HPLC法测定松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇

目的:建立松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇的测定方法。方法:采用HPLC法,甘露醇的色谱柱为SUGAR SC1011柱(300 mm×8 mm,6μm),超纯水作流动相,流速0.5 mL/min,柱温70℃,示差折光器检测。麦角甾醇的色谱条件为汉邦ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇作流动相,流速1.0 m L/min,检测波长282 nm,柱温30℃。结果:甘露醇在6.26~18.78μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=16708X-2601,r=0.9999,平均加样回收率为98.89%,RSD值为1.67%。麦角甾醇在0.2096~1.4672μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=1.2E+6X-37700,r=1,平均加样回收率为98.56%,RSD值为0.97%。结论:研究的方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性,可作为松杉灵芝菌丝体中甘露醇和麦角甾醇含量质量控制的定量方法。     

高效液相色谱测定灵芝孢子油番茄红素复合制剂中麦角甾醇含量的方法及验证

建立了用高效液相色谱分析灵芝孢子油番茄红素复合制剂中麦角甾醇的方法。采用ZORBAX Eclipse Plus色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，以甲醇为流动相，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长为282 nm。方法学验证结果表明，麦角甾醇在1.01～100.75 mg·L^-1内呈良好的线性关系，R²为0.999 9，样品加标平均回收率为102.26%,RSD为1.28%。该方法简便，精密度和稳定性良好，可为灵芝孢子油番茄红素复合物制剂及其相关产品的质量控制方法提供参考。     

美发网菌子实体和原质团中甾醇类物质含量测定方法研究

建立利用高效液相色谱测定美发网菌子实体和原质团中麦角甾醇和豆甾醇含量的方法。麦角甾醇含量测定色谱条件:岛津Inerlsil ODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇为流动相;检测波长为281 nm;流速为1 mL·min~(-1);柱温为28℃;进样量为10μL。豆甾醇含量测定色谱条件:汉邦ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(96:4)为流动相;检测波长为204 nm;流速为0.8 mL·min~(-1);柱温为35℃;进样量为10μL。麦角甾醇在进样量0.2004μg~0.8016μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=1E+06x-9625.3,r=0.9999。豆甾醇在进样量0.0408μg~0.3208μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=4E+06x-37149,r=0.9995。应用高效液相色谱法建立的测定方法可以快速准确地测定美发网菌子实体、原质团中麦角甾醇和豆甾醇的含量,可作为美发网菌质量控制方法。     

HPLC法测定花菇中麦角甾醇含量

目的 建立花菇中麦角甾醇含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱方法,采用Diamonsil (TM)C18分析柱(250×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇,流速1.0 mL/min,检测波长283 nm;柱温25℃；结果 麦角甾醇进样量在2～8 μg之间与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为99.88％,RSD为0.16％.方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性.结论 该方法简便、准确、线性范围宽、灵敏度好,为花菇质量评价提供了可靠依据.     

HPLC法测定猴头菌菌丝体中麦角甾醇含量

从猴头菌菌丝中分离麦角甾醇并建立测定含量的高效液相色谱法（HPLC）。方法：色谱柱为XTerra MSC18（4．6mm×250mm5μm），流动相为甲醇-水（98：2），流速为1．0mL／min，检测波长为284nm，柱温为室温。结果：样品在1．02-10．2mg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0．9999（n=6）。平均加样回收率为106．69％，RSD为0．86％。结论：所建立的方法能够对猴头菌中的麦角甾醇的含量进行测定，方法准确、简便、重现性好，为猴头菌药材质量评价提供了可靠依据。     

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg~0.20μg (r=1)、 6.54 ng~65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg~3.05μg (r=1)、6.54 ng~65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。     

HPLC法测定长柄侧耳中的洛伐他汀含量

对长柄侧耳进行洛伐他汀含量测定,建立其质量控制标准。采用高效液相色谱法(HPLC)测定洛伐他汀含量,色谱柱为Diamonsil ODS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇—0.1%甲酸(90∶10),流速为0.5 mL.min-1,检测波长为237 nm,柱温为42℃。经过方法学考察,洛伐他汀含量测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性,样品在2μg～10μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为100.16%,RSD为1.14%。洛伐他汀的含量为120.7μg.g-1。本方法简便、准确、线性范围宽、灵敏度高,可用于本品的质量控制。     

UPLC测定不同方式干燥的猴头菌中麦角甾醇的含量

以采摘于黑龙江省海林市的猴头菌为研究对象,分别使用自然干燥、加热干燥、真空加热干燥、真空冷冻干燥和微波干燥等方式将其制备成样品,然后用超高效液相色谱(UPLC)-紫外检测法来测定不同干燥方式的样品中麦角甾醇的含量。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相:乙腈,流速:0.3 mL/min,检测波长282 nm,进样体积4μL,以猴头菌中麦角甾醇的含量为指标,分别对提取溶剂、水浴时间和料液比进行了最佳条件优化。结果表明:最佳的提取溶剂为无水乙醇,水浴时间为30 min,料液比为1∶20(g∶mL),其回归方程Y=9609.4X+4955.6,R2=0.9998,平均加样回收率为100.70%,RSD为0.66%。猴头菌经70℃真空干燥方式处理的麦角甾醇含量最高,而采用1.34 KW微波干燥处理的麦角甾醇含量最低,表明了不同的干燥方式会对猴头菌中的麦角甾醇含量有所影响,因而应当根据不同的药用和医疗途径去选择合适的干燥加工方式。     

