柑桔褐斑病菌侵染对不同抗性柑桔种质防御酶活性的影响

为探明柑桔褐斑病菌Alternaria alternata侵染后柑桔防御酶活性变化与抗性的关系,以通过病情指数法和病斑平均直径法鉴定筛选出的高抗种质Lw8、中抗种质L2和高感种质Lw14的盆栽苗为试材,采用孢子悬浮液喷雾法在叶片上接种柑桔褐斑病菌(以喷洒无菌水为对照),接种后0、1、2、3、6、8和10d时采用各种酶试剂盒测定了叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、几丁质酶(CHT)和β-1,3葡聚糖酶(GLU)等7种防御酶的活性。结果表明,接种前,抗病种质(Lw8和L2)的SOD、PAL、PPO、GLU、CHT活性显著高于高感种质(Lw14),POD活性则与高感种质相近,CAT活性低于高感种质。接种后,3个不同抗性种质的7种防御酶的活性较对照明显提高,但增加幅度不一致;除CAT活性表现为高感种质的增幅高于抗病种质外,其余6种防御酶的活性均表现为抗病种质的增幅高于高感种质,并且抗病种质的防御酶活性升高迅速,一般在接种3d内可达到峰值。     

激发子物质处理富士苹果果实后抗轮纹病病菌侵染的研究

富士苹果果实经硝普钠(SNP)、茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)和氯化钙处理后再接种轮纹病菌,各个处理均能不同程度地防止轮纹病菌的侵染和扩展,其中MeJA和SNP处理效果最明显,烂果率和烂果面积分别比对照减少26.7%、26.7%和41.6%、36.2%。另外,还对各处理果实的PAL、SOD、POD和PPO活性变化进行了分析,结果表明,接种轮纹病菌的72h内,4个处理的PAL和PPO活性均表现出先升后降的趋势,而SOD和POD活性变化除SA处理一直保持平稳波动上升外,其余3个处理也表现为先升后降趋势;各处理的PAL和POD峰值出现的时间均早于SOD和PPO。PAL、POD和PPO活性峰值和平均值均以MeJA处理最高,SOD活性峰值和平均值SNP处理最高。     

轮纹病菌对不同抗性苹果品种防御酶的影响

实验研究了3个苹果品种被轮纹病菌(Botryosphaeriaberengrianaf.piricola)侵染后苹果枝干轮纹病防御酶系的变化。结果表明,在受病菌侵染后,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)均表现为先升后降的趋势,且抗病品种的峰值出现较晚。抗病品种鸡冠的PAL、SOD和POD活性变化峰值和均值要高于国光和富士,而PPO活性变化的峰值和均值则低于国光和富士。     

不同抗性甜瓜接种蔓枯病菌后若干生理指标的变化

对不同抗性甜瓜接种蔓枯病菌后测定叶片中叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量和3种防御酶（PPO、PO、PAL）的活性。结果表明：叶绿素含量在接种后呈现先增加后减小趋势,抗病甜瓜增幅大,叶绿素含量高于感病甜瓜;可溶性糖含量在接种后先降低后升高、再降低再升高,抗病甜瓜可溶性糖含量高于感病甜瓜;可溶性蛋白含量在接种后逐渐升高,感病甜瓜峰值出现早于抗病甜瓜;3种酶活性在接种后都有不同程度提高,其中抗病甜瓜酶活性增幅高于感病甜瓜。几种酶活性变化可以用于甜瓜蔓枯病抗性鉴定。     

FOC-RA-5诱导后黄瓜叶片内几种酶活性的变化

用致病力为0的FOC-RA-5在黄瓜胚根长约1cm(浸胚根)和子叶展平时(灌根)分别进行2次诱导处理,以无菌水处理为对照,诱导处理后每隔24h取黄瓜叶片作为供试材料,对黄瓜叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、脂氧合酶(LOX)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和硝酸还原酶(NR)活性进行测定,研究了黄瓜枯萎病菌弱毒菌株对黄瓜枯萎病诱导抗性机理。结果表明:叶片内LOX、PAL、PPO、POD活性先升高后降低,APX、NR活性先降低后升高,处理组的酶活性显著高于对照组的酶活性;黄瓜叶片内APX、LOX、PPO、POD和PAL活性与诱导后黄瓜植株的病情指数呈负相关,NR活性与诱导后黄瓜植株病情指数呈正相关。     

疫霉菌侵染后辣椒生理生化指标研究

用辣椒疫病菌生理小种ph3人工接种抗疫病的辣椒品系A5、A3和感病品系EC,并用生理小种ph1接种抗病品系A3,接种后分别测定和分析植株体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)和几丁质酶(Chitinase)活性的变化。结果表明:接种疫霉菌后,抗病品系与感病品系体内4种酶的活性有明显差异,并显示出辣椒品系的抗病性与植株体内的多酚氧化酶活性、苯丙氨酸裂解酶活性、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性呈正相关。     

