醛化人“O”型红细胞的制备及其在兔出血症HA／HI试验中的应用

在兔出血症的检测和免疫监测中,血凝／血凝抑制试验（HA／HI）是常规有效的检测方法。针对人“O”型新鲜红细胞存在质脆易碎、保存期短的缺点,从醛化人的“O”型红细胞制备方法的优化、工作浓度、保存时间三个方面进行研究,并用于兔出血症的HA／HI试验,同时以新鲜的人“O”型红细胞作为对照。结果表明：经戊二醛-甲醛二次醛化的红细胞的醛化效果与只用戊二醛醛化的红细胞效果差异不显著,均优于甲醛醛化效果,且经戊二醛-甲醛二次醛化或戊二醛醛化后的红细胞不溶血,性质不变,易保存;在兔出血症HA/HI试验中,经戊二醛醛化人“O”型红细胞的试验效果与新鲜红细胞差异不大,结果稳定性好。     

“兔瘟”红细胞诊断液的研制

诊断“兔瘟”的醛化人“O”型红细胞可长期保存;提出了病料处理方法,消除了非特异性反应;醛化的与新鲜的人“O”型红细胞诊断液效果相当。“兔瘟”病毒具有凝集人“O 型”红细胞的特性,但使用新鲜的红细胞多为不便。为此,本文就醛化红细胞的使用效果及病料处理方法进行了研究,现报告如下。     

用于“兔瘟”HA试验的冻干醛化红细胞的研制

冻干醛化红细胞与新鲜人O型红细胞对“兔瘟”的诊断效果一致,两者呈显著正相关(r=0.9506)。冻干醛化红细胞4℃保存10个月,比在相同条件下保存的醛化红细胞悬液的HA效价高3个滴度。     

豚鼠醛化红细胞在人流感病毒血凝活性测定中的应用

在流感疫情监测中,血凝试验是最常用的检测方法.针对鸡红细胞不能凝集流感病毒"O"相毒株,新鲜红细胞需现采现配、麻烦、费时,易溶血、不易保存等问题,本试验对豚鼠醛化红细胞制备方法的筛选和制备条件的优化进行研究,并以新鲜豚鼠红细胞为对照,用于流感病毒不同型别血凝试验.结果表明,戊二醛固定法制备的豚鼠醛化红细胞不溶血、结果稳定性好、保存期长、血凝活性与新鲜豚鼠红细胞基本一致,可以替代新鲜豚鼠红细胞用于血凝试验.     

鸡醛化红细胞在鸽Ⅰ型副粘病毒HA和HI试验中的应用

在血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中，传统的方法采用新鲜红细胞。由于新鲜红细胞容易破碎，保存时间短，每次试验需临时准备，使用很不方便。本文采用醛化红细胞进行鸽1型副粘病毒的HA和HI试验，并与新鲜红细胞进行对照，结果表明，两种红细胞在鸽1型副粘病毒的HA和HI试验中的结果基本一致，而使用醛化红细胞更为便利。现将结果报道如下。1材料与方法l．l鸽1型副粘病毒（鸽A／PMV－1）；鸽A”MV－IZH株由本室鉴定保存，在9－11日龄鸡胚培养后收获尿囊液无菌检查后置4C保存备用。用于HI试验的病毒经0．2％甲醛37C灭活24小时后置…     

醛化非免疫公鸡红细胞在鸡新城疫HA试验中的应用

使用非免疫公鸡的经醛化后的红细胞和新鲜红细胞进行NDV微量HA对比试验证明,符合率达到92.4%,保存9个月时仍然有效,应用醛化红细胞将使HA试验更加简便,易行,由于醛化红细胞保存期可达一年而使该诊断液商品化成为可能。     

