甘肃棘豆中降解苦马豆素内生细菌的筛选与鉴定

为研究甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis Bunge)中降解疯草毒素——苦马豆素的内生细菌,采用选择性富集培养的方法,以苦马豆素作为唯一碳源,从甘肃棘豆内生细菌中筛选到1株苦马豆素降解菌,命名为Ab.在摇床转速为150 r·min-1、28℃条件下培养30 h,菌株Ab对质量浓度为100 mg·L-1苦马豆素的降解率为11.577 1%;延长培养时间并不能提高其降解苦马豆素的能力,但可耐受高质量浓度(1 g·L-1)的苦马豆素.通过形态学、生理生化试验和16S rDNA序列比对分析对Ab进行鉴定,结果表明,菌株Ab为革兰阴性短小杆菌,在LB平板上菌落呈圆形,中心凸起,边缘整齐,乳白色,表面光滑,属于短波单胞杆菌属(Brevundi monas),与缺陷短波单胞菌(Brevundi monas diminuta)同源性为100%.说明甘肃棘豆中存在降解苦马豆素的内生细菌Brevundi monas diminutaAb;降解苦马豆素的内生细菌可能与产生苦马豆素的内生真菌共同维持疯草中苦马豆素的动态平衡.     

棘豆属植物及其有毒成分的中毒病理学研究

对棘豆属植物中的生物碱提取、分离和鉴定后，证实生物碱中含有苦马豆素。通过对两组小白鼠分别饲添加棘豆属植物粉和生物碱的中毒实验，发现两组小白鼠都发生中毒，其临床症状，剖检变化，病理组织变化基本相同，表明生物碱是棘豆属植物中主要毒性成分，实验除采用常规Ｈ．Ｅ染色外，还应用组织化学和透射电镜等检测手段，较细致地观察了小白鼠束棘豆中毒后的病理变化。     

甘肃棘豆中产苦马豆素内生真菌的分离与鉴定

【目的】确定甘肃棘豆中是否存在产生苦马豆素(SW)的内生真菌。【方法】对甘肃棘豆的内生真菌进行分离,应用薄层色谱法和气相色谱-甲基化--αD-甘露糖苷内标法分别对菌丝中SW进行检测,筛选可生成SW的疯草内生真菌;通过形态学观察,应用聚合酶链反应对5.8S rDNA-ITS序列进行扩增,并对扩增序列进行分析,构建系统发育树,对其进行种属分类。【结果】筛选出1种可以产生SW的甘肃棘豆内生真菌FEL3,气相色谱内标法测得其菌丝中SW含量为400.52μg/g。根据形态学、5.8S rDNA-ITS序列分析结果和文献报道,确定FEL3为埃里格孢属真菌。【结论】甘肃棘豆中存在生成SW的内生真菌Embellisiasp.FEL3。     

甘肃棘豆中苦马豆素的分离与鉴定

用升华法从甘肃棘豆中分离到一种白色细针状结晶，经ＴＬＣ、ＭＰ、ＩＲ、ＭＳ鉴定分析确定为苦马豆素，经计算甘肃棘豆中的提取率为 １４μｇ／ｇ。     

萃取法提取甘肃棘豆中的苦马豆素研究初报

将1.5kg甘肃棘豆干粉经水提取,提取液浓缩后用正丁醇萃取,萃取液加入稀硫酸调节pH7.0,回收溶剂,制成浸膏;将浸膏与二氧化硅粉末混匀后用氯仿萃取该浸膏中的小极性杂质。用氨性氯仿萃取,收集氨性氯仿萃取液,挥干后升华得到7.5mg针状结晶,与苦马豆素标准样品对照进行TLC检测,其Rf值及斑点颜色与苦马豆素标准样品一致;通过熔点和IR、MS、1HNMR、13CNMR等鉴定其化学结构,为苦马豆素,计算甘肃棘豆苦马豆素的产率为5mg/kg。     

急弯棘豆生物碱成分薄层色谱分析及苦马豆素分离

为了探明急弯棘豆的生物碱成分,明确急弯棘豆是否属于疯草类植物,采取醇类溶剂提取法、生物碱系统提取法、薄层色谱分析及平面色谱图像定量分析技术对急弯棘豆生物碱成分进行研究,并采用大孔吸附树脂柱层析方法分离苦马豆素。结果表明,1.25kg急弯棘豆干草粉得到113.35g总浸膏,经酸化和碱化后,碱水液分别经氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到各部分浸膏0.30g、0.20g和5.95g,出膏率分别为0.024%、0.016%和0.476%。各萃取部分经薄层展开、Ehrlich’s试剂显色及软件分析发现,氯仿部分有9个斑点,且斑点3相对含量最大,为40.26%,乙酸乙酯部分有6个斑点,且斑点4相对含量最大,为41.90%,正丁醇部分有3个斑点,且斑点3相对含量最大,为78.26%。上述各斑点均与苦马豆素标准品颜色及Rf值一致。通过柱层析,在正丁醇萃取部分得到苦马豆素51.90mg。结果显示急弯棘豆含有苦马豆素,属于疯草类植物的一种。     

