和牛母牛超数排卵及胚胎移植试验研究效果初报

[目的]研究和牛母牛超数排卵及胚胎移植效果。[方法]利用纯种和牛母牛作为供体,荷斯坦母牛及西杂母牛作为受体,通过供体牛的超数排卵、人工授精、采胚、胚胎冷冻及受体牛的同期发情和鲜胚移植,快速获得纯种和牛及和牛胚胎。[结果]对4头青年纯种和牛母牛进行超排,重复冲卵13头次,共采卵数122枚,其中75枚可用胚胎,可用胚率为61.5%,平均5.76枚/头次。对75头荷斯坦牛及西杂母牛同期发情,结果获得89.2%的同期发情率。67头受体牛移植了鲜胚,2个月后妊娠检查有35头怀孕,移植妊娠率为52.23%。[结论]可以利用超数排卵及胚胎移植增加和牛母牛利用效率。     

娟姗青年母牛超数排卵及冻胚移植效果试验报告

2005年3月至7月,在广西地区选择25头娟姗母牛作为供体,用不同厂家、不同剂量的促排卵激素进行超排和重复超排,观察了超排及重复超排效果.结果25头供体共采卵46头次,排卵数502枚,回收到278枚胚胎,采卵率为55.4%,获得207枚可用胚胎,平均4.5枚/头次,可用胚率为74.5%;与此同时在2005年4月至2006年1月,开展了娟姗牛冷冻胚胎的移植工作,对185头本地黄母牛和杂交母牛进行了同期发情处理,结果共有166头发情,其中113头可移植,同期发情率为89.7%,可移植率为61.1%.113头可移植牛移植2个月后,经妊娠检查共有47头怀孕,移植妊娠率为41.6%.     

娟姗牛与荷斯坦青年母牛超排效果比较

本试验对56头娟姗牛与179头荷斯坦青年母牛进行超排处理,分别获得可用胚胎227枚和1242枚;可用胚率分别为57.80%和70.65%,娟姗牛和荷斯坦牛超排黄体数无明显差异(P>0.05),但采胚数明显低于荷斯坦牛,娟姗牛的超排结果明显低于荷斯坦牛的结果(P<0.05),移植受体牛270头,怀孕157头。移植妊娠率分别达到52.54%和50.20%,同期娟姗牛胚胎与荷斯坦牛胚胎移植结果比较,无显著差异(P>0.05)。娟姗牛超排使用FSH剂量为9mg更为经济。青年荷斯坦牛和娟姗牛可用于胚胎生产,但青年娟姗牛的可用胚胎数低于荷斯坦牛。     

牛超数排卵技术的研究

用ＦＳＨ＋ＰＧＦ１。超排处理７２头次供体牛,采卵３６１枚,可用胚２３５枚,黄牛胚胎可用率高于奶牛、肉牛,育成牛胚胎可用用率高于经产牛,秋冬季超排效果明显好于春季。     

常规精液与性控精液的超数排卵效果比较

采用常规精液输精和性控精液输精对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排试验。超排后,采用常规精液输精供体母牛521头,共回收卵5311枚,平均每头10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。采用性控精液输精供体母牛59头,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控精液组的未受精率大大高于常规精液组,而可用胚胎数和可用率明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了可用胚胎率。     

ET与AI后代荷斯坦青年母牛超排效果分析

为了比较胚胎移植(ET)和人工授精(AI)后代荷斯坦青年母牛的超排效果,试验通过对13～16月龄的193头AI后代荷斯坦青年母牛与97头ET后代荷斯坦母牛进行超排处理,对超排效果进行比较分析,结果表明:荷斯坦青年奶牛进行超数排卵可以获得满意的胚胎生产效果,AI青年后代牛16月龄超排效果优于13～15月龄,在新疆使用8.5～9.5 mg的FSH(中科院生产)超排,效价和剂量是合适的,ET与AI后代荷斯坦奶牛平均获得可用胚胎数(6.56±1.37)枚/头次和(5.22±1.21)枚/头次,可用胚胎率为64.8%和55.4%,移植妊娠率分别为49.3%(500/1014)和43.0%(135/314)。说明荷斯坦牛AI和ET后代在13～16月龄可用于胚胎生产,繁殖性能差异不明显。     

转基因奶牛与普通奶牛超数排卵效果的比较分析

本文对20头转基因母牛与20头普通母牛超数排卵效果进行了比较分析。在20头超排转基因奶牛中,16头有超排反应,4头无超排反应,超排成功率为80%(16/20),平均获胚/卵总数为6.15±4.43枚,可用胚数为3.94±2.62枚,未受精卵数为1.50±2.19枚,退化胚胎数为0.69±0.78枚;20头对照组普通奶牛中,17头有超排反应,3头无超排反应,超排成功率为85%(17/20),平均获胚/卵总数为8.65±5.70枚,可用胚数为4.18±3.11枚,未受精卵数为1.47±1.12枚,退化胚胎数为3.00±4.24枚。统计分析表明,转基因奶牛的获胚/卵总数、可用胚数、未受精卵数与普通奶牛均无显著差异(P>0.05),转基因奶牛的退化胚胎数显著低于普通奶牛(P<0.05)。本试验结果说明转入改变乳成分的外源基因不影响奶牛的超数排卵效果。     

