用马丁干粉培养多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230株增菌高峰期试验

猪多杀性巴氏杆菌病（猪肺疫）是猪常见的传染病，目前已研制出防治该病的许多种疫苗，利用多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230株生产的猪肺疫活疫苗就是其中之一，许多生物制品厂多采用马丁肉汤作为培养基，用马丁干粉作为培养基使用的较少，目前尚未有报道。试验采用马丁干粉培养基培养多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230株，并对增菌高峰期进行测试，现将结果报道如下。     

用马丁干粉培养多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230珠增菌高峰期试验

猪多杀性巴氏杆菌病(猪肺疫)是猪常见的传染病,目前已研制出防治该病的许多种疫苗,利用多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230株生产的猪肺疫活疫苗就是其中之一,许多生物制品厂多采用马丁肉汤作为培养基,用马丁干粉作为培养基使用的较少,目前尚未有报道.试验采用马丁干粉培养基培养多杀性巴氏杆菌内蒙系679-230株,并对增菌高峰期进行测试,现将结果报道如下.     

用不同培养基生产猪多杀性巴氏杆菌活疫苗的试验研究

用马丁干粉和马丁肉汤培养基培养猪多杀性巴氏杆菌,分别生产3批猪多杀性巴氏杆菌活疫苗。结果用马丁干粉培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1．80×10^10CFU／mL、1.75×10^10CFU／mL、1.80×10^10CFU／mL：冻干后的存活率分别为64％、69％、67％。用马丁肉汤培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1．20×10^10CFU／mL、1．50×10^10CFU／mL、1．10×10^10CFU／mL,冻干后的存活率分别为50％、49％、54％。用两种培养基制备的疫苗按《兽用生物制品检验标准》（以下简称《标准》）检验6批疫苗均合格。     

猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（EO630株）生产用合成培养基的研究

为便于猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（E0630株）质量控制和降低生产成本,研制了ZJ-1和ZJ-2两种合成培养基,并进行了两种合成培养基与马丁肉汤的比较试验。结果表明,合成培养基ZJ-1培养活菌数高于ZJ-2和马丁肉汤。用合成培养基ZJ-1培养制备3批疫苗,并分别用兔进行安全检验和小鼠效力检验。3批疫苗对兔均2／2健活,对小鼠的保护力分别为9／10、9110、8／10,符合产品质量标准。本试验表明,运用合成培养基替代传统培养基是可行的。     

兔多杀性巴氏杆菌制苗菌液灭活工艺的试验报告

为了优化疫苗制造过程中的灭活工艺，本课题组针对甲醛的使用浓度以及灭活时间进行了试验。试验结果表明，兔多杀性巴氏杆菌JN株菌液按0．2％的比例（v／v）加入甲醛溶液，37℃条件下灭活48h，灭活彻底，以该灭活工艺制备的免多杀性巴氏杆菌灭活菌液注射试验兔，试验兔10／10健活，注射部位无炎性反应，试验兔采食量、饮水量无明显异常变化，精神状态良好，表明该灭活工艺灭活的菌液安全性良好，该灭活工艺切实可行。     

禽多杀性巴氏杆菌(G190E40株)菌液发酵参数对细菌菌数影响的探讨

本文通过马丁肉汤培养基和改良马丁液体培养基发酵禽多杀性巴氏杆菌(G190E40株)的比较以及改变发酵过程中通气量的大小、方式等发酵参数,寻找获得菌液菌数最高的发酵模式;通过对马丁肉汤培养基和改良马丁液体培养基发酵时间和菌数的关系,确定最适宜的收获时间,从而提高细菌冻干存活率.试验证明:使用改良马丁液体培养基、先静止后逐渐增大通气量的发酵效果最好,发酵时间大约在8h左右时菌液菌数最高.     

多杀巴氏杆菌的一种选择性分离培养基

以马丁培养基为基础，加入促生长因子牛全血和抑菌剂硫酸新霉素和盐酸洁霉素制成多杀巴氏杆菌分离培养基．当培养基中硫酸新霉素的浓度低于２．５μｇ／ｍｌ时，对多杀巴氏杆菌生长无影响；浓度为２．５μｇ／ｍｌ时．对其个别菌株的生长稍有抑制作用；当浓度增大到到５μｇ／ｍｌ时，荚膜Ａ型菌株的生长明显受到抑制，Ｂ型菌株部分受到抑制，而Ｄ型菌株基本不受影响；当浓度达到１０μｇ／ｍｌ时，各型菌株均不能生长．当培养基中含硫酸新霉素２．５μｇ／ｍｌ和盐酸洁霉素１．０μｇ／ｍｌ时，仅个别菌株的生长稍受抑制，而绝大多数菌株生长不受影响．当培养基中含硫酸新霉素２．０μｇ／ｍｌ和盐酸洁霉素１．０μｇ／ｍｌ时．对各型多杀巴氏杆菌的生长均无抑制作用，并可抑制环境中绝大多数杂菌的生长。因此，可以作为选择性培养基分离多杀巴氏杆菌。     