试验性黄花棘豆对绵羊血清蛋白含量的影响

[目的]了解黄花棘豆中毒后绵羊血清蛋白含量的动态变化。[方法]给装有永久性瘤胃瘘管的8只绵羊按照每日允许摄入量为10g/(kg.mb)来投服黄花棘豆,研究试验性黄花棘豆中毒后各时期绵羊的血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量变化。[结果]饲喂黄花棘豆粉后,全部试验羊在第16～18天出现中毒症状,第25～28天出现严重中毒症状。第28天采血后停止投服黄花棘豆,试验羊中毒症状在2周内全部消失。整个试验期间血清总蛋白、球蛋白含量无明显变化(P>0.05),而白蛋白含量在第21天和第28天显著降低(P<0.05)。[结论]该试验中黄花棘豆的主要有毒成分为吲哚兹啶生物碱。     

镰形棘豆化学成分预试及生物碱成分薄层色谱分析

采用植物化学成分系统预试法、生物碱系统提取法和薄层色谱技术对镰形棘豆地上部分全草的化学成分,特别是生物碱成分进行了薄层色谱分析。结果表明,镰形棘豆地上部分全草中含有生物碱、有机酸、皂甙、黄酮、香豆素、萜类和挥发油等多种化学成分,其中以生物碱沉淀反应最明显;1.50 kg镰形棘豆经95%乙醇回流提取得总浸膏198.10 g,经酸化、碱化所得碱水液依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分段萃取,得生物碱氯仿萃取部分0.72 g,乙酸乙酯萃取部分0.97 g,正丁醇萃取部分26.70 g,分别占总生物碱的2.54%、3.42%、94.04%,说明镰形棘豆生物碱主要集中在正丁醇萃取部分以大极性生物碱为主;各部分生物碱经薄层层析分析,发现镰形棘豆中生物碱的种类至少有24种,经与标准样品对照,证明镰形棘豆所含的生物碱主要以苦马豆素及其类似物等吲哚里西啶生物碱为主,同时也含有少量的黄华碱和臭豆碱等喹诺里西啶生物碱。     

“疯草”中苦马豆素解毒制剂及抗肿瘤应用研究进展

"疯草"中的主要毒性成分苦马豆素,属于一种多羟基取代吲哚兹定生物碱。其能抑制动物机体中的α-甘露糖苷酶,造成人和动物中毒;同时又具有极强的抗肿瘤活性,而对人有益。全文概述了苦马豆素的生化特性、中毒机理、解毒制剂研制以及抗肿瘤作用的研究进展,以期为预防治疗苦马豆素中毒以及合理开发利用苦马豆素提供参考。     

甘肃棘豆中苦马豆素提取工艺改进初报

用40 kH z超声波水媒处理甘肃棘豆草粉1.5 kg,代替传统的索氏提取法或溶剂冷浸法,水提液浓缩除杂后,用正丁醇萃取,正丁醇萃取液用稀酸水萃取,浓缩后的稀酸水萃取液用氨性氯仿萃取,浓缩氨性氯仿萃取液成浸膏,此浸膏经石蜡油浴升华得到24 m g白色晶体,经薄层层析检验,可初步鉴定为苦马豆素。此法不用柱层析,简化了苦马豆素提取的步骤,提取率为16 m g/kg。     

“棘毒净”治疗大白鼠小花棘豆慢性中毒的效果

[目的]小花棘豆(O.glabra)属于棘豆属(Oxytropis DC.)的一种,是我国西北地区主要的有毒植物.家畜的小花棘豆中毒给当地的畜牧业带来了巨大的经济损失.在构建大白鼠小花棘豆慢性中毒模型的基础上,验证“棘毒净”对大白鼠小花棘豆中毒的解毒效果.[方法]大白鼠腹腔注射该药后,对大白鼠的脏器系数、饲料利用率、血液学、血液酶学、内脏器的组织学进行考察.[结果]保护组血液MCH、WBC、MCV、MCHC普遍高于中毒组,AST、ALP活性及血清肌酐值较中毒组下降.[结论]“棘毒净”对大鼠起到一定的保护作用,对大鼠的肝肾脏起到一定的保护作用.     

