魔芋飞粉生物碱的抑菌活性及抑菌机理研究

【目的】探究魔芋飞粉生物碱(Alkaloid from konjac powder,AKP)的抑菌作用及其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理,为新型天然抑菌剂和防腐剂的开发提供理论依据。【方法】采用液体倍比稀释法,确定AKP对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌4株供试菌的最小抑菌质量浓度(Minimum inhibitoryconcentration,MIC),并采用牛津杯法测定AKP对上述4株供试菌的抑菌圈大小;通过测定在AKP作用下,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线、菌体培养液电导率及观察细胞膜完整性、细胞形态等,对AKP的抑菌作用及其机理进行分析。【结果】AKP对4株供试菌均有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强(MIC为10mg/mL),大肠杆菌次之(MIC为20mg/mL)。AKP对供试菌的抑菌圈直径依次为金黄色葡萄球菌大肠杆菌枯草芽孢杆菌鼠伤寒沙门氏菌。菌体生长曲线显示,AKP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有明显的抑制效果。AKP作用后,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜受损,存活率显著降低,菌体培养液电导率显著上升。电镜观察发现,AKP使菌体细胞膜出现破损,部分菌体出现空腔。【结论】AKP具有抑菌作用,其可能通过破坏细菌细胞膜结构而导致内容物外泄,进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡,从而抑制其生长。     

石莼醇提物基于细胞膜损伤的抑菌作用

为探究石莼醇提物基于细胞膜损伤的抑菌作用,检测了其对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑菌性能,测定了不同质量浓度石莼醇提物对供试菌生长、核酸和蛋白质的泄露量、培养液电导率的影响,使用流式细胞仪、扫描电镜、透射电镜观察金黄色葡萄球菌菌体损伤率和超微结构的变化.结果表明:石莼醇提物可显著抑制金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的正常生长,尤以对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,其最低抑制浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)分别为1.56、3.13 mg·mL~(-1);2×MIC的石莼醇提物可增大菌体细胞膜通透性,导致菌体内核酸、蛋白质的大量泄露,培养液的电导率极显著上升(P0.01),菌体细胞膜严重萎缩甚至裂解,菌体损伤率可达96.42%.综上,石莼醇提物通过破坏细胞膜的完整性达到抑菌效果.     

肉桂醛体外对鼠伤寒沙门氏菌的抑菌机制

【目的】探究肉桂醛体外对鼠伤寒沙门氏菌的抑制效果及作用机制。【方法】通过微量倍比稀释法测定肉桂醛对鼠伤寒沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);通过生长曲线探究肉桂醛对沙门氏菌增殖的影响;通过SDS-PAGE观察肉桂醛对菌体蛋白质的影响;通过扫描电镜观察肉桂醛对菌体形态的影响;测定电导率和DNA渗出量,观察肉桂醛对细菌细胞膜和细胞壁通透性的影响。【结果】肉桂醛具有一定的抑菌作用,MIC为128μg/mL,MBC为512μg/mL,MIC及以下浓度的药物对细菌增殖无明显影响,但可抑制菌体蛋白质代谢,破坏菌体正常形态,增加细胞膜和细胞壁通透性。【结论】肉桂醛对沙门氏菌具有一定的抑菌效果,可作用于菌体细胞膜和细胞壁,抑制菌体蛋白质代谢。     

四种常见粽叶提取物的抑菌活性与稳定性

为系统比较荷叶、箬叶、芦苇叶、槲叶这4种常见粽叶的超声提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肠炎沙门氏菌等食物致病菌的抑菌活性与稳定性,测定了抑菌圈直径、最低抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）与细胞膜渗透性,以及热稳定性、pH值稳定性与紫外照射稳定性。结果表明,在4种提取物中,荷叶、芦苇叶提取物的抑菌圈直径较大,对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、肠炎沙门氏菌的抑菌圈直径几乎均明显（P<0.05）大于山梨酸钾、苯甲酸钠。荷叶提取物对所有致病菌的MIC与MBC最小;4种提取物对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的MIC最小,对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的MBC相同;浓度达到0.5倍MIC值及以上的提取液浓度可显著（P<0.05）改变微生物的细胞膜通透性。这4种粽叶提取物可有效抑制致病菌的生长,并具有紫外照射稳定性与热稳定性,在pH值5~7的弱酸性与中性条件下的抑菌作用稳定。     

