小果型番茄花药愈伤组织诱导因素的研究

以5个小果型番茄F1代为材料,研究了不同基因型、低温预处理时间、蔗糖浓度、激素配比以及培养条件对花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:5个基因型的花药愈伤诱导能力有明显的差异,以XF98-7×奇斯曼尼的出愈率最高,达到33.46%;4 ℃低温预处理2 d对愈伤组织的诱导有显著的促进作用;最适愈伤诱导培养基是MS + 0.5 mg·L-1 NAA +1 mg·L-1 KT+40 g·L-1蔗糖;在黑暗条件下培养有利于愈伤组织的诱导.     

福建野生葡萄松散型愈伤组织的诱导及其继代保持

以福建野生葡萄(Vitis amurensis Rupr.)带节茎段为外植体,建立无菌株系,并以此无菌株系小苗的茎段或叶片为外植体,进行愈伤组织诱导、继代增殖和长期保持等方面的研究.结果表明,光照条件下,愈伤组织诱导以MS+BA 2.0 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1培养基最佳,诱导率可达100％;愈伤组织的继代增殖以MS+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖30g· L-1培养基最佳,可以获得生长状态良好的松散型愈伤组织;采用MS+2,4-D 1.0 mg· L-1+蔗糖30 g· L-1培养基继代培养几代后转到MS+2,4-D 1.0 mg· L-1+KT 0.5 mg· L-1+AgNO35.0 mg· L-1+蔗糖30 g·L-1培养基上培养1代,如此交替进行,同时在光照条件下,可长期继代保持野生葡萄愈伤组织,并可保持其旺盛的生长能力.     

牡丹花药诱导愈伤组织

以牡丹品种‘凤丹’的带花丝的花药为外植体,诱导其产生愈伤组织,利用不同发育时期的花药诱导愈伤组织,确定了最佳的花药发育时期为单核中期,利用单核中期的花药,在确定合适激素配比的基础上,从不同的蔗糖质量浓度、4℃条件下不同处理时间等方面对花药愈伤组织诱导的影响进行了系统研究。结果表明:花药诱导愈伤组织合适的激素组合为MS+2,4-D2.0 mg.L-1+6-BA1.5 mg.L-1+NAA1.0 mg.L-1;花药在蔗糖质量浓度为6%、4℃条件下处理8 d时,愈伤组织的诱导率最高可达50.8%,优化了牡丹花药愈伤组织培养组合。     

‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

枇杷花药培养诱导愈伤组织的研究

为了寻找枇杷花药愈伤组织诱导的最佳条件及配方。以枇杷花药为试验材料,采用完全组合设计研究了温度、蔗糖浓度、激素对花药愈伤组织诱导的影响。低温处理对愈伤组织的形成没有多大影响,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率低于对照;30 g/L蔗糖诱导花药愈伤组织的效果较好,诱导率为62.5%;在附加1 mg/L 2,4-D和2 mg/L 6-BA的MS培养基上,诱导率最高,为90.00%;MS+0.25mg/L6-BA+1 mg/LNAA最有利于愈伤组织的增殖。高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成。一定浓度的2,4-D和6-BA对枇杷花药愈伤组织的诱导有较大的影响,且2,4-D起着主导作用。     

茉莉花愈伤组织的诱导及其继代保持

以福州茉莉花茎段或花器官组织为外植体,进行愈伤组织诱导、继代增殖和长期保持等方面的研究。结果表明,在光照条件为1 500~2 000 lx下,能够诱导获得6种类型的愈伤组织,愈伤组织诱导适宜培养基为MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1,诱导率可达100%;同时在MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1培养基中,能长期继代保持茉莉花愈伤组织,并维持旺盛的生长能力。     

西洋参花药愈伤组织诱导培养条件的优化

为了提高西洋参花药培养的愈伤组织诱导率,试验以吉林省集安西洋参花蕾为材料,初步研究不同浓度2,4-D、6-BA和蔗糖对花药愈伤组织诱导的影响,优化西洋参花药愈伤组织诱导培养条件。结果表明:在MS基本培养基附加2,4-D 2mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖60g/L+琼脂5.5g/L+水解乳蛋白0.5g/L的条件下,西洋参花药愈伤组织的诱导率可达37.53%。2,4-D对西洋参花药愈伤组织的诱导必不可少;2,4-D和6-BA的合理搭配能提高西洋参花药愈伤组织的诱导率;60g/L的蔗糖能有效促进西洋参花药愈伤组织的诱导。     

