抗BYDV小麦——中间偃麦草易位系α-淀粉酶2同工酶的研究

对抗大麦黄矮病毒病的普通小麦－－中间偃麦草易位系Ｆ９４６３１和Ｆ９４８８５－２进行抗性和α－淀粉酶２同工酶电泳图谱的研究,证明抗性基因和控制α－淀粉酶２形成的结构基因α－Ａｍｙ－Ａｇ２（α－Ａｍｙ－Ｘ２）均位于中间偃麦草第７６组染色体长臂上。这两个基因都呈显著遗传性。α－Ａｍｙ－Ｘ２控制形成二条α－淀粉酶２特异酶带,可认为是７Ａｉ－１长臂的生化标记,经ＢＹＤＶ抗性和α－淀粉酶２遗传分析,推断这两个     

簇毛麦和中间偃麦草rRNA基因位点双色荧光原位杂交分析

簇毛麦和中间偃麦草是小麦改良的重要抗源，为了对导入的外源染色体及片段进行有效鉴定，应用分带和双色荧光原位杂交，将25S－5．8S－18S rRNA、5S rDNA基因分别定于簇毛麦染色体1V短臂和5V短臂上。分别在中间偃麦草的3对、4对染色体上观察到25S－5．8S－18S rRNA和5S rRNA基因，其中有2对染色体在其短臂上有两种核糖体RNA基因。     

4D缺体小麦与八倍体小偃麦杂交的细胞遗传学研究

利用自花结实的４Ｄ缺体小麦作母本，与中２、中５及中１００１等八倍体小偃麦杂交，获得的杂种Ｆ１植株除４Ｄ缺体×中５育性极低外，其余组合略低于普通小麦×八倍体小偃麦的自交结实率。杂种Ｆ１体细胞２ｎ＝４８。４Ｄ缺体×中２的Ｆ１花粉母细胞减数分裂ＭＩ染色体配对的平均构型为１８．８１（１５－２２）Ⅱ＋０．５７（０－３）Ⅲ＋０．１１（０－２）Ⅳ＋８．２３（６－１０）Ⅰ。观察结果同时表明：（１）单价体的分布在每个ＰＭＣ中以８为众数；（２）单价体之中的两个在多数的ＰＮＣｓ中能形成次级联合配对，说明４Ｄ与４Ｅ染色体具有部分同源关系；（３）杂种Ｆ１多数花粉母细胞中多价体的出现表明八倍体小偃麦中Ｅ染色体组具有促进部分同源染色体配对的基因。     

甘蓝型油菜-埃塞俄比亚芥二体附加系植株形态及细胞学鉴定

从甘蓝型油菜品种“３－６３－４－５－１”与埃塞俄比亚芥品种“Ｄｏｄｏｌｌａ”杂种Ｆ１植株开放受粉获得的Ｆ２群体中筛选出一株半不育、矮杆、甘蓝型油菜类型植株，经连续４个世代自交、分离鉴定出一个二体附加系“９２Ｉ１０９６”。细胞学观察结果，其根尖细胞染色体数２ｎ＝４０，比其母本甘蓝型油菜（２ｎ＝３８）多两条额外染色体。花粉母细胞（ＰＭＣｓ）减数分裂中期（ＭＩ）染色体构型平均为０．４７Ｉ＋１９．７７Ⅱ，     

硬粒小麦-长穗偃麦草附加系、代换系和易位系的创制

通过小麦与长穗偃麦草远缘杂交创制附加系、代换系及易位系是小麦遗传改良中利用长穗偃麦草优良基因的重要途径。本研究将长穗偃麦草特异分子标记、染色体计数、基因组原位杂交(GISH)及非变性原位杂交(ND-FISH)等多种方法相结合,对硬粒小麦Langdon(AABB)与小偃麦8801(AABBEE)的杂交后代群体进行分子细胞学鉴定,创制出硬粒小麦-长穗偃麦草3E、6E染色体双体附加系Du-DA3E和Du-DA6E,硬粒小麦-长穗偃麦草1E(1B)染色体双体代换系Du-DS1E(1B)以及硬粒小麦-长穗偃麦草1AS-1EL染色体易位系Du-T1AS·1EL。创制的4个种质中长穗偃麦草染色体均能稳定遗传,这不仅增加了硬粒小麦-长穗偃麦草附加系和代换系的类型,还为后续利用长穂偃麦草优良基因改良小麦提供了特殊种质资源。     

