α-乳白蛋白与β-酪蛋白预防炎症的协同作用研究

牛乳中酪蛋白比例高,而母乳中乳清蛋白含量高,α-乳白蛋白、β-酪蛋白作为母乳中主要的乳清蛋白和酪蛋白,以α-乳白蛋白和β-酪蛋白为研究对象,利用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应,探究不同比例的组合蛋白对细胞炎症的预防作用,探索乳清蛋白和酪蛋白的最佳配比,使婴配粉更贴合母乳。结果表明,添加α-乳白蛋白和β-酪蛋白单体能改变炎症因子mRNA和蛋白水平的表达,然而当混合比例为1:0.17时效果最佳,能显著降低白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、髓样分化基因88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)在mRNA水平的表达,在蛋白水平降低IL-6 1.99倍、白介素1β(IL-1β)3.91倍、肿瘤坏死因子α(TNF-α)2.72倍。通过抑制非TLR4介导炎症信号通路关键蛋白NF-κB p65的磷酸化抑制炎症的发生。本研究明确了α-乳白蛋白和β-酪蛋白预防炎症发生的最佳比例,初步阐明了两者协同抗炎的作用机理,为其在婴幼儿配方奶粉中的精准添加提供理论支持和技术指导。     

奶牛乳蛋白基因多态性研究进展

乳中蛋白质由酪蛋白和乳蛋白组成。酪蛋白包括αs1-酪蛋白(αs1-Casein,αs1-CN)、αs2-酪蛋白(αs2-Casein,αs2-CN)、κ-酪蛋白(κ-Casein,κ-CN)和β-酪蛋白(β-Casein,β-CN)).     

青海本地黄牛乳蛋白的多态性

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对 84头青海本地黄牛的 4种乳蛋白多态性进行了研究。结果发现 :( 1 )α -乳白蛋白、β-乳球蛋白、αs1-酪蛋白和 β-酪蛋白等 4种乳蛋白都存在多态性 ;( 2 ) 4种乳蛋白的平均基因杂合度为 0 .2 0 0 8;平均基因均质度指数为 0 .62 82 ,平均有效等位基因数为 1 .2 869;( 3 )在青海本地黄牛中发现一个新等位基因αs1-CNE     

α-酪蛋白和κ-酪蛋白基因型对Murciano-Granadina山羊乳成分的影响

研究结果表明,羊的α-酪蛋白的基因多态性影响乳的品质;但是κ-酪蛋白的基因型是否影响乳的组成还知之甚少。并且α-酪蛋白和K-酪蛋白基因型的交互作用也研究较少。因此,本试验选择89头Murciano-Granadina山羊旨在研究α-酪蛋白和κ-酪蛋白基因型与乳品质之间的关系。在Murciano-Granadina山羊316 d的泌乳期内,每隔一周测定一次乳产量、总蛋白、乳脂肪、非脂固形物、乳糖、αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白等的含量。结果表明,αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白基因型之间没有交互作用。与κ-酪蛋白的AA基因型相比,κ-酪蛋白的AB和BB基因型显著影响乳中总蛋白和蛋白质分数。并且试验结果与法国在山羊品种上的试验结果不同,本试验结果证明,αs1基因型不影响乳蛋白、酪蛋白和脂肪的含量。生产上当考虑山羊乳的成分时,应对κ-酪蛋白基因型引起足够的重视。     

驴乳和牛乳蛋白热稳定性的研究

通过对驴乳和牛乳采取4种不同的热处理研究,比较了不同的加热方法对驴乳和牛乳中蛋白质稳定性的影响。结果发现,驴乳的乳清蛋白在60℃已经完全变性,驴乳酪蛋白的变性温度介于90~100℃,变性温度比较窄,而牛乳的酪蛋白的变性温度比较高。研究表明,驴乳乳清蛋白的变性温度低于60℃,驴乳中的α-乳白蛋白相对较多,而β-乳球蛋白较少,牛乳则相反。相比较而言,驴乳的酪蛋白和乳清蛋白的变性率较高,而牛乳的热稳定性更好。说明控制温度和时间可获得不同变性程度乳制品。     

奶牛乳蛋白基因的研究进展

奶牛被称为“人类的保姆”,牛奶是能为人类提供最优质、最完善的营养物质之一。而乳中蛋白质直接决定着乳制品的品质和风味。研究发现乳中蛋白质主要有两类：酪蛋白和乳清蛋白,两者占乳中蛋白质总量的95％,酪蛋白包括αS1,酪蛋白（αS1-CN）、αS2-酪蛋白（αS2-CN）、β-酪蛋白（β-CN）、 κ-酪蛋白（κ-CN）;乳清蛋白包括α-乳清蛋白（α-La）、     

