利用EST同工酶鉴定天麻品种及亲缘关系的研究

目的：鉴定3种天麻品种及其亲缘关系。方法：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对三种天麻菌株酯酶(EST)同工酶进行研究。结果：天麻不同菌株之间酯酶同工酶活性不同，酶谱条带数在4～5条，且具有特征谱带。B、G的酶谱条带数基本相同；R、B、G的酶谱条数依次分别为4条，5条，4条；其中基本酶带有3条；G号菌株与B号菌株的相似度指数为0．89，说明这两个菌株间亲缘关系最近。G号菌株与R菌株的相似度指数为0．75，反映它们之间的亲缘关系相对较远。     

中国六个白灵菇（Pleurotus nebrodensis）商业菌株的DNA指纹图谱分析

在中国的6个白灵菇商业菌株中，ITS区域的621bp DNA片段和蛋白转录延长因子的519bpDNA片段的序列完全相同，表明该6个菌株属同一个种，RAPD分析结果表明，其中5个白灵菇菌株的亲缘关系较近，用PAUP4．0软件中的UPGMA方法进行聚类分析，遗传差异小于3．4％，但这5个菌株与6号菌株的差异较大，达到了16．9%。在此基础上构建了6号菌株的特异性标记引物。     

杏鲍菇多孢分离菌株ISSR、RAPD分子标记及体细胞不亲和性分析

通过杏鲍菇多孢分离菌株的ISSR、RAPD分子标记和体细胞不亲和性分析,体细胞不亲和性分析得出子代杏1、杏3、杏4与出发菌株湘杏98有拮抗线,杏1、杏2、杏3、杏4四株子代均有明显的拮抗线。16条ISSR引物和19条RAPD引物分别扩增出99、154个条带,多态性条带分别占48.48%、61.00%;相似系数变异范围分别为0.63~0.86、0.57~0.83。湘杏98、杏2、杏3在2种标记的聚类结果上存在差异。体细胞不亲和性分析从表型上(拮抗线有无)反应了菌株的遗传变异。RAPD标记遗传相似系数小于ISSR标记,表明ISSR标记更适合亲缘关系较近的种群间遗传多样性分析。     

继代培养对蛹虫草菌丝生长速度及酯酶同工酶的影响

以蛹虫草菌株为试材,通过垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和菌丝生长速度测定,对不同代次蛹虫草菌丝生长速度和菌株酯酶同工酶表现型进行比较分析,旨在寻找蛹虫草菌种退化机理。结果表明:不同代次蛹虫草的菌丝生长速度差异不显著,而酯酶同工酶酶谱发生较大变异。9个菌株共有3条迁移率不同的条带,分别为0.63、0.65和0.67,其中F1、F3、F4和F5代菌株出现第2、3条酶带,迁移率分别为0.65和0.67,而F2、F6、F7、F8、F9代菌株发生变异,迁移率为0.67的条带消失,菌株酶谱条带中产生了迁移率为0.63的新条带。     

九株鸡腿菇菌株比较试验

试验比较了来自不同地区的9个菌株，结果表明：4个供试菌株产量较高，其中特白33菌株、7号菌株和5号菌株在1％水平上显著优于CC944对照菌株，生物转化率分别高于对照菌株46．6％、33．9％和15．5％。     

中国工厂化栽培杏鲍菇菌株的RAPD和ISSR分析

为了研究国内工厂化栽培的杏鲍菇菌株的遗传多样性,对筛选的34个杏鲍菇菌株进行RAPD(Randomly Amplifiled Polyrnorphic DNA)和ISSR(Inter-Stmple sequence Repeat)分析。从31个RAPD引物中选取了23个引物对34株杏鲍菇工厂化生产菌株进行PCR扩增,共扩增出266条稳定清晰的DNA条带;从32个ISSR引物中选取了23个引物对34株杏鲍菇工厂化生产菌株进行PCR扩增,共扩增出211条稳定清晰的DNA条带。根据扩增结果,对34个杏鲍菇菌株进行了RAPD标记、ISSR标记及二者相结合的聚类分析。3种方法的分析结果相近,可分别将34个供试菌株分为4~5大类。研究为国内工厂化杏鲍菇栽培菌株的筛选、育种和栽培奠定基础。     