小麦-中间偃麦草2A/6St代换系014-459的分子细胞遗传学鉴定

中间偃麦草是小麦遗传改良的有用资源,育成了大量的小麦-中间偃麦草附加系、代换系及部分双二倍体。中4是小麦-中间偃麦草部分双二倍体,很方便与普通小麦杂交并被广泛用于小麦的遗传改良。014-459是中4与普通小麦杂交后代,具有一些特殊特性,材料014-459与一些普通小麦杂交,无论正反交,其F1表现为不育,而与另一些普通小麦的杂交F1表现为可育,此外,材料014-459粗蛋白和湿面筋含量很高。基于014-459的这些特性,猜测其可能具有中间偃麦草染色体片段,为此对014-459进行了细胞学鉴定。FISH和GISH以及PLUG标记分析用来分析材料014-459的染色体组成情况。连续的FISH和GISH试验证实小麦-中间偃麦草部分双二部体中4与小麦杂交后代品系014-459的1对小麦2A染色体被来自中间偃麦草的1对St染色体代换, PLUG标记分析证实这1对St染色体属于第6同源群,可能来自中间偃麦草的St染色体被代换进小麦中造成了材料014-459的一些特性。对品系014-459的分子细胞遗传学鉴定对促进中间偃麦草6St染色体在小麦中利用及小麦品质改良有积极作用。     

小麦-偃麦草杂种后代及小麦种质资源对纹枯病的抗性

为鉴定小麦-偃麦草杂种后代以及我国小麦品种和育种中间品系对纹枯病的抗性,并且解析偃麦草染色体与纹枯病抗性的关系,在徐州和南京两个试点,采用田间病圃法对321份普通小麦品种或品系和56份小麦-偃麦草杂种后代材料进行了纹枯病抗性鉴定。在徐州试点没有发现高抗纹枯病的种质,但是有52份材料表现中抗反应型,包括34份普通小麦材料,其中萧农8506-1、小偃81、冀植4001、农大195、徐州8913和京东3066A-3的相对抗病指数高于0.7。在南京试点,全部普通小麦材料都不抗纹枯病,只有5份小麦-偃麦草种质表现中抗反应型。部分小麦-偃麦草种质的病情指数不但显著低于感病对照品种苏麦3号和扬麦158,而且还低于抗病对照品种安农8455和宁麦9号,如小麦-中间偃麦草4Ai#2或4Ai#2S附加系、代换系和易位系材料TA3513、TA3516、TA3517和TA3519及小麦-长穗偃麦草第4部分同源群染色体代换系SS767,说明中间偃麦草4Ai#2染色体和长穗偃麦草4J染色体可能与纹枯病病情指数降低有关。基因组原位杂交分析结果表明,4Ai#2染色体属中间偃麦草的J^s基因组,而长穗偃麦草与纹枯病抗性相关的第4部分同源群染色体属J基因组。虽然纹枯病与眼斑病的发病部位和症状非常相似,但抗眼斑病基因Pch1 (Madsen)和Pch2 (Cappelle-Desprez)对纹枯病无效。     

一种利用染色体显微切割和微克隆获得小麦基因探针的方法

利用染色体显微切割和微克隆技术对普通小麦钢８２－１２２（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ ２ｎ＝４２）染色体长臂１Ｄ染色体进行切割和ＰＣＲ扩增，提出了高分子量麦谷蛋白（ＨＭＷ－ＧＳ１）１Ｄｘ５亚基基因片段，可为获得新基因特异性探针打下一定的基础。     

冬小麦丰抗13缺体系和双单体系研究

冬小麦丰抗１３缺体系和双单体系研究孙荣锦杨之刚（中国农业科学院作物所，北京１０００８１）１丰抗１３缺体系小麦染色体组成是２ｎ＝６ｘ＝４２，小麦缺体是２ｎ－２＝４０，即缺少了某对染色体的单株，称缺体株。它的减数分裂中期Ⅰ染色体构型是２０″即２０个二价体...     