漏芦乙醇提取物对奶山羊乳腺上皮细胞乳成分合成的影响

以体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞为模型,利用β-酪蛋白、甘油三酯及乳糖/半乳糖检测试剂盒测定漏芦乙醇提取物处理的乳腺上皮细胞培养液中β-酪蛋白、甘油三酯和乳糖含量;采用荧光定量RT-PCR检测β-酪蛋白、甘油三酯和乳糖合成代谢相关酶和蛋白因子mRNA表达的变化。结果显示,25、50、100μg/ml的漏芦乙醇提取物以浓度依赖的方式显著提高乳腺上皮细胞合成分泌β-酪蛋白、甘油三酯及乳糖含量(P<0.05)及乳腺上皮细胞中乳成分合成代谢相关酶和蛋白因子的mRNA表达水平(P<0.05)。实验结果表明漏芦乙醇提取物能促进奶山羊乳腺上皮细胞合成分泌β-酪蛋白、甘油三酯和乳糖,并能提高乳腺上皮细胞乳成分合成代谢相关酶和蛋白因子的基因表达,进而影响奶山羊乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂和乳糖的合成。     

高效液相色谱法同时测定巴氏杀菌乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白

建立巴氏杀菌乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白的高相液相色谱分析方法。样品经水稀释、调节pH值至4.6沉淀酪蛋白，过滤后采用Xbridge Protein BEH C4柱分析，经体积分数0.1%三氟乙酸-水溶液、体积分数0.09%三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脱、紫外检测器检测、外标法定量。结果表明：α-乳白蛋白在10～500 mg/L质量浓度范围内线性良好，相关系数为0.999 87；当牛乳中α-乳白蛋白加标量为200～1 032 mg/L，加标回收率为97.9%～104.0%、相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为0.00%～1.09%；β-乳球蛋白在20～900 mg/L质量浓度范围内线性良好，相关系数为0.999 96；当牛乳中β-乳球蛋白加标量为600～4 727 mg/L，加标回收率为96.1%～103.0%、RSD为0.00%～2.23%。该方法分离效果好、重复性好，适用于巴氏杀菌乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的准确定量。     

乳制品中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白含量的测定

本检测方法在已有检测方法资料的基础上,通过改变柱温和梯度洗脱条件,提高A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白的分离效果,以便更好的分析乳制品中A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白的含量.本检测方法使用盐酸胍、二硫苏糖醇使β-酪蛋白变性,流动相选择B(乙腈),A(0.1％三氟乙酸水溶液),流速0.5 mL/min,梯度洗脱,柱温50℃...     

羊奶乳清蛋白的分离方法研究

乳清蛋白得率是衡量羊奶乳清分离效果的重要指标之一。本文研究了15种分离羊奶乳清蛋白的方法,为有效提取羊奶中乳清蛋白提供理论参考。通过分析乳清蛋白组分中α-乳清蛋白、β-乳球蛋白的含量,以及检测酪蛋白和αs1-酪蛋白残留量,发现"离心法+等电点法"效果最好,α-乳清蛋白留存率为74.95%,β-乳球蛋白留存率为48.64%,酪蛋白去除率达63.9%;进一步研究发现αs1-酪蛋白去除率达到14.9%。这些试验结果证实,"离心法+等电点法"的复合方法是一种有效分离羊奶乳清蛋白的科学方法,可应用于实际生产。     

羊乳蛋白质组成及消化特性

应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和体外模拟消化研究羊乳蛋白质组成和消化特性。结果表明：羊乳蛋白质主要由酪蛋白和乳清蛋白组成,酪蛋白主要由αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白组成,在酪蛋白中的相对含量分别为23.10%、30.39%、38.09%和8.42%;乳清蛋白主要由α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白组成,在乳清蛋白中的相对含量分别为24.59%、57.50%、4.35%、8.69%和4.88%;羊乳酪蛋白主要在肠液中消化,在胃液中消化120 min时     

Comparison of milk protein composition in a Swedish and a Danish dairy herd using reversed phase HPLC

Abstract

The milk composition in a Swedish herd, consisting of Swedish Red and White cows (SRB) and Swedish Holstein cows (SLB), and in a Danish herd, consisting of Danish Holstein-Friesian cows (SDM), was evaluated. Concentrations of the major milk proteins (κ-casein, α_S1-casein, β-casein, β-lactoglobulin A, β-lactoglobulin B and α-lactalbumin) of 134 individual milk samples were determined by reversed phase (RP) HPLC. Other parameters determined included milk fat, urea, lactose, calcium, lactoferrin, somatic cell count and protein degradation (determined as level of free amino-terminals). Analysis of variance was used to compare concentrations of analysed milk variables between SRB and SLB or between SLB and SDM. Concentration of total protein, total casein, β-casein and κ-casein were significantly higher in SRB milk compared with SLB milk. Concentration of α-lactalbumin and calcium were significantly higher in SDM milk than in SLB milk. The concentration of urea was higher in SLB than in SDM milk and is suggested to reflect differences in feeding regimes between the investigated Swedish and Danish herd.     