基于酯酶同工酶的暗褐网柄牛肝菌遗传多样性分析

从云南、四川两省9个采样地共收集31个暗褐网柄牛肝菌(Phlebopus portentosus)子实体,通过组织分离获得菌株,分别利用固体、液体培养基培养菌丝体,对其进行酯酶同工酶分析,通过酶谱聚类分析研究分离菌株的遗传多样性。结果表明,固体培养的菌丝体共检出10个酯酶同工酶条带、21种酶谱类型,每个菌株具有2条~5条同工酶条带;液体培养菌丝体共检出11个同工酶条带、23种酶谱类型,每个菌株具有2条~6条同工酶条带;2种培养方式下所有菌株均检出一条相对迁移率R_f=0.13、相对分子质量为136 kDa的同工酶条带;不同培养方式相同菌株的酯酶同工酶酶谱存在较大差异。在遗传距离为0.220时,固体培养菌丝体的酯酶同工酶酶谱聚为9类,液体培养的聚为7类;在遗传距离为0.300时,2种培养方式的酶谱均聚为4类;聚类结果与地理来源无相关性。暗褐网柄牛肝菌具有丰富的遗传多样性,为后续种质资源保护、优良菌株筛选和种性鉴定等工作提供参考。     

河北省苹果树腐烂病病菌遗传多样性的RAPD分析

为了揭示河北省苹果树腐烂病病菌的群体遗传多样性,应用5条随机引物对采自河北省张家口、石家庄、邢台、廊坊、衡水、秦皇岛、唐山、沧州和保定9个苹果产区的、具有代表性的44个苹果树腐烂病病菌分离株的DNA进行了RAPD分析。结果表明:这些分离株共产生了89条谱带,并且均为多态性条带,多态性位点率为100%;应用NTSYS 2.1软件对所得到的RAPD图谱进行聚类分析,以遗传距离0.72为阈值,所有的菌株可划分为7个遗传群体,这说明河北省苹果树腐烂病病菌具有丰富的种内遗传多样性,然而,这种群体多样性与地理来源并无直接关系;鉴于黄色、浅黄色和灰白色菌株为河北省苹果树腐烂病病菌的优势菌株,特选出分别来自第Ⅰ^Ⅶ组的6号、8号、27号、37号、14号、20号和31号菌株作为备用菌株,供今后在抗病种质材料测试中使用。     

RAPD和SRAP分子标记在金针菇菌种鉴定中的应用

试验从分子生物学和形态学角度，利用SRAP和RAPD分子标记技术对7个金针菇菌株进行遗传多样性分析。SRAP共扩增出469条DNA条带。大部分条带分子量在200～3000bp，多态性条带为377条，占总条带数的80．4％，每对引物平均获得41．9条多态性条带。RAPD扩增出476个条带。其中多态性条带为274条，占总条带数的57．6％，每个引物平均获得343条多态性条带。结果证明，RAPD与SRAP分子标记技术在试验中分别在以相似系数0．91和0．72为阈值时，7个供试菌株的分组大致是相同的。金913和金19同源性最大，在2种分子标记技术中相似系数分别达到了0．9903和0．8966，表明金913和金19可能是同物异名，而金405与其他菌株的亲缘关系最远，其远缘优势应在杂交育种中引起重视。     

RAPD和SRAP分子标记在真姬菇菌种鉴定中的应用

利用RAPD及SRAP分子标记技术对从国内外收集到的12个真姬菇菌株进行遗传多样性分析.结果表明,20条RAPD引物共扩增出多态性条带285条,18对SRAP引物共扩增出多态性条带176条.在相似系数0.800水平时,RAPD和SRAP分子标记分别将12个真姬菇菌株分为5个和6个类群.两种方法均适用于真姬菇种内鉴定,而SRAP标记较RAPD标记稳定性好,更适于真姬菇的种内鉴定.     

