红茂草中精油成分分析及抑菌活性的研究

为红茂草药物的进一步开发和利用,本试验以甘肃平凉地区野生药用植物红茂草为研究对象,采用水蒸气提取、蒸馏萃取(SDE)提取、超临界CO_2萃取等3种方法,分别提取红茂草中的精油成分;以GC-MS对其精油进行化学成分分析,并将超临界CO_2萃取的红茂草精油采用平板菌落计数法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌进行抑菌活性测定。结果显示,三种提取方法中,水蒸气提取法和蒸馏萃取提取法所得精油为橙黄色,有浑浊,超临界CO_2萃取法所得精油为淡黄色,澄清液体。3种方法所得精油均含有24种共同成分,以超临界CO_2萃取法最优,其提取率为2.1220%,水蒸气提取法最低,提取率为1.7870%;将超临界CO_2萃取的红茂草精油作用于3种供试菌,测定其最小抑菌浓度(MIC)分别为:金黄色葡萄球菌0.2500 g/mL、大肠杆菌0.3000 g/mL,绿脓杆菌0.2600 g/mL,抑菌效果显著。研究结果表明,超临界CO_2萃取是提取红茂草精油的最佳方法,通过超临界CO_2萃取法提取的红茂草精油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有良好的抑菌效果。     

龙安柚柚皮精油提取工艺及抗氧化、抑菌活性研究

本文采用水蒸气蒸馏法提取龙安柚柚皮精油,通过单因素及正交试验对提取工艺进行优化,考察浸泡时间、NaCl溶液质量分数、料液比对得率的影响;测定龙安柚柚皮精油抗氧化和抑菌活性。结果表明：当提取时间为60 min,NaCl溶液质量分数为2%,料液比为1:1.5时柚皮精油提取率最高为0.79%;龙安柚柚皮精油具有较强的还原能力和清除DPPH自由基的作用,对DPPH的半抑制浓度为3.22mg/mL,抑菌试验结果显示,龙安柚柚皮精油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定抑制作用,随着精油浓度增加,抑菌效果增强。     

野生药用红茂草挥发油提取及抗氧化活性研究

采用CO₂超临界法萃取红茂草中挥发油,对其进行GC-MS分析,以提取的挥发油为研究对象,确定红茂草挥发油的抗氧化能力大小。研究表明,红茂草挥发油成分复杂,存在一定的抗氧化能力。     

红茂草中黄酮类提取工艺优化及体外抑菌研究

以红茂草为研究对象,在单因素水平筛选测定的基础上,通过响应面法优化其提取工艺。提取物采用Diamonsil C18(4.6mm×150mm,1.8μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.2%磷酸(65∶35,v/v)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长280nm;并对提取物进行抑菌活性测定,以大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌为供试菌,进行体外抑菌活性研究和透射电镜观察。结果显示,红茂草中黄酮类化合物最佳提取工艺条件为:液料比15mL/g、超声时间35min、回流时间2.5h、乙醇体积分数65%,在此工艺下红茂草中黄酮类化合物含量为2.60%,HPLC检测重现性好;其提取物对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为0.28g/mL和0.20g/mL,MBC为0.26g/mL和0.10g/mL,IC50为0.2162g/mL和0.1805g/mL,在透射电镜下观察抑菌效果显著。研究表明,响应面法对红茂草中黄酮类化合物提取工艺的优化比较合理。     

红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,测定其生长曲线、最小抑菌浓度、抑菌率及半数抑菌浓度,并检测了金黄色葡萄球菌膜通透性和形态变化。结果表明,红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌作用,其最小抑菌浓度为0.35 mg/m L,半数抑菌浓度为0.214 mg/m L。红茂草生物碱可改变金黄色葡萄球菌的细胞形态,显微观察发现菌体变形缢裂。     