禽霍乱鸡胚组织灭活油乳苗的研究

选择禽多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１强毒株（血清１型），接种鸡胚，收集死胚制备组织灭活油乳苗，分别免疫鸡和鸭，设肉汤培养的Ｃ４８－１菌株灭活乳化苗作免疫对照。免疫后４周用异源血清型禽多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（血清３型）攻击。经组织灭活油乳苗免疫的鸡保护率达９３．３％，鸭保护率达１００％，而经肉汤培养的灭活苗对鸡和鸭均无保护作用，说明鸡胚培养的多杀性巴氏杆菌具有交叉保护作用。     

兔多杀性巴氏杆菌16S rRNA PCR检测方法的建立和应用

以兔多杀性巴氏杆菌的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的多杀性巴氏杆菌的16SrRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了兔多杀性巴氏杆菌PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60cfu/mL,使用建立的PCR方法扩增兔多杀性巴氏杆菌标准株和分离株均能扩增出643bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本试验所建立的兔多杀性巴氏杆菌病原PCR检测方法敏感、特异、可靠。     

多杀巴氏杆菌的一种选择性分离培养基

以马丁培养基为基础，加入促生长因子牛全血和抑菌剂硫酸新霉素和盐酸洁霉素制成多杀巴氏杆菌分离培养基。当培养基硫酸新霉素的浓度低于２．５μｇ／ｍｌ时，对多杀巴氏杆菌生长无影响；浓度为２．５μｇ／ｍｌ时，对其个别菌株的生长销有抑制作用；当浓度增大到５μｇ／ｍｌ时，英膜Ａ型菌株的生长明显受到抑制，Ｂ型菌株部分受到抑制，而Ｄ型菌株基本不受影响；当浓度达到１０μｇ／ｍｌ时，各型菌株均不能生长。当培养基中含硫酸     

马丁干粉培养基的性能研究

将研制的马丁干粉培养基与新鲜马丁培养基比较,证明用干粉培养基培养链球菌、多杀性巴氏杆菌和丹毒杆菌,其每1 mL中活菌数和灵敏度均与新鲜马丁培养基相当.干粉培养基用于生物制品的生产及检验更方便且质量稳定,可推广应用.     

用不同培养基生产猪多杀性巴氏杆菌活疫苗的试验研究

用马丁干粉和马丁肉汤培养基培养猪多杀性巴氏杆菌,分别生产3批猪多杀性巴氏杆菌活疫苗.结果用马丁干粉培养基生产的制苗用茵液的活菌数分别为1.80×1010 CFU/mL、1.75×1010 CFU/mL、1.80×1010 CFU/mL;冻干后的存活率分别为64%、69%、67%.用马丁内汤培养基生产的制苗用菌液的活菌数分别为1.20×1010 CFU/mL、1.50×1010 CFU/mL、1.10×1010 CFU/mL,冻干后的存活率分别为50%、49%、54%.用两种培养基制备的疫苗按<兽用生物制品检验标准>(以下简称<标准>)检验6批疫苗均合格.     

禽霍乱鸡胚组织灭活油乳苗的研究

选择禽多杀性巴杆菌Ｃ４８－１强毒株（血清１型）接种鸡胚，收集死胚制备组织灭活油乳苗，分别免疫鸡和鸭，设肉汤培养的Ｃ４８－１菌株灭活乳化苗免疫对照，免疫后４周用异源血清型禽多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（血清３型）攻击。经组织灭活油乳免疫的鸡保护率达９３．３％，鸭保护率达１００％，而经肉汤培养的灭活苗对鸡和鸭均无保护作用，说明鸡胚培养的多杀性巴氏杆菌具有交叉保护作用。     

马丁琼脂培养基质量控制标准研究

为建立马丁琼脂培养基质量控制标准,系统评价马丁琼脂培养基适应性和促生长能力,运用多杀性巴氏杆菌、丹毒杆菌和链球菌类活疫苗活菌计数参考品,通过活菌计数统计分析,对新鲜马丁琼脂、干粉马丁琼脂或改良马丁琼脂进行适应性和促生长能力系统测试。结果显示：新鲜马丁琼脂、干粉马丁琼脂和改良马丁琼脂均对多杀性巴氏杆菌、丹毒杆菌、链球菌的适应性和促生长能力差异显著,需同时选择巴氏杆菌类、丹毒杆菌类、链球菌类活疫苗计数参考品评价马丁琼脂培养基的适应性和促生长能力,表明活菌计数参考品用于建立马丁琼脂质量控制标准是可行的。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗研制

