胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响

[目的]为了评估胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响。[方法]使用63头青年奶牛作为供体进行超数排卵,评估回收胚胎质量和发育阶段。选择334头青年奶牛作为受体鲜胚移植不同质量和发育阶段胚胎。对胚胎质量分布、发育阶段分布、不同质量胚胎和不同发育阶段胚胎移植30 d妊娠率进行统计分析。[结果]可用胚胎中A级胚胎比例(60.78%)显著高于B级和C级胚胎比例(36.70%和2.52%)(P<0.05);致密桑椹胚比例(54.36%)显著高于早期囊胚,囊胚和扩张囊胚比例(18.35%,25.0%和2.29%)(P<0.05)。A级和B级胚胎移植30 d妊娠率(63.55%和64.35%)显著高于C级胚胎移植30 d妊娠率(44.44%)(P<0.05);致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚和扩张囊胚移植30 d妊娠率差异不显著(P<0.05),早期囊胚、囊胚移植30 d妊娠率高于致密桑椹胚、扩张囊胚移植30 d妊娠率(P<0.05)。[结论]选择不同发育阶段的A级和B级胚胎能够获得较高胚胎移植妊娠率,增加早期囊胚和囊胚阶段胚胎移植数量能够提高胚胎移植妊娠率。     

影响奶牛体外受精胚胎培养效果的胚胎因素

对胚胎因素影响奶牛体外受精胚胎培养效果进行了研究。结果发现,在胚胎因素中,胚胎类型(冻胚和鲜胚)与胚胎发育阶段对胚胎培养效果没有显著影响(P>0.05);冷冻胚胎解冻后停留时间对胚胎培养效果影响极显著(P<0.01);冷冻胚胎解冻后胚胎等级对胚胎培养效果影响显著(P<0.05),解冻后A级胚胎存活率(80%,128/160)、囊胚孵化率(58.75%,94/160)显著高于B级胚胎存活率(59.38%,95/160)和囊胚孵化率(37.5%,60/160)(P<0.05);解冻水浴温度(20℃、30℃)对培养效果有极显著影响(P<0.01)。     

牛胚胎日龄与移植时间对妊娠率的影响

探讨胚胎移植过程中受体与胚胎日龄的最佳结合点.本文对接受移植受体牛的发情天数与胚龄进行了研究,选取北京奶牛中心的3种不同胚龄的A级胚胎分成两组进行移植,A组采用随机移植方案,B组采用同步移植方案,结果B组胚胎妊娠率(61.11%)高于A组胚胎妊娠率(25.81%),两组之间存在显著性差异(P<0.05).表明在胚胎移植中同步移植的效果好于随机移植.     

影响绵羊冻胚移植妊娠率的因素分析

本研究对胚胎质量、胚胎移植数量、胚胎发育阶段、冷冻方法、移植方法及饲养管理水平等因素对移植产羔率的影响进行研究,以提高绵羊胚胎移植效率。结果表明:采用1.5mol/L乙二醇做冷冻保护剂对胚胎进行常规冷冻,冻前A级胚胎冷冻/解冻后可用胚率、存活率、降级率均高于B级,差异极显著(P<0.01)。移植1枚冷冻解冻后A级、B级或2枚(A+B)胚胎的受体移植产羔率分别为44.48%、46.84%和44.81%。经χ2检验分析,三者之间无显著差异(P>0.05)。移植双胚的受体双羔率为22(%53/241),以胚胎为单位计算,产羔率仅为33.40%。A级囊胚和桑椹胚的产羔率之间无显著差异(P>0.05)。1.5 mol/L乙二醇常规冷冻保存的体内胚胎移植产羔率高于EFS40玻璃化冷冻保存,但经统计学分析,二者无显著差异(P>0.05)。子宫手术移植和腹腔内窥镜法子宫移植之间产羔率不具统计学差异(P>0.05)。在牧场条件下大规模移植的平均产羔率为43.95%,范围在20%￣70%之间,受体饲养管理水平对绵羊移植产羔率有较大影响。     

黑头萨福克绵羊胚胎玻璃化快速冻胚移植效果分析

本试验应用玻璃化胚胎冷冻方法进行黑头萨福克绵羊胚胎冷冻和移植,比较了受体羊卵巢上黄体数量、受体羊的体况、移植胚胎的数量对受体受胎率的影响。受体羊卵巢上有一个黄体的移植受胎率42.7%与有2~3个黄体受体羊移植受胎率44.4%无显著差异;受体的体况对受胎率有显著影响,中上等(含中等)体况水平的受体的受胎率47.2%显著高于中下等的受体的受胎率43.0%(P0.05);使用玻璃化胚胎冷冻法的冷冻解冻胚胎移植受胎率54.2%显著高于常规胚胎冷冻法的冻胚移植受胎率44.0%(P0.05);移植1枚桑葚胚(1M)的受胎率47.5%略高于移植1枚囊胚(1B)的受胎率44.3%(P0.05)。因此,受体羊黄体数、冷冻桑葚胚和囊胚对胚胎移植受胎率没有显著影响,而受体中上等(含中等)体况水平和玻璃化胚胎冷冻法冷冻解冻胚胎移植受胎率显著提高。     