芦笋高效花药培养技术体系的建立

以芦笋品种"Gijnlim"为试验材料,研究花药预处理、培养基附加物、培养方式等对愈伤组织类型、诱导率和绿苗分化率的影响,探讨愈伤组织类型与染色体倍性比例间的关系。结果表明,芦笋花药在4℃低温下冷藏5～7d后接种于含有NAA2.0mg·L-1、6-BA1.0mg·L-1及6%蔗糖的1/2MS培养基上对愈伤组织的诱导最为有利;接种后进行32℃的高温处理5d,有利于提高愈伤组织的诱导率;培养基中加入水解酪蛋白(CH)300mg·L-1有利于提高愈伤组织的诱导率;愈伤组织的类型和日龄影响绿苗的分化率,致密型愈伤组织的分化率高于松散型愈伤组织,30～40d日龄的愈伤组织分化率最高。镜检结果表明,致密型愈伤组织分化的单倍体多于松散型。     

影响刺梨花药愈伤组织诱导因素的研究

以贵农1号、2号、5号、6号、7号刺梨为材料,研究不同基因型、不同取材时间、小孢子发育时期、基本培养基、糖源、生长调节物质、培养条件等刺梨花药愈伤组织诱导的影响.结果表明;以刺梨盛花期(5月份)且小孢子发育为单核中后期的贵农1号花药为试材;Ms为基本培养基;3%的蔗糖为糖源;1.0mg·L-1 6-BA +2.0mg·L-1 NAA +0.5mg·L-1 2、4-D +1.0mg·L-1 KT为激素组合,在黑暗条件下培养最有利于刺梨花药愈伤组织的诱导.     

鱼腥草愈伤组织的诱导技术

以鱼腥草茎秆和叶片为外植体,进行外植体消毒和愈伤组织诱导条件的研究。结果表明:外植体在0.1%升汞中浸泡10 min可达到良好的消毒效果,污染率低于2%;愈伤诱导所用的茎秆和叶片两种器官中,适宜的外植体是茎秆,其诱导率可达31.25%;愈伤诱导时,24 h暗培养比12 h黑暗与12 h光照交替培养诱导率高;在含2,4-D或6-BA的3种培养基中,仅在MS+2.0 mg.L-16-BA+6.0 g.L-1琼脂+30 g.L-1蔗糖的诱导培养基中诱导出了愈伤组织,诱导率最高为28.57%。     

不同因素对茄子花药愈伤组织诱导的影响

为了提高花药愈伤组织的诱导率,进一步优化培养条件,以西安绿茄为材料,研究了不同激素、碳源、氨基酸及AgNO3对花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:1) 单一激素愈伤组织诱导率几乎均为零,生长素和细胞分裂素组合的总愈伤率(愈伤率1)均大于18.0%,花药中部愈伤率(愈伤率2)均大于4.00%;其中,以0.2mg/L 2,4-D+1.0mg/L NAA+0.25mg/L KT组合表现最好.2) 3种碳源中,2%蔗糖愈伤组织诱导率1为57.14%,表现最好;2%的蔗糖和6.5%的葡萄糖出愈率2均大于12%,无明显差异.3) 加入氨基酸及AgNO3的出愈率1和出愈率2均高于不加任何添加物的处理;100mg/L丝氨酸对于诱导花药中部出愈率效果最好.说明,单一激素愈伤组织诱导效果较差,生长素和细胞分裂素组合诱导效果较好,西安绿茄最适愈伤诱导培养基为MS+0.2mg/L 2,4-D+1.0mg/L NAA+0.25mg/L KT+2%蔗糖+100mg/L丝氨酸.     