野菊花提取物抑菌活性

利用琼脂扩散法和琼脂平板稀释法分别测定野菊花提取物对供试菌的抑菌活性和最小抑菌浓度MIC(Minimal inhibitory concentration)。通过测定不同培养时间后培养液的OD560值。活菌数和电导率研究野菊花提取物对金黄色葡萄球菌的生长曲线的影响。结果表明,野菊花提取物原液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌活性分别为(27.02±0.45)mm、(20.56±0.43)mm、(17.82±0.36)mm,MIC分别为原液浓度的12.5%(v/v)、25%(v/v)、50%(v/v)。与对照组相比,野菊花提取物作用于金黄色葡萄球菌后,菌体的生长繁殖受到影响,细胞渗透性改变,而且作用方式与麦迪霉素对金黄色葡萄球菌的作用方式存在差异。     

细叶小檗不同生长部位生物碱抑菌活性研究

  目的  对细叶小檗不同生长部位（根、茎、叶、果）生物碱抑菌活性进行对比评价，旨在筛选细叶小檗抑菌有效部位和主要抑菌成分，为拓宽其全植株应用领域及研发新型天然食品防腐剂的研究提供理论依据。  方法  以抑菌圈直径、最低抑菌质量浓度和最低杀菌质量浓度为考查指标，采用牛津杯抑菌法，研究各生长部位生物碱对4种食源性致病菌（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌）的抑制作用，采用高效液相色谱法测定生物碱的种类和含量。  结果  纯化前后细叶小檗4种不同生长部位生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌这4种常见食源性致病菌均呈现正相关的剂效关系。其中，纯化前细叶小檗实生物碱的抑菌效果最佳，当其生物碱质量浓度为60 g/L时，抑菌圈直径大于20 mm。通过二倍稀释法研究表明:其对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌质量浓度（MIC）均为1.25 g/L，最低杀菌质量浓度（MBC）均为2.50 g/L，对金黄色葡萄球菌的MIC为2.50 g/L，MBC为5.00 g/L。纯化后细叶小檗根生物碱的抑菌效果最佳，当其生物碱质量浓度为40 g/L时，抑菌圈直径大于20 mm。通过二倍稀释法研究表明:其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC均为0.31 g/L，MBC均为0.63 g/L，对枯草芽孢杆菌、沙门氏菌的MIC为0.63 g/L，MBC为1.25 g/L。液相色谱检测结果显示:纯化后生物碱构成包括小檗碱（0.28 ~ 41.69 g）、药根碱（0.32 ~ 12.67 g）、巴马汀（0.25 ~ 17.09 g）。  结论  细叶小檗根、茎和果这3个部位对供试菌株有较强的抑菌作用，叶抑菌效果稍弱。4个不同生长部位基本生物碱单体种类相同，但含量存在显著差异。当生物碱质量浓度为60 g/L时，纯化前不同部位抑菌作用强弱次序为果 > 根 > 茎 > 叶；纯化后不同部位抑菌作用强弱次序为根 > 茎 > 实 > 叶。      

农林废弃物干馏产物木醋液的抑菌活性

通过试验测定了白桦木醋液、杂木木醋液、木屑木醋液及蒸馏木屑木醋液4种木醋液的基本参数,测定了其对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)3种供试细菌的最低抑菌浓度(MIC),并以MIC为基础研究木醋液的抑菌机理。结果表明,4种木醋液对3种供试细菌均有较强的抑制作用,以蒸馏木屑木醋液抑菌效果最佳[对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为(24.13±3.21)、(17.44±2.20)、(17.59±2.79)mm];在最低抑菌浓度的作用下,3种供试细菌生长规律发生改变,细胞膜通透性增大,导致细胞内电解质、蛋白质和糖类物质的渗出,木醋液还抑制了细菌蛋白质的合成,使细胞代谢紊乱,最终使细胞死亡,从而起到抑菌作用。     