乌兰县黄牛乳蛋白的多态性

对青海省乌兰县 74头黄牛的 4种乳蛋白的多态性进行了研究。结果发现 :①α 乳白蛋白 ,β 乳球蛋白 ,αS1 酪蛋白和 β 酪蛋白都存在多态性 ;②乌兰本地黄牛乳蛋白的多态性特征与杂种黄牛相似 ;③在乌兰本地黄牛的 β 乳球蛋白基因座上发现罕见的等位基因 β LGD。     

不同乳制品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的测定

建立高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳和婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法。样品中加入超纯水溶解,经过二硫苏糖醇和碘代乙酰胺溶液反应打开二硫键并保护巯基后,加入胰蛋白酶溶液进行酶解,反应结束后用乙腈水溶液定容,离心,移取上清液待测,外标法定量。结果表明：α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白标准曲线在0～100 μg/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995;α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白在生乳中的平均加标回收率为93.5%～117.1%,相对标准偏差为1.4%～6.7%。该方法前处理操作简便,分析速度快,灵敏度高,可用于牛乳和乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量测定。     

市售婴幼儿乳粉中乳清蛋白的胃肠消化稳定性及其抗原性评估

牛乳含有丰富的蛋白质、脂肪等营养素，是婴幼儿重要的营养来源，牛乳蛋白也是诱发婴幼儿食物过敏的 主要因素之一。对5 种市售婴幼儿乳粉进行体外模拟静态消化，通过电泳、水解度测定分析蛋白消化稳定性，并利 用间接竞争酶联免疫吸附实验评价乳清蛋白的抗原性。结果表明：5 种配方乳粉中，α-乳白蛋白和β-乳球蛋白在样 品1、2、4中具有较好的消化稳定性，胃肠消化后，样品1中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性降低，样品2中2 种过 敏原蛋白的抗原性增加，样品4中α-乳白蛋白的抗原性增加，β-乳球蛋白的抗原性降低；α-乳白蛋白和β-乳球蛋白在 样品3和5中消化稳定性较低，经胃肠消化后，样品5中2 种过敏原蛋白的抗原性增加，样品3中α-乳白蛋白的抗原性 增加，β-乳球蛋白的抗原性降低。     

九龙藏黄牛乳蛋白的组成及遗传多态性研究

本研究旨在了解生活在高海拔地区的藏黄牛乳的生化组成特点。试验测定了43头九龙藏黄牛乳蛋白含量、乳蛋白组成和酪蛋白多态性。藏黄牛乳蛋白含量低,仅约为29 g/L;电泳分析结果显示,脱脂乳蛋白组成与普通牛乳接近,主要包括酪蛋白、α-乳清蛋白和β-乳球蛋白等组分,β-Lg与α-La含量的比值低于牦牛;酪蛋白的相对含量约为70%,主要包含α_s-CN和β-CN,二者分别检测到3和2种基因型。研究结果表明,九龙藏黄牛乳的组成与生活在类似生态环境中的九龙牦牛存在差异。     

中国水牛乳蛋白基因型与酪蛋白胶束粒度的关联研究

本研究旨在分析中国水牛乳蛋白各亚型与乳蛋白粒径的关联。采用反向高效液相色谱法对160头泌乳中期的水牛进行多态性测定,并利用激光粒度仪分析水牛乳蛋白的粒径。结果显示:αs1-酪蛋白(αs1-CN)、β-酪蛋白(β-CN)和α-乳白蛋白(α-LA)存在A型和B型2种基因型,κ-酪蛋白(κ-CN)有A型、B型、C型和D型4种基因型,αs2-酪蛋白(αs2-CN)和β-乳球蛋白(β-LG)没有发现多态性。κ-CN和αs1-CN各亚型在乳蛋白面积平均径(D[3,2])上有显著差异,筛选出的6种αs1-β-κ-CN复合基因型在乳蛋白面积平均径(D[3,2])以及中位径(D50)上差异显著。综上,水牛αs1-β-κ-CN复合基因为AB-BB-AB型以及κ-CN的C等位基因均与乳蛋白粒度存在显著关联。     

青海柴达木黄牛乳中4种乳蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对106头柴达木黄牛乳汁中4种乳蛋白的多态性进行了研究，结果发现：（1）α-LA，β-LG，αS1-CN和β－CN都存在多态性；（2）4种乳蛋白的平均有效等位基因数为1．375个，平均基因杂合度为0．2334，平均基因均质指数为0．607；（3）在β-LG基因座上发现罕见等位基因β-LG^D，在β－CN基因座上发现新等位基因在β－CN^F。