国产促卵泡素(FSH)对供体牛超排效果的分析

通过对6头荷斯坦青年母牛用国产FSH 4d逐日递减注射法进行超排处理,非手术采卵.共收集桑椹胚(M)、紧缩桑椹胚(CM)、囊胚(BL)、扩张囊胚(EXB)各胚龄的胚胎49枚,可用胚38枚,其中A级M 1枚、CM 23枚、BL 1枚、EXB 9枚;B级M 1枚、BL 3枚、可用率达77.5%,平均可用胚6.3枚/头.这说明,在严格把握技术环节的情况下,国产FSH超排效果显著.     

应用性控冷冻精液生产性控胚胎试验

在供体奶牛超排时,应用X性控冷冻精液进行输精,生产体内性控胚胎.超排处理72头供体母牛(每头输4支精液),获可用胚335枚,平均每头供体牛获可用胚4.65枚.对照组共处理供体牛68头,采用常规冷冻精液输精(每头牛输精2支),获可用胚415枚,头均获可用胚6.1枚.     

常规精液与性控精液生产胚胎的效果比较

分别采用常规精液和性控精液输精,对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排效果试验。超排后,521头采用常规精液输精供体母牛,共回收卵5311枚,头均10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。59头采用性控精液输精供体母牛,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控组的未受精率大大高于常规精液组,而有效胚胎数和比例明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中,受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了有效胚胎率。     

高产奶牛超数排卵移植黄牛技术研究

2002-2004年,从饲养的812头奶牛群中,选择69头高产奶牛作供体进行超数排卵处理,63头供体牛共获胚胎495枚,超排成功率达91．3％(63／69),平均获胚胎7．17枚／头,可用胚胎402枚,平均可用胚胎5．82枚。其中采用加拿大生产的促卵泡素超排处理奶牛供体10头,获卵106枚,可用胚胎87枚,平均获可用胚胎8．7枚/头;采用鲜胚移植奶牛受体8l头,妊娠44头,妊娠率为54．3％,产犊28头,待产16头;采用冷冻胚胎移植黄牛受体278头,妊娠114头,妊娠率为41．0％。产犊22头,待产92头。     

奶水牛超数排卵试验效果分析

本试验以杂交奶水牛及纯种奶水牛作为供体牛,采用日本生产的FSH作为外源激素进行超数排卵,研究确定了胚胎移植供体牛超数排卵、人工授精、采胚等效果。试验结果表明,5头奶水牛供体牛进行超排,共采卵7头次,采卵数21枚,其中10枚可用胚胎,平均1.4枚/头次,可用胚率为47.6%。     

不同月龄荷斯坦奶牛对超排效果的影响

用青年牛进行超排可以加快遗传进展，缩短世代间隔。试验对不同月龄的青年奶牛和成年奶牛的超排效果进行了比较，分别为7～9．9月龄、10～12．9月龄、13～15月龄和成年奶牛。183头奶牛中有170头奶牛超排有反应，且不同月龄的奶牛在超排成功率上没有显著差异，但随着超排奶牛月龄的增加．超排成功率有升高的趋势。170头奶牛中有1468枚胚胎冲出，其中920枚胚胎可用（62．7%）。7～9．9月龄的奶牛的平均获胚数为5．4枚，可用胚为2．8枚，显著低于其它组别（P〈0．05）。大于10月龄的青年奶牛各组间的超排效果没有显著差别（P〉0．05），平均获胚数为8．9枚，平均可用胚为5．6枚。不同月龄对未受精卵率的影响不大，但是小于10月龄的青年奶牛的变性胚率要显著高于其它组别的奶牛（P〈0．05）。这些结果表明，大于10月龄以上的奶牛可以成功地进行超排，但是小于10月龄的奶牛不能应用于胚胎的商业化生产中。     

不同因素对奶牛超数排卵效果影响的研究

为了充分利用优良母牛遗传资源,发挥超数排卵技术对改良奶牛品种的重要作用,采用CUE-MATE孕酮栓+FSH+PGF2α法和自然发情+FSH+PGF2α法对酒泉地区饲养的奶牛进行了超数排卵研究。结果表明:自然发情法和CUE-MATE法超排回收的平均可用胚胎数分别为4.54枚和4.86枚;上、中、下3等膘情供体牛获得的平均可用胚胎数分别为6.13、5.39和3.29枚,可用胚率分别为58.60%、58.08%和44.66%;采用CUE-MATE孕酮栓+FSH+PGF2α方法进行超排处理,平均可用胚胎数:春季(4.00枚)≤秋季(4.86枚)≤冬季(5.07枚),平均可用胚率:秋季(56.04%)>冬季(50.71%)>春季(43.50%);青年母牛的超排效果略高于经产母牛,但两者间差异不显著(P>0.05)。     