红茂草生物碱TLC检测技术的建立及抑菌活性研究

利用醇提法提取红茂草中生物碱,并对其进行TLC检测,建立红茂草生物碱TLC检测技术;用红茂草浓缩液对3种供试菌进行体外抑菌活性研究,测定其最小抑菌浓度（MIC）。结果以95%乙醇：冰乙酸：水：浓氨水（15：0.5：2.5：0.5）为展开系统,分离效果最好,斑点清晰;对供试菌MIC测定结果分别为：大肠埃希氏杆菌0.18mg/mL、金黄色葡萄球菌0.14mg/mL、粪肠球菌0.26mg/mL。红茂草具有明显的抑菌作用。TLC检测技术可作为红茂草提取物中生物碱质量控制方法,且该法重现性好、准确度高。     

不同植物精油对畜禽呼吸道致病菌的影响

试验旨在通过对17种具有良好抑菌效果植物精油的体外抑菌试验，筛选出对引起畜禽细菌性呼吸道感染常见致病菌（大肠杆菌、沙门氏菌、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌）有显著疗效的单一植物精油品种，再通过体外抑菌正交试验筛选出最佳的植物精油复配方案，最后通过人工攻毒建立动物感染模型，筛选出复配精油组合的最佳治疗剂量，为植物精油防治家禽细菌性呼吸道疾病奠定理论基础。结果表明：在17种植物精油中，抑菌效果最好的单一植物精油是肉桂醛和香芹酚，对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为0.391 mg/mL，对乙型溶血性链球菌的最小抑菌浓度均为0.781 mg/mL。抑菌效果最佳的植物精油组合为2∶1的肉桂醛∶牛至油和2∶1的肉桂醛∶百里香酚，2∶1的肉桂醛∶牛至油对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为0.195 mg/mL，对大肠杆菌、乙型溶血性链球菌的最小抑菌浓度均为0.391 mg/mL;2∶1的肉桂醛∶百里香酚对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为0.195 mg/mL，对乙型溶血性链球菌的最小抑菌浓度为0.391 mg/mL。在2∶1的肉桂醛∶百里香酚复合植物...     

响应面法优化柞蚕蛹多糖的提取工艺及其抑菌活性研究

为确定柞蚕蛹多糖的最佳工艺条件及其抑菌活性,试验将柞蚕蛹作为材料,利用水提取法提取柞蚕蛹多糖,并用滤纸片法检测柞蚕蛹多糖的抑菌活性。结果表明,柞蚕蛹多糖最适宜的提取条件为料液比1∶45 g/mL,时间3.16 h,温度75℃,进行3次重复试验,所得柞蚕蛹多糖平均提取率为1.38%。柞蚕蛹多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌抑制效果最好。 [关键词]柞蚕蛹|多糖|提取|响应面|抑菌     

盐穗木生物碱正丁醇萃取部分对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用研究

探讨盐生荒漠植物盐穗木醇提正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑止作用,并测定其抑菌效果与其最小抑菌浓度(MIC)。取盐穗木地上全草部分阴干粉粹并进行超声波处理,提取正丁醇萃取物,并对萃取物进行抑菌作用及其效价(最小抑菌浓度)的测定。结果显示,盐穗木生物碱正丁醇萃取部分0.1 mg/mL稀释液对浓度为10~(-2)CFU/mL金黄色葡萄球菌抑制效果较好,呈中度敏感,抑菌效价为1∶8;该浓度对大肠杆菌的抑菌效价为1∶4。     

凤尾草不同提取物抑菌效果研究

目的:采用不同提取方法提取凤尾草有效成分,并通过体外抑菌实验测定不同提取物的抑菌效果。方法:以体外抑菌实验结果为考察指标,采用乙醇回流提取法、蒸馏水浸提法、碱溶酸沉提取法对凤尾草的有效成分进行提取,通过对4种细菌的药敏实验比较不同提取方法的抑菌差异性,并计算最小抑菌浓度。结果:凤尾草抑菌有效提取方法为乙醇回流提取法;凤尾草乙醇回流提取液对受试菌的抑菌效果为金黄色葡萄球菌绿脓杆菌枯草芽孢杆菌大肠杆菌,最小抑菌浓度分别为3.13μg/mL、6.25μg/mL、6.25μg/mL、12.50μg/mL。结论:凤尾草不同提取方法提取液抑菌效果有差异,乙醇回流提取法抑菌效果较为显著。     

