‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

豫杂一号泡桐花药愈伤组织的诱导

以豫杂一号泡桐花药为材料,开展了其花药愈伤组织诱导的研究.结果表明,外植体的消毒方式以体积分数70％乙醇处理30 s后再用体积分数0.1％ HgCl2消毒60 s最为理想;4℃预处理有利于花药愈伤组织的诱导,以低温处理7d的花药愈伤组织诱导率为最高;30g·L-1蔗糖质量浓度诱导花药愈伤组织的效果较好.诱导率达58.76％;诱导愈伤组织以MS培养基附加30 g·L-1蔗糖+2 mg·L-1 NAA+3 mg·L-16-BA为最佳.     

白芦笋花药愈伤组织诱导及绿芽分化

为建立芦笋单倍体育种技术体系以解决国内芦笋新品种资源贫乏问题,该文以白芦笋花药为外植体进行了愈伤组织的诱导及绿芽分化研究。试验结果表明,芦笋花药经过4d的冷藏(4℃)处理后,接种于含有NAA2.0mg/L、6-BA 1.0mg/L及6%蔗糖的1/2MS培养基上,可产生愈伤组织;每年的4月份接种花药的愈伤组织诱导率最高,8月份次之,11月份最低。品种间、同一品种不同单株间花药的愈伤组织诱导率不同,以‘UC155’品种(18.9%)最高,显著高于其他三个品种‘UC142’(11.6%)、‘Gijnlim’(10.3%)、‘Thielim’(5.8%),所有试验株系中以‘UC155’-8的愈伤组织诱导率最高,达83.5%;每日补充光照强度为1000lx的光照,比全暗培养更有利于芦笋花药愈伤组织的形成;花药接种前进行离心处理(4000r/min)30min,不能提高愈伤组织诱导率;愈伤组织转瓶培养于NAA0.5mg/L、6-BA1.0mg/L及3%蔗糖的MS培养基上,能分化出无根绿芽;不同品种间绿芽分化率有差别,以‘Gijnlim’品种最高(67.2%),‘UC142’品种最低(14.1%);未分化绿芽的愈伤组织再转入于不含植物生长调节剂的MS培养基上培养,部分愈伤组织能分化出绿芽。     

怀地黄花药培养与再生植株体系的建立

以怀地黄花药为外植体,通过器官发生途径建立怀地黄再生植株体系.结果表明,在4℃条件下预处理3d有利于愈伤组织的诱导;愈伤组织诱导的最佳培养基为2.0 mg·L-1MS +2,4 -D +0.5 mg·L-16 -BA +2.0 mg·L-1KT;愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为10 mg·L-1MS +IAA +10 ...     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

表-油菜素内酯对小麦花药培养效率的影响

花药接种前麦穗置－２０℃、１０ｍｉｎ预处理有利于出愈和绿苗分化。花药接种后３７℃、８ｈ培养使出愈率由８．２％（对照）提高到２９．０％。在诱导培养基上附加２ｍｇ／Ｌ的水杨酸（ＳＡ）对愈伤组织分化有促进作用,而不影响出愈和绿苗分化。诱导培养基上附加０．０２ｍｇ／Ｌ表－油菜素内酯（ｅｐｉ－ＢＲ）能使绿苗分化率由２５．７％（对照）提高到４７．２％,白苗分化率由３１．４％降低到２４．３％,当ｅｐｉ－ＢＲ浓度     

百合无病毒苗快速繁殖技术

以东方百合珠芽作为外植体进行脱毒苗的组织培养快速繁殖技术的研究,结果表明诱导愈伤组织的最适培养基为MS附加BA0.5mg·L-1和NAA0.1mg·L-1,培养7d后愈伤组织就启动,愈伤组织的诱导率达到90.5%;最适宜分化的培养基为MS BA1.5mg·L-1 KT0.1mg·L-1 NAA0.1mg·L-1,培养8d即开始分化出丛状芽,分化率可达到93.33%;最适宜芽增殖培养基为MS附加BA0.5mg·L-1和NAA0.05mg·L-1,繁殖系数达到5.4;无根苗转入1/2MS IAA1.0mg·L-1,100%生根;经检测,0.3～0.8mm的外植体,均能达到脱毒的要求。     

低温处理促使五味子愈伤组织再分化

以五味子的嫩茎段基部诱导产生的愈伤组织为试材,接种于1/4MS的培养基中进行低温处理,并应用均匀设计筛选出最适宜的处理温度和时间,再将处理后的愈伤组织转接到培养基MS+6-BA1.50mg·L-1+IBA0.02mg·L-1中进行愈伤组织再分化培养。结果表明:愈伤组织经-4℃的低温处理53d后,再经50d的培养分化出大量的再生芽苗。     

冬小麦‘东农冬麦1号’成熟胚组织培养及再生体系建立

‘东农冬麦1号’是目前黑龙江省高寒地区首个可越冬冬小麦品种,建立高效稳定组织培养再生体系,对品种改良和功能基因组学研究具有重要意义。研究以‘东农冬麦1号’成熟胚为外植体,探讨培养基类型、接种方式、添加物组合浓度、2,4-D、6-BA和KT浓度等因素对愈伤组织诱导、分化及植株再生影响。结果表明,不同培养基类型对冬小麦成熟胚诱导率影响无显著差异。接种方式对成熟胚愈伤组织分化率影响极显著,胚切伤略带胚乳法成熟胚刮碎法完整胚法。诱导培养基附加适量添加物有利于愈伤组织分化,正交试验获得添加物最佳配比为100 mg·L-1谷氨酰胺+0.1 mg·L-1NAA+0.3 g·L-1肌醇+1 g·L-1脯氨酸+0.5 mg·L-1ABA。2,4-D浓度显著影响成熟胚愈伤组织分化率和成苗率,随2,4-D浓度升高,诱导率呈先升高后降低趋势,而分化率和成苗率均下降。分化培养基中6-BA对成苗率影响差异极显著,4 mg·L-1时达到最大;KT对愈伤组织分化要高于6-BA,但对成苗率影响明显低于6-BA。该体系所获冬小麦愈伤组织分化率和成苗率分别可达93.33%和66.64%。     

低温预处理对籼稻花粉植株诱导的效应

4个籼稻杂交组合,取花粉发育阶段为单核中晚期的穗子,置于9—11℃低温下预处理14天而后接种于不同培养基上。在接种的25,840枚花药中6,203枚花药产生愈伤组织,诱导率平均为24%(对照为3.4%)。随机取1,771枚花药的愈伤组织转入分化培养基进行分化培养,583枚花药的愈伤组织分化绿苗。分化频率平均为32.9%(对照为11%)。绿苗总诱导率为7.9%。观察汕优2号稻穗置于9—11℃低温预处理2—33天后进行花药培养。愈伤组织诱导率及绿苗分化率均以冷处理20天为最高。如温度降低则处理时间相应缩短。另外不同材料对冷处理的最适时间温度也稍有不同。正交试验结果表明,冷处理对花药培养效率的影响远比培养基的效率大。组织学观察表明,低温预处理能提高花药离体培养成活率,促使更多花粉细胞分裂发育成多细胞团。