提高奶牛胚胎移植妊娠率的措施

随着奶牛价格的大幅降低,奶牛胚胎移植技术推广应用受到了大大限制,要想推广技术必须提高奶牛胚胎移植妊娠率,降低胚胎移植犊牛生产成本。1胚胎方面除了选择优秀供体奶牛外,还要选择品质优良种公牛,精液活力高,一般冻精活力在0.6以上,精子含量在1000万个/m L。一般鲜胚A、B、C级胚胎受胎率分别为64%、45%、33%;冷冻胚胎A级受胎率为45%,B级受胎率为40.02%,C级受胎率为12.19%。所以一般冻胚移植A、B级胚胎,C级胚胎直接进行鲜移植,不进行冷冻。由于冷冻对胚胎有一定的危害,当条件允许时,尽量采用鲜胚进行移植。2受体方面受体牛选择要按照严…     

奶牛冷冻胚胎分割和分割后半胚冷冻技术

用简易分割方法,分割奶牛冷冻胚胎16枚,获得半胚32枚,分割成功率为100％(16/16),可移植半胚29枚,移植于16头受体牛,到第3个情期未返情者经直肠检查有6头妊娠,妊娠率为37.5％(6/16)。其中,在分割前或者分割后经恢复培养0.5～2h再移植的10头受体牛,5头妊娠;而未经恢复培养,分割后直接移植的6头受体牛中,只有1头妊娠。移植后3个月,直肠检查确定2头流产。已有1头受体黄牛生出1头奶牛牛犊(母)和1头受体奶牛产1头奶牛牛犊。其余的2头妊娠受体牛将于9月份产犊。此外,用简易分割法分割奶牛胚胎5枚,得到半胚10枚,裸半胚直接冷冻,解冻后回收可移植半胚5枚,移植于4头受体牛,无一头妊娠。结果表明,冷冻胚胎的分割半胚优于分割后冷冻半胚移植效果;冷冻胚胎分割前或者分割后恢复培养移植优于未经恢复培养而直接移植;简易分割法可应用于冷冻胚胎的分割。     

解冻后胚胎质量对移植妊娠率的影响

研究分析了胚胎质量等级对胚移妊娠率的影响,用于移植的冷冻性控胚胎由加拿大进口,胚胎移植的受体为鲁西黄牛和西门塔尔牛。分析结果显示:解冻后的胚胎等级对受体牛的妊娠率有一定程度的影响,其中A级胚胎的受体妊娠率较C级胚胎的受体妊娠率高15%左右,差异显著(P<0.05);另外,虽然受体母牛品种对移植受胎率也有一定程度的影响,但没有显著差异(P>0.05)。     

牛早期胚胎取样对移植妊娠率的影响

为了研究牛早期胚胎取样对移植妊娠率的影响,本试验从胚胎类型、胚胎质量、胚胎发育阶段、取样细胞数及体外放置时间五个方面进行分析。结果表明,整胚与取样性鉴胚胎之间移植妊娠率差异不显著(P0.05);取样后1级胚胎的移植妊娠率极显著高于取样后的2级胚胎(P0.01);扩张囊胚的移植妊娠率显著高于早期囊胚和桑葚胚的移植妊娠率(P0.05)。1级和2级胚胎均在取样4～6个细胞时,获得最高移植妊娠率,但与其他组别差异均不显著(P0.05)。随着胚胎在体外放置时间的延长,移植妊娠率呈现下降的趋势。     

进口优质肉羊胚胎的移植试验

对从澳大利亚进口的304枚德克赛尔肉羊冷冻胚胎进行移植,产羔178只,产羔率为5855%.并对冷冻胚胎解冻、移植过程中的主要环节进行研究,其结果如下①解冻后的A、B级孵化囊胚所占比例为(43.75%)、桑椹胚--扩张囊胚解冻后的A、B级胚胎所占比例为(84.02%),两者有显著差异;②解冻后的A、B级桑椹胚--扩张囊胚移植产羔率(64.88%)显著高于解冻后的A、B级孵化囊胚移植产羔率(42.85%);解冻后的C级胚胎移植后也能得到一定的产羔率;③经产母羊胚胎移植产羔率(68.62%),显著高于育成母羊产羔率(51.85%).     

