红阳猕猴桃的组织培养快繁技术

为提高红阳猕猴桃组织培养效率,以红阳猕猴桃带芽嫩茎段和再生苗叶片为外植体,通过组培快繁试验,对影响红阳猕猴桃嫩茎段腋芽萌发和再生苗不定芽再生的生长调节物质的用量和作用进行分析筛选。结果表明:红阳猕猴桃最适宜诱导腋芽萌发的培养基为WPM+1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA和WPM+1mg·L~(-1)6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA,在此条件下带腋芽茎段萌芽率达100%;再生苗叶片不定芽诱导的最佳培养基为WPM+1mg·L~(-1) 6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA+0.2mg·L~(-1) 2,4-D;最适合红阳猕猴桃不定芽增殖的培养基为WPM+0.2mg·L~(-1) NAA+0.2mg·L~(-1) 2,4-D。     

烈香杜鹃嫩茎腋芽丛生芽诱导和植株再生

【目的】建立烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导和植株再生体系,为烈香杜鹃工厂化育苗奠定技术基础。【方法】以烈香杜鹃嫩茎为外植体,应用均匀设计法对影响烈香杜鹃腋芽丛生芽诱导和生根的各主要植物生长调节剂及其水平的作用进行探讨。【结果】适宜的烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导培养基为：1/2 DR+TDZ 2.80 mg/L+IAA 0.01 mg/L+GA₃ 1.85 mg/L,诱导率为99.8%;生根培养基为：1/2 DR+IAA 0.07 mg/L+NAA 0.02 mg/L,生根率达99.7%。在生根培养基中添加GA₃ 2.00 mg/L,再生植株茎节在35 d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上,植株再生率为97.0%。再生植株炼苗移培后成活率达95.0%以上。【结论】建立了烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽植株再生体系。     

基于均匀设计法优化苞叶杜鹃高效快繁体系研究

以苞叶杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基,结果表明,最适合嫩茎段腋芽萌发生长及茎段生根的培养基为DR+IAA0.10mg/L+NAA0.08mg/L+GA31.90mg/L,再生率达99.3%以上。以再生植株的茎节为材料进行快繁,在45d的培养周期内增殖倍数平均达5以上,建立了苞叶杜鹃的高效快繁体系。     

香樟涌金的组织培养和植株再生

[目的]探讨香樟涌金茎段组培快速繁殖方法,为工厂化生产香樟涌金组培苗提供技术支持.[方法]以香樟涌金带腋芽茎段(长1.0～1.5 cm)为外植体,进行腋芽诱导、丛生芽增殖及植株再生研究.[结果]香樟涌金腋芽在诱导培养基MS+6-BA l.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L中萌发率达100.0％,并能正常伸长展叶;在MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.05mg/L培养基中腋芽能正常生长并增殖,平均有效芽数6.5个;在1/2MS+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.03 mg/L生根培养基中培养30 d后,有87.6％的丛生芽生根,移栽成活率达90.0％.[结论]MS+6-BA l.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L、MS+6-BA 3.0mg/L+IAA 0.05 mg/L、1/2MS+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.03 mg/L可分别作为香樟涌金茎段腋芽最佳的诱导培养基、适宜的继代与增殖培养基和相对适合的生根培养基.     

采用均匀设计法优化高山笃斯越桔微体繁殖体系

以高山笃斯越桔嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基,结果表明:最适合外植体嫩茎段腋芽萌发生长的培养基为:DR+ZT3.00 mg·L-1+IAA0.10 mg·L-1+GA31.50 mg·L-1,萌发率达98以上;腋芽生长及生根的培养基为:MS(改良)+IAA0.10 mg·L-1+mA0.30 mg·L-1+GA31.10 mg·L-1,再生率达99以上.成功建立了高山笃斯越桔的微繁体系.     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