荞麦壳水提取物的抑菌活性

研究天然副产物荞麦壳水提取物对常见的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及沙门氏菌的抑制作用。以甜荞麦壳为材料,热水为提取溶剂,浓缩干燥后得到荞麦壳粗提物质,进一步使用大孔树脂纯化后进行最小抑制浓度(MIC)和抑菌圈试验。结果表明:荞麦壳提取物对大肠杆菌的抑菌效果最为明显,对金黄色葡萄球菌无抑菌活性。荞麦壳粗提物的MIC分别为大肠杆菌10 mg/m L,沙门氏菌和枯草芽孢杆菌均为20 mg/m L。大孔树脂吸附纯化后的样品的抑菌圈明显大于粗提物,证明荞麦壳水提取物中抑菌活性的主要物质为黄酮类化合物。     

桃叶提取物的抑菌活性

以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为供试菌,通过滤纸片法比较不同溶剂和干燥方法对桃叶提取物抑菌作用的影响。结果表明,不同干燥方法获得的桃叶提取物对3种供试菌都具有较好的抑菌效果,以先晒后阴法对大肠杆菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径最大可达19.3 mm;供试菌的抑菌效果随着菌悬液浓度的降低逐渐增大,对大肠杆菌最显著;不同溶剂的提取物对3种供试菌都有抑制作用,但抑菌效果不同,3种供试菌最佳的提取溶剂都为60%的乙醇。     

几种香辛料的体外抑菌研究

摘 要【目的】 考察不同香辛料（乌梅、石榴皮、鼠尾草、公丁香）提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、腐败希瓦氏菌、铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、枯草芽孢杆菌的体外抗菌活性影响并探讨香辛料可能存在的协同增效效应。【方法】采用牛津杯平板扩散法,以最小抑菌圈直径确定不同香辛料提取液的最低抑菌浓度（MIC）,同时采用棋盘法测定乌梅、石榴皮的联合抑菌效果。 【结果】 4种香辛料（乌梅、石榴皮、鼠尾草、公丁香）提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为15.62、15.62、125、31.25mg/mL;对腐败希瓦氏菌的MIC为7.81、3.905、250、62.5mg/ml;乌梅与石榴皮复配对大肠杆菌的FIC为1.25;对金黄色葡萄球菌的FIC为2.5;对荧光假单胞菌的FIC为0.25;对腐败希瓦氏菌的FIC为0.75;对枯草芽孢杆菌的FIC为2.5;对铜绿假单胞菌的FIC为1。【结论】乌梅与石榴皮单独使用时表现出较鼠尾草和公丁香更好的抑菌效果;腐败菌对香辛料更为敏感;乌梅与石榴皮复配后对荧光假单胞菌有协同增效作用;对腐败希瓦氏菌及铜绿假单胞菌有相加效应。     

无花果内生真菌的抑菌活性筛选

以金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、大肠杆菌（Escherichia coli）为测试菌种,对无花果根、茎、叶中分离出的87株内生真菌进行活菌筛选,结果表明：无花果87株内生真菌中有36株对1种或多种指示菌有拮抗作用,其中对金黄色葡萄球菌有抑菌作用的有18株,对枯草芽孢杆菌有抑菌作用的有11株,对大肠杆菌有抑菌作用的有7株;活性菌株抗菌活性多以中等活性为主,高活性和低活性的菌株较少。从36株有活性的菌株中选出具有代表性的20株内生真菌的代谢产物进行抗菌活性筛选,结果表明20株菌株的代谢产物至少对1种供试菌株具有抑菌活性。     

