腹泻犊牛感染的隐孢子虫种类鉴定及基因分型

为了鉴定陕西省某牛场有腹泻症状犊牛感染的隐孢子虫(Cryptosporidium)种类及其分子生物学特征,基于隐孢子虫18SrRNA和GP60基因位点,对从该场采集到的3例腹泻犊牛新鲜粪便样品进行PCR扩增和序列分析。结果表明,3份样品全部为Ⅱd型微小隐孢子虫(C. parvum),其中2份为ⅡdA30G4,1份为Ⅱd A34G4。说明在该牛场中的腹泻犊牛存在微小隐孢子虫感染,需引起养殖者的重视。     

陕西部分地区秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染状况

为明确陕西部分地区秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染率及其种类分布,本试验从杨凌和宝鸡3个秦川牛场采集了113份3~6月龄的犊牛粪便样品,基于隐孢子虫18SrRNA基因位点对其进行PCR检测和序列分析。结果显示,隐孢子虫总感染率为16.8%(19/113),各养殖场的隐孢子虫感染率差异不显著(P0.05);种类鉴定发现了3种隐孢子虫,分别为安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)、瑞氏隐孢子虫(Cryptosporidium ryanae)和牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis),其中安氏隐孢子虫为优势虫种,广泛分布于各个养殖场。这些研究结果表明这些地区的秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染比较普遍,且种类较为复杂。     

一起暴发性犊牛急性腹泻病的病因调查

犊牛腹泻是影响犊牛健康的主要疾病之一,通过对某规模化牛场暴发的犊牛急性腹泻病的实验室诊断,对犊牛腹泻常见病原,包括轮状病毒、冠状病毒、致病性大肠杆菌、沙门氏菌及隐孢子虫进行了PCR检测。结果表明,本次犊牛急性腹泻病是由沙门氏菌引起的。     

北京地区牛隐孢子虫病的调查及小鼠的人工感染

隐孢子虫病是全世界流行的一种人畜共患病。笔者对北京地区的牛隐孢子虫病进行了初步调查,在调查的5个牛场中有4个发现有隐孢子虫感染,其中二月龄、三月龄犊牛感染率最高(二月龄为19.5%,三月龄为17.4%),四、五月龄时逐步下降,一月龄犊牛感染率最低。人工感染试验证明牛隐孢子虫能够感染正常的和免疫力降低的小鼠。从而证明北京地区牛隐孢子虫不具有宿主特异性,它既能感染牛,又能感染小鼠。笔者还在电镜样品和组织切片中发现了隐孢子虫各发育阶段的虫体;被隐孢子虫寄生的肠绒毛发生不同程度的变性、坏死、萎缩和上皮细胞的脱落,从而证明北京地区牛隐孢子虫具有一定的致病性。     

宁夏部分地区奶牛犊牛隐孢子虫感染情况调查

为了解宁夏地区犊牛隐孢子虫的感染情况,从3个市8个规模化奶牛场采集272份犊牛粪便样品,利用巢氏PCR技术对18S rRNA基因位点进行检测和分析。结果显示,隐孢子虫的总感染率为12.88%,银川市隐孢子虫感染率为16.89%,吴忠市隐孢子虫感染率为6.94%,石嘴山市隐孢子虫感染率为9.62%,三者差异不显著(P0.05),断奶前、后感染率分别为14.14%,12.14%。序列处理分析发现3种隐孢子虫,分别为牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis,C.bovis)、瑞氏隐孢子虫(Cryptosporidium ryanae,C.ryanae)和微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.parvum),其中C.bovis分离率最高(54.29%)。研究表明这些地区犊牛隐孢子虫感染比较普遍,且感染的虫种有3种,其为深入了解宁夏部分地区隐孢子虫的分子流行情况提供了参考数据。     

致犊牛腹泻肠道原虫的分子生物学鉴定

为确定导致犊牛腹泻的寄生原虫种类及分子学特性,利用基于隐孢子虫核糖体小亚基RNA、蓝氏贾第虫β-贾第素和毕氏肠微孢子虫内转录间隔区的分子生物学技术对腹泻犊牛的粪便样品进行鉴定。结果表明,引起犊牛腹泻的寄生原虫包括微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫、瑞氏隐孢子虫、E型蓝氏贾第虫和多种基因型的毕氏肠微孢子虫,并且存在多种原虫混合感染。说明原虫是引起犊牛腹泻的重要病原,畜牧业临床中应加强原虫病的防控。     

河南省部分地区乳牛隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握乳牛隐孢子虫病在河南省的流行动态,从河南省郑州、开封、济源和鹤壁4个地区9个奶牛场采集12月龄以内的乳牛粪便样品582份,用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法进行检测。结果显示,隐孢子虫总感染率为26．12％（152／582）。其中,断乳前犊牛（5日龄至2月龄）隐孢子虫感染率为30．91％（51／165）,断乳后犊牛（3～12月龄）感染率为24．22％（101／417）。依据形态数值初步鉴定为2种隐孢子虫,即微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫。微小隐孢子虫在断乳前犊牛阳性样品中的比率为50．98％（26／51）,在断乳后乳牛阳性样品中的比率为9．90％（10／101）。另外,饲养方式（断乳前犊牛单独隔离饲养和未隔离饲养）对断乳前犊牛2种隐孢子虫的感染率有显著影响。     