投喂率对稻-黄颡鱼共作系统气态氮散失和饲料氮利用率的影响

为探讨稻鱼共作模式中投喂率对N₂O、NH₃排放以及饲料氮利用率的影响,采用模拟试验,设置不同投喂率（0、2%、4%、6%和8%）稻-黄颡鱼共作处理以及黄颡鱼单养处理（投喂率4%）,研究投喂率对稻-黄颡鱼共作系统中N₂O和NH₃排放特征、水体和底泥氮含量、黄颡鱼生长性能和饲料氮利用率的影响。结果表明,稻-黄颡鱼共作处理N₂O累积排放量和水体总氮、铵态氮、硝态氮、亚硝态氮含量随投喂率增加而增加,分别从未投喂处理的-0.01 kg·hm^-2和0.60、0.22、0.25、0.02 mg·L^-1增加到8%投喂率处理的0.72 kg·hm^-2和4.61、1.75、2.50、0.16 mg·L^-1。在相同投喂率下,稻-黄颡鱼共作处理N₂O累积排放量、水体总氮、铵态氮、硝态氮和亚硝态氮含量分别比黄颡鱼单养处理降低32.10%、48.63%、31.43%、69.13%和69.23%。增加投喂率会削弱稻-黄颡鱼共作模式对N₂O排放和水体氮污染的抑制效应。投喂率对稻-黄颡鱼共作处理NH₃挥发无显著影响。黄颡鱼对饲料氮的利用率随投喂率增加呈下降趋势;特定生长率、粗蛋白含量和蛋白增加量随投喂率增加呈先增后减趋势。稻-黄颡鱼共作处理中最大特定生长率、最高蛋白增加量和最低单位产量N₂O排放量对应投喂率分别是5.49%、5.16%和1.00%。相同投喂率条件下,稻-黄颡鱼共作有利于促进黄颡鱼粗蛋白累积、降低N₂O和NH₃排放量以及水体和底泥氮养分含量。研究表明,稻-黄颡鱼共作系统中,水体氮含量和N₂O排放量随投喂率的提高而增加,综合黄颡鱼生长和N₂O排放情况,建议稻-黄颡鱼共作模式的投喂率不超过5.49%。     

印度菜粕替代国产菜粕对奥尼罗非鱼生长、体组成及健康状况的影响

【目的】研究印度菜粕替代国产菜粕对奥尼罗非鱼生长性能、免疫力及肝脏结构的影响。【方法】选取120尾初始体质量约为17.3 g的奥尼罗非鱼,随机分为4组;设计4种等氮等能的实用饲料G0、G50、G75和G100,其中,G0为对照组(国产菜粕用量35%),G50、G75和G100为分别用印度菜粕替代G0饲料中50%、75%和100%的国产菜粕并添加质量分数为0.1%的二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)为诱食剂,饲养周期为43 d。【结果】印度菜粕替代水平升高可导致罗非鱼的末均质量、增质量率、特定生长率降低,饲料系数升高,其中,G100组差异显著(P0.05)。全鱼体成分和血清常规生化指标差异不显著(P0.05),血清丙二醛(MDA)、NO含量和超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)活性差异也不显著(P0.05),但G100组总抗氧化能力(T-AOC)和溶菌酶(LZM)含量比G0显著升高(P0.05)。随着印度菜粕替代水平的升高,奥尼罗非鱼肝细胞结构的损伤程度逐渐加大。【结论】生长阶段在17~70 g的奥尼罗非鱼,饲料中印度菜粕替代国产菜粕的水平不宜超过75%。     

山羊冰川棘豆中毒的血液学指标分析

10只杂种奶山羊随机等分为试验组和对照组 ,试验组羊按 10 g/ ( kg· d)的剂量饲喂冰川棘豆干粉 ,定期采血 ,进行血液 RBC、Hb、PCV、WBC、白细胞分类记数和全血淋巴细胞空泡变性的测定 ,并计算 MCH、MCV、MCHC。结果表明 ,RBC、Hb、PCV、MCH、MCV、MCHC明显低于对照组 ,与对照组比较差异极显著 ( P<0 .0 1) ,淋巴细胞出现空泡变性 ,中毒羊造血系统受到损害 ,抵抗力降低 ,贫血属小细胞性贫血     

牛羊和实验动物的实验性夹竹桃中毒的症状和心电图观察

黄花夹竹桃[Thevetia peruriana(Pers)K.Schum]和红花夹竹桃(Nerium indicum,Mill),都可引起山羊、黄牛、奶牛等家畜和实验动物小白鼠、兔、狗中毒死亡。笔者给黄牛喂饲红花夹竹桃鲜叶0.248克/公斤体重,小奶牛和山羊喂饲黄花夹竹桃叶片经60℃恒温烤干制成的粉末,剂量分别为1.10和1.207克/公斤体重,均能引发和自然病例相同的中毒症状并致死。夹竹桃中毒致死的原因为心力衰竭(heart bailure),其中以心室颤动引起者居多。心电图是提示心脏兴奋的产生、传导和功能恢复与否的有效工具。这种诊断技术的敏感性和可靠性在兽医临床医学研究中,对牛羊夹竹桃中毒的诊断未给予很好地应用。本文应用心电图在这方面做了初步研究。实验结果表明,心电图是动物夹竹桃中毒诊断心脏功能和判断药物疗效的有效手段之一。本文也对牛羊夹竹桃中毒的病理、常用治疗药物加以讨论。     