茎枯病菌毒素对芦笋愈伤组织防御酶活性的影响

以‘阿波罗’‘冠军’和‘NJ987’3个芦笋品种的愈伤组织为试材,研究了茎枯病菌毒素对芦笋愈伤组织防御酶活性的影响及再生苗抗性的诱导效应。结果表明:3个芦笋品种愈伤组织在茎枯病菌毒素胁迫下,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性均较对照显著升高。其中SOD、POD、PPO活性均呈先迅速升高,稍有下降后再次升高的趋势,并分别在第2、8天先后出现2个峰值。CAT活性在第2天达到峰值,之后呈降低趋势。‘冠军’愈伤组织PAL在接种后2d内迅速升高达到峰值,之后一直保持较高水平;‘NJ987’和‘阿波罗’愈伤组织PAL则分别在第2、4天后才开始迅速上升,在第8天时达到峰值。经毒素处理后存活的愈伤组织再生苗对茎枯病菌的抗性增强。     

白粉菌对葡萄叶片生理特性的影响

以欧洲葡萄F1代株系15-1-9为试验材料,在叶片上接种葡萄白粉菌后,分别在0、5、10、15、20、25、30 d取样,测定叶片的过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、可溶性蛋白质含量、丙二醛和木质素含量等生理特性的动态变化,为葡萄白粉病的防治和葡萄抗白粉病育种提供基础参考资料。结果表明:葡萄叶片感染白粉菌后,POD、CAT、PAL的酶活性均高于未接种的健康叶片(CK),呈上升趋势,而PPO活性则呈下降趋势,并且在后期略有回升。接种后叶片的可溶性蛋白质含量降低,丙二醛、木质素的含量有不同程度上升。由此可见,葡萄白粉菌的侵染对叶片内的生理特性的动态变化有较大影响。     

嫁接砧木对西瓜枯萎病的抗病机理研究(摘要)

砧木嫁接能够有效防治西瓜枯萎病,在西瓜生产上具有广泛应用。国内外对砧木品种选育、嫁接技术,嫁接对西瓜的产量、品质的影响,及嫁接介导接穗基因表达变化等方面已开展了大量研究,而对于嫁接砧木自身的抗病机理研究较少。以高抗西瓜枯萎病的葫芦砧木‘超丰抗生王’(CFKSW)和感病西瓜’苏蜜1号’(SM1)为材料,从组织结构变化、生理生化响应、转录组基因表达特征和蛋白质组变化等方面对CFKSW响应西瓜枯萎病菌生理小种1(FON1)侵染的抗性机理进行了研究。CFKSW响应FON1侵染的显微观察结果表明,FON1侵染后,CFKSW根部木质部导管通过快速形成膜状物、侵填体及细胞壁增厚阻塞菌丝入侵。而SM1的防御反应较CFKSW晚,FON1严重侵染时SM1木质部薄壁细胞细胞壁溶解,导管组织脱落导致维管系统空洞,从而使植株呈现萎蔫症状,这一现象在CFKSW根中没有发现。生理生化响应研究结果表明,与SM1相比,接种西瓜枯萎病菌后,CFKSW根中PAL、AAO、PPO、POD活性升高,MDA含量降低,β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性增强。表明嫁接砧木通过增强自身保护酶活性和PR蛋白酶活性从而提高植物抵抗病原菌的能力。同时,FON1侵染后,CFKSW比SM1具有较高的防卫基因表达水平。表现为:CFKSW中CHI、APX和PPO基因的表达随枯萎病菌侵染时间的延长而升高,而PAL呈现先升高后降低的表达趋势,但仍高于本底表达;SM1中仅PPO基因在枯萎病菌侵染后表达上调,而其他基因的表达则是先升高后降低,与嫁接西瓜中的PAL基因表达一致。为了进一步了解CFKSW响应FON1侵染的转录组特征,构建了枯萎病菌侵染后嫁接砧木根的转录组测序文库并进行Illumina RNA-seq双端测序及生物信息学分析。获得了45 642条Unigene,其中,枯萎病菌侵染后有486个基因差异表达,包括276个上调基因和210个下调基因。采用COG、GO功能分类工具将486个差异表达基因分别划分为21个和53个功能类别,共涉及物质及能量代谢、信号传导、转录调控及防卫反应等诸多生理生化过程。进一步比较差异表达基因的表达水平,初步确定有26个基因在FON1侵染后表达量变化显著,且与植物抗病性相关。为深入开展嫁接砧木抗病相关基因功能及调控等研究提供了丰富的数据资源。为了明确这些差异表达基因是否能够在蛋白水平上进行翻译,采用双向电泳(2-DE)技术和质谱(MS)技术对西瓜枯萎病菌侵染后嫁接砧木根的蛋白质组变化进行了研究。Image Master(GE)软件分析后,发现砧木根中有27个蛋白点差异表达,对27个差异蛋白点进行了二级串联质谱鉴定和数据库搜索,根据功能,这些蛋白主要涉及防御应答(22.2%),根形态建成(7.4%)、碳/氮代谢(14.8%)、蛋白水解(7.4%)、能量代谢(11.1%)、信号传导(7.4%)、活性氧代谢(3.7%)、光合(7.4%)、分子伴侣(3.7%)等9大功能类群。对转录水平的差异表达基因和蛋白水平的差异表达蛋白进行比较分析,发现有4个基因可以同时在两个水平上表达,这4个基因分别为:Leucine-rich亮氨酸富集蛋白基因、钙调蛋白基因、Glutathione谷胱甘肽转移酶基因和Gibberellin赤霉素氧化酶基因。从多个角度对嫁接砧木的抗病机理进行了探讨,有助于从已有的抗性种质资源中挖掘抗病基因,进而应用于分子标记辅助育种,对于培育持续抗性砧木新种质具有重要意义。     

