马缨杜鹃离体快繁体系的建立及优化

以马缨杜鹃种子为外植体,建立和优化了马缨杜鹃高效而稳定的离体快繁体系,并采用ISSR标记对试管苗的遗传稳定性进行分子检测.结果表明:种子在接种于1/4MS+1.0mg/L KT培养基上,萌发率在70%以上,丛生芽诱导以无菌苗带顶芽茎段为佳,最适培养基为WPM附加0.5mg/L TDZ和1.0mg/L IBA,丛芽伸长最适培养基为WPM+KT 0.5mg/L+GA 1.0mg/L.在1/2WPM+KT 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L+IBA 2.0mg/L培养基上30d开始生根,生根率可达100%.90d后驯化移栽成活率在80%以上.采用20个ISSR引物扩增,对通过上述流程快繁的试管苗的体细胞无性系遗传变异进行分子检测,未检测到多态性带,表明该快繁体系能生产出遗传稳定性高的试管苗.     

菊花茎段组织快繁体系的建立

通过对菊花茎段采用不同的消毒处理,然后进行诱导、增殖和生根试验,建立了菊花离体快繁体系：消毒灭菌处理以70％酒精浸泡10s后,在0.1％升汞溶液中浸泡3min为最佳;带腋芽茎段诱导的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;腋芽增殖的最适宜培养基为MS＋6-BA2.0 ～3.0 mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1;利用不带腋芽的茎段诱导愈伤组织的最适宜培养基是MS＋6-BA0.5mg·L-1＋ NAA0.5mg·L-1;愈伤组织再分化成丛生芽的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;诱导生根的适宜培养基为1/2MS＋ NAA0.5 mg·L-1;生根率为100％;试管苗移栽到疏松透气的蛭石＋珍珠岩＋园土（1：1：1）混合基质中,成活率可达98％.     

转BADH-反义4CL基因二色胡枝子的组培快繁技术

为探索建立转BADH-反义4CL基因胡枝子组培快繁体系和掌握试管苗移栽技术,以转基因和非转基因二色胡枝子组培苗为材料,对植株进行茎段增殖、茎段生根的快繁研究,同时进行基质、光照、苗质量对试管苗移栽成活率影响研究。结果表明,非转基因植株茎段增殖最佳培养基配方为：1/2MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA＋0.2 mg/L IBA,增殖系数4.46;转基因植株茎段增殖最佳培养基为1/2MS＋1.0 mg/L 6-BA0.1 mg/LNAA0.3 mg/L IBA,增殖系数3.95。非转基因植株茎段生根最佳培养基为1/2MS＋0.4 mg/L IBA,生根率为100%;转基因植株茎段生根培养基：1/2MS＋0.2 mg/L NAA＋0.4 mg/L IBA,生根率为99%。非转基因植株和转基因植株的移栽基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩（体积比1∶1∶1/4）、遮一层遮阴网、苗质量为正常苗时移栽成活率较高。     

高山杜鹃茎段组织培养和优化体系的建立

以高山杜鹃茎段为外植体,研究不同品种、不同激素组合对5个高山杜鹃品种无菌芽发生的影响,并以品种Jeande Marle Montague为试验材料,研究不同激素组合对试管苗生根和增殖的影响。结果表明:茎段外植体均能诱导萌发,最佳诱导培养基为WPM TDZ(0.5 mg.L-1),诱导率为90.4%;试管苗继代增殖培养基为WPM TDZ(0.5 mg.L-1) NAA(1.0 mg.L-1),增殖系数达7.96;试管苗生根培养基为1/2 WPM NAA(0.25 mg.L-1) IBA(0.25 mg.L-1),生根率为98.6%。试管苗移栽到泥炭、珍珠岩(体积比为4¨1)基质中,成活率达98%以上。     

黄连木茎尖组培快繁技术研究

以黄连木(Pistacia chinesis Bunge)实生苗茎尖为外植体,研究了黄连木茎尖丛生芽诱导、生根以及试管苗移栽的培养基和培养条件,结果表明:1/2WPM+4.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA适合茎尖丛生芽的诱导,诱导率达82.1%,生根以1/2WPM+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA较佳,生根率达100%.黄连木实生苗茎尖是较适合的外植体材料,在短期内能获得大量组培苗,其试管苗适宜的移栽基质为营养土-蛭石(比例1 ∶1),移栽成活率达95.0%.     