Comparative Analysis of Genomes in Oryza sativa, O.officinalis, and O. meyeriana with C0t-1 DNA and Genomic DNA of Cultivated Rice

Fluorescence in situ hybridization (FISH) and comparative genomic hybridization (CGH) were applied to somatic chromosomes preparations of Oryza sativa, O. officinalis, and O. meyeriana with labeled probes of C0t-1 DNA and genomic DNA from the cultivated rice. The coverage percentage (%) and size (Mb) of C0t-1 DNA in O. sativa, O. officinalis, and O. meyeriana were 47.1 ±0.16, 38.61 ±0.13, 44.38±0.13, and 212.33± 1.21,269.42 ± 0.89, 532.56± 1.68 Mb, respectively. The coverage percentage and size of genomic DNA from O. sativa in O. officinalis and O. meyeriana were 91.0, 93.6% and 634, 1 123 Mb, respectively, in which 365 and 591 Mb in O. officinalis and O. meyeriana were from O. sativa genomic DNA, but not from repetitive sequences of O. sativa, and the uncoverage genome size in O. officinalis and O. meyeriana were 64 and 78 Mb, respectively. In addition, karyotype analysis was conducted based on the signal bands of C0t-1 DNA in O. sativa, O. officinalis, and O. meyeriana. The results showed that highly and moderately repetitive sequences in Oryza genus were conserved as the functional genes during evolution. The repetitive sequences reduplication may be one of the important causes of the genome enlargement of O. officinalis and O. meyeriana, and O. officinalis genome enlarged more slowly when compared with O. meyeriana. Based on the above results, it is concluded that O. officinalis and O. meyeriana were formed by reduplication, rearrangement, and gene selective loss during the evolution process.     

日粮硫水平对山羊硒代谢的影响

试验考察了在舍饲条件下饲喂混合精料和干草时补硫对山羊硒代谢的影响。风干基础日粮含硒0.03ppm,补硒使各组风干日粮含硒均为0.23ppm,风干基础日粮含硫0.07％,各组风干日粮补硫量分别为0、0.20、0.40、0.60、1.00％。结果表明:采食量在日粮含硫量为0.47％时显著提高,并随日粮硫水平的增加而上升。补硫对全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性、血硒含量没有显著影响,毛硒含量和日粮硫水平显著负相关(γ=-0.876)。血清磷酸肌酸激酶(CPK)活性随日粮硫水平增加而上升,但上升的幅度从日粮硫含量为0.47％以后增大。由此可见,考虑山羊硒需要量时,风干日粮含硫量不宜超过0.47％。     

日粮能量水平对山羊血清胃泌素水平的影响

本试验研究了日粮能量水平变化对山羊血清胃泌素水平的影响及其作用机理.试验分3个系列.系列一:选取健康空怀母山羊2只,采用自身对照方法,分为试验期和对照期.对照期饲喂含消化能2.33Mcal.kg~(-1)的基础日粮30d;试验期饲喂含消化能2.91Mcal.kg~(-1)的试验日粮40d.2种日粮的粗蛋白含量、钙磷含量均相等.结果对照期山羊血清胃泌素平均水平为64.62pg·ml~(-1),试验期为89.80pg·ml~(-1),差异十分显著(P<0.01).系列二:以4ml·min~(-1)的速度经山羊颈静脉套管滴注5%的葡萄糖溶液120ml后,血清胃泌素水平(69.29±4.22pg·ml~(-1)显著(P<0.05)高于滴注生理盐水时的水平(65.18±3.67pg·ml~(-1).这种升高可部分为阿托品所抑制,提示这一过程由迷走神经胆碱能纤维所中介.系列三:以6ml·min~(-1)的速度经皱胃瘘管输注30%的葡萄糖溶液180ml后,山羊血清胃泌素水平(66.87±1.74pg·ml~(-1)显著(P<0.05)高于输注生理盐水时的水平(64.13±1.15pg·ml~(-1).试验结果表明,血糖浓度的变化是调节机体血清胃泌素水平的因素之一,葡萄糖能否直接刺激胃窦粘膜影响血清胃泌素水平有待进一步探讨.