甘草查耳酮A对貂源铜绿假单胞菌的抗菌活性

【目的】 研究甘草查耳酮A对貂源铜绿假单胞菌的抗菌活性，为临床合理使用甘草查耳酮A抗感染治疗提供依据。【方法】 采用微量肉汤稀释法和平板计数法测定甘草查耳酮A对貂源铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration，MBC）；平板计数法测定1MIC、2MIC、4MIC和8MIC甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌的杀菌效果；吸光光度法测定1/16MIC、1/8MIC、1/4MIC和1/2MIC甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌生长的影响；结晶紫染色法测定1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC和1MIC的甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌生物被膜的抑制效果以及1/4MIC、1/2MIC、1MIC和1MBC甘草查耳酮A对生物被膜的清除效果；建立小鼠皮肤刀伤模型和皮肤脓肿模型评价甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌感染小鼠的治疗效果。【结果】 甘草查耳酮A对貂源铜绿假单胞菌临床分离菌株具有良好的抗菌活性，MIC和MBC分别为3.125和12.5 μg/mL。时间-杀菌曲线结果显示，2MIC和1MIC组在6 h内铜绿假单胞菌数量逐渐减少，之后基本维持在1×10⁵ CFU/mL左右；8MIC和4MIC组铜绿假单胞菌的数量一直处于下降趋势，并且分别在14和16 h后均无菌落形成。1/16MIC甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌生长影响不明显，而1/8MIC、1/4MIC和1/2MIC甘草查耳酮A可抑制细菌生长。1MIC甘草查耳酮A对铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制率约为70%，1MBC甘草查耳酮A可清除约50%预形成的生物被膜。体内试验结果表明，甘草查耳酮A有助于铜绿假单胞菌感染小鼠刀伤的创口愈合，并减少皮肤脓肿。与对照组相比，甘草查耳酮A和氨苄西林组脓肿中的细菌数量均极显著减少（P<0.01）。【结论】 甘草查耳酮A对貂源铜绿假单胞菌具有良好的体外和体内抗菌活性，可进一步用于临床治疗铜绿假单胞菌感染制剂的研发。     

PGD2/DP1途径对细菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达的影响

为了研究前列腺素D₂（prostaglandin D₂,PGD₂）/DP₁受体途径对大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）感染奶牛子宫内膜组织中炎症介质HMGB-1和PAFR的表达及对组织损伤程度的影响,试验以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,应用1×10^-6 mol/L DP₁受体激动剂（BW-245C和15d-PGJ2）和等量（1×10⁶ CFU/mL）大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织,采用实时荧光定量PCR、免疫组化和HE染色法检测奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR的表达并评价组织损伤情况。结果显示,与空白对照组相比,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达量显著升高（P<0.05）,而DP₁受体激动剂与大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共处理奶牛子宫内膜组织中DP₁受体激动剂显著抑制奶牛子宫组织中HMGB-1和PAFR的表达（P<0.05）。HE染色结果显示,大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织上皮细胞和腺上皮细胞完全脱落、坏死、崩解;而DP₁受体激动剂、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织中,DP₁受体激动剂的加入显著减轻奶牛子宫内膜组织的损伤程度（P<0.05）。免疫组化染色法结果与以上两种方法结果一致。结果表明,PGD₂能够抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织中损伤相关因子HMGB-1、PAFR的表达,减轻组织损伤程度,这一作用可能是由DP₁受体所介导的。     

