柞蚕酯酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,调查了柞蚕酯酶同工酶在幼虫不同发育时期、不同组织器官及不同品种间的特异性变化:柞蚕酯酶同工酶活性和酶带数在幼虫不同发育时期存在一定的差异性,各龄盛食期酶带数目多且活性强,其表达与幼虫的生长发育有关;幼虫不同组织器官中酯酶同工酶的活性及种类差异很大,在脂肪体及中肠组织中活性较强,并且种类较多,酶活性的高低与组织的功能关系密切;酯酶同工酶在柞蚕品种间表现出很强的特异性,但在迁移率0.65处各品种均有1条共有谱带。UPGMA法聚类分析显示:33个柞蚕品种可分为4个大的类群,各品种与其母系亲本更多地表现出较近的亲缘关系,说明母系亲本在柞蚕杂交分离育种中起着决定性作用,所以杂交育种应优先注重对母系亲本性状的选择;部分品种在系统分离育种过程中来自亲本的一些性状逐渐弱化,而某一特定性状得到加强,与其亲本间表现出较远的亲缘关系。     

柞蚕、(天蚕×柞蚕)F_1、蓖麻蚕蛹期血液及脂肪体酯酶同工酶凝胶电泳分离

本文报道了柞蚕、(天蚕×柞蚕)F_1、蓖麻蚕蛹期血液及脂肪体酯酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳的不连续电泳图谱并试图探讨这些同工酶和蚕体内生理生化过程的某些关联,提出同工酶活性高低和蚕体内能量代谢有关的推测,试验结果表明:柞蚕血液及脂肪体的酯酶同工酶酶带较多,且颜色较深,而蓖麻蚕的较少,且颜色很浅、(天蚕×柞蚕)F_1介于二者之间。雌雄比较:血液酯酶同工酶活性全部雌强于雄、脂肪体酯酶同工酶活性全部雄强于雌,唯(天×柞)F_1例外。同一类蚕的不同个体,不同发育时期,不同器官,不同性别之间均存在差别。     

栗蚕幼虫酯酶同工酶酶谱多态性及应用于品种间亲缘关系的分析

栗蚕是珍稀的野蚕资源。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定栗蚕幼虫不同发育时期、不同组织器官的酯酶同工酶酶谱,并依据酯酶同工酶酶谱的多态性分析纯黑、纯绿2个品种的亲缘关系。检测结果表明:栗蚕幼虫中肠的酯酶同工酶活性和酶带数随龄期而增加,且同一龄期以盛食期的酶表达量最高;幼虫中肠及脂肪体中的酯酶同工酶活性较强,并且酶带数较多;2个供试品种间的酯酶同工酶酶谱明显不同。根据酶谱差异分析2个品种的遗传相似系数为0.86,表现出较近的亲缘关系。研究结果提示:栗蚕幼虫酯酶同工酶的酶活性和酶带数与生长发育和组织功能有关,幼虫酯酶同工酶酶谱可以作为分析品种间亲缘关系的依据之一。     

山西黑猪不同器官组织乳酸脱氢酶同工酶活性分析

为了探究哺乳动物中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的种类及不同器官组织中LDH同工酶的活性及相对含量,试验以山西黑猪为试验材料,利用紫外分光光度计和聚丙烯酰胺凝胶电泳对不同器官组织中LDH活性和同工酶谱带进行检测和分离。结果表明:不同器官组织中LDH的活性存在明显区别,不同器官组织中所含LDH同工酶的种类和相对含量各不相同,不同器官组织中相同LDH同工酶的相对迁移率差异不大。说明动物机体中同工酶的保守性较高。     

柞蚕血淋巴酯酶同工酶的初步研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对柞蚕血淋巴酯酶同工酶进行了初步的研究 ,结果表明 :柞蚕血淋巴酯酶同工酶酶谱雌雄间无明显差异 ;柞蚕血淋巴酯酶同工酶活性较低 ;不同品种之间酯酶同工酶电泳酶谱差异较大 ,表现出良好的多态性。     