碳源和氮源对绣球菌茵丝生长的影响

采用平板培养方法研究了碳源、氮源对绣球菌(Sparassis crispa)菌丝生长的影响,并用二元二次正交回归实验对绣球菌的母种培养基配方进行优化.结果表明,适宜绣球菌菌丝生长的最佳碳氮源为葡萄糖和鱼粉蛋白胨,优化后的母种培养基配方为:马铃薯20％,葡萄糖2.10％,鱼粉蛋白胨0.32％,琼脂2％.     

树脂在绣球菌多糖脱色中应用的初步研究

通过不同树脂对绣球菌多糖脱色率及多糖保留率的比较,选择脱色效果好、多糖保留率高的树脂对绣球菌多糖进行脱色。实验结果表明D303和HZ-830两种型号的离子交换树脂脱色效果较好;通过单因素试验对2种树脂的脱色时间、温度、pH、上样质量浓度对脱色率影响进行研究,得出较合适的脱色工艺。实验结果表明,D303树脂最佳脱色条件为脱色温度40℃、脱色时间6h、pH8、样品质量浓度10mg·mL-1;HZ-830树脂最佳脱色条件为脱色温度40％、脱色时间3h、pH8、样品质量浓度20mg·mL-1。     

绣球菌的诱变育种和深层发酵工艺的初步研究

对绣球菌301、302进行紫外线诱变处理，以生长速度为指标进行初筛．再通过深层发酵进行复筛。综合分析菌丝体的生长量和胞内外多糖的产量．选出301—3、302—2为优选菌株。研究不同碳、氮源对诱变株301—3菌丝体生长和多糖产量的影响．认为淀粉、麦芽糖是较为合适的碳源：玉米粉和麸皮是较为合适的氮源。对碳氮源正变试验．确定最佳的培养基组成为：淀粉2．0％、麦芽糖0.4％、玉米粉0.6％、麸皮0.6％。     

几种微生物菌剂对辣椒混合性土传病害的田间防效试验

用不同浓度的微生物茵剂AR156、AR156—1、AR156—2、菌根菌、甲基硫菌灵喷洒基质,研究不同浓度处理对辣椒栽培大田土传病害的防效。研究结果表明,辣椒移栽后60d和105d,浓度为10。cfu／mL的AR156—2处理的防效分别为86．39％和78．14％,增产效果显著,增产率214．39％;菌根菌防效不明显,但促生效果明显,增产率达158．25％。     

广叶绣球菌溶血素基因的序列分析及表达动态

通过转录组测序获得了一个广叶绣球菌(Sparassis latifolia)编码的溶血素基因(latifolysin),进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR分析溶血素基因表达水平,采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)标记结合二维液相色谱串联质谱鉴定分析溶血素表达差异.结果表明latifolysin基因全长为399 bp,编码133个氨基酸.保守功能域搜索显示latifolysin具有与杨树菇溶血素(aegerolysins)蛋白家族相同的结构域和功能位点,两者序列相似性40％.杨树菇溶血素家族蛋白在真菌中呈不连续性分布.系统进化树结果显示绣球菌溶血素隶属于担子菌类群,与草菇(Volvariellavolvacea)遗传关系较近.实时定量PCR和蛋白定量结果表明,latifolysin和绣球菌溶血素在广叶绣球菌幼菇期表达量最高,且显著高于菌丝体中表达水平.     