木薯品种西选03快繁体系的建立（英文）

【目的】探讨木薯品种西选03快繁技术,为其种苗规模化生产提供技术支持。【方法】以水培幼茎腋芽为外植体,调查MS基本培养基中添加不同用量6-BA和PP333对外植体芽诱导、增殖培养和生根的影响。【结果】外植体采用0.1%KMNO4预处理10 min后经75%酒精20 s+0.1%Hg Cl2(加吐温-80)5 min的灭菌效果较好,污染率为14.0%,成活率达79.3%。采用MS+6-BA 0.05 mg/L培养基进行初代诱导效果较好,外植体培养15 d腋芽萌发率达90.0%,且萌发芽生长旺盛,茎秆粗壮。无菌腋芽茎段在MS+6-BA 0.1 mg/L培养基中继代增殖效果最佳,芽增殖倍数为4.6。MS+PP3330.3 mg/L培养基诱导生根效果较好,生根率100.0%,培养30 d平均根数为6.9,叶色墨绿,植株健壮。【结论】以幼茎腋芽为外植体的快繁体系可用于西选03种苗规模化生产。     

红阳猕猴桃带芽茎段再生体系的建立

为建立红阳猕猴桃快速繁育高效再生体系,以带芽茎段为外植体材料,通过诱导带芽茎段直接出芽,研究不同浓度激素的MS培养基对腋芽萌发、不定芽增殖及生根的影响。结果表明:最适宜带芽茎段腋芽萌发的培养基是MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA,萌芽率达88.37%。在MS+1mg·L~(-1) ZT+0.1mg·L~(-1)NAA培养基上,不定芽增殖效果最好。1/2MS+0.8mg·L~(-1) IBA培养基最利于不定芽诱导生根,根系发达,再生苗长势健壮。     

软枣猕猴桃高效快繁体系研究

研究不同浓度6-BA、NAA组合对软枣猕猴桃(Actinidia arguta)带腋芽嫩枝的芽诱导、芽增殖与生根的影响以及软枣组培苗的移栽技术。结果表明,带腋芽嫩枝做外植体,经诱导,腋芽萌发获得无菌苗,最佳芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L NAA,猕枣1号和猕枣2号的腋芽萌发率分别为95.8%和97.5%。获得的软枣无菌苗切成带2～3片叶的茎段,接种于芽增殖培养基上增殖培养,最佳芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA,芽周期增殖系数分别可达4.3和6.3。最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA,生根率均达100%。生根组培苗直接移栽至智能温室,移栽3个月后成活率均可达95%以上。     

均匀设计法优化牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株再生体系研究

以牛皮杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基。结果表明,最适合嫩茎段腋芽丛生芽苗的诱导培养基为1/2 MS+2-ip 3.50mg/L+IAA 0.02mg/L+GA3 1.00mg/L,诱导率可达96%;生根培养基为MS(改良)+IAA 0.10mg/L+NAA 0.07mg/L,生根率可达98%。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30d的一个培养周期内,增殖倍数平均达60以上。通过试验,建立了牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株的再生体系。     

黄芽白与红菜薹杂种后代的细胞遗传学特征

将白菜型油菜不同栽培种‘红菜薹’和‘黄芽白’进行正反交获得杂种一代,再经过多代自交获得高世代杂种。观察杂种后代形态学特征(叶型、株高、分枝数等）、育性特征（花粉育性、自交结实率）和花粉母细胞减数分裂染色体行为特征。结果表明经过多代自交,杂种后代各性状趋于稳定,正反交杂种形态有较大差异,而高世代杂种与杂种一代相比,形态没有明显变化。杂种后代花粉育性和自交结实率都比较高,花粉可育率均达到90%以上,但与双亲相比仍然稍差。杂种后代花粉母细胞减数分裂比较正常,但仍有少数细胞出现异常染色体行为。杂种后代减数分裂终变期染色体联会主要以形成环状和棒状的二价体为主,但也形成四价体等其他染色体构型。杂种后代中平均形成二价体的数目在6.7～8.2,最多全部20条染色体形成10个二价体,其中形成环状二价体和棒状二价体的比例相差不大。除了形成二价体外,部分花粉母细胞还形成少数四价体。与亲本相比,杂种后代染色体联会出现较多的非同源联会,平均每个细胞形成二价体的数目比亲本少,而形成四价体的数目比亲本多。在减数分裂后期Ⅰ,同源染色体分开并移向细胞两极,减数分裂后期Ⅱ,染色单体分开最终形成四分体。在此过程中,绝大多细胞染色体行为正常,但有个别细胞出现后期Ⅰ染色体不均等分离,有些细胞同源染色体分开时形成染色体桥;有些细胞在减数分裂Ⅱ中期和后期出现落后染色体。此杂种后代减数分裂过程较正常,探明杂种后代的减数分裂特征可为白菜型油菜杂交育种提供理论依据。     