柞蚕不同品种酯酶同工酶的特异性

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对柞蚕酯酶同工酶不同品种间的特异性进行了研究,主要结果如下:酯酶同工酶在柞蚕品种间表现很强的特异性。组平均法聚类结果表明:33个品种可分为5个大类,印度引进品种in981与其他各品种遗传距离最远,表明了其较远的亲缘关系。其他各品种按亲缘关系远近各自聚成一类。各品种与其母系亲本更多地表现出较近的亲缘关系,所以在杂交育种亲本选择过程中,应优先注重对母系亲本性状的选择。部分品种在系统分离育种过程中来自亲本的部分性状逐渐弱化,而某一特定性状得到加强,与其亲本间表现出较远的亲缘关系。柞蚕中肠酯酶同工酶品种间活性差异也比较大。茧层率较高的几个品种如多丝3号、多丝4号,三里丝、方山黄等在相对迁移率0.75位置均表达一条活性较强的酶带,其他品种此位置的酶带或者不表达,或者活性比较低。     

棕黑锦蛇雌雄个体不同器官/组织同工酶比较分析

为了研究棕黑锦蛇雌雄个体不同器官/组织同工酶,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法对棕黑锦蛇心脏、肝脏、肾脏、肌肉、大脑、肺脏、睾丸7种器官/组织(雌性6种)中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、酯酶(EST)进行分离、分析。结果表明:棕黑锦蛇不同组织中共分离出LDH1~LDH5、电泳迁移率为0.129~0.291的5条谱带,共分离出SOD1~SOD13、电泳迁移率为0.093~0.954的13条谱带,共分离出EST1~EST9、电泳迁移率为0.121~0.595的9条谱带。各种器官/组织中,心脏中LDH同工酶活力最强,肝脏中SOD同工酶活力最强,肾脏中EST同工酶活力最强。棕黑锦蛇雌雄个体之间及同一个体、不同器官/组织之间同工酶谱带分布和酶的活性存在明显差异。     

不同家蚕品系的胰蛋白酶抑制剂种类与活性的多态性分析

胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)广泛存在于昆虫体内,可抑制胰蛋白酶的水解活性。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白酶活性染色的方法,研究不同家蚕品系的丝腺、同一品系家蚕的不同组织器官及不同发育时期丝腺中胰蛋白酶抑制剂种类和活性的多态性,以丰富家蚕丝蛋白的合成、分泌及保护机制研究的基础信息。在22个家蚕品系上蔟第2天的蚕体丝腺中,共检测到6种胰蛋白酶抑制剂,分别命名为TI-Ⅰ~TI-Ⅵ,其中大部分家蚕品系都有TI-Ⅵ,有TI-Ⅳ的品系也较多,而有TI-Ⅱ的品系最少,家蚕不同品系间TI的种类分布不一致;在幼虫5龄期,TI活性随着丝腺的发育逐渐增强;在家蚕品系大造上蔟第1天蚕体的7个组织器官中,只在血液、精巢和丝腺中检测到TI,其中血液和丝腺中各检测到2种TI,精巢中检测到1种TI,而且同一家蚕品系含有TI的组织器官中的TI种类也不一致。对茧丝中3种TI(TI-Ⅲ、TI-Ⅳ和TI-Ⅵ)的理化性质进行检测,发现不同种类TI对温度及p H的适应范围不同,其中TI-Ⅵ的适应范围较广。研究结果显示:不同家蚕品系丝腺中含有的TI种类以及6种TI活性的强弱表现出多态性;同一家蚕品系不同组织器官中的TI种类也具有多态性;温度和p H对不同TI的活性影响程度不同。     