黄河三角洲2种菊科植物提取物及其复配的抑菌活性

[目的]明确2种菊科植物的抑菌活性。[方法]以干苦菜、黄花蒿作为供试材料,大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌作为供试细菌,采用滤纸片法通过抑菌圈的大小研究干苦菜、黄花蒿及其复配提取液的抑菌活性。[结果]在供试浓度为0.1 g/m L时,2种植物的提取液及2种植物的复配混合液对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,并且每1种植物提取液对至少1种菌的抑菌率大于70%,其中黄花蒿提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌率大于80%,苦菜提取液对大肠杆菌的抑菌率大于85%,苦菜与黄花蒿提取液的复配混合液对大肠杆菌的抑菌率约为100%。[结论]苦菜、黄花蒿有较好的抑菌活性,可进一步研究开发。     

鼠曲草类黄酮及其锌络合物的抑菌活性

采用滤纸片法和稀释法,测定、比较了鼠曲草类黄酮(GDF)及其锌络合物(GDF-Zn)对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(MIC),并进一步研究抑菌时间对GDF和GDF-Zn抑菌作用的影响.结果表明,GDF和GDF-Zn对上述4种菌均有明显的抑制效果,且GDF-Zn的抑菌效果更好,随着样液与菌悬液作用时间增长至8~10 h,抑菌率均增至最大值,此外,二者对所试菌株中的革兰氏阳性菌的抑菌活性均强于革兰氏阴性菌;GDF和GDF-Zn对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC分别为0.20、0.40、0.20、0.10 mg·m L~(-1)和0.20、0.20、0.20、0.10 mg·m L~(-1).     

西兰花叶中硫代葡萄糖苷酸水解产物的体外和体内抗菌试验

采用琼脂平板打孔法和试管两倍稀释法,检测了西兰花叶中硫苷酸水解产物(ITCS)对伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的敏感性及最小抑菌浓度(MIC);并以金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌建立感染小鼠模型,观察其体内的抗菌效果.结果表明:随着硫苷酸水解产物(ITCS)的稀释抑菌效果逐渐降低、呈现剂量效应;同一浓度点ITCS的抑菌效果,其大小顺序依次是枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>伤寒沙门氏菌>埃希大肠杆菌;伤寒沙门氏菌和大肠杆菌的西兰花叶粉硫苷水解产物(ITCS)最小抑菌浓度(MIC)均为1/40,即为0.234μmol/mL;而对于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌硫苷水解产物(ITCS)最小抑菌浓度(MIC)均为1/80,即为0.117μmol/mL;ITCS对感染金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的小鼠具有一定的保护作用,其中对金黄色葡萄球菌感染小鼠体内的抗菌效果优于伤寒沙门氏菌.试验表明,ITCS具有一定的体外和体内的抗菌作用.     

梅花鹿鹿角盘活性肽的分离鉴定及其抑菌活性分析

【目的】分离和鉴定梅花鹿鹿角盘活性肽,并研究其抑菌活性,为其制备和开发利用提供参考。【方法】利用酸提醇沉法从梅花鹿鹿角盘粉末中提取总蛋白,过0.45 μm滤器后,用凝胶过滤层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等方法,从鹿角盘总蛋白中分离、纯化天然活性肽,利用液相色谱 质谱联用(LC-MS/MS)方法对其进行鉴定,通过二倍稀释法分析天然活性肽对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的最小抑菌浓度(minimal inhibit concentration,MIC);在此基础上,以不添加活性肽的菌悬液为对照,用不同质量浓度的天然活性肽处理大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,检测菌液的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性和电导率,分析天然活性肽对病原菌菌体生长曲线以及细胞壁和细胞膜的影响。【结果】从梅花鹿鹿角盘总蛋白中成功分离出纯度为93.70%的天然活性肽,其相对分子质量为4 543.14,序列与抗菌肽（UNIPORT:A8QJ91）相似,并将其命名为梅花鹿鹿角盘活性肽(sika antler plate bioactive peptide,SAPBP)。SAPBP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为0.5和1 mg/mL,对以上2种病原菌的生长曲线有明显影响。与对照相比,不同质量浓度SAPBP作用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌体后,碱性磷酸酶活性和菌液电导率均明显上升,可知SAPBP对病原菌菌体细胞壁和细胞膜造成不同程度的损伤,其中2 MIC SAPBP对病原菌的破坏作用最为明显。【结论】从梅花鹿鹿角盘总蛋白中分离纯化出了天然活性肽,该活性肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。     

