胚胎免疫火鸡疱疹病毒后鸡淋巴器官的超微结构观察

用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗对孵化至１８日龄的鸡胚胎进行免疫注射。超微结构观察显示，１８日龄胚胎免疫鸡出壳后对淋巴器官的早期发育具有明显的免疫促进作用；而鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）攻毒试验的结果则表明，非免疫鸡出现较明显的淋巴样细胞的退行性变化。     

鸡马立克氏病的免疫形态学研究

为了比较马立克氏病(MD)弱毒苗814鸡胚免疫与雏鸡免疫的免疫保护力。检查其鸡胚免疫的安全性,探索MD的免疫性质和免疫发生规律。本实验应用组织学和组织化学的方法,分别对18只龄鸡胚免疫鸡。1日龄雏鸡免疫鸡和非免疫对照鸡不同时期MD强毒攻击后的病理变化进行了检查。并对各组未攻毒鸡的胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏进行了动态观察。对各组淋巴器官的T、B淋巴细胞和巨噬细胞进行了统计比较,实验结果表明:MD弱毒苗814鸡胚免疫与雏鸡免疫比较,能促进免疫器官的早期发育,提前获得免疫保护力,MD弱毒苗814鸡胚免疫不引起MD病变,是安全的:MD免疫以T淋巴细胞为主,同时B淋巴细胞和巨噬细胞积极参与。     

bcl-2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡的关系

用一步法从17 日龄来克亨SPF鸡胚和90 日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总RNA(TRNA),用鸡B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因 (bcl-2) cDNA探针进行Northern blot杂交。发现bcl-2 在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同, 成年鸡bcl-2 的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊, 而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况, 胚胎鸡法氏囊、脾脏和胸腺的细胞凋亡率分别是0.40% , 0.68% 和0.38% ; 成年鸡则是6.98% , 1.17% 和0.61% 。结果表明, 鸡bcl-2 基因通过阻抑细胞凋亡直接调控正常免疫器官的发育, 在淋巴细胞发育过程中bcl-2是免疫细胞亚型选择的重要调节物。     

马立克氏病（MD）胚胎免疫最佳免疫途径的研究

经尿囊腔接种、钝端垂直进针接种和长轴中点垂直进针接种３种途径，对有ＭＤ母源抗体的１８日龄鸡胚免疫接种ＭＤ疫苗（ＨＶＴ），结果表明不同免疫途径胚胎接种均有效，但以钝端垂直进针组的孵化率和健雏率最高，并有利于机械化和自动化操作，胚胎免疫接种ＨＶＴ不会降低孵化率和键雏率。     

鸡胚胸腺的组织发育

连续观察孵化至１４～２１日龄的鸡胚胸腺,详细描述了早日龄鸡胚胸腺的组织学分化发育过程。结果显示,胸腺完整组织结构的形成约在１８日龄。２１日龄出现的非炎性异嗜性细胞在胸腺组织分化发育过程中所起的作用值得注意。     

鸡胚免疫器官发育中肥大细胞的观察

为了探讨肥大细胞(MC)在鸡胚免疫器官中的作用,并提供组织形态学依据,对不同日龄鸡胚胸腺、法氏囊、脾脏采用Carony's液固定,阿尔新兰染色-藏红O复染(alcian blue-safrianin O,AB/SO)并对其肥大细胞(Mast cell,MC)的形态、分布及数量变化进行观察.结果表明,Carnoy's液固定,AB/SO染色可以清晰地显示MC的组织结构,MC呈圆形、椭圆形和不规则形,大小不一;胸腺中MC主要分布在髓质,并有少量分布于血管和小叶间结缔组织;法氏囊中MC在淋巴小结周围的组织中分布;脾脏中MC分布在淋巴小结周围,血窦、血管中偶见.18日龄前脾脏、19日龄前法氏囊、20日龄前胸腺中MC的数量与器官发育呈正相关,其后MC的数量下降是否与MC的排出有关尚不清楚.     