禽大肠杆菌间接血凝抗体测定中致敏红细胞的选择

采取健康公鸡血液，提取红细胞，以禽病原性大肠杆菌O78-166分离的LPS分别致敏新鲜红细胞和醛化红细胞，置4℃下保存，在致敏后1-8d，应用上述致敏红细胞分别测定6个O78-166免疫鸡阳性血清，以比较上述红细胞的敏感性和有效使用期。结果表明：以LPS致敏的新红细胞做定量试验较为精确，以LPS致敏的醛化红细胞做大肠杆菌定性试验较为快捷。方便。     

人的各型红细胞用于“兔瘟”凝集反应诊断

在常规“兔瘟”凝集反应诊断中,都是采用人“O”型红细胞。笔者使用了“A”型、“B”型、“AB”型人的红细胞悬液作凝集反应,结果表明,“兔瘟”病毒对人的各类血型红细胞的凝集作用没有严格的选择性,红细胞悬液和全血的结果都是一致的。通过凝集与凝集抑制试验的检验,病毒对人不同血型红细胞的凝集现象均能被特异性的免疫血清所抑制。操作方便、取血方便、实用性强,敏感性高,但还有待进一步积累数据深入探讨。     

间接血凝试验测定猪弓形体病抗体若干因素的探讨

1、鞣酸处理绵羊红细胞可提高与抗原的亲和力,提高致敏效果。2、不同固定剂处理红细胞的效果以戊二醛-丙酮醛最好,双醛固定次之。但双醛固定法所用试剂均系国产,因此仍可作为较理想的固定方法。3、致敏条件以pH3.3～4.8,温度36～38°C,致敏时间以60分钟为适宜。4、一步法与二步法的致敏效果相同,一步法操作简便。5、在9～15°C冰箱保存下,双醛和戊二醛-丙酮醛固定绵羊红细胞可使用3个月;致敏红细胞可使用40天。6、间接血凝试验对检出弓形体抗体具有特异性。     

醛化鸡红细胞在新城疫病毒检测中的应用

鸡红细胞可以被多种病毒所凝集,因此可用以检测多种病毒,尤其在新城疫病毒(NDV)的检测中更为常用。过去,检测NDV的HA和HI试验皆使用新鲜的鸡红细胞,常因红细胞表面吸附的免疫球蛋白等物质洗涤不彻底而影响试验结果。醛化红细胞不易破碎,保存时间长,并可消除不同个体间红细胞的差异对试验的影响。水文就应用醛化鸡红细胞代替新鲜鸡红细胞在NDV检测中的效果进行了研究。     

猪红细胞醛化及其在犬细小病毒血凝试验中的应用

为了克服犬细小病毒血凝检测因随时需要新鲜猪红细胞而不能在临床广泛应用的缺点,试验用戊二醛醛化猪红细胞进行犬细小病毒血凝试验(HA)。结果表明:醛化后的红细胞不变形,结构完整,细胞膜的硬度增加,细胞不易破碎。1%醛化猪红细胞比1%新鲜猪红细胞检测结果低1~2个效价,结果容易判读,且具有检测的特异性,准确性。说明醛化的猪红细胞可以代替新鲜猪红细胞进行血凝检测。     

在鸡新城疫HA和HI试验中使用醛化红细胞的试验观察

长期以来,在鸡新城疫(ND)血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验中均使用新鲜鸡红细胞,由于这种新鲜红细胞保存时间短,使用之前临时采血洗涤,费时又不方便;同时因不同批次或不同鸡只个体红细胞的差异而影响检测结果。而醛化红细胞具有保存时间长(一年左右)、不溶血、不易破碎和使用方便等优点。笔者在鸡新城疫 HA 和 HI 试验中使用醛化红细胞替代新鲜红细胞进行了试验观察,获得满意的效果,现报告如下。     

应用反向间接血凝法(IHA)检测冻兔肉产品中兔出血症病毒的研究

兔出血症病毒的常规检测方法是血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验,此法所用新鲜人红细胞均需用前洗涤,较为不便,为此,我们选用双醛化绵羊红细胞做成抗体致敏红细胞以代替新鲜的人红细胞,以利测毒技术的推广应用。一、材料和方法(一)材料1.兔的肌肉及骨髓检测材料由邳县肉联厂提供。2.双醛化绵羊红细胞由南京农业大学兽医微生物教研组或江苏省农科院兽医所提     

ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

用人“O”型红细胞吸附解脱法提纯制备的兔出血症病毒抗原,成功地建立了ELISA检测兔出血症病毒抗体的方法。实验证明,该ELISA方法敏感、特异,与HI试验结果有极好地相关性。     

醛化鸡红细胞应用于鸡新城疫的诊断和抗体检测

将新鲜鸡红细胞经戊二醛处理后，制成醛化鸡红细胞。该醛化鸡红细胞具有特异性，不发生自凝，保存期可达半年以上，和阴性尿囊液不发生凝集，与新工细胞同时用于血球凝集和血球凝集抑制试验，对疑似鸡新城疫病料和待检测血清进行检测，结果在ＨＡ试验中，新鲜鸡红细胞比醛化鸡红细胞高１－３个滴度，而在ＨＩ试验中，两种红细胞所得结果基本一致，有的则醛化对外开放红细胞比新鲜鸡红细胞高１－２个滴度。由此说明，醛化鸡红细胞完全     

不同醛化方法制备的鸡红细胞对新城疫病毒的血凝对比试验

在血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验中,由于新鲜红细胞容易破碎,保存时间短,每次试验需临时准备,使用很不方便。本文采用醛化红细胞进行新城疫的HA试验,并与新鲜红细胞进行对照。结果表明两种红细胞在新城疫的HA试验中的结果基本一致,效果良好。     

应用免疫酶组化染色法快速诊断“兔瘟”的研究

免疫酶组化染色法诊断“兔瘟”具有特异性强、重复性好、方便快速的优点,与血凝试验的阳性符合率为100%,是便于基层推广应用的有效方法.目前用于诊断“兔瘟”的方法较多,临床上都利用兔瘟病毒具有凝集人红细胞的特性而应用血凝(HA)、血凝抑制(HI)试验及平板凝集试验。尽管这些方法简便、快速,但人红细胞购买不便、保存期短.难以做到标淮化,不利于在基层推广。为此,我们利用免疫酶组化染色法来诊断兔瘟.试验表明,该法简便、准确、稳定,是适用于基层的有效方法.     

对血凝试验用鸡红细胞保存条件的探讨

对血凝试验所用的鸡红细胞的保存条件进行了比较。在新鲜红细胞液中加入甘油或尿素可以延缓细胞破裂溶血。鸡红细胞经戊二醛处理后，于4℃保存9个月，其凝集特性未发生变化，同时在醛化红细胞中加入甘油更能稳定血凝活性。在4℃、室温和37℃条件下将制备的新鲜红细胞和醛化红细胞用作血凝试验的指示剂，不影响新城疫病毒抗原血凝滴度。结果表明，所制备的醛化鸡红细胞的甘油悬液可以替代新鲜红细胞用于临床实践中新城疫的血凝和血凝抑制试验测定。     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱的研究

用家兔A型魏氏梭菌培养液处理的6株鸡传染性支气管炎病毒,以方阵试验分别与人O型红细胞及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、麻雀、小鼠等8种动物的红细胞作血凝试验,结果证明,鸡传染性支气管炎病毒H_(120)株和M_(41)株均能凝集人O型以及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、小鼠的红细胞,而不能凝集麻雀的红细胞;GIBV株和Connecticut株能凝集人O型以及免、鸡、鹌鹑、麻雀的红细胞,而不能凝集猪、羊、鸭、小鼠的红细胞;Gray株能凝集兔、鸡、鹤鹑的红细胞,不能凝集人O型以及猪、羊、鸭、麻雀、小鼠的红细胞;而经家兔A型魏氏梭菌培养液处理的T株和未经处理的6株病毒对人O型以及8种动物的红细胞都没有凝集性。试验还证明,M_(41)株和H_(120)株对人O型及8种动物的血凝活性水平有差异。