三种ELISA方法检测苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的比较

苹果褪绿叶斑病毒（ＡＣＬＳＶ）和苹果茎沟病毒（ＡＳＧＶ）是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ和改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ法,并与ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ的检测结果比较。试验结果表明,ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ能检测出ＡＳＧＶ,却不能检测出ＡＣＬＳＶ,与此同时,这两种病毒均可用改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ检测。ＤＡＳ     

两种免疫胶体金快速诊断技术简介

植物病毒的血清学检测 ,以酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)最为普遍和有效 ,它在方法学上比较完善 ,是一种经典的方法。通常ＥＬＩＳＡ反应是在聚苯乙烯反应板上进行的 ,当固相载体变成硝酸纤维素膜时 ,则出现了免疫酶斑点试验 (ＩｍｍｕｎｏｅｎｚｙｍｅＳｐｏｔＡｓｓａｙ ,ＩＥＳＡ)。若将此处的标记物由酶标记改为金标记时 ,因不需要酶促反应的底物 ,缩短了整个检测的时间 ,随着技术的不断进步 ,出现了两种免疫胶体金快速诊断技术即 :斑点免疫金渗滤试验和胶体金免疫层析试验。现分别予以介绍。1　斑点免疫金渗滤试验 (ＤｏｔＩｍｍｕｎ…     

快速检测大豆疫霉菌的酶联免疫吸附技术研究

利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清，对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明：间接法（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和夹心法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）都能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌，但在检测病组织时，夹心ＥＬＩＳＡ的特异性较强，能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌     

用ELISA法快速检测沙门氏菌

我们试验一种新的快速检测沙门氏菌的方法，这种方法是使用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ），直接从增菌培养液中检测沙门氏菌。在检测的９４个鱼粉（肉骨粉）样品中，我们同时使用快速检测法和常规细菌学检测法，结果是阳性符合率为９２％，阴性符合率为１００％，总符合率９８％以上。使用快速检测法，最快可以在２７ｈ有结果，而常规的细菌学检测方法最快要７２ｈ才有结果，大大缩短了检测的时间。     

快速检测大豆疫莓菌的酶联免疫吸附技术研究

利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清，对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明，间接法（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和夹心法（ＤＡＳ－ＥＬＳＩＡ）能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌，但在检测病组织时，夹心ＥＩＳＡ的特异性较强，能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌。     

棉花枯萎病菌的血清学研究

本研究以棉花枯萎病菌公安菌株为材料，用Ｄ．Ｉａｎｎｅｌｉ法提取菌丝孢子蛋白抗原，按改进的Ｊ．Ｅ．Ｄｅｖａｙ免疫方案制备抗血清。琼脂双扩散测得效价达１／６４，用琼脂双扩散、（比较）对流免疫电泳、间接ＥＬＩＳＡ及ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ测定抗血清的特异性和灵敏度。结果表明４种检测方法基本上均能鉴别到尖孢镰刀菌种的水平，但不能鉴别到种以下的分类单位，４种方法检测所达的灵敏度依次为４．８６２５×１０－２，６．０７８×１０－３，３．７９９×１０－４，３．７９９×１０－４ｍｇ×ｍｌ－１。除此之外，本研究对琼脂双扩散法在真菌血清学上的应用上作了摸索     

梨中AVERMECTIN B1残留的酶联免疫吸附测定

本文建立了检测梨中Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的间接竞争酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）。以结合物４″－Ｏ－（单）琥珀酰Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１－ＢＳＡ免疫家兔，制备特异性针对Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的多克隆抗体。梨样本经甲醇提取后用ＥＬＩＳＡ检测。在６．０￣６０ｍｇ／ｋｇ添加浓度范围内，Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的回收率为８６％￣１０５％，变异系数（ＣＶ）为４％￣８％。样本检测限为０．１ｍｇ／     

酶联免疫技术检测植物病原真菌

７０年代初期Ｃｌａｒｋ和Ａｄａｍｓ将酶联免疫吸附检测（Ｅｎｚｙｍｅ－ＬｉｎｋｅｄＩｍｍｕｎｏｓｏｒ－ｂｅｎｔＡｓｓａｙ,简称ＥＬＩＳＡ）用于植物病毒分析［１］。随着进出口贸易发展,迫切需要一种快速检测农产品中植物有害真菌的方法,常规的形态学分类检测方...     