bcl—2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡？…

用一步法从１７日龄来克亨ＳＰＦ鸡胚和９０日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总ＲＮＡ（ＴＲＮＡ）,用鸡Ｂ－细胞淋巴瘤／白细胞病－２基因（ｂｃｌ－２）ｃＤＮＡ探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。发现ｂｃｌ－２在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同,成年鸡ｂｃｌ－２的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊,而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况,胚胎鸡法氏囊、     

鸡传染性法氏囊病胚胎免疫研究

用ＩＢＤＢＪ８３６免疫接种１８ｄ龄鸡胚，雏鸡在１，３，６周龄用ＩＢＤ强毒攻毒，获得显著保护，其保护率分别为６６．７％，８７．５％和１００％，且早期免疫保护率高于雏鸡免疫。ＩＢＤ胚胎免疫安全，不影响孵化率和健雏率，对新城疫苗的免疫应答没有抑制作用。     

鸡胚消化器官组织学发育过程观察

通过对孵化1~8日龄的鸡胚进行连续切片,HE染色,对鸡胚消化器官胃、肠、肝脏、胰腺进行组织学连续性观察,详细描述鸡胚消化器官组织发育过程。试验结果表明,在4日龄鸡胚消化器官胃、肝脏、胰腺均开始发育;在6日龄时腺胃和肌胃开始分化;至8日龄肝脏已有肝小管和肝小叶结构,腺胃壁开始出现腺管,未出现腺泡。胃功能的发育完善较肝脏、胰腺、肠的发育晚,可能与鸡胚早期主要消化吸收卵黄等脂类物质有关。     

鸡胚MD免疫器官组织形态学变化

用马立克氏病(MD)三价苗对18日龄鸡胚免疫后,其免疫器官(法氏囊,胸腺,脾脏)中的酯酶阳性T淋巴细胞,浆细胞数量明显高于1日龄雏鸡免疫组,而后者又高于未免疫对照组。表明18日龄胚胎免疫比1日龄雏鸡免疫能更早地产生较好的免疫应答,并能更早地促进免疫器官的免疫成熟。     

来航鸡淋巴器官的组织学和组织化学观察

本介绍了在石蜡切片上用酸性非特异性酯酶标记T淋巴细胞的方法，研究了43只1日龄来航鸡的胸腺，腔上囊，脾，盲肠扁桃体内T，B淋巴细胞的分布及其比值，并用常规HE染色法探讨了来航鸡出壳后不同阶段淋巴器官发育的显微结构变化。结果表明：1日龄来航鸡淋巴器官内ANAE阳性和阴性淋巴细胞分布的区域分别与T，B淋巴细胞分布的区域一致；1日龄时除胸腺和腔上囊基本发育完善外，脾和盲肠遍桃体均未发育完善，在三周龄时出现淋巴小结迹象，四周龄时淋巴小结较明显，到八周龄时发育成成年水平。     

不同时期鸡胚体外培养及其影响因素的研究

采用代用蛋壳体外培养方法，对不同时期鸡胚胎换蛋壳培养进行了研究。结果表明：体外受精卵体外培养发育率为10％。X期胚胎体外培养的出雏率为1.2%；孵化1日龄胚胎体外培养的出雏率为7.9%；去1／4壳的鸡胚出雏率为3.7%；鸡胚胎换蛋壳以后，添加6－8mL稀蛋白对换壳鸡胚发育比较适宜。     

鸡胚免疫接种防制禽病研究概况

家禽胚胎发育学研究表明,8日龄鸡胚胸腺和法氏囊已可检测到淋巴细胞,14日龄鸡胚淋巴细胞已能产生抗同种移植物的排斥反应(Jankovic,D.D.等,1975)。但在1982年以前,人们一直认为,鸡胚的免疫系统尚未启动,不具备产生明显免疫应答的能力。因此,当1981年美国农业部地区家禽研究室Sharma等首次报道在鸡胚孵化的最后1/4期间经胚胎接种鸡马立克氏病HVT126疫苗,雏鸡获得了早期的免疫保护时,人们对此感到惊奇和怀疑,但随即为其他研究者证实。     