水分胁迫对蒙古黄芪生理特性的影响

研究了蒙古黄芪在水分胁迫条件下其保护酶系统(SOD、POD、CAT和APX)、丙二醛、超氧阴离子、可溶性蛋白和脯氨酸的变化。结果表明,3种处理下SOD活性上升规律相似,其活性大小为重度干旱(SD)中度干旱(MD)适宜对照(CK);MD和SD中CAT活性在胁迫初期不断升高后期开始降低,POD和APX活性初期缓慢升高后期大幅升高。MD和SD中超氧阴离子在后期开始升高且升高幅度高于CK。丙二醛含量初期和后期都有较大降幅。可溶性蛋白在胁迫初期显著升高,后期SD中可溶性蛋白含量变化较大。SD中脯氨酸含量积累明显。研究结果认为,在外部环境变化后,蒙古黄芪的保护酶系统和渗透调节物质会发生变化以适应外部环境,维持植株的正常生理代谢,具有较强的耐旱能力。     

不同土壤水分条件对酸枣生物量与耗水特性的影响

【目的】通过盆栽试验研究酸枣生物量与耗水特性的关系,为酸枣的生产管理提供参考。【方法】以1年生酸枣为研究对象,用称质量控水法控制土壤水分含量,设重度胁迫(SD,含水量为田间持水量的35%)、中度胁迫(MD,含水量为田间持水量的55%)和适宜水分(CK,含水量为田间持水量的75%)3个水分处理,测算不同水分处理条件下酸枣的耗水量、单株生物量、组织含水量、叶片数及叶面积,分析酸枣生物量与耗水特性的关系。【结果】不同土壤水分条件下,酸枣耗水量差异很大,土壤水分含量越高,酸枣耗水量越大;适宜水分条件下酸枣的平均耗水强度为0.1178kg/(株·d);土壤越干旱,酸枣组织含水量越低,在中度和重度胁迫水分条件下,酸枣的平均耗水强度分别为0.0868和0.0723kg/(株·d);酸枣的全年耗水量高峰出现在7月底到8月中旬。3个水分条件下,酸枣生物量和组织含水量均表现为CK>MD>SD,叶片数和叶面积最大值表现为CK>MD>SD,叶片数最大值的出现时间以SD早于MD和CK。【结论】水分供应越少酸枣组织含水量越低,而且即使在适宜的水分条件下,酸枣的组织含水量也低于700g/kg;生长后期落叶,叶片对气孔的控制能力下降,导致生长后期耗水量的反常增加;酸枣存在明显午休现象;干旱导致的过早停止生长是酸枣植株矮小的主要原因。     

猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌多重PCR检测方法的建立及应用

为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法。特异性试验结果表明,可以从4种布鲁菌以及4种细菌混合物中扩增出大小分别为276、494、733和976bp的特异性条带,对照组的检测结果为阴性;敏感性试验结果表明,对4种病原菌基因组DNA的检出量为猪种32.2pg、牛种21.3pg、羊种27.5pg、绵羊种43.2pg;人工模拟感染样本检测结果表明,能从混合感染的病料中特异地检测出4种病原菌。应用该方法对200份临床奶山羊乳样进行检测,结果检出4份阳性。建立的多重PCR方法具有特异性强、敏感度高、稳定性好的特点,可以有效地检测4种布鲁菌的感染。     

