金线莲组培快繁技术研究

以金线莲的茎段为外植体,进行组织培养研究,以期建立完整高效的快繁体系。试验结果表明,金线莲最佳诱导和增殖培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,p H值5.8;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.3%+蔗糖15 g/L+琼脂8 g/L,p H值5.8。     

大花萱草品种红宝石快繁体系的建立

以大花萱草"红宝石"的茎尖为外植体进行植物组织培养的研究,建立了其再生快繁体系。对比试验结果表明:(1)芽诱导培养基:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L的表现最为优异;(2)增殖培养基:MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+糖30 g/L+琼脂6 g/L的表现最为优异;(3)生根培养基:1/2MS+NAA 0.1 mg/L+马铃薯20 g/L+蔗糖15 g/L+琼脂7 g/L+活性碳1 g/L的表现最为优异。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

文心兰组培快繁技术研究

以文心兰具有休眠芽的花梗节段为外植体进行组培快繁试验,结果表明:选取发育初期的花芽较容易诱导出丛芽,其最佳诱导培养基为MS+6-BA4.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);适合的丛芽增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+Ad 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);较适宜的生根壮苗培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L+0.2%活性炭(pH5.8)。     

蝴蝶兰再生体系优化的研究

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。试验表明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基为:1/2MS+NAA1mg/L+苹果酸30g/L+香蕉泥100g/L+活性炭1g/L+蔗糖15g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

薰衣草高频植株再生系统的建立

以薰衣草叶片为外植体,建立了薰衣草高频植株再生系统,为薰衣草规模化快繁和遗传转化体系的建立奠定了基础.以6-BA,NAA,IBA,Ce(NO3)2,Na2MoO4及蔗糖为实验因子,芽分化率为测定指标,通过L18(61×36)正交实验,筛选了薰衣草芽分化的最佳组合:MS培养基中含有6-BA 2.0 mg/L,NAA 0.5 mg/L,IBA 0.15 mg/L,Ce(NO3)2 10 mg/L,Na2MoO4 0.5 mg/L及蔗糖15 g/L.通过L9(34)正交实验,筛选了1种宜于薰衣草生根的理想培养基,即MS+IAA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖15 g/L+活性炭1.0 g/L.     

薰衣草高频植株再生系统的建立

以薰衣草叶片为外植体,建立了薰衣草高频植株再生系统,为薰衣草规模化快繁和遗传转化体系的建立奠定了基础。以6-BA,NAA,IBA,Ce(NO3)2,Na2MoO4及蔗糖为实验因子,芽分化率为测定指标,通过L18(61×36)正交实验,筛选了薰衣草芽分化的最佳组合:MS培养基中含有6-BA2.0mg/L,NAA0.5mg/L,IBA0.15mg/L,Ce(NO3)210mg/L,Na2MoO40.5mg/L及蔗糖15g/L。通过L9(34)正交实验,筛选了1种宜于薰衣草生根的理想培养基,即MS+IAA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖15g/L+活性炭1.0g/L。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响.结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶.(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA＞2,4-D＞IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS+6 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂和MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.     

蝴蝶兰的组织培养技术

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验证明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MA+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基:1/2MS+IBA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+0.3%活性炭+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

甘蓝CMS下胚轴和子叶的离体培养与植株再生研究

【目的】探索一种利用甘蓝胞质雄性不育系(CMS)下胚轴和子叶进行快速扩繁的技术,为利用CMS大量繁制甘蓝杂交种提供一条新途径。【方法】以甘蓝CMS 05-2-10为试材,将苗龄5~7 d无菌苗的下胚轴和子叶切下,接种于MS培养基上,45~50 d后统计再生芽数,比较6-BA与NAA不同质量浓度配比对不定芽的诱导情况;将诱导出的不定芽接种于添加不同质量浓度(0,0.1,0.3,0.5 mg/L)NAA的MS生根培养基上,20 d后比较生根率和根的长势。【结果】在对下胚轴和子叶进行不定芽诱导时,MS培养基中分别添加1.0和4.0 mg/L的6-BA对下胚轴、子叶的诱导效果较好,其芽再生频率和分化系数分别为83.3%,53.0%和3.6,3.0。在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,其对下胚轴不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为80.7%,分化系数为3.4,褐化率为1.5%;在MS培养基中添加4.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,其对子叶不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为50.0%,分化系数为3.2,褐化率为3.4%;二者的褐化率均明显低于仅添加6-BA的处理。在MS生根培养基中添加0.3 mg/L NAA时,不定芽的生根效果较好,生根率达100%,且根系生长健壮。【结论】利用甘蓝胞质雄性不育系CMS 05-2-10的下胚轴和子叶作为外植体进行不定芽的诱导,对于下胚轴,其适宜培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂;对于子叶,其适宜培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂。不定芽诱导生根的最适培养基为MS+0.3 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响。结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶。(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA>2,4-D>IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS 3 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS 6 mg/L6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂和MS 4 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。     

