黄瓜‘浙秀1号’种子纯度的SSR鉴定

种子纯度在种子生产中的重要性日益提升,分子标记技术因其具有高效、稳定、可靠等优点越来越多地被应用到种子纯度鉴定中。本研究利用SSR分子标记技术对黄瓜杂交品系‘浙秀1号’及其两亲本之间的多态性进行了引物筛选和种子纯度鉴定研究。结果表明,在699对供选SSR引物中,有3对引物分别在‘浙秀1号’杂交种和其双亲之间表现为稳定的共显性,杂交种带型为双亲的互补带型,适合于杂交种纯度鉴定。经田间试验验证,引物稳定性良好,且与田间鉴定结果非常接近,可用于‘浙秀1号’杂交种种子纯度的鉴定,显示出SSR标记技术在黄瓜杂交种子纯度的室内快速检测中有广泛应用前景。     

棉花杂交种种子纯度的SSR分子标记鉴定方法

种子的纯度是影响杂交棉发挥其杂种优势的重要原因。本研究基于不同棉花品系之间的遗传变异,筛选出杂交种亲本间具有多态性,且为共显性的SSR核心引物,用于杂交种种子纯度鉴定。通过统计每个检测引物扩增带型的差异或一致性,综合得出杂交种的种子纯度。利用该方法,对4个棉花杂交种种子的纯度进行SSR分子标记鉴定,为棉花杂交种纯度鉴定提供参考。     

基于InDel标记快速检测黄瓜津优38种子纯度

以黄瓜品种津优38中插入缺失(InDel)标记为研究对象,筛选获得能够区分津优38父本、母本及其杂交种的[TT]缺失位点:应用焦磷酸测序技术检测该位点,初步建立基于InDel标记的津优38种子纯度鉴定方法并检测8批种子样品.结果表明,应用焦磷酸测序技术检测[TT]缺失住点能明显区分出津优38父本、母本及杂交种;基于InDel标记的津优38种子纯度鉴定方法具有高准确性、高通量、操作简单、易于自动化等优点;8批种子样品平均种子纯度为97.08%,与SSR鉴定结果(95.83%)基本相符.     

抗除草剂基因在黄瓜杂种纯度快速鉴定上的应用研究

黄瓜抗除草剂转基因T0植株经除草剂抗性筛选,连续2代自交获得T1和T2种子;分别对T1植株进行bar基因PCR检测和T2植株Southern杂交检测,证明bar基因已整合到黄瓜染色体上;以非转基因黄瓜为对照,摸索出田间抗性鉴定和室内种子抗性鉴定的除草剂临界浓度;从田间和室内筛选除草剂抗性纯合性转基因株系3个;以表现较好的2个抗性纯合转基因株系为父本,与非转基因母本杂交,获得F1种子,并在室内进行了杂交种纯度鉴定,鉴定效率达100％。建立了一套在种子发芽阶段或2片真叶期进行黄瓜杂交种纯度鉴定的新技术。     

利用SSR标记鉴定茎瘤芥(榨菜)“涪杂5号”种子纯度

为建立一套丰产抗病型的茎瘤芥杂交品种"涪杂5号"种子纯度的快速鉴定方法,本研究以"涪杂5号"及其双亲为试验材料,采用改良CTAB法快速提取DNA与SSR标记分析相结合,对茎瘤芥杂交种种子纯度进行检测。利用改良CTAB法提取的DNA能够满足SSR分析要求,从600对SSR芸薹属共有引物中筛选出3对共显性SSR标记引物Ol11-G11、Na14-G06和Na14-G10,父母本条带互补,可将杂交种中的假杂株分离开。分别利用其中两对引物相结合,对"涪杂5号"种子群体进行SSR检测,结果发现分子标记鉴定结果与田间鉴定结果基本一致。研究结果表明了利用SSR引物Na14-G06与Na14-G10或Ol11-G11相结合可实现对茎瘤芥杂交种"涪杂5号"种子纯度的快速和准确鉴定,并为其大面积推广和安全生产提供了理论依据。     

玉米杂交种纯度鉴定SNP 核心引物的确定及高通量检测方案的建立

纯度是玉米种子质量的重要指标之一,尤其杂交种自交株是影响田间产量的关键因素。KASP(kompetitive allele specific PCR)技术具有高通量、低成本的优点,适用于种子纯度检测。本研究基于12套杂交种及其父母本的三联体样本及335份玉米杂交种国家审定标准样品SNP指纹,从384个SNP基础位点筛选获得60个候选位点,位点转化为KASP引物的成功率为95%。综合考虑引物双亲互补率、多态性、稳定性和分型效果等多项指标,最终确定20个引物作为玉米杂交种纯度鉴定的核心引物,能够有效鉴定99.7%供试样品纯度。对于待测样品京科968通过SNP-DNA指纹数据库查询,并选择双亲互补型引物进行纯度鉴定。在检测的110个个体中,共检出1个自交苗和2个异型株,纯度为97.3%。同时,基于纯度核心引物对批量样品检测建立高通量纯度检测方案,具有快捷、准确、高通量和低成本的特点,为政府监管和企业提供了更多纯度鉴定方案的选择。     

