红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

黑果枸杞组织培养研究

以黑果枸杞成熟种子为外植体,萌发无菌苗后诱导愈伤组织及不定芽分化获得再生植株,建立黑果枸杞组织培养体系。结果表明,MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长,诱导种子萌发成无菌苗的培养基为MS+6-BA1. 0 mg/L+GA_3 0. 5 mg/L;无菌苗脱分化形成愈伤组织适宜的培养基为MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 1 mg/L,诱导率80%,平均丛生芽数25株;诱导愈伤组织分化和生长适宜的培养基为MS+6-BA 0. 4 mg/L+NAA 0. 1 mg/L;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA 0. 3 mg/L+NAA 0. 2 mg/L.     

柳叶蜡梅叶片愈伤组织诱导实验研究

以不同方式处理柳叶蜡梅种子，观察其在MS培养基上萌发和生长的状况。结果显示：98％浓硫酸处理的种子发芽率达32％，其它处理萌发率低。以种子无菌苗叶为外植体，接种于2，4-D、NAA、6-BA组合不同浓度生长调节剂的MS固体培养基上，进行愈伤组织诱导实验；外植体愈伤组织诱导培养基MS＋NAA0．3mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1的诱导率为80％，生长稳定可分化出苗。     

芽变毛白杨组织培养初步研究

以芽变毛白杨幼嫩枝条为外植体进行愈伤组织和茎段组织培养试验研究。结果表明:芽变毛白杨诱导愈伤组织培养基为:MS 6-BA 2.0~4.0 mg/L 2,4-D 1.5~2.0 mg/L NAA 0.25 mg/L KT 2.0~4.0 mg/L 3%蔗糖,愈伤组织分化芽培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 2.0 mg/L 3%蔗糖时,培养效果好。茎段培养时,适宜无根苗生长的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L 3%蔗糖,生根诱导适宜的培养基为1/2MS IBA 0.5~1.0 mg/L 1.5%蔗糖。     

大哥大红掌实用化生产的组织培养研究

以叶片、叶柄或叶茎为外植体,在培养基MS+6-BA 1～2mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 0.1～0.2mg/L上均可诱导愈伤组织的产生,其中以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D 0.1mg/L效果最好,诱导率可达87%以上;其最佳的分化培养基MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L上,分化率可以达到90%以上,大哥大红掌最佳的增殖培养MS+6-BA 2mg/L+NAA0.2mg/L,培养30d芽的增殖系数达到3.45,降低6-BA浓度或提高NAA浓度有利于培养壮苗;1/2MS+NAA 0.1mg/L+1g/L活性炭的培养基诱导植株生根效果最好,生根率86%,平均每株苗生根3条;生根试管苗移栽于泥炭土:珍珠岩=5∶1的基质,成活率约86%。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

木瓜海棠组织培养技术的研究

以木瓜海棠当年生嫩枝上带有腋芽的茎段为外植体，运用对比试验和正交设计等方法，对木瓜海棠试管苗的快繁、生根、叶片和茎段愈伤组织的诱导进行研究。结果表明：快繁最适培养基为：MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋2，4-D0．2mg／L，增殖系数可达8．7；采用一步生根法最佳培养基为：1／2MS＋IBA1mg／L＋NAA0．2mg／L；在MS＋6-BA4．0mg／L＋2，4-D0.5mg/L的培养基上愈伤组织生长的较快，结构正常。     

白花柽柳的组培与快繁技术

以白花柽柳的茎段为外植体,进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明:以MS培养基添加1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D诱导愈伤组织的效果最好,出愈率达98.4%;以MS培养基添加1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L IBA诱导愈伤组织产生芽的效果最好,出芽率达45.0%。以MS培养基添加1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA直接诱导产生丛生芽的效果最好,出芽率达98.68%。以1/4 MS培养基诱导生根的效果最好,生根率达93%;以V沙子∶V草炭∶V珍珠岩=1∶1∶1的混合基质有利于试管苗的移栽,成活率达80%。     

杂交鹅掌楸离体培养中器官发生的研究

以杂交鹅掌楸的叶片、叶柄、无菌苗的茎段及其芽基部切段为外植体,进行愈伤组织途径的器官发生及不定芽途径的直接器官发生培养。结果表明,多种外植体在诱导培养基上均能脱分化产生愈伤组织,其中无菌苗芽基部具有最高的愈伤组织诱导率。愈伤组织在MS 6-BA 2.0 mg.L-1 NAA 0.5 mg.L-1和MS 6-BA 4.0 mg.L-1 NAA 0.5 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽。部分外植体在MS 6-BA 4.0 mg.L-1 NAA 0.5 mg.L-1的分化培养基上直接分化产生不定芽。器官发生途径再生体系的建立为抗逆基因工程等工作奠定了基础。     