某奶牛场犊牛腹泻的病原诊断及防控建议

2019年10月,湖南常德市某奶牛场26头犊牛发生腹泻,为了确诊发病原因,无菌采集4头病死牛的肠内容物、肠组织、粪便,采用RT-PCR技术检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒、隐孢子虫、大肠杆菌毒力基因及黏附素,对分离到的大肠杆菌用纸片法(K-B)进行药物敏感试验。结果显示,在肠道样品中有3个astA毒力基因阳性,阳性率为75%,隐孢子虫1个阳性,其他检项均显示阴性,大肠杆菌对10种抗生素全部耐药,耐药率100%。结果表明,该牛场犊牛腹泻主要是由致病性大肠杆菌和牛隐孢子虫感染引起,且大肠杆菌耐药性非常严重。本研究可为该场犊牛腹泻防治提供参考。     

国际上首次报道犊牛感染火鸡隐孢子虫

中国兽医信息网中国疾病预防控制中心寄生虫病预防与控制所重点实验室沈玉娟研究员与哈尔滨医科大学刘爱芹教授合作在《PLoSONE》杂志上发表文章,报告了我国黑龙江省哈尔滨、大庆、牡丹江和齐齐哈尔地区断奶前犊牛隐孢子虫感染调查情况：总感染率为47.68%（72/151）,分子鉴定为牛隐孢子虫47.22%（34/72）,安氏隐孢子虫36.11%（26/72）,赖氏隐孢子虫6.94%（5/72）,火鸡隐孢子虫6.94%（5/72）和微小隐孢子虫2.78%（2/72）。其中微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫,均为人兽共患隐孢子虫虫种,具有潜在的公共卫生危害。亚型分型：微小隐孢子虫亚型为IIdA19G1,火鸡隐孢子虫亚型为IIIeA22G2R1。在我国犊牛自然感染火鸡隐孢子虫具有地域流行特点,系国内外首次报道。火鸡隐孢子虫主要感染禽类,也是继人隐孢子虫和微小隐孢子虫后,第三大能感染人的隐孢子虫虫种。而犊牛作为火鸡隐孢子虫的储存宿主,需要开展更多系统的实验感染研究来证实;同时应对人、动物进行进一步的分子流行病学研究,来阐明微小隐孢子虫和火鸡隐孢子虫等传播动力学关系。     

规模牧场犊牛腹泻治疗实例

2012年12月,河北和陕西的两个大型牛场出现了许多腹泻病例,其中犊牛高发,且死亡率较高,通过调查,确定是隐孢子虫、轮状病毒混合沙门氏菌感染,用"达可"、美达佳及抗生素治疗,取得较好效果。     

规模化牛场犊牛常见腹泻症的病原学检测

通过收集规模牛场患有腹泻症犊牛的粪便,运用法国维克公司生产的相关诊断试剂,开展检测工作,结果表明:引起塔额垦区规模牛养殖的犊牛发生腹泻的病原分别为:冠状病毒平均阳性率16.23%、轮状病毒平均阳性率18.73%、大肠杆菌平均阳性率18.07%和隐孢子虫平均阳性率18.41%,病原检测提示我们应该重视防控工作。     

防制犊牛小球隐孢子虫感染的策略

防制犊牛小球隐孢子虫感染的策略查红波摘译索勋校小球隐孢子虫（Ｃｒｙｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｒｖｕｍ）感染是犊牛腹泻的主要原因之一。至今，尚无防制隐孢子虫病的特效药物。治疗犊牛隐孢子虫病在目前仅限于支持疗法，即在发生腹泻时，补充体液。人们曾试图用被动...     

宁夏牛隐孢子虫感染情况调查研究

为了解宁夏地区牛隐孢子虫感染情况,在宁夏5个地级市中的10个县(区)随机抽取10个规模牛场,采集牛粪便样品600份,用牛隐孢子虫抗原检测试剂盒进行ELISA检测。结果显示,在600份样品中,有157份样品隐孢子虫阳性,阳性率为26.17%。其中奶牛的阳性率为10.42%,肉牛的阳性率为36.67%,两者差异极显著(P0.01)。不同地区牛的隐孢子虫阳性率不同,其中奶牛的阳性率在1.67%~23.33%之间,肉牛的阳性率在16.67%~63.33%之间,均差异极显著(P0.01)。不同年龄阶段牛的阳性率也不同,育成奶牛、成年奶牛以及成年肉牛的阳性率较高,分别达11.25%、11.25%和41.67%。该研究首次采用牛隐孢子虫抗原检测试剂盒对宁夏5个市的规模养殖牛场进行检测,为深入了解该地区牛隐孢子虫流行情况、制定有效的防控措施提供了依据。     