蝇毒磷对柞蚕体内几种重要生理代谢酶类活性的影响

为了评估柞蚕饰腹寄蝇防治药剂蝇毒磷溶液(商品名灭蚕蝇3号)对柞蚕正常生理代谢的影响,用灭蚕蝇3号药液处理柞蚕5龄幼虫后,测定蚕体内乙酰胆碱酯酶(ACh E)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、细胞色素P450(CYP450)和羧酸酯酶(Car E)的活性变化。药液处理后12 h内,柞蚕幼虫头部的ACh E、CYP450和Car E活性均显著低于对照组,GST活性与对照组的差异不显著;脂肪体中的ACh E活性显著低于对照组,GST、CYP450、Car E活性与对照组的差异均不显著;血淋巴中4种酶活性与对照组的差异均不显著。药液处理后48 h内,柞蚕幼虫除脂肪体中ACh E的活性发生变化后与对照组之间的差异不再显著外,各组织器官中几种酶的活性与对照组之间的差异,均同药液处理后12 h内测定的结果一致。试验结果表明,以生产上常用浓度的灭蚕蝇3号药液处理柞蚕5龄幼虫,会引起柞蚕头部ACh E、CYP450和Car E的活性显著降低,因而用该药剂防治柞蚕饰腹寄蝇时应禁止盲目增大药剂使用浓度和延长药液浸蚕的时间,避免影响柞蚕的正常生理代谢活动。     

柞蚕蛹期血淋巴蛋白质的等电聚焦分析

<正> 昆虫血淋巴是细胞外体液,浸润着虫体内所有组织和细胞。全变态昆虫的蛹期是重要的变态期,在此期间,进行着幼虫组织的分解和成虫组织形成。血淋巴中蛋白质种类的变化情况,是昆虫生理学者关注的问题之一。柞蚕是典型全变态昆虫,柞蚕蛹期里翅芽发育,与此同时,在雄蛹中睾丸进一步发育成熟,而在雌蛹中卵巢开始发育,直至完全成热。因此,有必要分析柞蚕蛹期血淋巴蛋白质种类及其消长变化特点,为逐步深入阐明蛹期成虫器官芽生长发育过程中,利用血淋巴中的蛋白质致使血淋巴蛋白质种类出现有关变化,提供分析资料。 关于昆虫血淋巴蛋白质的分析工作,过     

家蚕血液酯酶同工酶

本文报道了一些家蚕血液酯酶聚丙烯酰胺凝胶的不连续电泳图谱。酯酶同工酶可显出三个区带,分别为A、B_1、B_2。蛹期与幼虫期的酶谱一致,但蛹期各酶带的活性强,使幼虫期显色较浅的带能清晰的显出,发现东34品种主要酶带—A缺失,推想这是由于控制该带的基因突变所致,提出控制家蚕血液酯酶的基因有两个不同座位的基因,分别控制A带和B_1、B_2带的生产。     

东方田鼠不同器官组织同工酶研究

为了对东方田鼠的深入研究及鼠害防治提供基础的生理生化指标依据,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的方法对东北林区东方田鼠的心脏、肝脏、肾脏、骨骼肌、脑、睾丸6种器官组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶进行分离、分析。结果表明:东方田鼠心脏、肾脏、骨骼肌、脑、睾丸5种器官组织中均有LDH1~LDH5的5条谱带出现,而在肝脏中只出现1条谱带为LDH5,在心脏、肾脏、骨骼肌、睾丸4种器官组织中均有亚带出现,6种器官组织中的LDH同工酶活性不同;在东方田鼠心脏、肝脏、肾脏、骨骼肌、脑、睾丸6种器官组织中的SOD同工酶中共分离出SOD1~SOD18的18条谱带,其中SOD4、SOD9、SOD14、SOD154条谱带为6种器官组织中共有谱带,且SOD15谱带在6种器官组织中活性最强。2种同工酶在6种器官组织中的谱带分布及酶活性存在明显的组织特异性。     

家蚕血液酯酶同功酶的研究

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法.测定了24个家蚕品种及杂交种从三龄到后蛹不同发育时期的血液酯酶同功酶酶谱.结果表明:家蚕血液中存在着丰富的酯酶同功酶酶带类型,整个试验可观察到22条酶带,根据其迁移率及染色特点可分为A、B、C、D、E五大染色区.在不同发育阶段中共有13条酶带经常显现,后蛹期主要同功酶酶带活性降低,但非主带A-1区酶带却清楚地显示出来.在幼虫阶段,酶带的数目及活性防着食下量的增多而增人.并观察到A-2-b带与B-2带的表现最为突出,推测A-2-b带可能是家蚕血液部酶同功酶的基本酶带.进一步分析表明,A-2-b带活性与大多数经济性状间呈高度的正相关性.     