杏仁中苦味物质的检测方法及苦味物质在杏仁发育过程中的分布研究

建立了一种同时测定苦杏仁的种皮、子叶(种仁)、早期的珠心和胚乳等组织中苦杏仁苷与野黑樱苷含量的高效液相色谱方法。采用甲醇作提取溶剂，超声提取青岛大红杏仁中苦杏仁苷和野黑樱苷，以1∶400(质量∶体积)的料液比、超声提取30 min为适宜的提取条件。采用Agilent poroshell 120 EC-C18色谱柱(2.7μm,4.6 mm×50 mm)，流动相为20%甲醇和80%水，流速0.3 mL/min，检测波长210 nm，在柱温30℃的条件下，苦杏仁苷和野黑樱苷色谱峰分离良好；苦杏仁苷浓度为0.5～100μg/mL线性关系良好，R2=0.999 9，野黑樱苷浓度为0.5～100μg/mL线性关系良好，R²=0.999 7；苦杏仁苷平均加标回收率为98.87%～101.18%，野黑樱苷为97.90%～110.69%。用此方法对青密沙杏仁不同发育阶段不同组织中的苦杏仁苷和野黑樱苷含量进行了检测，结果发现，发育成熟的杏仁子叶组织中苦杏仁苷含量较高，为39.60 mg/g(R4-c)，而发育早期的杏仁中没有检测到苦杏仁苷；与苦杏仁苷不同，除了R4-c，野黑樱苷在杏...     

高效液相色谱法测定苹果、青椒等水果蔬菜中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,色谱柱为HYPERS IL-C18(5μm,250mm×416mm),以乙腈(A)和0.5%磷酸溶液(B)进行洗脱,流速为1.0mL/min;进样量为20μL;检测波长为330nm。结果表明,绿原酸在40~200μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997。平均回收率为99.52%,RSD小于2.0%。采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,方法简便、准确,可以用于绿原酸的检测。     

TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的体系优化

采用薄层层析法(TLC),展开剂为氯仿-甲醇-氨水=8∶2∶0.1;同时采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Ultra IITMC18(5μm×250mm×4.6mm)、流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇(45∶55)、检测波长为216nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为10μL;建立TLC和HPLC同时分离测定苦豆子生物碱体系的优化方法。结果表明:槐定碱和苦参碱在200~900μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,R2分别为0.9994和0.9996。平均回收率(n=9)分别为99.47%和99.82%;试验表明可通过TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子药用成分的质量控制。     

香菇中麦角甾醇提取、表征及抗氧化、降胆固醇特性

采用超声辅助皂化法提取香菇(Lentinula edodes)子实体麦角甾醇，通过单因素实验和正交实验优化提取条件，对麦角甾醇纯化产物表征、光稳定性进行分析，并测定其对羟基、DPPH自由基清除率和降胆固醇活性。结果表明：麦角甾醇最佳提取条件为料液比1∶40 (g:mL)、0.04 g·mL^-1 KOH、超声温度70℃、超声时间70 min，在此条件下麦角甾醇得率为(0.81±0.02)%，麦角甾醇纯化产物纯度为(86.18±3.49)%。与白炽光比较，紫外光照射麦角甾醇纯化产物的存留率显著降低。在实验范围内，1 mg·mL^-1麦角甾醇纯化产物对羟基、DPPH自由基清除率较高，清除羟基、DPPH自由基的IC50分别为(12.96±1.36)、(6.68±0.98) mg·mL^-1。麦角甾醇纯化产物显著降低胆固醇在胶束中的溶解度。研究结果可为香菇麦角甾醇的利用提供参考。     

贵州省刺梨中抗坏血酸含量HPLC测定方法优化

贵州省蕴藏着较丰富的刺梨资源,抗坏血酸是刺梨中主要的活性成分之一。为探究较优高效液相色谱法(HPLC)对贵州省刺梨中抗坏血酸进行含量测定,试验分别对流动相、柱温、流速进行方法优化,确定适用的色谱条件,并进行方法学考察。采用所优化的方法对贵州省刺梨中抗坏血酸进行含量测定,测定结果与食品安全国家标准"食品中抗坏血酸的测定"中第一法HPLC测定所得结果使用配对样本T检验比较两者是否存在差异。结果表明,以流动相为0.05%草酸水溶液与甲醇(98∶2),柱温为25℃,流速为0.7 mL/min,检测波长为245 nm,进样量20μL时,所得测定方法耐用性、专属性、精密度、稳定性、重复性、回收率均较好,刺梨中抗坏血酸含量在0～50μg/mL范围内线性关系良好(R~2=0.999 9)。同时,刺梨中抗坏血酸含量与国标方法所测抗坏血酸含量差异无统计学意义(P0.05)。因此,优化所得HPLC法检测贵州省刺梨中抗坏血酸含量结果准确、可靠,操作简便,适用于贵州省刺梨中抗坏血酸的含量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定食用菌中维生素D_2含量