宁夏地区犊牛腹泻的病原调查

为了解宁夏地区奶牛犊牛腹泻的病原微生物种类及流行病学情况,2017年6月至12月对宁夏地区20个牧场有临床腹泻症状的犊牛,随机采集127份腹泻粪便样品,采用快速检测试剂盒对轮状病毒、隐孢子虫、大肠杆菌和贾第鞭毛虫4种病原微生物进行了抗原检测。结果显示:在127份腹泻粪样中,轮状病毒的阳性检出率为32. 28%(41/127),隐孢子虫的阳性检出率为25. 20%(32/127),大肠杆菌阳性检出率为11. 02%(14/127),贾第鞭毛虫阳性检出率为4. 72%(6/127)。结果表明:宁夏部分奶牛养殖区犊牛已经存在着较为严重的轮状病毒和隐孢子虫病感染,此调查为宁夏制定科学有效的综合防控措施提供了有效依据,对促进宁夏地区奶产业健康持续发展具有重要意义。     

某奶牛场隐孢子虫及其他寄生虫感染情况调查

<正>奶牛常见寄生虫病种类较多,严重影响奶牛生产性能,有的甚至危及奶牛的生命。隐孢子虫是寄生于奶牛体内的一种常见寄生虫~([1])。1985年首次发现了犊牛感染隐孢子虫。隐孢子虫病是由隐孢子虫科隐孢子虫属的多种隐孢子虫寄生于肠黏膜上皮细胞和胃黏膜细胞内引起的一种原虫病,其病原隐孢子虫(Cryptosporidium)可广泛寄生于人类、禽类、哺乳类和两栖类等240多种动物~([2])。本病多发生于犊牛,以严重腹泻为特征。     

奶牛场55例犊牛腹泻主要病原调查

为了解杨凌周边部分奶牛场犊牛腹泻的病原种类及感染情况,通过对杨凌2个奶牛场的55例腹泻犊牛取样检测,采用快检试剂盒对牛病毒性腹泻病毒、轮状病毒、大肠埃希菌K99、贾第虫以及隐孢子虫进行检测。结果发现不同病原的总体感染率分别为隐孢子虫35.7%,轮状病毒21.4%,大肠埃希菌K9921.4%,贾第虫7.1%,牛病毒性腹泻病毒未检出。结果表明,调查的2个奶牛场犊牛腹泻病原主要为隐孢子虫、轮状病毒、大肠埃希菌K99、贾第虫,其中隐孢子虫总体感染情况最为严重,未检出牛病毒性腹泻病毒。     

犊牛反刍前感染隐孢子虫引起维生素A代谢障碍

犊牛反刍前感染隐孢子虫引起维生素Ａ代谢障碍犊牛试验感染隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｘｖｕｍ），检验其血清维生素Ａ醇、维生素Ａ软脂酸盐及维生素Ａ总量，并观察空肠和回肠形态学变化。试验组１为对照组，不感染隐孢子虫，试验时连续６天每隔１２小...     

奶牛隐孢子虫病流行病学调查及初生犊牛感染试验

应用饱和糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法调查郑州、商丘和洛阳3个地区的5个奶牛场、2个专业村的582份粪样，查出阳性样品64份，隐孢子虫总阳性率11％（64／582），发现两种不同形态的卵囊，根据其形态结构等特点鉴定为小球隐孢子虫（C．parvum）和安氏隐孢子虫（C．andersoni）。其中2个场奶牛感染安氏隐孢子虫，有1个场的奶牛感染小球隐孢子虫，且感染强度较小。犊牛感染率较育成牛、成年牛高。并进行小球隐孢子虫分离株对初生犊牛的致病性试验，其结果为潜隐期7天，排卵囊高峰出现在感染后第16天，高峰期5天。剖检后消化道黏膜经抗酸染色鉴定，仅在回肠中段发现卵囊。     

牛源隐孢子虫新疆南疆分离株巢式PCR鉴定

为了解新疆南疆牛隐孢子虫病的感染情况,从而为该病的防控提供理论依据,以新疆南疆某牛场牛粪中的隐孢子虫卵囊DNA为模板,根据隐孢子虫18S rRNA序列设计引物,采用巢式PCR方法鉴定了自然感染的新疆南疆牛源隐孢子虫,并对扩增出的目的片段进行了测序、同源性分析,并运用MEGA 5.0软件构建系统发育进化树。结果表明:检测材料能够扩增出目的片段;新疆南疆牛源隐孢子虫分离株的18S rRNA与广州微小隐孢子虫的同源性达100%,种系发育亲缘关系最近,处于同一分支,与宁夏、河南、黑龙江等地微小隐孢子虫的同源性达99%。说明新疆南疆牛源隐孢子虫分离株在种属上为微小隐孢子虫。     

隐孢子虫病的防治

1907年，美国寄生虫专家Tyzzer在小白鼠体内作胃腺组织切片时，在上皮细胞内发现了一种细胞内寄生的原虫，并命名为隐孢子虫（Cryptosporidium）。1955年Slavin报道隐孢子虫感染火鸡小肠出现急性临床症状，其特征是严重腹泻，但死亡率低，首次证明了隐孢子虫的强致病性。特别是1971年Panciera等在腹泻犊牛小肠中检测到隐孢子虫后更进一步引起了兽医界的兴趣，1985年周圣文等在国内首次发现并报道犊牛隐孢子虫病。