家蝇幼虫血淋巴对鸡免疫功能的影响

将100只1日龄雏鸡随机分为4组,用家蝇幼虫血淋巴按不同剂量给鸡灌服,用药一定时间后,对21,35,50日龄鸡分别随机抽取8只进行称重、颈静脉采血和剖杀,取脾脏、法氏囊进行称量,测定血淋巴对鸡体重及免疫器官的影响,并利用E一花环形成试验、鸡新城疫血凝抑制(ND-HI)试验检测血淋巴对鸡的细胞免疫、体液免疫功能的影响．结果表明：血淋巴对鸡体重、脾脏、法氏囊重各组间差异均不显著．E-花环试验中21,35日龄各组间差异显著,50日龄各组间差异极显著;ND-HI试验中21,35日龄各组间差异不显著,50日龄各组间差异极显著．说明家蝇幼虫血淋巴在增强鸡的细胞免疫与体液免疫功能方面具有明显的促进作用．     

鸡马立克氏病毒抗独特型抗体苗免疫效果观察

探讨MDV(Marek’s Disease Virus)抗独特型抗体(Ab2)模拟抗原诱导抗MDV感染的能力。将MDV抗独特型抗体分别与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂按1：1比例乳化制备成抗体苗．对1日龄，10日龄SPF鸡进行两次免疫，同时设火鸡疱疹病毒疫苗(HVT)和非免疫空白对照。30日龄后用马立克氏病毒(MDV)标准Ⅰ型强毒——京-1毒行腹腔攻击，在第30天，第60天，第120天采血，分别检测免疫系统一淋巴器官重量、循环血淋巴细胞数量、病理组织学变化、孵化率及免疫抑制性反应。MDV抗独特型抗体苗免疫攻毒后淋巴组织器官增重、器官未见淋巴细胞浸润．120d保护率为83．45％．未见大肠杆菌继发感染发生。HVT苗免疫攻毒后淋巴组织器官，淋巴细胞的数量下降、出现病理损伤，120d保护率为73．80％。MDV感染法氏囊、脾脏的重量及循环血中淋巴细胞的数量减少，大肠杆菌的敏感性增加。MDV抗独特型抗体能诱导机体产生抗MDV感染保护。     

谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的影响

160只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分成4组,分别饲喂添加0、0.2%、0.4%和0.8%谷氨酰胺饲粮28d。每周末取鸡24只,每组6只,颈静脉放血致死,取胸腺、法氏囊和脾脏,电子分析天平称重,Bouin液固定,制作石蜡切片,HE染色,光镜观察,显微摄影,研究基础日粮中添加谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的影响。结果为(1)试验3组1、4周龄和试验2组2、4周龄胸腺重量显著高于对照组(P<0.05),试验3组2周龄极显著高于对照组(P<0.01);试验2组1、2、4周龄和试验3组4周龄法氏囊重量显著高于对照组(P<0.05),试验3组1、2周龄极显著高于对照组(P<0.01)。(2)试验组胸腺小叶增多,皮质增厚,淋巴细胞密集,髓质比例减小,胸腺小体减少、减小;法氏囊皱襞内淋巴滤泡增多,皮质增厚,滤泡内淋巴细胞增多,但对照组4周龄皱襞内淋巴滤泡急剧减少。添加0.8%谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官的作用最为明显。结果说明,日粮中添加谷氨酰胺对肉仔鸡中枢淋巴器官胚后发育的促进作用较为明显,对中枢淋巴器官,尤其是法氏囊的退化具有延缓作用。从组织学角度证明谷氨酰胺能够促进中枢淋巴器官的胚后发育及其内T、B淋巴细胞的增殖与分化,进而提高机体的免疫功能。     

结核分枝杆菌菌体蛋白对鸡红细胞免疫功能及淋巴器官发育的影响

将180羽1日龄AA肉鸡随机分为6组,分别设置为结核分枝杆菌菌体蛋白高、中、低剂量组,未破碎全菌体组,菌体蛋白注射组和对照组,每组30羽.对照组仅饲喂基础日粮,试验组分别添加不同剂量的分枝杆菌菌体蛋白.试验鸡于14、21、28、35 d时分别进行剖杀.通过红细胞C3b受体花环和红细胞免疫复合物花环试验及试验鸡免疫器官组织学检查,结果表明:分枝杆菌菌体蛋白能有效增强鸡红细胞免疫功能并能刺激淋巴器官的发育和增殖.     