娟姗牛与荷斯坦牛超排效果比较

本试验对56头青年娟姗牛和179头荷斯坦青年牛进行超排处理,平均获得可用胚胎数4.05±4.20枚/头次和7.06±3.72枚/头次;可用胚率分别为57.80%和70.65%,娟姗牛和荷斯坦牛超排黄体数无明显差异(P>0.05),但采胚数娟姗牛明显低于荷斯坦牛。共移植受体牛310头,怀孕157头(50.65%)。娟姗牛胚胎与荷斯坦牛胚胎的移植妊娠率分别为52.54%(31/59)和50.20%(126/251),无明显差异(P>0.05)。结果表明,青年荷斯坦牛和青年娟姗牛可用于胚胎生产,但娟姗牛的可用胚胎数低于荷斯坦牛。     

奶水牛超数排卵与胚胎移植试验效果分析

采用杂交奶水牛及纯种奶水牛作为供体牛,将日本生产的FSH作为外源激素进行超数排卵,以确定胚胎移植供体牛超排的效果;采用CIDR+PMSG+PG+LHRH-A3法,确定受体牛胚胎移植和同期发情的效果。试验结果表明:5头奶水牛供体牛超排,共采卵7头次,采卵数21枚,其中10枚可用胚胎,平均1.4枚/头次,可用胚率为47.6%。受体牛的同期发情效果和可移植率分别为77.0%和62.0%。     

牛胚胎移植产业化超数排卵的系统研究

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的产业化,试验系统地研究了超排方案、青年奶牛的月龄及发情周期不同阶段、重复超排次数、超排间隔时间、卵巢状态、胎次与产后间隔时间对超排效果的影响,共超排供体奶牛1 127头次,回收胚胎共10 900枚,可用胚胎数量为6 942枚,平均每头次获得胚胎数量为6.73枚.结果表明:①应用PSO1、PSO2和 PSO3三种方案进行超排处理,PSO3方案的超排成功率和平均回收可用胚胎数均高于其他两个方案;②利用发情周期9～11 d的自然发情奶牛直接超排效果最好;③对青年奶牛进行超排处理,应限制超排起始时间,15月龄以上的青年奶牛超排效果较好;④供体牛连续重复超排控制在3次以内,连续4次超排处理后极大降低胚胎可用率;⑤超排处理的间隔最短时间应该选择46～60 d;⑥经产牛1～3胎次超排效果较好,7胎次以上较差;⑦产后间隔时间选取80～90 d.     

不同黄体大小对供体超排和受体移植成功率的影响

本试验分析了291头14～15月龄荷斯坦青年母牛不同黄体大小对供体超排的效果。比较了924头受体母牛不同黄体大小对胚胎移植后妊娠率的影响。结果表明,埋栓前,黄体1.2cm组超排效果和有效胚胎数较高。黄体较小的组超排效果稍差一些。1.5cm以上黄体组的结果居中。受体母牛在移植胚胎时,0.8cm以上黄体的受体均获得了较高的妊娠率。但1.5cm以上黄体的受体妊娠率更高一些。由此结论提出：在超排前,黄体的大小与母牛体内孕酮浓度的高低和超排效果有关。受体在移植胚胎前,只要黄体的大小能保证最低妊娠所需的孕酮浓度,均能保证较好的妊娠率。黄体较大时,妊娠率有增加的趋势。     

奶牛胚胎移植技术研究报告

1986—1988年,我们共超排处理采集胚胎供体黑白花奶牛21头,获卵总数为196个,其中可用胚胎141个,每头平均6.71个。1987年超排成绩最好,每头平均获9.5个可用胚胎(全国每头平均3.8个),在国内居领先地位;其中有两头母牛先后获得21个(364号母牛)和32个(263号母牛)可用胚胎,连续两次创当时国内最高记录。第一批移植试验(1986.4—1987.10),将奶牛胚胎移植给30头受体牛(其中奶牛9头,黄牛21头),90天妊娠率为43.3％(13/30)。13头受体牛(奶牛5头,黄牛8头)先后产下了黑白花牛犊。     

奶牛超排前卵巢状态对超排效果的影响

本试验初步研究了超排前卵巢状态对超排效果的影响。据直肠检查结果将供体奶牛分为两组 :1组供体卵巢上只有黄体存在 ;2组供体卵巢上不仅有黄体存在还有卵泡存在。经超排处理后 ,1组中 2头供体无发情表现 ;2组中 6头供体无发情表现。 2组供体的不发情率 2 7 3 %显著高于 1组的 6 3 %(P <0 0 5)。两组供体在平均获胚数和平均获可用胚数无显著差异 (P >0 0 5)。