根癌农杆菌介导CYP1A1转化菠萝的研究

将菠萝(Ananas comosus)愈伤组织经含有植物表达重组质粒(pUHA1-CYP1A1)的根癌农杆菌(LBA4404菌株)侵染后,在MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+100μmol/LAS+8g/Lagar上共培养3d,转入选择培养基(MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+20mg/LKm+400mg/LCarb+8g/Lagar)上培养约10d后开始分化出不定芽;28d后将绿色的抗Km不定芽转入MS+2.0mg/LNAA+30mg/LKm+300mg/LCarb+8g/Lagar上再进行连续2轮选择,随后将绿芽转入MS+1.0mg/LIBA+30mg/LKm+8g/Lagar上生根,共获得95株Km抗性植株,转化率0.12%～2.69%.对其中部分的抗Km植株进行PCR检测,PCR阳性植株率达64.29%.经Southern杂交进一步证实,CYP1A1已整合到菠萝基因中.以琼脂为培养基凝固剂、共培养基中添加AS、增加选择次数和逐渐增加新一轮选择培养基中的Km质量浓度等是根癌农杆菌介导菠萝愈伤组织获得转基因植株的重要条件.     

激素对非洲菊花托愈伤组织诱导和不定芽分化的影响

在MS培养基中分别加入不同浓度的6-BA和NAA,对非洲菊的幼嫩花托进行培养。结果表明,不同激素组合对非洲菊愈伤组织的诱导、不定芽的分化和不定芽的增殖影响明显,以MS+6-BA 7 mg/L+NAA 0.5 mg/L+琼脂9 g/L+3%蔗糖为最佳培养基。     

藻百年的组培快繁技术研究

[目的]研究藻百年（Exacum tetragonum）的离体培养和快速繁殖技术。[方法]利用藻百年的茎尖和茎段作为外植体进行组织培养和快速繁殖。[结果]结果表明,MS＋6-BA2mg/L＋NAA0.2 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适诱导培养基;MS＋6-BA1 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适增殖培养基,1/2 MS＋NAA0.3 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适生根培养基。[结论]该研究可为其他龙胆科植物的组织培养与快速繁殖提供方法参考。     

欧洲花楸茎段植株再生繁育技术

建立了欧洲花揪的快繁再生体系。结果表明,诱导不定芽的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂8．0e／L;适宜不定芽增殖的培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30．0r／L＋琼脂8．0g/L;最佳生根培养基为1／2MS＋NAA0．3mg／L＋蔗糖10．0g／L＋琼脂8．0g／L。     

胜利百号甘薯脱毒种苗离体繁殖培养基优化

以甘薯品种胜利百号脱毒试管苗为材料,以不同浓度的MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-BA、NAA和蔗糖,通过正交试验筛选胜利百号脱毒试管苗离体培养的适宜增殖培养基,试验结果表明胜利百号甘薯试管苗的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L;通过单因子试验筛选适宜试管苗根诱导及生长的基本培养基和NAA浓度,结果表明适宜的胜利百号试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。     

茅膏菜组织培养研究初报

[目的]探讨培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[方法]以好望角茅膏菜为试验材料,在10种培养基上进行繁殖,研究不同的培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[结果]茅膏菜幼叶在MS培养基上能形成愈伤组织,但在花宝一号＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA 0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基上有利于愈伤组织形成,特别是花宝一号＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖20 g/L时更有利于愈伤组织形成 在MS＋活性炭＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基有利于茅膏菜愈伤组织的分化,特别是MS＋活性炭＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.2mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖30 g/L培养基既有利于愈伤组织分化出芽,又有利于幼苗分化出根。[结论]该研究为茅膏菜的快速繁殖奠定了基础。     

甘农2号杂花苜蓿愈伤组织诱导及体细胞胚和芽分化的研究

以甘农2号杂花苜蓿下胚轴为材料,MS为基本培养基,研究了不同浓度的2,4-D、NAA、KT、BA、蔗糖及2,4-D作用时间对甘农2号杂花苜蓿愈伤组织的诱导、体细胞胚和芽分化的影响.结果表明,3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L NAA为愈伤组织诱导阶段最佳激素组合;2,4-D作用时间以15 d为宜;最佳的芽分化培养基为MS+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+20 g/L蔗糖.     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。     

白桃成熟胚试管苗培养研究

以白桃成熟胚为试验材料,无菌萌发获取试管苗,并筛选出试管苗培养最合适的增殖及生根培养基。研究结果表明,白桃试管苗培养最适合的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,增殖系数为3.45。生根率最佳诱导培养基为1/4 MS+IBA 0.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根率为82.22%。生根数最佳诱导培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根数为5.96。