食籽栝楼离体快繁的初步研究

以雌性栝楼块根萌发苗的茎段腋芽为外植体进行无菌试管苗的诱导、继代增殖快繁、生根以及试管苗移栽试验。结果表明:MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L最适合诱导栝楼茎段腋芽形成无菌试管苗;MS+BA0.1mg/L+IAA0.6mg/L是继代增殖快繁最适培养基;在1/2MS+NAA0.2mg/L是生根最适培养基。试管苗移栽在蛭石和珍珠岩(1∶3)的混合基质苗床上成活率可达85%以上。     

常春藤离体快繁技术

以常春藤Hedera nepalensis var.sinensis茎段为外植体,研究了培养基、植物生长调节物质和移栽基质对常春藤离体快繁的影响.结果表明:起始和增殖培养中高盐质量浓度的MS培养基好于低盐培养基WPM和B5.增殖培养时,在培养基中同时添加2.0 mg·L-16-BA和1.0 mg·L-1GA3为佳,增殖系数可达到4.以1/2 MS为基本培养基,虽然不添加任何生长调节物质亦能获得高生根率,但附加0.10 mg·L-1NAA能更好地促进根系发育.移栽基质选用腐质土,成活率可达80%以上.用自来水代替蒸馏水,白砂糖代替蔗糖,对常春藤试管苗的增殖和生长无显著影响,可降低培养成本.表6参9     

莪术的组织培养

以广西莪术的根茎为外植体,接种在以MS为基本培养基,附加不同种类、不同浓度植物生长调节物质的培养基上,进行不定芽诱导、丛生芽增殖、试管苗生根及移栽等试验。在MS培养基中附加BA3.0 mg.L-1时,不定芽诱导率最高,丛生芽增殖壮苗培养基以MS BA3.0mg.L-1 氯化胆碱(CC)10mg.L-1为最佳,试管苗生根以MS NAA2.0mg.L-1最好。     

马兰茎尖培养及快速繁殖的研究

以马兰的茎尖为试验材料,进行了茎尖的萌发与分化、试管苗的生根、移栽与移植的快繁技术研究。结果表明:MS+BA 0.2 mg.L-1+IAA 0.5 mg.L-1+GA30.5 mg.L-1是生长点萌发生长的理想培养基;MS+NAA 0.1 mg.L-1+BA 1.0 mg.L-1是萌发生长芽分化培养的理想培养基;1/2MS+IAA 0.6 mg.L-1是不定芽生根培养和生根继代培养的理想培养基;在温室中河沙是试管苗移栽的理想基质;移植到山坡上的试管苗长势旺盛。     

亳菊的组织培养快繁技术研究

[目的]探讨亳菊组织培养的快繁技术。[方法]以亳菊的茎尖作为外植体,以MS为基本培养基,附加不同剂量的NAA和6-BA,分别进行丛生芽诱导、增殖和生根培养,考察不同激素配比的培养基对亳菊丛生芽形成与生长的影响,以及对试管苗长势和生根的影响,并根据丛生芽的数量、长势、苗高、根条数、繁殖周期等指标,筛选适合亳菊茎尖离体组织培养的培养基配方。[结果]亳菊诱导分化的最佳培养基配方为MS＋6-BA0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L;增殖培养的最佳培养基配方为MS全量培养基;诱导生根的最佳配方为1/2MS＋IBA0.30 mg/L。将试管苗移栽到土∶泥炭∶珍珠岩为1∶1∶1的基质中,其成活率达99%,大田移栽的试管苗成活率可高达97.9%。[结论]该研究所筛选的培养基配方可作为亳菊脱毒培养的最优技术方案。     