水貂源铜绿假单胞菌的分离鉴定、耐药性及毒力基因检测

为查明河北某水貂养殖场水貂死亡原因,本研究进行了病理组织学检查、细菌分离培养、细菌形态学观察、生化鉴定、16S rDNA鉴定、药敏试验、耐药基因和毒力基因检测、动物回归试验等。结果显示,共分离到3株铜绿假单胞菌,16S rDNA序列与GenBank中铜绿假单胞菌相应序列相似性达到100%,且3株分离菌均能使大鼠死亡。药敏结果表明,分离菌对左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、多黏菌素B敏感,对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类、四环素类等抗生素耐药。分离菌携带3种超广谱β-内酰胺酶基因（bla_CTX-M1、bla_OXA-2、bla_OXA-10）、3种碳青霉烯酶基因（bla_VIM-1、bla_SPM-1、bla_KPC-1）及吸附相关基因、T1SS-T3SS分泌系统、氧化应激相关基因、群体行为调控基因、磷脂酶相关的17种毒力基因。本研究结果为水貂绿脓杆菌病的临床诊断和治疗提供了参考依据。     

噬菌体降低铜绿假单胞菌所致腐蛋的效果

铜绿假单胞菌是孵化过程中造成腐蛋的主要病原菌,拟尝试用裂解性噬菌体防治。选用腐蛋中筛选的铜绿假单胞菌PA-MH12,以此为宿主从河水中筛选到1株裂解性噬菌体MH12-Q,对其进行了生物学特性研究,体外进行了对铜绿假单胞菌所致腐蛋的防控效果试验。结果显示：噬菌体MH12-Q属于肌尾噬菌体科（Myoviridae）,效价可达到10¹³pfu·mL^-1,完全裂解效价（CLC）为10¹⁰pfu·mL^-1,最适生长温度为37℃,pH稳定性好,最适pH为6~8,且其在pH4~10的效价都能维持在较高的水平。最佳感染复数（OMOI）为0.001,感染宿主的潜伏期为30 min,爆发期为70 min。噬菌体MH12-Q可使高浓度铜绿假单胞菌的感染率从70%降低到40%。铜绿假单胞菌噬菌体MH12-Q的生物学性质适合生产应用,对孵化场腐蛋具有较好的防控作用,能够提高感染铜绿假单胞菌的鸡胚成活率。     

牛至油博落回口服液的研制及体外抑菌活性测定

【目的】 研制牛至油博落回口服液, 并测定其体外抑菌活性及其主要成分的联合抑菌效果, 为临床用药提供理论依据。【方法】 通过预试验和Box-Behnken响应面法优化处方; 采用高效液相色谱法测定口服液主要成分含量; 采用滤纸片法测定口服液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌的抑菌圈直径; 采用试管二倍稀释法测定口服液、5%牛至油溶液及1%博落回溶液对4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC); 采用微量棋盘稀释法对5%牛至油溶液与1%博落回溶液进行体外联合药敏试验。【结果】 牛至油博落回口服液最优配方为: 5%牛至油, 1%博落回提取物, 25%增溶剂聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油, 0.02%抗氧化剂2, 6-二叔丁基对甲酚(BHT), 余量为水。口服液中香芹酚的含量为42.59 mg/mL, 血根碱含量为6.51 mg/mL。口服液对4种菌的抑菌圈直径分别为16.9、16.4、23.7和17.0 mm, MIC分别为3.125、3.125、1.5625和1.5625 μL/mL, MBC分别为12.5、6.25、3.125和3.125 μL/mL; 5%牛至油溶液对4种菌的MIC分别为25、12.5、6.25和100 μL/mL, MBC分别为100、50、25和>200 μL/mL; 1%博落回溶液对4种菌的MIC分别为6.25、12.5、3.125和6.25 μL/mL, MBC分别为50、25、6.25和25 μL/mL。联合药敏试验表明, 二者联合用药对大肠杆菌、沙门氏菌起相加作用, 对金黄色葡萄球菌无作用, 对粪链球菌为协同作用。【结论】 试验制备了牛至油博落回口服溶液剂, 该制剂对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌具有良好抑制作用。     

Discovery,Isolation,Identification and Characterization of Novel Non-ribosomal Peptide Antibacterial Active Substances in Bacillus

