哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存概况及其常用方法

哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术,是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部[1].Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎,这种方法不仅大大简化了冷冻过程,而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤,提高了冷冻效率[2].     

弓形虫两种保种方法的试验

目的寻求一个简便、适宜的弓形虫保种方法。方法采用不同温度的冷冻保存法和细胞培养保存法对弓形虫保存进行了试验研究,为深入研究弓形虫提供保证。结果弓形虫在液氮(-196℃)、-70℃能长期保存,4℃能保存14 d。通过细胞培养能获得大量的弓形虫滋养体,对培养细胞的选择性不强。结论两种保种方法保存后弓形虫毒力不变。     

猪精液、胚胎和体细胞冷冻保存及应用研究进展

对猪精液、胚胎和体细胞的冷冻保存应用研究情况进行了综述,讨论了每种细胞形态的关键性技术的发展,重点关注他们的保存、运输和减少病菌传播。同时还讨论了采用冷冻保存的精液、胚胎和体细胞结合其他猪辅助生育技术如体外受精(IVF)、精子卵质显微注射(ICSI)、体细胞核移植(SCNT)复育猪遗传资源和模型的方法。这些采用冻存细胞的辅助生育技术(ART)的应用将会极大提高猪的遗传/模型保护、交换、复育的效率和生物安全。     

哺乳动物胚胎低温保存研究进展

胚胎冷冻是一项新的细胞冷冻保存技术,胚胎低温保存对于提高哺乳动物繁殖效率有很重要的意义,本文对家畜胚胎低温保存的特点,原理和方法进行了综述,并介绍了下班化冷冻保存的新方法。     

猪精液冷冻保存技术研究进展

猪精液冷冻保存技术对生猪产业发展有重要意义,有利于提高优秀种公猪的利用率以及实现优秀种质资源的长久保存,促进种猪场降本增效。目前中国猪精液冷冻保存技术取得了一系列进步,国内应用猪冻精配种的受胎率以及产活仔数基本达到了国外冻精配种水平。但是,由于冻融过程会对猪精子造成一定程度的损伤,精子的受精能力下降,受精窗口期缩短,国内、外应用冻精配种的生产成绩仍与常温保存精液存在不小差距。文章回顾了国内、外猪精液冷冻保存技术的发展历程,介绍了猪精液和精子的基本特点,简述了降温过程造成精子损伤的机理,并从冷冻稀释液成分这一角度分析介绍了减小冷冻损伤的机理与方法,如添加冷冻保护剂减少细胞内外冰晶形成、维持细胞内外渗透压以及稳定细胞膜结构;添加抗菌物质抑制解冻后细菌的快速繁殖;添加抗氧化物降低活性氧水平,缓解氧化应激,保护精子结构和受精能力等,最后对猪精液冷冻保存技术未来的发展方向进行展望,以期为相关研究以及实际应用提供参考。     

猪胚胎冷冻保存研究进展

胚胎冷冻保存技术在大多数哺乳动物上已获得成功,牛胚胎冷冻已经进入商业化应用阶段。猪胚胎由于其特殊的低温生物学特性,冷冻保存研究进展缓慢。本文综述了猪胚胎在冷冻过程中的细胞生物学变化,以及近几年猪胚胎冷冻保存研究所取得的显著进展。     

应用腹腔窥镜进行冻精输精新技术的研究

随着低温生物学理论研究的进展,对细胞冷冻致死有关学说的研究,细胞脱水及冷冻变性,冷冻和解冻对细胞伤害及其防止办法的明了。牛精液冷冻贮存已成为当代奶牛业减少饲养头数、提高产量、获得高经济效益的得利措施,得到极广泛地全球性的应用。绵羊精液的冷冻保存技术研究是在50年代开始的,至60年代冻精输精受胎率仍不理     

猪胚胎冷冻保存研究进展

胚胎冷冻保存技术在大多数哺乳动物上已获得成功，牛胚胎冷冻已经进入商业化应用阶段。猪胚胎由于其特殊的低温生物学特性，冷冻保存研究进展缓慢。本文综述了猪胚胎在冷冻过程中的细胞生物学变化，以及近几年猪胚胎冷冻保存研究所取得的显著进展。     

大规模细胞培养过程中污染的类型及控制策略探讨

细胞污染是动物细胞培养技术中面临的主要问题。本文从细胞培养过程中污染产生的来源、种类及控制策略等方面对规模化培养过程中常见的污染类型及防控手段进行综述,为提高细胞培养水平、防治细胞培养过程中可能出现的污染状况及研究新的去除污染的手段提供新的思路,为有效减少和控制污染、降低损失,提高生物制品的质量奠定基础。     

猪卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存对于畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。随着玻璃化冷冻技术日趋成熟，其现已广泛应用于牛、羊等大家畜的卵母细胞冷冻保存。然而，猪卵母细胞的冷冻保存至今仍处于试验研究阶段，由于猪卵母细胞脂质含量高，对低温敏感，在玻璃化冷冻保存过程中极易受到冷冻保护剂毒性以及渗透胁迫、氧化应激等损伤，造成细胞骨架以及亚细胞器受损，最终导致细胞发育能力降低甚至死亡。近年来，人们在提高猪卵母细胞冷冻保存效率的研究中取得了突破性进展。本文简要介绍了卵母细胞冷冻保存的常见方法及作用机理，总结了猪卵母细胞在玻璃化冷冻过程中造成的细胞损伤类型及影响，概述了人们针对不同类型的冷冻损伤提出的解决方法和取得的成就，并对其应用前景进行展望，为今后提高猪卵母细胞的玻璃化冷冻效率提供新思路。     