影响番茄杂交种子纯度的因素分析及防止对策

衡量番茄杂交种子质量的主要标准有纯度、净度、发芽率、含水量四大指标。外贸番茄杂交制种对杂交种子纯度要求 98%以上。在制种全过程中 ,从播种到收获任何环节上失误 ,都可能导致杂交种子纯度下降。总结几年来外贸番茄杂交制种实践经验 ,对影响杂交种子纯度的因素进行分析 ,提出保证种子纯度的关键技术措施 ,为番茄杂交制种提供依据 ,供制种农户、制种单位及有关技术人员参考。1　种子纯度的影响因素种子纯度是指本品种种子数占供试样品种子数的百分率。导致番茄杂交种子纯度下降的原因是混入异品种种子或自交种子。1.1　混杂种子混杂种子…     

利用SSR标记鉴定玉米杂交种黔单16号纯度的研究

玉米杂交种纯度鉴定对玉米种子质量管理具有重要意义;本实验利用SSR标记技术,以玉米杂交种黔单16号及其亲本DNA为供试材料,从30对SSR引物中筛选出3对在杂交种黔单16号中呈现双亲带型的引物;研究表明,这3对引物均可用于玉米杂交种黔单16号种子纯度鉴定.     

ISSR分子标记在丝瓜杂交种纯度鉴定的应用

品种纯度鉴定对种子质量的保证十分关键。为了鉴定丝瓜杂交种‘农福丝瓜801’的遗传纯度,本研究利用ISSR分子标记技术对丝瓜杂交种‘农福丝瓜801’及其亲本的DNA指纹进行分析,试验从100条引物中筛选出具有特异性ISSR引物3个(ISSR-820,ISSR-886,ISSR-891)。结果表明,ISSR-820为父母本特异性标记共显性引物,可快速有效地辨别杂交种;ISSR-891能以杂交种是否扩增出父本特征带为依据,可有效地鉴定出杂交种中所混杂的母本自交系种子;ISSR-886能区分父本机械系混杂。并且,ISSR分子鉴定结果与田间鉴定结果相一致,表明这些引物能有效应用于‘农福丝瓜801’种子纯度的快速鉴定。     

SSR标记对甜瓜杂交种‘玉贵人’纯度的鉴定

为了精准快速地筛选出鉴定甜瓜杂交种纯度的SSR引物,本研究利用18对甜瓜SSR核心引物对甜瓜杂交种‘玉贵人’及其亲本进行引物筛选和种子纯度鉴定。结果筛选出2对引物(CmS57和CmS59)在子代中兼具双亲条带并且在亲本间具有多态性,且条带清晰,间隔明显,并利用这2对引物在杂交群体中进行验证,纯度鉴定结果为97.8%和100.0%;SSR分子标记的鉴定结果与田间调查结果的误差为1.1%。表明本研究筛选出的引物CmS57和CmS59能够作为特异引物对甜瓜杂交种‘玉贵人’进行种子纯度检测,也说明应用SSR分子标记技术对甜瓜种子的纯度鉴定是可行的。     

甘蓝型油菜中油杂8号种子纯度的SSR鉴定

（中国农业科学院油料作物研究所/国家油料作物改良中心/农业部油料作物遗传改良重点实验室,湖北武汉 430062）     

农业生物技术在水稻种子纯度鉴定中的应用

【研究目的】为了选择直观、准确、可靠、经济可行和易于操作的水稻种子纯度鉴定技术;【方法】分析和总结了电泳鉴定法、DNA分子标记鉴定法和叶色标记技术鉴定水稻种子纯度的研究进展及应用概况;【结论】作者认为电泳鉴定法及DNA分子标记鉴定法只能获得杂交水稻杂种纯度的基本数据,不具备有效排除假杂种的功能,也不可能采取后补救措施解决因纯度低而造成的产量损失。白化转绿型叶色标记技术运用在杂交水稻上,将结束传统种子纯度的检测方法,引发种子纯度检测的革命,具有极其广阔的市场前景。     