植源蜕皮激素对无脑蓖麻蚕蛹血淋巴蛋白质组分的影响

<正> 蓖麻蚕在蛹期里,幼虫组织器官分解,成虫器官芽发育,尤其是翅芽的发育和雌性卵巢的发育。而蛹期的血淋巴则是成虫器官芽发育的环境条件,为成虫器官芽的发育提供物质基础和运送激素等活性物质。因此,蛹期的血淋巴中物质成分的变化,特别是血淋巴蛋白质组成种类的变化,是昆虫生理学工作者关注的问题之一。已有人利用聚丙烯酰胺电泳,研究过家蚕和蓖麻蚕五龄幼虫血淋巴蛋白质种类,但尚未见蓖麻蚕蛹期血淋巴蛋白质分析的报道。     

鹅细小病毒侵染雏鹅组织器官的氧化/脱氢酶及同工酶研究

酶是催化代谢途径的高效活性基因产物,应激环境和遗传基础的不同导致同工酶结构或活性差异,使不同组织和发育阶段的酶种类和活性表现特异性变化。采用生化分析试验技术和PAGE分析鹅细小病毒(GPV)感染雏鹅氧化/脱氢酶(LDH、ADH、POD、CAT)的活性及同工酶特征变异,结果表明,GPV感染雏鹅的脑、心脏、脾脏组织新出现1条POD同工酶谱带,肺脏组织消失1条同工酶谱带;GPV感染雏鹅的肝脏、脾脏组织分别缺失慢区3条和1条CAT同工酶谱带;GPV感染雏鹅组织器官的LDH和ADH同工酶仅显示1~2个慢区带,肺脏缺失1条慢区ADH同工酶谱带,ADH活性降低了13.61%~61.08%,心脏增高1.2倍;POD、CAT、LDH活性分别增强1.2~6、1.5~3.5、2~2.5倍,而脑、肺脏的CAT活性降低了40.29%和94.68%,心脏、肺脏的LDH活性降低了75.93%和91.81%。提示氧化/脱氢酶产生的广泛变异是GPV感染应激与宿主氧化/脱氢酶基因表达的互作效应,其酶的谱型、活性等生化特征变异,直接或间接调控代谢途径、影响生理机能及病理性能,敏感的氧化/脱氢酶是研究病毒基因型与宿主遗传易感性互作病理学机制的有效标记物。     

叶尔羌高原鳅三种同工酶的组织差异性研究

为了探究叶尔羌高原鳅同工酶表达的组织差异性和基因位点表达特征,试验采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对养殖和野生个体的心脏、肌肉、肝脏和肾脏4种组织器官的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行分离、分析。结果表明:叶尔羌高原鳅LDH由2个基因位点编码,4种组织器官中共检测到3条酶带,组织差异性不明显;EST由3个基因位点编码,4种组织器官中共检测到7条酶带,其中EST-1a和EST-3b为各组织器官共有酶带,具有明显的组织差异性;MDH的S-MDH和M-MDH型同工酶在各组织器官中均有表达,4种组织器官中共检测到5条酶带,但酶带分布具有明显的组织差异性。根据酶谱特征对其种质鉴定进行了分析发现,叶尔羌高原鳅同工酶具有自属的一套同工酶系统特征。     

