喹噁啉钠分离较好,斑点显色清晰且无干扰,可用于中药散剂中非法添加物磺胺喹噁啉钠的快速筛选。采用C18柱为固定相,以甲醇-乙腈-水-冰乙酸(2∶2∶9∶0.2)为流动相,紫外检测波长为270 nm。液相色谱鉴别中药散剂中非法添加磺胺喹噁啉钠分离良好,无干扰峰,可用于中兽药散剂中非法添加物磺胺喹噁啉钠的鉴别。