分子标记技术在蔬菜作物品种鉴定与纯度检测中的应用

品种鉴定与遗传纯度检测是蔬菜作物种子品质检验极为重要内容。本文综述了以蛋白质、DNA为基础的分子标记,如蛋白质与同工酶、RELP、RAPD、SSR、ISSR等分析技术应用于蔬菜种子检测的基本原理与进展。利用标记分析技术成功进行F1种子纯度检测的关键是亲本与杂交种间稳定差异位点的获得。已获得的重要园艺性状紧密连锁的遗传标记将有利于F1种子纯度鉴定。由于分子标记客观、稳定、快速、高效,这些技术将在今后种子检测中起到重要作用。     

基于油菜F1杂种种皮鉴别其母本的SSR检测方法及应用

甘蓝型油菜杂交种中雄性不育母本假杂种是影响种子纯度的关键。为了探索一种能准确鉴定油菜杂交种中母本假杂种的方法,利用CTAB小样法分别提取油菜F1杂种种皮和幼苗的总DNA,进而筛选种皮与幼苗的SSR谱带存在差异的引物,并用于鉴别杂交种制种样品中母本基因型假杂种。结果表明：F1杂种种皮的SSR电泳谱带与其母本相同,利用筛选到的多态性SSR引物对2个国审品种的6份杂交制种样品中母本基因型假杂种鉴定的结果与田间单株鉴定吻合率达98%以上,说明利用F1杂种种皮与幼胚存在多态性的SSR标记鉴定杂交种的母本基因型假杂种是可靠的。该技术方法可以克服目前油菜杂交种SSR纯度鉴定对亲本的依赖,为种子生产、管理和经营部门种子纯度质量的有效监控提供技术参考。     

碧绿3号苦瓜种子纯度的RAPD检测研究

应用60个随机引物对华南地区苦瓜主栽品种之一--碧绿3号及其亲本的基因组DNA进行了RAPD分析,发现引物OPQ-01可在碧绿3号及其亲本的RAPD图谱中形成多态性差异,可应用于碧绿3号苦瓜种子纯度的检测;对1份种子样品进行了RAPD检测,其结果与田间种子纯度检测结果完全一致.     

DNA指纹用于杂交水稻种子纯度和真伪鉴定的研究进展

本文简要阐述了RAPD、RFLP、AFLP、SSR等几种主要的建立DNA指纹图谱的分子标记技术及其在杂交水稻种子纯度和真伪鉴定中的研究和应用情况,同时评述了这几种分子标记技术各自的优缺点,并就水稻DNA提取方法的改进、PCR扩增反应程序和反应体系的优化、扩增产物的检测以及DNA指纹在杂交稻种子纯度和真伪鉴定中的准确性等问题进行了讨论。DNA指纹在杂交水稻种子纯度和真伪鉴定中具有广阔的应用前景,关键是要建立一套完善的、标准化的技术体系,进一步简化实验操作程序,降低成本,真正做到简单快速、准确可靠,使DNA指纹能用于规模化、商业化的种子质量鉴定之中。     

大豆品种真实性与品种纯度田间小区种植鉴定研究报告

通过对呼伦贝尔市2008 年春季监督抽查的9 个大豆品种共294 份种子样品进行真实性和品种纯度的田间小区种植鉴定。以GB/T3543.5-1995 为准,4N原则设计田间排列,采取人工精量点播、优质化学除草管理,于不同生育期记载试验品种及标准对照品种的主要特征特性,并比对印证。试验结果表明：样品平均出苗率为87.0%,其中92.2%的样品出苗率高于80%。168 个小区有硬实苗,比例为57.1%,但高硬实苗率样品小区不多,硬实没有严重影响种子质量。259 个小区样品纯度鉴定达标,总达标率88.1%;68 个小区为高纯度样品区,未检出杂株,比例为23.1%;10 个小区的样品纯度低于90%,比例为3.4%,其中4 个小区检出为非本品种（异品种）问题样本,比例为总样品的1.4%。样品田间出苗率整体表现优良;纯度表现良好。但极少数低纯度样品种子质量堪忧。纯度鉴定结果显示,高纯度样品与低纯度样品均有聚集现象,即优质企业样品质量愈加优良;问题企业样品质量愈加低劣。试验再次证实了田间小区种植鉴定方法的稳定性、可靠性,今后仍将长期是种子真实性与纯度检验的主要方法之一。     

陆两优996种子纯度的SRAP指纹图谱鉴定

利用270对SRAP引物对陆两优996和2个亲本的DNA指纹图谱，获得能在父、母本间表现出多态性的特异SRAP标记引物有54对，其中差异性条带136个。利用Me3Em8引物，条带在杂交种完全互补，对200株样本进行了纯度鉴定，结果鉴定纯度为97.50%，与田间种植鉴结果97.50%(海南鉴定)一致，表明SRAP标记技术适用于种子纯度鉴定。