大白菜感染甘蓝链格孢后三种抗氧化酶活性的变化

以2个抗病和2个感病的大白菜品种为材料,研究人工接种甘蓝链格孢后叶片过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的动态变化及其与抗病性的关系。结果表明:抗病品种在受到甘蓝链格孢侵染时,叶片内POD活性反应较感病品种快,但POD活性值上升比感病品种小;抗病品种在受到病原菌侵染时,叶片内CAT活性反应快,且一直维持在一个较高的水平,而感病品种在受病菌侵染后叶片内的CAT活性变化缓慢,变化程度低;另外无论是抗病品种还是感病品种的PAL酶活性在接种后的动态变化有相似规律,接种后所有品种的PAL酶活性均比未接种前增加。     

红菜薹栽培与育种研究进展(下)

②雄性不育系的利用田福发等(2004)采用石蜡切片技术,在光学显微镜下系统研究了红菜薹波里马胞质雄性不育系(Polima CMS)、红菜薹萝卜胞质雄性不育系(Ogura CMS)及相应保持系花药发育过程的细胞形态学特征.观察结果表明,红菜薹Polima CMS花药发育受阻于孢原细胞阶段,不形成花粉,属无花粉型,此不育系花药不形成绒毡层和中层;而红菜薹Ogura CMS花药败育发生于小孢子母细胞期或四分体时期,表现为绒毡层细胞异常,挤压四分体,导致四分体和绒毡层同时解体而败育.     

浓香乳菇生物学特性研究

浓香乳菇 Lactarius cumphoratus Fs.香气浓郁,是理想的食品风味剂和天然香料。本文对浓香乳菇的菌丝生长的生理特性作了较为深入的研究,其结果表明:菌丝最适生长温度为23～25℃;最适 pH 值是3～4;以葡萄糖、可溶性淀粉为碳源最适宜,其次是甘露糖、麦茅糖、棉籽糖、甘露醇、蔗糖、果糖、山梨醇、蜜二糖,而对羧甲基纤维素,纤维二糖和木糖利用较差。对十六种氮源的利用,中性大豆蛋白显著优于蛋白胨、(月示)蛋白胨、酪蛋白;较适宜的无机氮源是硝酸钾、硫酸铵,不能利用尿素;添加盐酸硫铵素、复合维生素B、反丁烯二酸、L-酪氨酸、DL-β-苯丙氨酸对菌丝生长有显著的促进作用。浓香乳菇菌丝体能产生香味。     

Aseptic micropropagation of Rhododendron P.J.M. hybrids

Summary

Shoot tips established in vitro better than single nodes. Five-cm shoot tips gave better Stage I results than 2-cm shoot tips. The best microshoot proliferation rates were obtained with isopentenyladenine (2iP) at 5 and 10 mg l^?1; tetrahydropyranyl-benzyladenine was ineffective. Microshoots rooted well, regardless of the level of 2iP in the Stage II medium. Stem-cutting-macropropagated plants generally were more variable in height, had less basal branching and were more erect than plants from microculture.     

嵩明海菜花的核型分析

以我国云南省嵩明海菜花为试材,研究其体细胞染色体数目和核型(2n=2x=22=12m+8sm+2st)。结果表明:嵩明海菜花核型类型为"2B"型,与海菜花属的核型非常相近,这为进一步研究水鳖科海菜花属的系统演化提供了重要的细胞学资料,为海菜花的1个新变种提供细胞学依据。     

北京地区红花玉兰幼苗物候观测研究

通过对北京地区红花玉兰幼苗的物候观测,探究了其物候变化规律和物候特性,分析了红花玉兰幼苗春季物候期对温度和降水量的响应规律,为红花玉兰在北京的引种提供一定的理论依据。     

不同栽培条件对金边虎尾兰生理特性的影响

以金边虎尾兰为试材,研究土栽和水栽条件对其生理特性的影响.结果表明,水栽金边虎尾兰具有较高的观赏价值;2种栽培条件下植株的生理特性有较大的差异.水栽金边虎尾兰的根系活力明显低于土栽金边虎尾兰;水栽金边虎尾兰根系的POD活性和叶片叶绿素含量明显高于土栽金边虎尾兰;水栽金边虎尾兰的可溶性蛋白含量高于土栽金边虎尾兰,但两者间的差异不显著.