蟆叶秋海棠离体培养的研究

以蟆叶秋海棠(Begonia rex)的幼嫩叶片为外植体,采用L25(55)正交设计,研究了不同生长调节剂和培养基对愈伤组织诱导的影响.结果表明,培养基的类型对愈伤组织诱导的影响极大,生长调节荆对愈伤组织诱导有一定的影响,愈伤组织在不添加任何生长调节剂的培养基上即可进行分化.蟆叶秋海棠最佳愈伤组织诱导培养基组合为1/2 MS+0.5～1.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-16-BA+0.5～2.0 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,愈伤组织诱导率可高达100%.生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,生根率高达100%.     

沙芥愈伤组织培养的初步研究

采用沙芥种子作为无菌外植体来源时,以0.1升汞消毒10～12min的效果较好.下胚轴和子叶均在MS+2,4-D 0.01 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+3.0蔗糖+0.5琼脂(pH5.8)中可诱导出愈伤组织.愈伤组织的最佳继代培养基为MS+NAA 2mg·L-1+KT0.5 mg·L-1+3.0蔗糖+0.5琼脂(pH5.8).     

725杨组培繁殖技术研究

以美洲黑杨725杨树(Populus deltoides cl.‘725’)叶片为材料,对其再生体系的建立及其分化和生根苗对潮霉素B的浓度筛选进行了研究。结果表明,叶片的最佳消毒体系为75%的酒精消毒时间8 s,0.1%的升汞消毒3 min,最佳诱导愈伤的培养基是MS+6-BA 0.2 mg·L-1+2,4-D 1.5 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳诱导分化培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;适宜的继代增殖培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg·L-1+IBA 0.7 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂6 g·L-1;对725杨叶片分化和不定芽生根进行了潮霉素B的敏感性试验,确定叶片分化的临界浓度为2.5 mg·L-1,生根的临界浓度为1.5 mg·L-1。     

裂叶马兰无性系建立的研究

为保护野生资源、满足栽培对种苗的需求,以裂叶马兰的嫩茎为外植体,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根、试管苗生根继代增殖的研究,以及试管苗移栽和定植的研究,建立起裂叶马兰的无性系。结果表明:MS+蔗糖35 g·L-1+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D2.5 mg·L-1是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的适宜培养基;MS+蔗糖30 g·L-1+AgN031.0 mg·L-1+GA31.0mg·L-1+ZT1.6 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/2MS+蔗糖20 g·L-1+NAA 0.6 mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为95.9%;定植成活率98.0%。定植成活的试管苗保持了野生裂叶马兰的所有植物学性状。     

三尖杉愈伤组织诱导及其分化的初步研究

以三尖杉茎尖、嫩叶为外植体,应用正交设计法对愈伤组织诱导及其继代分化进行了研究。结果表明,不同外植体灭菌的难易程度相差较大,叶片较茎尖容易;叶片用体积分数为75%的酒精浸泡30-45 s,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果最好;茎尖则用体积分数为75%酒精浸泡1 min,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果较好;诱导叶片、茎尖愈伤组织的最佳培养基配方为MS+NAA 1.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;愈伤组织在继代培养基上均能进行分化,其中结构紧密的茎尖愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1培养基上继代培养能诱导分化形成不定芽。     

不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响

以观赏茄‘金蛋'为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT0.25 mg/L+LH 1000 mg/L+Gln 500mg/L+蔗糖50g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用.     

秦党茎段的组织培养研究

试验研究了利用秦党茎段进行组织培养的方法,结果表明:在光照强度1600 1x,温度25℃的条件下,秦党幼茎诱导愈伤组织及芽较快的初代培养基是MS+2,4-D 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1及MS+BA 2.0 mg··L-1+IAA 1.0 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1;继代培养基为MS+BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1直接分化形成幼苗,或MS+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1诱导形成无根苗再进行生根培养.     

怀地黄花药培养与再生植株体系的建立

以怀地黄花药为外植体,通过器官发生途径建立怀地黄再生植株体系.结果表明,在4℃条件下预处理3d有利于愈伤组织的诱导;愈伤组织诱导的最佳培养基为2.0 mg·L-1MS +2,4 -D +0.5 mg·L-16 -BA +2.0 mg·L-1KT;愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为10 mg·L-1MS +IAA +10 ...     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。