4种微量元素对蒙古黄芪幼苗形态建成及抗逆性的影响

微量元素在种子萌发过程中通过影响种子内的酶系统,促进种子内贮藏物质的分解,影响种子的萌发和幼苗的生长、生理。以蒙古黄芪(Astragalus membranaceus Bge.)为对象,研究Fe、Zn、Mn、Cu对蒙古黄芪种子萌发、幼苗生长和部分生理特性的影响。结果表明,一定质量浓度的微量元素处理能够显著促进蒙古黄芪种子的萌发,提高种子活力,促进黄芪幼苗的生长。进一步的研究表明,200mg/L FeSO4、50mg/L ZnSO4、250mg/L MnSO4和200mg/L CuSO4处理的黄芪幼苗子叶叶绿素含量最高;800mg/L FeSO4、50mg/L ZnSO4、500mg/L MnSO4和200mg/L CuSO4处理的黄芪幼苗根系相对电导率最低,根系活力最佳,说明微量元素处理减少了黄芪幼苗根系质膜所受的伤害,提高了根系抗逆性;400mg/L FeSO4、100mg/L ZnSO4、125mg/L MnSO4和25mg/L CuSO4处理的黄芪幼苗SOD和POD活性最佳。说明一定质量浓度的微量元素处理能够提高黄芪幼苗的抗逆性。     

新疆棉花枯萎病菌营养亲和群的初步研究

从新疆各植棉区采集棉花枯萎病病株,经分离纯化获４９个单胞菌株。接种试验表明：４９个菌株均使棉花产生枯萎病症状。利用氯酸钾诱变棉花枯萎病菌,产生抗氯酸盐的硝酸盐营养突变株,４９个菌株共诱发获得３３６个ｎｉｔ突变株,将获得的ｎｉｔ突变株作营养亲和性配对反应,可将４９个菌株分为４个亲和群,其中４６个菌株属同一亲和群,它们均与７号小种的ｎｉｔ突变株相亲和,其余３个菌株分别属于其它亲和群。     

松毛虫属一新种(鳞翅目:枯叶蛾科)

记述采自青海的一松毛虫新种－－玉树松毛虫Ｄｅｎｄｒｏｌｉｍｕｓ ｌｉｕｉ Ｘｕ ｅｔ Ｊｉｎ，ｓｐ．ｎｏｖ。，文中附有特征图。     

响应面法优化超声提取墨石榴皮中花青素

为研究超声提取墨石榴皮中花青素的最优工艺条件,以墨石榴皮为试材、酸性乙醇为提取剂、提取率为考查指标,通过单因素和Design-Expert 8.0.5b软件设计的回归正交试验,用响应面法分析优化各因素及其相互作用的最佳组合,得出墨石榴皮超声提取花青素的最优工艺参数:超声温度恒定40℃时,乙醇体积分数70%,料液比1g∶25mL,超声时间40min,超声功率90W。在此条件下,花青素提取率为182mg/kg,与理论值(183mg/kg)基本一致。     

鸡伤寒白痢沙门氏菌灭活菌苗的研制

由鸡沙门氏菌株C79-13和C79-20及新疆分离株AS97-19和AS96-4四株菌,经自制的改良硫代硫酸钠培养基,通气搅拌培养,甲醛灭活制成氢氧化铝佐剂苗,经免疫接种健康鸡,免疫后21d抗体水平达到最高,经ANAE方法和T淋巴细胞E花环方法检测,免疫组的细胞免疫水平明显高于非免疫对照组,差异极显著,10LD剂量强毒株攻菌试验,死亡保护率达94.7%,免疫组分离菌率为3.1%。表明该苗具有良好的安全性和免疫效果。     

大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

评价大理重楼和独龙重楼的野生资源分布情况和皂苷类成分.采用实地调研考察,并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷,增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标,以课题组已经建立的ELSD-UPLC法测定大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分含量.结果表明:1)大理重楼除模式产地云南大理,在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布,野生资源蕴藏量较少;独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡,野生资源蕴藏量更少; 2)二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者各省级药材标准中,但是其根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用; 3) 10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多,主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H; 4)在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准,主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷,得出大理重楼和独龙重楼资源均稀少结论,建议高度重视开展人工繁育与资源保护工作;大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷("宫血宁"有效成分),独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷("抗病毒颗粒"消炎、抗菌、抗病毒有效成分),可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.