古巴蝇和赤眼蜂防治甘蔗螟虫大田示范

为评价古巴蝇（Lixophaga diatraeae Townsend）和赤眼蜂（Trichogramma chilonis）防治甘蔗螟虫的效果,在广西农科院武鸣里建基地进行了古巴蝇和赤眼蜂防治甘蔗螟虫大田示范。对冬植蔗、春植蔗、秋植蔗、宿根蔗和实生苗释放古巴蝇和赤眼蜂防治甘蔗螟虫的结果显示：在不施用农药防治甘蔗螟虫的情况下．仅适时释放古巴蝇和赤眼蜂到蔗地。各蔗地的枯心率和螟害节率平均在5％和10％以下。表明古巴蝇和赤眼蜂能有效控制螟虫为害,为在生产上推广应用这一生物防治技术提供了依据。     

辣椒疫病生防菌的初步筛选

采用平板对峙培养法,筛选对辣椒疫霉菌具有抑菌效果的生防菌。结果表明：从功能微生物资源库中选择的25个菌株中,11个菌株对辣椒疫霉菌具有抑制作用,其中菌株PSB-13-2-2,YC-10和KLP-1对辣椒疫霉菌抑制作用明显,抑制率分别为51.85%,50.97%和52.60%。     

深绿木霉T95和球毛壳ND35混用对土传病害的防治效果

用深绿木霉T95和球毛壳ND35两种拮抗菌株以及两者的混合菌株对由瓜果腐霉Pa和立枯丝核菌Rs引起的猝倒病和立枯病的防治效果进行了初步研究。平皿对峙结果表明,对瓜果腐霉Pa抑制作用最大的为ND35+T95混合拮抗菌,生长抑制率为73.36%,高于拮抗菌ND35对瓜果腐霉Pa的生长抑制率47.87%。而对立枯丝核菌Rs的拮抗作用三者之间差异不显著。盆栽试验结果表明,在菜豆上ND35+T95混合菌株对猝倒病的防治效果高于单个菌株深绿木霉T95,但在黄瓜、番茄上差异不显著。田间试验结果表明,混合拮抗菌株ND35+T95组合对立枯病和猝倒病的防治效果分别为49.05%和60.37%,均高于单一拮抗菌株深绿木霉T95的防治效果,但与对照化学药剂恶霉灵相比存在一定的差异。     

啶酰菌胺对黄瓜灰霉病防治效果的综合评价

利用菌丝生长速率法检测了6株灰葡萄孢(Botrytis cinerea)对6种药剂的抗性背景,发现它们对啶酰菌胺具有不同水平的抗性。同时结合盆栽试验和田间试验评价了50%啶酰菌胺水分散粒剂对黄瓜灰霉病的防治效果。盆栽试验中,50%啶酰菌胺水分散粒剂对具有低等抗性的2株灰葡萄孢的防治效果分别为53.49%和53.04%,对3株高等抗性的灰葡萄孢的防治效果分别为50.16%、51.67%和32.24%。说明灰葡萄孢的抗性发展已经严重影响了啶酰菌胺的杀菌活性。2013年和2014年的田间试验中,50%啶酰菌胺水分散粒剂施药量为375g·(667m2)-1时,防治效果分别为94.34%和90.39%。在施药量为300g·(667m2)-1时,50%啶酰菌胺水分散粒剂与对照药剂50%腐霉利可湿性粉剂的防治效果都很显著。综上所述,现阶段啶酰菌胺对黄瓜灰霉病仍具有很好的防治效果。     

不同月季品系在高海拔地区的引种表现

对西藏农牧学院校园内栽培的黑红、樱红、粉红、紫红、玫红色5种不同花色月季品系的花期农艺性状进行了调查分析。结果表明:黑红色的月季品系花径较大、花瓣数多,花瓣厚度、花枝长度和粗度适中,各主花枝分株数整齐度高,复叶长度适中,是比较理想的高海拔地区栽培用月季品系;其次为樱红色的品系;粉红色和紫红色的品系居中;玫红色的品系虽主花枝平均分枝数最多,但不同主花枝间差异最大,整齐性表现最差,故观赏价值最低。