裂叶马兰无性系建立的研究

为保护野生资源、满足栽培对种苗的需求,以裂叶马兰的嫩茎为外植体,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根、试管苗生根继代增殖的研究,以及试管苗移栽和定植的研究,建立起裂叶马兰的无性系。结果表明:MS+蔗糖35 g·L-1+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D2.5 mg·L-1是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的适宜培养基;MS+蔗糖30 g·L-1+AgN031.0 mg·L-1+GA31.0mg·L-1+ZT1.6 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/2MS+蔗糖20 g·L-1+NAA 0.6 mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为95.9%;定植成活率98.0%。定植成活的试管苗保持了野生裂叶马兰的所有植物学性状。     

观果树种轮生冬青离体快繁技术

以轮生冬青幼嫩茎段为外植体,通过筛选启动培养基、比较不同增殖培养基及继代次数对增殖的影响,生根诱导培养基的筛选,建立了轮生冬青的离体快速繁殖技术体系。结果表明:最适腋芽诱导培养基为B5+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.05 mg·L~(-1);适宜增殖培养基为B5+6-BA1.5 mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1),第4次继代时增殖系数最大为6.3,丛生芽长势好;适宜的继代周期为35 d;最佳生根培养基为1/2B5+IBA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.3 mg·L~(-1),生根率可达100%。移栽于V(珍珠岩)∶V(蛭石)∶V(腐殖土)=2∶1∶1的混合基质中,成活率达90%以上。     

雪花梨的离体培养与快速繁殖

以雪花梨的单芽茎段为外植体,建立了雪花梨离体培养和快速繁殖体系。试验表明,5月中旬为雪花梨取材的最佳时间;基本培养基、6-BA和NAA等3种因素对黄冠芽增殖影响差异较大,按影响大小依次为6-BA、基本培养基、NAA;最佳的雪花梨组培苗增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.15mg·L-1+GA30.5mg·L-1,增殖系数达3.9;适宜雪花梨组培苗的生根培养基为1/2MS+IBA 1.0mg·L-1,生根率达41.4%。     

利用丛生芽增殖途径对大花蕙兰进行离体快繁

以大花蕙兰的侧芽为外植体,研究了利用丛生芽途径快速繁殖大花蕙兰的技术。结果表明：通过丛生芽增殖途径也能达到快速繁殖大花蕙兰的目的,在1／2MS＋6-BA3．5mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1＋卡拉胶8g·L-1＋蔗糖30g·L-1＋φ=10％的椰子水（CW）或w=10％的香蕉匀浆的培养基上,丛生芽增殖较快,以40d为1个继代周期,1年最少可增殖9次,以每个培养周期增殖3．6倍计,1个芽1年可繁殖出3．69≈10万株苗;在丛生芽增殖培养过程中,会出现褐化现象,但并未对大花蕙兰丛生芽的增殖产生不良影响;添加妒=10％的CW或W=10％的香蕉匀浆有利于提高丛生芽的增值率及其生长势;试管苗在1／2MS＋NAA1．0mg·L-1＋AC1g·L-1＋卡拉胶8g·L-1＋蔗糖30g·L-1＋φ=10％的CW的培养基上生根良好,生根率为86．1％;试管苗移栽在水苔上的成活率达92．5％。     

火焰南天竹茎段离体培养再生体系的优化

  目的  进行离体培养关键因子优化,以满足火焰南天竹Nandina domestica ‘Firepower’的规模化生产。  方法  以火焰南天竹茎段为外植体,通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究,优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。  结果  WPM+0.50 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基,不定芽诱导率为93.8%,且生长健壮;WPM+0.75 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为不定芽增殖培养基,增殖倍数3.3,新芽鲜绿色、生长良好;1/2WPM+0.50 mg·L-1 NAA+白砂糖30.0 g·L-1（pH 6.0）为生根培养基,生根率达95.0%。  结论  本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。     