细胞培养基MLM-45及培养条件对不同发育时期柞蚕卵巢细胞生长的影响

选择柞蚕5龄幼虫以及前滞育期、滞育期和解除滞育后发育前期、中期、后期的柞蚕蛹分离卵巢细胞,利用新研制的柞蚕细胞培养基MLM-45,在不同温度、pH值及渗透压条件下进行柞蚕卵巢细胞的体外培养,探究最佳培养条件及卵巢细胞取材的最佳发育时期。用台盼蓝染色活细胞计数方法,测定不同条件下用MLM-45培养基培养的不同发育时期柞蚕卵巢细胞的活力,当在27℃、pH 6.3、渗透压325 mOsm/kg的条件下培养30 d时,上述各发育时期柞蚕卵巢细胞的存活率最高,并且5龄幼虫、前滞育期和解除滞育后发育前期的卵巢细胞出现了增殖,其增殖率分别为54%、64%和2%,滞育期及解除滞育后发育中期和后期的卵巢细胞存活率也分别达到99.6%、96.6%和92.4%。在此最佳培养条件下,各发育时期柞蚕卵巢细胞培养2个月后其形态以圆形和椭圆形为主,尤以5龄幼虫和前滞育期蛹卵巢细胞的培养效果最好,细胞增殖7～8倍,是适于以MLM-45培养基培养的最佳发育时期柞蚕卵巢细胞。     

柞蚕蛋白水解酶及抑制剂的初步研究

比较蓖麻蚕幼虫、家蚕幼虫和蛹及柞蚕蛹的血淋巴及中肠的蛋白水解酶的活力表明,家蚕幼虫中肠的酶活力较高:幼虫的酶活力高于蛹.测定了柞蚕蛹中几种组织和体液的蛋白水解酶活力,仅发育后期蛹的中肠有蛋白水解酶的活力.脂肪体及血淋巴均来测得明显的蛋白水解酶活力.柞蚕在不同的生长发育时期蛋白水解酶活力不同.成蛹初期,抑制剂活力较高,酶活力很低,随着蛹的发育,抑制剂活力逐渐下降,酶活力逐渐上升.此抑制剂对热稳定,既能抑制胰凝乳蛋白酶,也能抑制胰蛋白酶.将发育后期蛹的中肠匀浆进行层析,可粗分得两种蛋白酶组分,其一能被慈姑抑制剂抑制,而不能被柞蚕抑制剂(由蛹血淋巴中提取,属胰蛋白酶的抑制剂类)所抑制,推断此蛋白水解酶可能是胰凝乳蛋白酶的类似物.     

西宁地区鲤鱼和草鱼组织乳酸脱氢酶的电泳分析

以西宁地区鲤鱼和草鱼为材料,采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对肝脏、肾、心脏、鳃、脑、眼、肌肉等7种组织器官分别进行了乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的分析比较。结果表明,不同组织中LDH的同工酶谱带是不同的,存在着组织特异性。鲤鱼的组织LDH共表现出LDHB4,LDHA282,LDHA4和LDHF4 4种主要同工酶,而草鱼则具有另外一种LDHE4同工酶。鲤鱼和草鱼同一组织器官的LDH的同工酶谱带也不尽相同,二者具有明显的种间分布特异性。     

雁鹅消化系统中AMY同工酶分析

为了研究雁鹅消化系统中淀粉酶(AMY)同工酶的分布及活性,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳(PAGE)的方法对雁鹅消化系统中食道、胃、小肠上段、小肠下段、肝脏、胰脏等6个器官组织中AMY同工酶进行分离分析。结果表明:6个器官组织中AMY同工酶共分离出电泳迁移率由0.476~0.131的AMY1~AMY10的10条谱带,其中食道、胃、小肠上段、小肠下段、肝脏、胰脏中分离出的谱带数分别为6,6,8,8,8,4条;AMY同工酶活力由强到弱的顺序依次为胰脏、食道、小肠上段、胃、小肠下段、肝脏,各器官组织中淀粉酶同工酶的谱带分布和酶的活性存在明显的器官组织特异性。