鸡马立克氏病疫苗鸡胚免疫技术的应用

目的:通过不同的马立克氏病(Marek’s disease,MD)疫苗接种方法的比较,得出获得最佳免疫效果的免疫方法。方法:选取孵化示范基地,孵化5组试验鸡群,每组100羽,试验组分别采取出生1日龄免疫、18日龄鸡胚免疫、出生免疫+17日龄二免、鸡胚免疫+出生二免、空白对照,自60日龄起对试验鸡群抽样开展体液免疫检测、细胞免疫检测、病理检测等试验室检测工作。结果:与对照组相比,4个疫苗免疫组的血清抗体效价、IFN-γ、IL-4水平均显著升高,同时MD的发病率显著下降,其中,以18日龄鸡胚免疫和鸡胚免疫+出生免疫效果最为显著。结论:鸡胚免疫技术能有效提高鸡马立克氏病疫苗的免疫效果。     

病毒 REV 与 ALV-J 经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性

【目的】J 亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virus subgroup J，ALV-J）和禽网状内皮组织增殖病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）均可通过鸡胚垂直传播，且两者在鸡胚中的自然共感染已有报道，但两者经鸡胚共感染的致病性未有研究。建立 ALV-J 与 REV 垂直传播共感染的实验动物模型，研究 ALV-J 与 REV垂直传播共感染的致病作用及其对禽白血病净化检测的影响，以期为推动多病原协同净化提供参考。【方法】通过鸡胚接种方式构建分别携带 ALV-J、REV 及两者共感染的雏鸡感染模型，通过孵化率、死亡率、体重、胎粪 ALV-p27 抗原检出率、病毒血症阳性率等指标分析 REV 与 ALV-J 在垂直传播中共感染的致病性。【结果】ALV-J+REV 共感染组鸡胚孵化率为 65.71%，低于单感染组和空白组（CK）；共感染组死亡率高于单感染组和CK。7 日龄时 CK、ALV-J 组、REV 组、ALV-J+REV 组雏鸡平均体重分别为 59.25、50.83、49.67、43.78 g，共感染加重了对雏鸡生长的抑制。ALV 血浆病毒分离结果显示，ALV-J 组、ALV-J+REV 组阳性率在各日龄均为100%，CK 均为 0%。采集肛拭子检测 ALV-p27 抗原结果显示，ALV-J+REV 组雏鸡阳性率在 1、3、7、14 日龄分别为 91.30%、94.12%、90.90% 和 100%，肛拭子的 ALV-J p27 阳性检出率低于血浆病毒分离。比较免疫器官发育指数结果显示，ALV-J 和 REV 单感染均导致雏鸡免疫器官萎缩，共感染加重免疫器官萎缩程度。免疫器官病毒载量显示，REV 与 ALV-J 共感染促进了 ALV-J 在免疫器官中的增殖，同时 ALV-J 也促进了 REV 在免疫器官中的增殖。【结论】相对于 ALV-J 和 REV 单感染，两者共感染降低了鸡胚孵化率、增加了雏鸡死亡率、增强了对雏鸡生长的抑制作用，对诱导胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官萎缩的影响更加显著，且两者在共感染过程中对彼此复制均有促进作用。     

鸡新城疫弱毒苗对18天龄鸡胚免疫的探索

对鸡新城疫（ＮＤ）疫苗接种１８天龄鸡胚的安全性和免疫抗体产生情况等进行了初步探讨试验结果表明,多种ＮＤ疫苗接种１８天龄鸡胚均能诱导出壳雏鸡产生较高的血凝抑制抗体（ＨＩ）,但疫苗对鸡胚有较强的致病性,孵化率和雏鸡成活率明显降低