含6X小黑麦血缘的抗病小麦新材料的种子储藏蛋白分析

６Ｘ小黑麦品种Ｖｅｎｕｓ和２个普通小麦品种杂交回交,选育出ＮＲ９８４９等８个系群９４个系,其中大部份抗条锈病或（和）白粉病。应用酸性聚丙烯酰胺凝胶电脉（ＡＰＡＧＥ）分析了ＮＲ９８４９等系群的６４个株及其亲本Ｖｅｎｕｓ、小偃６号和川育１２号的醇溶蛋白,结果表明,５０．００％的株系具有１ＲＳ／１ＢＬ所特有的Ｇ１ｄ１Ｂ３位点,２０．３１％的株系在Ｇｌｉ－２位点发生了普通小麦与６Ｘ小黑麦遗传物质重组;６４个株系中出现了１种亲本类型,３种重组类型和３种突变重组类型,突变率１５．６２％。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）指出,大多数株系Ｇｌｕ－１位点与普通小麦亲本相同,即由Ｇｌｕ－Ａ１编码的亚基１,Ｇｌｕ－Ｂ１编码的亚基７＋８、１４＋１５,Ｇｌｕ－Ｄ１编码的亚基５＋１０、２＋１２。文中还讨论了６Ｘ小黑麦向普通小     

Genomic constitution of a partial amphiploid OK7211542 used as a source of immunity to barley yellow dwarf virus for bread wheat

A combination of genomic in situ hybridization (GISH) and meiotic pairing analysis of crosses between a series of 2n= 56 partial amphiploids confirmed that the alien genome of the BYDV-immune Agro-tricum line OK7211542 is derived from Thinopyrum ponticum and not from Thinopyrum intermedium. The evidence from meiotic pairing analysis indicated that the chromosome constitution of OK7211542 is similar to another Agrotricum line, ORRPX, which was derived from a cross of wheat and Th. ponticum, but different from other Agrotricum lines, Zhong 5 and TAF 46 which were derived from the crosses between wheat and Th. intermedium. The GISH analysis confirmed that OK7211542 contained one complete set of 14 Th. ponticum chromosomes, in which no S chromosome was present in the alien genome. GISH also detected a small alien translocation attached to one of the wheat chromosomes, a result that was consistent with the pairing data.     

抗黄矮病小麦种质的分子标记

应用基因组原位杂交技术分析了抗小麦黄矮病种质的遗传组成,研究表明小麦一中间但麦草部分双二倍体无芒中4(2n=56)具有40条小麦染色体、5对中间僵麦草染色体、3对小麦/中间僵麦草易位染色体,其中1对是罗伯逊氏易位染色体。结果表明无芒中4与远中5的遗传组成有明显差异,是两种不同类型的材料。抗黄矮病小麦种质F940418, T10     

携带抗黄矮病基因染色体的分离

抗黄矮病小麦一中间堰麦草异附加系Z2 (2n=44)携带一对完整的中间僵麦草染色体,用Z2作母本与普通小麦品种中8601杂交,获得杂种F1(2n=43=21Ⅱ+1I)。利用激光显微切割技术将F1花粉母细胞减数分裂中期I及后期I的呈单价体的中间僵麦草染色体分离出来,经去蛋白、Sau3AI酶切后,进行PCR体外扩增。结果表明利用激光显微切割可分离     

对基因组原位杂交信号释译可能出现的片面性——来自一个小麦易位系(A-3)中外源遗传物质鉴定的启示

利用基因组原位杂交(GISH)和种子醇溶蛋白电泳(A-PAGE)技术对一个可能携带有10倍体长穗偃麦草(Thinopyrum ponticum (Host) Liu & Wang)遗传物质的小麦新种质A-3进行了综合鉴定. 用普通小麦"中国春"(Triticum aesticum L. cv. Chinese Spring)基因组(ABD)DNA作探针, 拟鹅观草[Pseudoroegneria stipifolia(Czern e     

