不同佐剂免疫原对猪旋毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７ 日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂（ＦＣＡ） 、白油司班佐剂、ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原，对试验猪腹腔注射免疫３ 次，每次间隔７ｄ ，每头猪的免疫剂量为０５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ 攻击感染旋毛虫肌幼虫２００ 条／ｋｇ 体重。于感染后第３５ｄ 和第１２０ｄ 剖杀试验猪，用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。结果４ 种佐剂免疫猪肌幼虫的减虫率分别为９６１２ ％ 、８７９７ ％ 、８９８４ ％ 和９５１５ ％ ，其中以ＦＣＡ 和蜂胶佐剂免疫组的保护作用最好。表明４ 种佐剂均具有免疫增强作用，而蜂胶佐剂在乳化程序、注射、价格及免疫增强作用等方面都优于其它佐剂，更具有开发应用前景。     

猪旋毛虫病疫苗的研制及免疫试验

以肠旋毛虫和新生幼虫研制的混合性旋毛虫病油佐剂疫苗，对１１８头不同体重猪进行了免疫试验。其中肌肉注射免疫猪１０８头，间隔２０～２５ｄ，免疫２次；腹腔注射免疫猪１０头，间隔９ｄ，免疫３次。免疫后经过一定时间，给每头免疫猪人工攻击活旋毛虫５００条，攻虫后经过１．５～８个月分批次剖检免疫猪，采取咬肌、肋间肌、膈肌、腰肌、后腿肌５个部位的肉样镜检。结果，有７头试验猪共检出已经死亡的旋毛虫９条，其余１１１头免疫猪均未检出旋毛虫，免疫保护率达９４％；疫苗免疫期半年左右；剖检证实，疫苗吸收良好，在注射部位仅见米粒大黄白色疫苗残留物；免疫猪未发现不良反应，安全性好。     

猪、犬旋毛虫成虫免疫原性试验

通过提取猪、犬旋毛虫成虫抗原，制备成虫油佐剂免疫原，在小鼠体内进行同源特异性免疫试验和交叉免疫试验。试验得到猪旋毛虫成虫抗原同源免疫减虫率为５５．８０％，其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是３５．１１％；犬旋毛虫成虫抗原同源免疫的减虫率为３９．００％，其对猪旋毛虫的交叉免疫减虫率是２４．９６％。试验结果揭示，猪、犬旋毛虫成虫具有一定的免疫原性，其交叉免疫减虫率低于同源特异性免疫。猪旋毛虫成虫抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫自身的同源特异性免疫差异不显著。     

旋毛虫新生幼虫对猪的免疫保护作用

给大白鼠经口感染７０００￣１００００条肌幼虫后７天剖杀，收集成虫。将７日龄成虫于１９９培养液中３７℃培养４８小时后过滤、离心收集新生幼虫。将冻融灭活的新生幼虫按不同数量与等体积弗氏完全佐剂乳化后按不同免疫程序经腹腔免疫猪。最后１次免疫后第７天攻击感染不同数量的肌幼虫。攻击感染后３５天剖杀全部试验猪，取膈肌脚消化检查，计算每克肌肉的荷虫量（ＬＰＧ）及免疫效力，同时观察免疫后及感染后的血清抗体消长变化     

猪、犬旋毛虫交叉免疫原性的研究

通过在小鼠体内感染猪、犬旋毛虫肌幼虫50条，再用同源免疫和交叉免疫方法攻击感染旋毛虫肌幼虫200条，来检测其肌幼虫的减虫率。试验得到猪旋毛同源免疫的减虫率为87.47%，对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是86.47%，犬旋毛虫同源免疫的减虫率为83.70%，其对猪旋毛虫的交叉免疫是83.46%。试验表明：旋毛虫肌幼虫自然免疫具有较好的免疫保护作用，交叉免疫的保护率低于同源免疫。     

旋毛虫各隔离株某些生物学特性的研究

通过对猪、犬旋毛虫和国际标准隔离：旋毛形线虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ）和本地毛形线虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｎａｔｉｖａ）的研究发现，猪旋志虫和旋毛形线虫在小鼠膈肌中出现保姆细胞的时间比较早，分别于感染第１６ｄ和１８ｄ出现，第３８ｄ和３６ｄ所有幼虫都已形成保姆细胞，而 虫和本地毛形线虫出现保姆细胞的时间较晚，于感染第２０ｄ和２２ｄ出现，第３２ｄ完成形成。猪旋毛虫和旋毛形线虫雌虫     