奶牛性别控制胚胎移植试验

试验的目的是研究分选X型冻精与常规冻精品质的比较,结果显示:分选X精子的精液密度、活率、存活指数等各方面指标均明显低于常规冻精(P<0.05);使用4支分选X型冻精进行体内受精胚胎生产,结果对排卵数小于17枚的供体母牛进行体内受精胚胎生产效果良好,大于17枚则部分未受精;分选X型冻精奶牛鲜胚双胚移植与分选X型冻精奶牛鲜胚单胚移植进行比较,结果性控奶牛鲜胚双胚移植与单胚移植产犊率差异不大,双胚移植经济效益较高;分选X型冻精与常规冻精所产母犊比较,结果性控胚胎移植所产犊牛初生和60日龄各项指标与常规冻精所产犊牛差异不显著(P>0.05)。     

黑萨福克和杜泊羊新鲜和冷冻胚胎移植效率的研究

为提高优质肉用种用绵羊胚胎移植的效率,试验选取76只黑萨福克羊和27只杜泊羊作为供体,采用"CIDR+FSH+PMSG"法进行超数排卵处理。选取384只小尾寒羊为受体,采用"CIDR+PMSG"法进行同期发情处理,以探索供体胚胎发育阶段、胚胎冷冻处理、胚胎体外停留时间以及移植给受体时移植侧黄体数量等因素对胚胎移植妊娠率的影响。结果表明:移植新鲜囊胚的妊娠率极显著高于桑椹胚(P0.01);冷冻/解冻囊胚移植妊娠率极显著低于新鲜囊胚(P0.01),而冷冻/解冻桑椹胚移植妊娠率与新鲜桑椹胚无显著差异(P0.05);此外,移植桑椹胚时,移植侧有1个黄体的受体妊娠率极显著低于有2~3个黄体受体妊娠率(P0.01),但移植囊胚时两者间差异不显著(P0.05)。综上可知,子宫角移植桑椹胚和囊胚时,移植新鲜囊胚、移植冷冻桑椹胚效率较高;将新鲜桑椹胚移植给移植侧有2~3个黄体受体效果好于1个黄体受体。     

胚胎因素对肉羊胚胎移植效果的影响

目的:观察分析胚胎因素对肉羊胚胎移植效果的影响.方法:选择258只已产1胎营养水平中上等的受体母肉羊为研究对象,对其移植A级胚胎,对比胚胎因素对肉羊胚胎移植效果的影响.结果:移植1枚桑椹胚的受胎率显著高于移植1枚囊胚者,不同体外保存时间的受体羊受胎率差异不具有统计学意义(P>0.05),随着胚胎移植数量的增长,受胎率明显提高(P<0.05).结论:胚胎因素与肉羊胚胎移植效果密切相关,其中胚胎发育阶段、移植胚胎数对受胎率有显著影响,胚胎体外保存时间对受胎率无显著影响,分析相应的影响因素对提高受胎率具有重要价值.     

纯种和牛快速扩繁关键技术研究

为达到快速扩繁纯种和牛的目的,试验从供体牛高强度超数排卵、胚胎性别鉴定及不同品种受体牛移植对产犊、妊娠期和犊牛初生重的影响进行研究。结果表明,纯种和牛连续超排9次,每次间隔30 d,第2次头均回收胚数22.78枚,显著高于第5~9次结果（P< 0.05）,其余各组之间无显著差异（P> 0.05）;第1~3次头均可用胚数分别为8.67、13.78、8.56枚,组间无显著差异（P> 0.05）,第2次头均可用胚数显著高于第4~9次头均可用胚数（P< 0.05）,极显著高于第7、9次头均可用胚数（P< 0.01）。性别鉴定胚胎和常规胚胎移植妊娠率和产犊率差异均不显著（P> 0.05）,性别鉴定胚胎的母犊率为95.56%。西门塔尔杂交牛受体产犊率高于和牛杂交牛、荷斯坦奶牛受体,但差异不显著（P> 0.05）。和牛杂交牛受体妊娠期极显著高于西门塔尔杂交牛和荷斯坦奶牛受体（P< 0.01）,西门塔尔杂交牛和荷斯坦奶牛之间差异不显著（P> 0.05）;西门塔尔杂交牛受体所产和牛母犊初生重显著高于和牛杂交牛受体（P< 0.05）,极显著高于荷斯坦奶牛受体（P< 0.01）,3个品种受体牛产和牛公犊初生重之间差异不显著（P> 0.05）;同一品种受体牛其产公、母犊牛的妊娠期及初生重均相近。     