The aim of this study was to search for novel non-ribosomal peptide antimicrobial substances based on the screening of bacterial secondary metabolites.The bacteria isolated from soil,sea water and common marine organisms in Yantai coastal area were isolated and purified.E.coli ATCC 25922 and Staphylococcus aureus ATCC 29213 were selected as indicator bacteria,and E.coli B2 (bla_NDM-5+mcr-1) and methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) T144 were used as indicator for secondary screening.The genome was extracted and the PCR products were sequenced to determine the active species.The secondary metabolites of bacteria were extracted by organic extraction,purified by gel chromatography and preparative liquid chromatography,and purity was detected by analytical liquid chromatography.The results of sequencing showed that the active strain belonged to Bacillus amyloliquefaciens sp.,and was named as Bacillus amyloliquefaciens 9-14 (active bacterium 9-14).The results of antibacterial test showed that the metabolites of active bacterium 9-14 had high inhibitory effect on Staphylococcus aureus ATCC 29213,MRSA T144,E.coli ATCC 25922 and E.coli B2.The metabolites of active bacterium 9-14 were cyclic lipopeptides composed of amino acid chains,which belonged to the derivatives of ibuprofen.The biological characteristics and antibacterial spectrum of the metabolites of active bacterium 9-14 were studied.The results showed that the metabolites of active bacterium 9-14 had good thermal stability and acid-base stability.And the antibacterial activity of the antibacterial substance treated with trypsin,pepsin,protease K and papain was not significantly weakened and had good stability.The antibacterial substance also had inhibitory effect on Staphylococcus aureus and E.coli,but had no activity against Pseudomonas aeruginosa,Klebsiella pneumoniae,Enterococcus faecalis and Bacillus cereus.In this study,a new antibacterial substance was obtained,which could be used as the precursor of antibacterial drugs,and could provide certain reference for food safety and disease control.     

芽孢杆菌中新型非核糖体肽类抗菌活性物质的发掘、分离鉴定及特性研究

本研究旨在基于对细菌次级代谢产物的筛选,寻找新型非核糖体肽类抗菌物质。通过对烟台沿海地区的土壤、海水及近海常见海洋生物中的细菌进行培养,分离纯化得到细菌的单克隆,以大肠杆菌（E.coli）ATCC 25922和金黄色葡萄球菌ATCC 29213为指示菌进行初步筛选,以耐多黏菌素和碳青霉烯E.coli B2（bla_NDM-5+mcr-1）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） T144作为指示菌对有活性的细菌进行二次筛选。通过提取基因组进行PCR扩增产物测序比对,确定活性菌种属。采用有机萃取法对细菌的次级代谢产物进行萃取,通过凝胶层析和制备液相色谱进行纯化,利用分析型液相色谱进行纯度检测,进—步利用质谱对纯化后的抗菌活性物质进行结构鉴定。测序结果表明,活性菌属于解淀粉酶芽孢杆菌种,将其命名为解淀粉酶芽孢杆菌9-14（活性菌9-14）。抑菌试验结果表明,活性菌9-14的代谢产物对金黄色葡萄球菌ATCC 29213、MRSA T144、E.coli ATCC 25922和E.coli B2均具有高效抑制作用。活性菌9-14代谢产物是由氨基酸链组成的环状脂肽,属于伊枯草菌素的衍生物。对活性菌9-14代谢产物的生物学特性及其抑菌谱研究发现,活性菌9-14的代谢产物具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,该抗菌物质经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K和木瓜蛋白酶处理后抗菌活性没有明显减弱,具有较好的稳定性;该抗菌物质对所用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌同样具有抑制作用,对绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌均不表现活性。本研究得到一种新型的抗菌物质,以该抗菌物质为抗菌药物的前体,可为食品安全和疾病控制提供一定的参考依据。     