猪旋毛虫病疫苗后海穴免疫研究

本项目对猪旋毛虫病成虫可溶性抗原疫苗经后海穴免疫注射的效果进行了研究。大鼠经口感染旋毛虫肌幼虫后３或７ｄ剖杀，收集成虫。经超声粉碎、高速离心制备成虫可溶性抗原。将抗原与等体积ＦＣＡ乳化，按０．２５ｍｇ／头及０．５０ｍｇ／头的抗原量分别进行后海穴注射（ＡＰ）及腹腔注射（ＩＰ），免疫猪只，使之经受旋毛虫的实验室攻击感染及自然感染。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原的免疫原性基本一致。采用后海穴注射     

猪旋毛虫病免疫方法的研究

本试验比较了３日龄及７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原的免疫原性，比较了不同佐剂对免疫效果的影响，观察了不同免疫途径对免疫效果的影响及疫苗的免疫持续期。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原免疫猪所诱导产生的免疫力接近，说明免疫原性基本一致。以白油—司班佐剂乳化抗原的免疫效果优于弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）乳化抗原，其减虫率分别为８６．３乏％与７０．２２％２而且白油—司班佐剂苗的粘稠度适中，便于注射。免疫途径对免疫效果的影响，以成虫可溶性抗原经腹腔注射（ＩＰ）的免疫效果优于肌肉注射（ＩＭ）。疫苗保存于４℃６个月不影响其免疫效力。猪免疫接种成虫可溶性抗原疫苗后免疫持续期至少６个月。     

不同免疫制剂对猪旋毛虫病的免疫效果比较

七种旋毛虫免疫制剂对猪进行的免疫试验证明,全虫制剂的每克肌肉含虫数减少率可达46.0％:如加入氢氧化铝佐剂,则减少率可达75.5％。     

猪、犬旋毛虫新生蚴免疫原性试验

将猪、犬旋毛虫新生蚴制备成免疫原,在小鼠体内进行免疫试验,免疫１周后攻击感染肌幼虫,３５日蝗检查肌幼虫的减虫率。结果表明,猪旋毛虫新生蚴的同源免疫和其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率分别为８３．１１％和７９．３９％,犬旋毛虫新生蚴的为８１．３７％和８０．６９％。结果揭示,旋毛虫新生蚴具有良好的免疫原性,同源免疫的减虫率比交叉免疫的高,猪旋毛虫新生蚴抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫新生蚴抗原的同源免疫在减虫率上差异不显著。     

猪旋毛虫病疫苗后海穴免疫研究

本项目对猪旋毛虫病成虫可溶性抗原疫苗经后海穴免疫注射的效果进行了研究。大鼠经口感染旋毛虫肌幼虫后３或７ｄ剖杀，收集成虫。经超声粉碎、高速离心制备成虫可溶性抗原。将抗原与等体积ＦＣＡ乳化，按０．２５ｍｇ／头及０．５０ｍｇ／头的抗原量分别进行后海穴注射（ＡＰ）及腹腔注射（ＩＰ），免疫猪只，使之经受旋毛虫的实验室攻击感染及自然感染。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原的免疫原性基本一致。采用后海穴注射疫苗具有减少抗原用量、增强免疫效果的作用。免疫后猪血清抗体滴度增加，呈暂时的细胞免疫抑制现象。后海穴注射疫苗猪群保护率达１００％，增加一倍抗原量经腹腔注射的猪群保护率为７５．２６％。     

旋毛虫病AcAb快速ELISA诊断盒的应用研究

应用ＭｃＡｂ快速ＥＬＩＳＡ诊断盒，对感染４个旋毛虫隔离种的猪定期检测其血清中抗体出现情况。结果，猪旋毛虫和旋毛形线虫（Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ）在感染２４ｄ后、犬旋毛虫和本地毛形线虫（Ｔ．ｎａｔｉｖａ）３１ｄ后，可在猪血清中检出抗体；在抗体出现时间上前二者较后二者早７ｄ左右。     

猪旋毛虫病疫苗的区域试验

在河南省某县一个猪旋毛虫病高发流行区进行了旋毛虫成虫可溶性抗原疫苗及灭活新生细虫疫苗的区域试验。免疫前用镜检法抽检某自然村商品猪２１头，查出有虫猪４头，感染率达１９．０５％。成虫可溶性抗原疫苗每头腹腔注射免疫０．５ｍｇ，间隔１０天作２次免疫；新生幼虫疫苗每头猪腹腔注射１０万条，同样间隔１０天作２次免疫。两种疫苗分别免疫猪８６及４４头。免疫后４－７个月内剖杀抽检免疫效果。共抽检未免疫自然感染对照猪４     