影响胚胎移植妊娠率的因素研究

为了加快本地区农村散养奶牛品种改良的进度,本试验利用奶牛冷冻胚胎对自然发情的奶牛实施移植,研究了移植时间、解冻方法、黄体发育程度及胚胎质量等级等因素对妊娠率的影响。结果表明:胚胎移植可以像人工授精一样在奶牛自然发情状态下进行;不同移植时间、不同解冻方法、A、B级黄体及A、B级胚胎等因素对妊娠率的影响差异不显著(P>0.05)。     

引进加拿大牛冻胚解冻后直接移植的效果

对进口的加拿大牛冷冻胚胎进行解冻后移植效果观察.结果共解冻24枚冻胚,解冻后直接移植给24头受体牛,妊娠19头,移植妊娠率79.2%,其中荷斯坦奶牛冻胚移植21头,妊娠17头,移植妊娠率达81.0%,创造我国牛冷冻胚胎移植成功率的最高记录.     

影响杜泊羊超数排卵和胚胎移植效果的因素研究

在生产条件下,探讨了胚胎回收部位、移植胚胎数量、胚胎发育阶段和季节等因素对杜泊羊超数排卵胚胎移植效果的影响.超数排卵处理了39只供体和移植了179只受体,结果表明,从输卵管平均回收胚胎数显著多于从子宫角平均回收胚胎数(10.57 vs 8.41)(P<0.05).移植2枚或3枚胚胎的妊娠率明显高于移植1枚胚胎的妊娠率(63.89% vs 66.67% vs 52.63%) (P<0.05).秋季、冬季和春季超排处理平均回收胚胎数(8.83 vs 9.50 vs 6.83)、平均可用胚胎数(7.92 vs 8.28 vs 5.17)和可用胚胎所占比例(88.68% vs 87.13% vs 75.61%)均显著高于春季(P<0.05).在秋季和冬季进行胚胎移植,妊娠率分别为57.89%和59.43%,高于春季移植的妊娠率(53.33%),但差异不显著(P>0.05).2～8-细胞胚胎的移植妊娠率与桑椹胚/囊胚移植妊娠率差异不显著(60.05% vs 57.47%)(P>0.05).     

胚胎因素对奶牛体外受精胚胎解冻孵化影响的试验研究

对胚胎因素影响奶牛体外受精胚胎培养效果进行了研究。结果发现：在胚胎因素中，胚胎类型（冻胚和鲜胚）与胚胎发育阶段对胚胎培养效果没有显著影响（P〉0．05）；冷冻胚胎解冻后停留时间对胚胎培养效果影响显著（P〈0．01）；冷冻胚胎解冻后胚胎等级对胚胎培养效果影响显著（P〈0．05），解冻后A级胚胎存活率（80％，128／160）、囊胚孵化率（58．75％，94／160）显著高于B级胚胎存活率（59．38％，95／160）和囊胚孵化率（37．5％，60／160）（P〈0．05）；解冻水浴温度（20℃、30℃）对培养效果有极显著影响（P〈0．01）。     

胚胎分割技术在肉牛繁育中的研究与应用

本试验采用弗莱维赫肉牛和日本和牛作为供体,本地黄牛为受体,进行同期发情和超数排卵,共得到可用胚胎234枚,分为4个处理:新鲜全胚113枚、新鲜双半胚55枚、冷冻全胚56枚和冷冻双半胚10枚,进行移植。结果表明,新鲜双半胚的妊娠率为65.45%,略高于新鲜全胚移植的妊娠率(63.72%),差异不显著(P＞0.05)。冷冻双半胚产犊率为20.00%,低于冷冻全胚移植的妊娠率(39.29%),差异不显著(P＞0.05),而冷冻组的妊娠率均显著低于新鲜组(P＜0.05)。新鲜双半胚的产犊率为95.56%,双犊率为35.55%,犊牛存活率为72.09%。新鲜全胚组的产犊率为63.16%,显著低于新鲜双半胚组(P＜0.05),但犊牛存活率却显著高于新鲜半胚组(90.00%和72.09%)(P＜0.05)。此外,全胚与双半胚移植后产生的犊牛初生重之间并无显著差异(P＞0.05)。     

转基因鲜胚和冻胚对黄牛受胎率的影响

本试验对转基因体细胞克隆胚胎经两种方式(鲜胚体温长途运送和冷冻胚胎复苏)移植到受体牛妊娠和产犊情况进行比较.结果为两组的妊娠率为33.08%和29.32%,出生率为5.70%和5.54%,差异均不显著(P>0.05),说明冻胚解冻后移植与鲜胚长途运输移植的效果无差异,转基因体细胞克隆胚胎低温冻存可应用于实际生产.