尾叶桉的组织培养及植株再生

研究了以尾叶桉(Eucalyptusurophylla)优树(U6无性系)无菌苗的叶子和茎段作为外植体诱导愈伤组织、丛生芽发生以及植株再生的过程。通过多种生长调节剂不同浓度组合的对比试验,确定了U6快繁体系的最适宜培养条件:(1)愈伤组织诱导培养基:MS 1-2mg/L2,4-D;(2)芽增殖培养基:MS 0.5mg/L6-BA;(3)生根培养基:1/2MS 2.0mg/LNAA。     

非洲紫罗兰组培技术研究

研究以非洲紫罗兰幼嫩叶片为外殖体,MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA、NAA、GA等外源激素对其愈伤形成、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,试验表明:采用MS+6-BA0.1～2.0mg·L-1+NAA0.01～0.5mg·L-1培养基,愈伤诱导率在20%以上;采用MS+6-BA0.1～1.0mg·L-1+NAA0.01～0.5mg·L-1+GA0.1～1.0mg·L-1培养基,对芽的生长及增殖效果好,并指出GA具有提高不定芽长势和成苗率的作用;采用1/2MS+NAA0.1～0.5mg·L-1或IBA0.1mg·L-1或IAA0.1～0.5mg·L-1,20d内生根率可达97%以上。在腐叶土∶珍珠岩=5∶3的基质中驯苗,成活率达90%以上。     

邓恩桉种子组织培养的研究

以邓恩桉种子为外植体,探讨用最少种子快速繁殖最多幼苗的方法,结果表明:MS培养基是较适合邓恩桉种子萌芽和生长的基本培养基;诱导种子直接脱分化成愈伤组织的较佳培养基配方为MS KT1.0 mg/L 2,4-D2.0 mg/L 半胱氨酸30 mg/L;以邓恩桉实生苗的芽来繁芽的较理想培养基配方为H BA2.0 mg/L IAA0.2 mg/L;邓恩桉实生苗的根诱导愈伤组织的较佳培养基配方为MS 6-BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴分化芽较佳培养基配方为B5 6-BA2.0 mg/L 2,4-D0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴脱分化为胚性愈伤组织的较佳培养基配方为B5 Ad2.0 mg/L IAA0.2 mg/L.     

不同激素配比对油茶花药愈伤组织形成的影响

为了加快油茶品种改良,提高油茶花药愈伤组织的诱导效率,在低温预处理（4℃）的基础上,以MS为基本培养基,研究了不同浓度的2,4-D、NAA及2,4-D、6-BA配比对普通油茶花药愈伤组织诱导效率的影响。结果表明：2,4-D、NAA诱导普通油茶愈伤组织的较优组合为2,4-D0．6mg／L,NAA0．05或0．5mg／L,愈伤组织诱导率分别达到35．56％和24．65％,在油茶花药愈伤组织诱导过程中。2,4-D有利于愈伤组织的形成,是最重要的因素;2,4-D、6-BA的混合使用更有利于愈伤组织的发生,并且两种激素适当的配比是提高愈伤组织诱导率的重要因素,0．5mg／L的2,4-D与0．2mg／L6-BA组合是实验得出的较优水平,愈伤组织诱导率达到42．74％。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

北乌头组培快繁技术体系初步研究

本文对北乌头组培快繁技术体系进行了初步研究,同时比较了不同外源激素组合对北乌头外植体诱导的影响,其结果表明:北乌头愈伤组织诱导最佳外植体为叶片,丛生芽诱导最佳外植体为带芽茎段及茎尖,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D,丛生芽诱导最适合培养基为MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/LNAA,继代培养以WPM+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA效果最为显著,增殖率在4倍以上;北乌头生根最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率可到90%。     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

洋丁香组织培养的研究

以植物园洋丁香茎段为试验材料,利用组织培养技术,筛选出诱导分化、继代增殖和生根的最佳培养基。结果表明:芽继代增殖培养基为:1/3MS+2,4D0.05(mg/L)+IBA2.0(mg/L)+NAA0.2(mg/L),最佳壮苗培养基为1/3MS+6-BA0.2(mg/L)+IBA1.0(mg/L)。最适合的生根培养基为MS+NAA0.2(mg/L)+IBA2.0(mg/L)+GA0.5(mg/L)。     

欧洲水仙鳞片组织培养与快速繁殖

以欧洲水仙‘Dutch Master’为研究材料,通过对鳞片取材部位、培养光照、激素配比以及组培苗移栽基质的研究发现,欧洲水仙初代培养的较适外植体为内层鳞片下部,合适光照度为1 000 lx。愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L,小鳞茎的诱导分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30 g/L,小鳞茎继代增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L,生根培养基为1/2MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L。炼苗移栽基质配比为V(蛭石)∶V(泥炭土)∶V(园土)=1∶1∶2。