三种植物精油抑菌效果的研究

[目的]研究不同浓度的新疆薰衣草、玫瑰和葡萄籽精油对7种供试菌种的抑菌效果.[方法]采用滤纸片扩散法.[结果]不同浓度的薰衣草、玫瑰和葡萄籽精油对7种供试菌种具有一定的抑菌活性.3;的薰衣草和玫瑰精油对供试菌抑菌效果最好,其中3;薰衣草精油对7种供试菌种抑菌5种菌的活性强度为:金黄色葡萄球菌＞枯草芽孢杆菌＞白色葡萄球菌＞植物乳杆菌＞大肠杆菌＞粪肠球菌＞戊糖片球菌,3;玫瑰精油为:粪肠球菌＞戊糖片球菌>金黄色葡萄球菌＞白色葡萄球菌＞植物乳杆菌＞大肠杆菌＞枯草芽孢杆菌.葡萄籽精油的抑菌效果相对其它两种精油较弱.[结论]薰衣草和玫瑰精油对上述细菌具有较强的抑菌效果,可作为天然抑菌剂.     

茶皂素对沙门氏菌的抑菌机理及对鸡胸肉的保鲜效果

研究了茶皂素(Tea Saponin)对沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、李斯特菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等的抑菌效果。以抑菌效果最好的沙门氏菌为供试菌,通过对沙门氏菌的生长、形态、胞外蛋白、碱性磷酸酶及K~+泄漏等方面研究茶皂素的抑菌机理,并以沙门氏菌菌落数、pH、持水率为指标评价茶皂素在鸡胸肉中的保鲜效果。结果表明,茶皂素主要通过破坏菌体的正常形态,改变细胞膜和细胞壁的透性,破坏其阻隔性,导致碱性磷酸酶和细胞内容物如K~+、蛋白质外泄来实现其抑菌功能;茶皂素可以抑制鸡胸肉中沙门氏菌的生长繁殖,减缓pH上升的速度,延缓持水率下降的速率,说明茶皂素可以作为鸡胸肉保鲜的天然抑菌剂。     

不同中草药抑菌活性比较研究

采用琼脂板扩散法对4种中草药进行金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的敏感性试验。结果表明：鱼腥草、野菊花、五倍子和板蓝根对两种试验菌都有明显的抑制作用,其中五倍子的抑菌作用最好,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC值均为3.125%,其原液对两种试验菌的抑菌圈直径分别达到15.5mm和16.0mm。而板蓝根的抑菌作用相对较弱,其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC值分别为12.5%和50%,抑菌圈直径分别为13.0mm和13.5mm。     

刺五加内生细菌的分离及抑菌研究

从刺五加中分离出内生细菌227株,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌,分别对其液体发酵液进行了抗菌活性的研究。结果表明:刺五加内生细菌对3种供试菌有一定的抑菌活性。     

牛心朴子体外抑菌作用的研究

[目的]研究牛心朴子的抑菌作用,为开发利用牛心朴子资源提供理论依据。[方法]将牛心朴子全草烘干粉碎后,用乙醇溶剂浸提。以金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌为供试菌,研究其抑菌活性,并测定其相应最小抑菌浓度（Mc）。[结果]牛心朴子生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌具有较好的抑制作用,其MIC分别为12．500、1．563、3．125及L6．250mg／ml;但对猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌无抑制作用。[结论]牛心朴子生物碱提取物对动物致病菌有一定的抑菌效果。