采用超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLCMS/MS)技术建立食用菌中维生素D_2的测定方法;优化质谱条件中的加速电压及碰撞电压,色谱条件中的色谱柱、流动相及其比例。优化结果如下,加速电压选择120 eV,定量子离子与定性子离子的碰撞电压分别选择22 eV和12 eV,色谱柱选择ZORBAX Eclipse plus C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm),流动相选择甲醇-水,其比例为95:5(v/v)。方法学考察结果表明,在0.1～40μg/mL浓度范围内,维生素D_2的峰面积与其浓度线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为20.0μg/kg,定量限为60.0μg/kg;回收率为77.0%～92.5%,相对标准偏差(relative stardard deviation,RSD)为2.1%～4.9%,方法准确可靠,可满足食用菌中维生素D_2含量的测定需要。对0.5、1.0、1.5、2.0 kJ/m~2不同剂量短波紫外线照射后的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)、糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)和香菇(Lentinus edodes)中维生素D_2的含量进行测定,结果表明4种剂量短波紫外线照射均能显著提高3种食用菌中维生素D_2的含量,在实验范围内,维生素D_2的含量随照射剂量的增加而增加。同一照射剂量处理,糙皮侧耳所含维生素D_2最多,其次为双孢蘑菇、香菇。     

黄花忍冬花中绿原酸的提取及含量的测定

采用索氏提取法提取黄花忍冬花中绿原酸并用HPLC法测定其中的含量.SHI-MADZUC18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为327 nm.结果表明:绿原酸在0.232～3.48μg呈现良好的线性关系,黄花忍冬花中绿原酸含量3.5%(RSD=0.141%,n=5),平均回收率为100.105%,RSD=1.05%.该方法经济、简便、快速、准确、可靠.     

HPLC法测定香菇中香菇嘌呤含量

建立1种运用高效液相色谱(HPLC)测定香菇(Lentinula edodes)中香菇嘌呤含量的方法。优化后的色谱条件为:Ultimate AQ-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(7∶93,pH 4.67)等度洗脱,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长259 nm,进样量10μL。研究结果发现该方法准确、灵敏、重现性好,适用于香菇嘌呤的定量分析。     

高效液相色谱法测定酿酒葡萄果实中的有机酸

目的:建立酿酒葡萄果实中有机酸含量的HPLC(high performance liquid chromatography)测定方法。方法:色谱柱为Discovery C18柱(25 cm×4.6 mm,5 m),流动相为0.01 mol/L K2HPO4溶液,流速为0.5 mL/min,柱温条件为30℃。检测波长210 nm。结果:在此色谱条件下,酒石酸、苹果酸、柠檬酸在30 min内得到基线分离。3种有机酸标准曲线的相关系数(R2)均在0.9995以上;精密度检测,RSD为1.15%～2.23%(n=5);重复性检测,RSD为1.64%～4.03%(n=5);回收率在91.98%～105.35%之间。结论:本方法简单快捷、准确、重现性好,可用于酿酒葡萄果实中有机酸含量的测定。     

分散固相萃取-高效液相色谱法测定草莓中游离鞣花酸含量

建立了分散固相萃取-高效液相色谱法(DSPE-HPLC)测定草莓中游离鞣花酸含量的检测方法。在酸性条件下用甲醇提取,经C18分散固相萃取净化。采用Agilent Poroshell 120SB-C18柱(100mm×4.6mm,2.7μm)分离,以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液(15∶85,V/V)为流动相,在254nm下检测。该方法可以将鞣花酸与基质良好分离,在0.1～20μg/mL浓度范围内线性良好(r=0.99981);最低检出浓度为0.0134μg/g,回收率为85.3%～95.1%,相对标准偏差小于10%,可用于草莓中游离鞣花酸含量的检测。     

两种测定食用植物油中叔丁基对羟基苯二酚的方法比较

本文比较了液相色谱-串联质谱、高效液相色谱两种测定食用植物油中叔丁基对羟基苯二酚(TBHQ)的方法。其中,液质联用方法的条件为以Kromasil 100-5-C18(3.9 mm×150 mm,5μm)为液相色谱柱,乙腈、水为流动相,流速为0.4 mL/min;通过HPLC-MS/MS系统中全扫描模式对TBHQ进行定性分析,多反应监测模式对其进行定量分析。高效液相色谱的条件为以Kromasil 100-5-C18(3.9 mm×150 mm,5μm)为液相色谱柱;以甲醇、0.5%甲酸水为流动相;检测波长为280 nm;流速为1.0mL/mL,本试验还比较了两种方法的优缺点,结果发现,液相色谱法测定TBHQ回收率较高,建议用液相色谱法检测食品中TBHQ。     

北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化研究

利用HPLC法研究了北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化规律。采用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.4%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱[0～8min 24%B;8～12min 50%B],检测波长278nm,流速为1.0mL/min,柱温为25℃。结果表明:绿原酸的最佳提取时间为2h,该方法简单快速、可行,含量测定准确。