兔眼蓝莓组织培养过程中褐化与生根问题的探讨

以兔眼蓝莓茎尖和茎段形成的愈伤组织和长期继代培养的试管苗为材料,接种于改良的WPM和1/2WPM的培养基中,研究活性炭与Vc液对兔眼蓝莓外植体和愈伤组织形成中褐化的影响以及外源体、活性炭对无根苗瓶内生根的影响。结果表明,当培养基中加入Vc液并含100～200 mg·L-1的活性炭时,能有效防止外植体褐化的发生;当培养基中加入Vc液并含200～500 mg·L-1活性碳时,可有效防止愈伤组织褐化发生。蓝莓继代培养试管苗在1/2 WPM的培养基中添加0.2 mg·L-1IBA,并含100～200 mg·L-1活性炭时生根情况最为理想,经过7 d暗培养,30 d后生根率高达87.8%。     

肾蕨离体培养技术的研究

以肾蕨匍匐茎茎尖为外植体,对离体再生培养技术进行了研究。结果表明：GGB的最佳诱导培养基为MS＋BA0.7 mg.L-1,诱导率为95%;GGB增殖培养基为MS＋BA0.7 mg.L-1,增殖系数为5.3;孢子体诱导培养基为MS＋BA0.7 mg.L-1＋NAA0.7 mg.L-1,诱导率可达到82%;适合诱导生根培养基为MS＋NAA0.2 mg.L-1＋0.1%Ac,生根率为100%。     

鳄梨组织培养繁殖体系优化研究

为满足市场需求,以鳄梨饱满茎段为外植体采用组织培养方法进行优质种苗繁育,对于该种的产业发展和应有具有重要意义。试验筛选了无菌株体系建立、诱导潜伏芽萌发、丛生芽继代增殖和生根培养较适培养基配方。结果表明：诱导鳄梨无菌株系建立较适培养基为WPM＋1.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋0.5 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂;诱导潜伏芽萌发较适培养基为WPM＋2.0mg?L－16￣BA＋0.5mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,诱导出芽率达到54％;丛生芽继代增殖培养较适培养基为WPM＋3.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,增殖率达到3.70;幼苗生根较适培养基为1/2WPM＋0.5 mg?L－1 IBA＋0.5 mg?L－1 NAA＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,生根率达到90％。炼苗移栽60 d后成活率为96％。该试验获得的培养基配方,可培养出完整植株,短期内获得大量优质种苗。     

杂种蓝莓（野生ב美登’）组培快繁1）

为了建立高效的杂种蓝莓组培快繁技术体系,以大兴安岭地区野生蓝莓和栽培品种‘美登’（‘Blomi-don’）杂交获得的杂交种子为试材,筛选出杂交种子最佳无菌处理条件,获得蓝莓杂种无菌苗。再以杂种无菌苗茎段为外植体,探究了不同质量浓度植物生长调节剂（ ZT）、蔗糖及继代周期对丛生芽诱导的影响,并探讨了培养基种类及植物生长调节剂IBA质量浓度对生根诱导的影响。结果表明：杂交种子经75％酒精和3％次氯酸钠分别处理20 s和7 min效果最好,污染率为0;添加0．6 mg· L－1 ZT和20 g· L－1蔗糖的WPM培养基为丛生芽诱导最佳培养基,诱导率高达100％,且芽丛密集、长势好;芽诱导期间,30 d的继代周期最有利于丛生芽的增殖,增殖倍数高达34．72;最佳生根培养基为添加0．4 mg· L－1 IBA的1／2WPM培养基,生根率高达88％,且生根周期仅为40 d,移栽成活率达到85％以上。