应用重组抗原预防猪囊虫病

应用２种重组抗原分别制成免疫刺激复合体疫苗各接种试验猪２次,间隔１４ｄ。第２次接种后７ｄ用有钩绦虫卵感染（２×１０４个／头）。感染后１１６ｄ,９头对照猪共发现１０６７个囊虫,平均１１８．６个／头;免疫Ａ组８头试验猪共发现囊虫５１０个,平均６３．８个／头,减虫率为４６．２％;免疫Ｂ组９头试验猪共发现囊虫８３个,平均９．２个／头,减虫率为９２．２％。在免疫Ｂ组猪体内发现的囊虫发育不全,虫体小,囊液少,囊膜较厚、不透明,呈乳白色,囊虫组织呈退行性病理变化,并伴有大量炎性细胞浸润。免疫动态监测发现,试验猪抗囊虫感染的免疫力主要取决于细胞免疫,而与体液免疫无关。试验猪血清循环抗原（ＣＡ）检测结果与剖检所见囊虫数量密切相关（Ｐ＜０．０１）。由此认为,ＣＡ检测是简便易行、效果可靠的现场实用技术。     

旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的应用研究

应用ＭｃＡｂ 快速ＥＬＩＳＡ 诊断盒,对感染了４ 个旋毛虫隔离种的猪定期检测其血清中抗体出现情况。结果,猪旋毛虫和旋毛形线虫（Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ）在感染２４ ｄ 后、犬旋毛虫和本地毛形线虫（ Ｔ．ｎａｔｉｖａ）３１ ｄ 后,可在猪血清中检出抗体;在抗体出现时间上前二者较后二者早７ ｄ 左右。     

旋毛虫各隔离种嗜酸性粒细胞变化的研究

旋毛虫各隔离种感染猪后,其血液中嗜酸性粒细胞显著增多,而其它各类细胞无明显变化,嗜酸性粒细胞于感染后７ｄ开始升高,１６ｄ左右达最高峰,以后逐渐下降趋势;猪旋毛虫和旋毛形线虫的嗜酸性粒细胞数量始终高于犬旋毛虫和本地毛形线虫,嗜酸性粒细胞增多可作为早期诊断旋毛虫病的重要临床指标之一。     

猪,犬感染犬旋毛虫后其嗜酸性粒细胞的变化情况

猪，犬感染犬旋毛虫后，其体内的嗜酸性粒细胞显著增高，而基佗各类细胞无明显变化，嗜酸性粒细胞于感染后第７ｄ开始升高，１４～３５ｄ之间达到高峰，以后呈逐渐下降趋势，但仍比对照组高，嗜酸性粒细胞的增多可作为早期诊断旋毛虫病的重要临床指标之一。     

多拉菌素对猪自然感染寄生虫的治疗效果

本文报道多拉菌素按公斤体重３００μｇ肌注对猪自然感染发生的线虫病和螨病的治疗效果。对２０头感染有肺和消化道线虫和２２头感染猪疥螨的猪进行治疗试验，将试验猪只随机分为多拉菌素加生理盐水组和生理盐水组。对抗蠕虫试验的猪，在用药后的第１４，１５ｄ宰杀，剖检收集虫体，对杀螨试验的猪，在用药治疗后的２８ｄ内，即杀螨试验的猪，在用药治疗后的２８ｄ内即用药当天，用药后的第７，１４，２１和２８ｄ收集螨计数。     

各旋毛虫隔离种某些生物学特性研究

通过对猪、犬旋毛虫和国际标准隔离种：旋毛形线虫（Trichinella spiralis)和本地毛形线虫（Trichinella nativa)的研究发现，猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠隔肌中出现保姆细胞的时间比较早，分别于感染第16天和18天出现，第38天和36天所有幼虫都已形成保姆细胞，而犬旋毛虫和本地毛形线虫出现保姆细胞的时间较晚，于感染第20天和22天出现，第32天完全形成。猪旋毛虫和旋毛形线虫雌虫体外培养24小时平均产新生幼虫数分别为66．0和76．2，而犬旋毛虫和本地毛形线虫分别是28．8和22．0，前二者在雌虫体外产新生幼虫能力上明显高于后二者。研究结果表明，黑龙江猪旋毛虫为旋毛形线虫，犬旋毛虫为本地毛形线虫。     

猪带绦虫六钩蚴45W-4B重组蛋白的免疫原性研究

目的观察猪带绦虫六钩蚴45W-4B抗原对仔猪的免疫保护作用。方法用IPTG诱导表达融合蛋白GST-45W-4B。用GST柱进行纯化，以Montanide ISA 206为佐剂制成疫苗免疫仔猪。间接ELISA检测仔猪血清抗45W-4B IgG抗体水平，MTT法进行外周血淋巴细胞殖试验。免疫1个月后全部实验组经口攻击感染25000彬头猪带绦虫虫卵，攻虫3个月后剖检，计算减虫率及保护率。结果免疫组注射疫苗的第2周起，抗体为阳性，45W-4B组持续升高至第8周，淋巴细胞增殖明显高于未免疫感染组。用该抗原制备的疫苗获得了95％的减虫率和33％的保护率。结论该抗原对猪囊尾蚴病具有很好的免疫保护作用。