几种危险性病毒抗血清的制备及检测方法的建立

番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子，制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为１／３２０，用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法检测病汁液可达１０－３～１０－４。３种血清之间无交叉反应，与健康寄主和常见的自然寄主蛋白也无反应。应用３种血清分别对２３种植物１００多个采集的样品和进口种子进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测，未发现有上述３种病毒存在     

用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角…

在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒辣粒子抗原，而典型病虫显症需５－６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒辣的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区可检测     

三种外检植物病毒的灭活处理

番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ），烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ），南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）的病汁液和ＰＥＧ粗提纯液，经适宜温度或甲醛处理，均丧失侵染性而有抗原性。ＴｍＲＳＶＰＥＧ粗提纯液经６０℃（水浴）处理１０分钟或２８℃７天，ＴＲＳＶ粗提纯液置２５℃一个月，Ａｒ－ＭＶ在４０℃７天条件下均可做为阳性对照的灭活处理的最佳方案。可保存抗原性在７～１２月以上。为了防止危险性检疫病毒的侵入，对入境种苗进行检疫，需建立快速、准确、标准化检疫程序，而在血清学快速诊断试验中，提供阳性对照，对提高判断准确率是必要的。因此，为了解决在诊断试剂中提供阳性对照但又不能使其检疫性病毒人为扩散这一重要问题，我们在研究三种外检病毒（ＴｍＲＳＶ，ＴＲＳＶ，ＡｒＭＶ）的检验技术的同时，又进行了一些灭活试验，用化学和物理方法钝化病毒，使其失去侵染性而保持抗原性，并应用于酶联诊断试剂盒中，本文报道了初步试验结果     

酶联放大系统提高常规酶联检测灵敏度的研究

以莴苣花叶病毒（Ｌｅｔｕｃｅｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）及其单克隆和多克隆抗体为试材，以直接ＥＬＩＳＡ、生物素抗生物素ＥＬＩＳＡ和异种动物双抗体夹心ＥＬＩＳＡ为方法，分别用酶联放大系统进行比较，发现酶联放大系统比常规的方法灵敏度高３～１０倍，其中以生物素抗生物素酶联放大系统效果最好，灵敏度达１ｎｇ     

免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法检测稻细条病菌的比较研究

比较免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法对稻细条病菌的检测灵敏度，前者为１０＾３ｃｆｕ／ｍｌ，后者为１０＾４ｃｆｕ／ｍｌ。通过与５属９种常见病原细菌和１１株来自不同地区的稻细条病菌的反应，二者均未发生交叉反应，表现出较好的特异性。对１８份不同带菌材料的检测结果：ＩＦＴ法检出符合率的６６．６７％，ＥＬＩＳＡ法检出符合率为３３．３３％，相比而言，在定性检测方面ＩＦＴ是比ＥＬＩＳＡ操作更简便，更灵敏的快速检     

用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒

在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原，而典型病虫显症需５～６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区均可检测到ＨａＮＰＶ病毒粒子，但地区间棉铃虫核型多角体病毒检出频率有显著差异     

烟草环斑病毒、马铃薯X病毒碱性磷酸酶酶联诊断试剂盒的研制简报

利用血清学技术开发的酶联诊断试剂盒 ,由于快速灵敏 ,操作简便 ,可进行大量样品的检测 ,比较好地满足了生产上需要 ,具有广阔的应用前景。由于国内尚没有成熟的植物病毒诊断试剂盒供应者 ,缺乏可靠的产品 ,因而限制了植物病毒诊断在国内的应用和发展。一旦需要时 ,主要是依赖国外进口 ,由于价格昂贵 ,采购不便 ,不能及时供应 ,在国内推广尚有一定的困难。另外 ,国外有些试剂盒在技术上有一定的缺陷 ,造成一些假阳性反应的出现 ,其中在阳性对照和阴性对照处理上不很成熟 ,对于危险性病毒的阳性对照处理不当 ,还易造成危险性病毒的扩散 ,而阴…     

灰斑古毒蛾核型多角体病毒病的自然流行

灰斑古毒蛾核型多角体病毒病的自然流行孙发仁（山东省泰安市菜篮子科技园，泰安２７１０００）ＰＲＥＬＩＭＩＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＰＯＬＹＨＥＤＲＯＳＩＳＶＩＲＵＳＩＳＯＬＡＴＥＤＦＲＯＭＯＲＧＹＩＡＥＲＩＣＡＥＳＵＮＦａ－Ｒｅｎ（ＴａｉａｎＳｃｉ...     

应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表     

杆状病毒表达猪传染性胃肠炎病毒钉状蛋白在血清学诊断上的应用

用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ Ｓ蛋白Ａ     

福建西番莲病毒病的发生及其病原黄瓜花叶病毒亚组鉴定

１９８８－１９９５年对福建西番莲病毒的发生为害进行调查,发现在西番莲栽培区病毒病普遍发生,发病率通常在３０－４０％,严重的达９０％以上,田间症状主要表现为叶片环斑、皱缩、花叶、环斑花叶、死面和果实木质化等。从田间病株采集４０份样本,经电镜观察和采用Ａ蛋白夹心ＥＬＩＳＡ（ＰＡＳ＿ＥＬＩＳＡ）,用西番莲化木质病毒ＰＷＶ）,西番莲黄花叶病毒ＰＦＹＭＶ）、紫果西番莲花叶病毒（ＧＭＶ）、烟草花叶病毒（ＴＭＶ     

'99世博会植物病毒种类的调查与鉴定初报

采用ＥＬＩＳＡ、ＥＭ和生物侵染实验,对世博会监管的植物样品进行了病毒种类的调查与鉴定。初步弄清了世博会植物病毒种类和分布发生情况。