以具有良好免疫原性的兔病毒性出血症病毒野毒WF株和兔多杀性巴氏杆菌C51-17株作为种子,研制出了兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌二联蜂胶灭活苗,并对疫苗进行了免疫剂量、免疫产生期、免疫保护期、保存期等试验,确定出二联苗免疫剂量1.0mL,二联苗在免疫后5天对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,免疫后10天对兔多杀性巴氏杆菌的保护率均达到80%,二联苗分别在免疫后6个月用兔出血症强毒攻击仍产生100%保护,在6个月用1个MLD的兔多杀性巴氏杆菌攻击保护率可达80%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为18个月。     

兔巴氏杆菌魏氏梭菌二联蜂胶灭活苗的研制

巴氏杆菌病与魏氏梭菌性肠炎是家兔的两种主要细菌性疾病，其发病率和死亡率均较高。蜂胶作为一种良好的免疫增强剂，不仅能够增强机体的免疫功能，而且还具有抗菌消炎的功能。为此，我们利用蜂胶作为佐剂，研制了兔巴氏杆菌魏氏梭菌二联蜂胶灭活疫苗。现将研制情况报告如下：１　材料与方法１．１　菌种兔巴氏杆菌系本所分离菌株，经鉴定为１：Ａ型。Ａ型魏氏梭菌菌种由中国兽药监察所提供。巴氏杆菌马丁肉汤培养物皮下或肌肉接种５～１０个活菌，能致死敏感兔。魏氏梭菌１８～２２小时肉肝汤培养物肌肉接种０．５ｍＬ／只，攻毒兔死亡或出…     

两株不同血清型禽源多杀性巴氏杆菌的理化特性研究

禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（８：Ａ型）和Ｃ４８．１（５：Ａ）对营养的需要较高，在一般培养基上生长不良，相比之下，Ｃ４８－１比Ｐ１０５９生长更差，但在胰蛋白胨肉汤和加５ｍＬ／Ｌ血清的普通培养基中两株菌均生长丰盛；两株菌的生长曲线显示，Ｃ４８－１在对数生长期的繁殖速度较快，最高菌数略低，但衰落期细胞死亡速度较慢；对培养基中ＮａＣｌ含量的要求，Ｃ４８－１为０～２．７％，Ｐ１０５９为０．９％～２．１％；     

干粉培养基在禽多杀性巴氏杆菌病活疫苗培养中的应用

正商品化干粉培养基在培养中应用越来越广泛,给细菌培养提供充分营养需求,简化培养基制备过程,并可使批间次差异减少。1菌种及原材料1.1菌种禽多杀性巴氏杆菌G190E40弱毒株,效检用禽多杀性巴氏杆菌C48-1强毒株。1.2培养基青岛海博公司,巴氏杆菌干粉培养基,批号:2015121.3试验动物3~4月龄的健康易感鸡2菌种制备2.1基础种子G190E40株冻干菌种用灭菌2~5mL pH7.4     

氟苯尼考对鸡多杀性巴氏杆菌感染的疗效试验

以试管肉汤两倍稀释法测定氟苯尼考和氯霉素对鸡多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度，然后对实验性鸡多杀性巴杆菌感染进行内服或肌注给药3d（每天2次）的治疗试验。结果表明，氟苯尼考和氯霉素对鸡多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度分别是0．5和1．0μg／mL。以20、40、80mg／kgBW氟苯尼考和40mg／kgBW氯霉素的剂量给鸡内服给药后，对鸡多杀性巴氏杆菌感染的治愈率分别为93．3％、100％、100％及70％；相同剂量肌注给药的治愈率分别为86．7％、100％、100％和83．3％，而感染对照组的死亡率为90．0％。     

兔传染性疾病防治技术讲座(一)

第一讲 兔传染性鼻炎的防治 兔传染性鼻炎病原为多杀性巴氏杆菌,以前也称兔败血杆菌病,兔败血巴氏杆菌病。 一、诊断要点 1.本病在秋季和春季发病率最高,可达20％～70％。发病率同卫生状况、兔只抵抗力及多杀性巴氏杆菌的致病力有关。病原体通过直接接触和空气而传播。