双黄连可溶性粉不同组分抗菌抗病毒活性研究

为了深度开发双黄连可溶性粉（金银花、连翘、黄芩，1：1：2），并为家禽、家畜合理选择用药提供科学依据，本研究以双黄连口服液生产工艺生产的双黄连可溶性粉及其醇沉物（多糖组分）、滤液（黄酮组分）作为研究材料，以哺乳动物牦牛源轮状病毒、鸡新城疫病毒，牦牛源致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为研究对象，采用牛津杯结合平板二倍稀释法，探讨其体外抗菌活性；以牦牛MA-104细胞株、鸡胚成纤维细胞株UMNSAH/DF-1为宿主细胞，采用噻唑蓝比色法（MTT）和细胞病变（CPE）检测法，探讨其体外抗病毒活性。研究结果表明，双黄连可溶性粉对革兰氏阴性菌（牦牛源大肠杆菌、牦牛源沙门氏菌、大肠杆菌质控菌株）的抑菌效果优于对革兰氏阳性菌（牦牛源金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球质控菌株）的抑菌效果，从双黄连可溶性粉中分离的黄酮组分可能是双黄连可溶性粉抑菌的主要成分，而多糖组分则无抑菌活性；黄酮组分对革兰氏阳性菌的抑菌效果优于对革兰氏阴性菌的抑菌效果；双黄连可溶性粉及其黄酮组分和多糖组分对鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1的最小无毒浓度（TC₀）分别为：2.58、1.17和1.56 μg/mL，对牦牛细胞MA-104的TC₀分别为：1.290、0.585和0.780 μg/mL，对牦牛轮状病毒均具有良好的抗病毒效果，双黄连可溶性粉对鸡新城疫病毒的抗病毒效果优于黄酮和多糖组分。研究结果为双黄连可溶性粉深度开发和对畜禽合理选择用药提供了科学依据。     

复方双黄连制剂体外抗菌抗病毒活性研究

【目的】探究复方双黄连制剂体外抗菌抗病毒活性,为复方双黄连的深度开发及家禽、家畜合理选择用药提供科学依据。【方法】将金银花、黄芩、连翘颗粒分别制成浸膏,再将药物浸膏及穿心莲颗粒按照比例制成穿心莲、双黄连（金银花：黄芩：连翘=1：1：2）和复方双黄连（金银花：黄芩：连翘：穿心莲=1：1：2：2）口服液,调节pH为7.0,生药浓度为100%。用大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的12个菌株进行细菌敏感性检测,采用牛津杯结合试管二倍稀释法筛选出敏感菌株,根据药物的最小抑菌浓度（MIC）探讨其体外抗菌活性;采用二倍稀释法稀释药物,培养恒河猴胚肾细胞（MA-104）、鸡胚成纤维细胞（DF-1）,用CCK-8法检测细胞活力,结合细胞病变（CPE）情况确定3种药物安全浓度,将最大药物安全浓度以二倍稀释法稀释3个梯度,用新城疫病毒、轮状病毒对MA-104和DF-1进行药物+病毒互作、先加药后攻毒和先攻毒后加药3种方式的处理,用CCK-8法检测细胞活力,并结合CPE探讨药物的体外抗病毒活性。【结果】复方双黄连的抗菌效果优于穿心莲和双黄连,其对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.20~1.56、0.20~1.56和0.78~1.56 mg/mL。CPE和细胞活力的测定结果表明,双黄连、穿心莲、复方双黄连对DF-1细胞的安全浓度范围分别为0~6.25、0~0.78和0~0.78 mg/mL,对MA-104细胞的安全浓度范围分别为0~3.13、0~0.78和0~0.78 mg/mL。新城疫病毒17E株对DF-1细胞的TCID₅₀为10^-6.19/100 μL;牦牛轮状病毒G6P[1]型SDA2株对MA-104细胞的TCID₅₀为10^-6.24/100 μL。复方双黄连通过直接灭活病毒（药物+病毒互作）、阻断病毒吸附（先加药后攻毒）及干扰病毒复制（先攻毒后加药）途径对新城疫病毒的有效抑制率分别为28.82%、55.92%、42.45%,对轮状病毒的有效抑制率分别为48.84%、26.52%、15.40%。【结论】复方双黄连的抗菌抗病毒作用均强于双黄连和穿心莲,且其对大肠杆菌、沙门氏菌的抗菌效果优于金黄色葡萄球菌,研究结果可为复方双黄连在兽医临床应用和深入开发提供科学依据。