十个八倍体小偃麦的细胞学鉴定和染色体构成分析

培育新的八倍体小偃麦,对于利用偃麦草遗传物质进行小麦的遗传改良具有重要意义。本研究利用细胞学和基因组原位杂交技术,对从中间偃麦草与小麦品种烟农15杂交后代选育出的10个八倍体小偃麦山农TE256、山农TE259、山农TE261、山农TE262、山农TE263、山农TE265、山农TE266、山农TE267-1、山农TE270和山农TE274进行了细胞学鉴定和染色体构成分析。结果表明,10个八倍体小偃麦绝大多数单株根尖细胞的染色体数目为2n=56,个别单株含有54或55条染色体;大多数2n=56单株的花粉母细胞在减数分裂中期I的染色体构型为2n=28II,少数花粉母细胞存在单价体、三价体或四价体,后期I染色体可均等分向两极,仅有极少数细胞出现染色单体提前分离等现象;10个八倍体小偃麦均含有普通小麦的全套染色体和中间偃麦草的1个混合染色体基组,其中间偃麦草染色体是由来自中间偃麦草3个不同染色体基组的染色体构成的混合染色体基组,其染色体构成分别为2St+8J~S+2J+2J-St、2St+8J~S+4J、2St+8J~S+2J+2J-St、2St+8J~S+2J+2J-St、2St+8J~S+2J+2J-St、6St+4J~S+2J+2J-St、4St+6J~S+2J+2J-St、2St+8J~S+4J、2St+8J~S+4J和4St+6J~S+4J,与目前已报道的八倍体小偃麦均有所不同。研究结果可为这些新型八倍体小偃麦的研究和有效利用提供参考依据。     

Molecular cytogenetic characterization of wheat–<Emphasis Type="Italic">Secale africanum</Emphasis> amphiploids and derived introgression lines with stripe rust resistance

Two amphiploids, AF-1(Triticum aestivum L. cv. Anyuepaideng–Secale africanum Stapf.) and BF-1 (T. turgidum ssp. carthlicum–S. africanum), were evaluated by chromosomal banding and in situ hybridization. The individual S. africanum chromosomes were identified in the BF-1 background by sequential C-banding and genomic in situ hybridization (GISH), and were distinguishable from those of S. cereale, because they exhibited less terminal heterochromatin. Fluorescence in situ hybridization (FISH) using the tandem repeat pSc250 as a probe indicated that only 6R^a of S. africanum contained a significant hybrid signal, whereas S. cereale displayed strong hybridization at the telomeres or subtelomeres in all seven pairs of chromosomes. Extensive wheat–S. africanum non-Robertsonian translocations were observed in both AF-1 and BF-1 plants, suggesting a frequent occurrence of chromosomal recombination between wheat and S. africanum. Moreover, introgression lines selected from the progeny of wheat/AF-1 crosses were resistant when field tested with widely virulent strains of Puccinia striiformis f. sp. tritici. Three highly resistant lines were selected. GISH and C-banding revealed that resistant line L9-15 carried a pair of 1BL.1RS translocated chromosomes. This new type of S. africanum derived wheat–Secale translocation line with resistance to Yr9-virulent strains will broaden the genetic diversity of 1BL.1RS for wheat breeding.     

基于改进的多色荧光原位杂交技术的染色体分析

为了提高多色荧光原位杂交(M-FISH)技术的鉴定效率,简化M-FISH操作程序,探索和建立新的M-FISH实验及观察体系,本研究以‘荆辉1号’（普通小麦辉县红-荆州黑麦双二倍体）、‘南农9918’（普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6AL）、‘扬麦22’（普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6DL）以及‘ST5V#4S-1’（普通小麦-簇毛麦小片段易位系）等为试验材料,以2个寡核苷酸探针[(GAA)₁₀、pAs1-1]和物种基因组DNA探针作混合探针进行M-FISH分析。结果表明在一次原位杂交中同时使用3种探针,既可以识别出小麦背景中所有的外源染色体或染色体片段,又可以根据(GAA)₁₀和pAs1-1在染色体上的杂交信号分布精确鉴定出小麦和外源染色体（片段）的具体身份。这种改进的M-FISH技术可有效用于小麦及其近缘植物染色体的鉴定,并有助于快速构建物种基于FISH的分子核型。     

Fluorescent in situ hybridization — a useful aid to the introduction of alien genetic variation into wheat

Summary Fluorescent in situ hybridization (FISH) of DNA to plant chromosomes has proved to be a powerful cytogenetic tool. The value of fluorescent in situ hybridization of total genomic DNA (GISH) of related species is demonstrated in the determination of wheat/alien chromosome pairing in hybrids. Its use for assessing the relative merits of the various genes that affect chromosome pairing is also shown.The ability of GISH to identify the presence in wheat of whole alien chromosomes or alien chromosome segments is illustrated. The potential of FISH for detecting repeated DNA sequences, low copy sequences and single copy genes is discussed.Abbreviations FISH fluorescent in situ hybridization - GISH genomic in situ hybridization - PRINS primer-induced in situ hybridization