小鼠腹腔巨噬细胞的分离与鉴定方法研究进展

正细胞培养是生物技术中一门最核心、最基础的技术,细胞试验能进行细胞水平上的研究,可降低研究成本,提高工作效率。如今细胞培养技术已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础学科之一。特别是在医药领域,细胞培养更具有特殊的作用和价值。出于不同的研究目的,研究中所用细胞的来源也不同。巨噬细胞具有强大的吞噬能     

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响

通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组(P>0.05),并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油(GL)组(P<0.05),且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清(FBS)+100mL/L DMSO+DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。     

家禽精子冷冻保存技术研究进展

精子冷冻保存技术是一种在体外长期低温保存精子的技术。该技术不仅在人类精子保存方面应用广泛,而且在畜牧业生产和动物保种等领域具有重要意义。然而,目前家禽精子冷冻保存效果还并不理想,大部分精子冷冻复苏后损伤严重,丧失受精能力,限制了该技术的应用和推广。鉴于近年来关于冷冻保护剂、抗氧化剂和药物传递系统在精子冷冻保存技术中的作用,文章从精子冷冻技术的研究历程、冷冻保存程序、冷冻损伤机制和家禽精子冷冻保存液等方面进行综述,为家禽精子冷冻保存技术的研究与应用提供参考。     

猪繁殖生物工程技术的研究现状及发展前景

1　猪胚胎冷冻自 2 0世纪 80年代牛胚胎技术建立以来 ,随着家畜胚胎学、细胞生物学、冷冻生物学的发展 ,猪胚胎冷冻保存技术也有了较大的发展。关于猪胚胎对低温环境敏感的生物学机制的研究正日趋加深。目前冷冻的猪胚胎移植后能出生后代。在不久的将来 ,冷冻保存胚胎的应用将是养猪产业的常规育种方法。这种育种方法的优势在于可以提供一种保种方法 ,可以进行全球性遗传运输和挽救濒危品种。总之 ,第一例胚胎移植牛出生 5 0年以后 ,猪冷冻保存的胚胎才取得成功 ,然而 ,当前猪胚胎冷冻保存技术进展的确很快。2　猪胚胎移植的最新研究进展猪…     

快速解冻法能提高细胞生存率

日本微生物工业技术研究所小松等人利用显微镜观察到,冷冻保存的酵母细胞在解冻时由于细胞的膜组织被破环而致死,而快速解冻法的生存率较高,对膜的损伤较小。通常认为采用形态和性质变化少的液氮冷冻保存细胞是有效的,但解冻以后,往往造成较多细胞死亡,小松等人用直径为数微米的一种面包酵母,把它浸在不同温度的不冻液中进行解冻试验。结果观察到在25℃下经10分钟缓缓解冻时,     

原代神经元培养及其在动物疾病研究中的应用

细胞是生命活动的基本单位,绝大多数生物都由细胞组成,细胞运行着机体一切生长代谢活动。因此,对细胞深入探索、加大力度推动细胞培养技术发展是21世纪人类预防与治疗动物疾病、发展经济生产的关键。目前,原代神经元培养无疑是原代细胞培养中的难点和重点。笔者主要介绍原代神经元的培养技术,分析技术要点,并对原代神经元培养在防治动物疾病中的应用作一概述。     

几种传代细胞系的液氮保存

传代细胞株和传代细胞系在超低温冷冻下,细胞既可长期保存,又能随时取用,对随时随地有检疫任务的检疫单位,特别适用.细胞冷冻保存比细胞连继传代培养能节省时间与材料,减少由于多次传代引起的遗传变异,还可防止在长期连续传代过程中可能发生的细菌或支原体污染.     

卵母细胞冷冻保存技术的研究进展

本文针对卵母细胞冷冻保存技术的研究进展及冷冻保存的作用机理进行了综述,为卵母细胞冷冻保存技术进一步研究提供参考理论依据。     

绵羊卵母细胞的玻璃化冷冻保存

玻璃化法是近几年才建立起来的一种细胞、胚胎及卵母细胞的冷冻保存技术。Nekagata和Shaw分别于1989年和1991年用此化法冷冻保存小鼠成熟卵母细胞,取得理想结果。本实验对玻璃化法冷冻保存绵羊卵巢内卵母细胞作了尝试。1 材料与方法从屠宰后东北细毛羊取出卵巢,用注射器从直径2～6mm的卵泡中抽取卵丘—卵母细胞复合体,选择正常的用成熟培养液(M199+10%FCS)洗2次后,转入VS_1(20.5%(w/v)二甲基亚砜,     

利用鸡胚培养骨骼肌细胞的研究

细胞培养广泛地应用于病毒学,免疫学,遗传学,分化及发育等许多领域.近年来病毒学中很多发展与能在培养细胞中生长病毒的技术有关.利用细胞培养技术已经生产出多种生物制品,随着病毒学等研究工作的发展,鸡骨骼肌细胞培养工作越来越受到重视,本试验采用胰酶消化法培养了大量优质的鸡骨骼肌细胞,并进行了冻存与复苏,建立了一套较完备,快速的鸡骨骼肌细胞培养方法.