欧洲缬草无菌苗培养及其根段不定根的诱导

为了得到大量欧洲缬草无菌苗和不定根,本研究以欧洲缬草种子为实验材料,研究不同消毒方法对种子发芽的影响;不同培养基种类对无菌苗生长的影响;以及不同生长素对无菌苗根段不定根诱导的影响。结果发现:种子发芽的最佳消毒方法为75%的酒精溶液浸泡消毒30 s,4%的NaClO溶液浸泡消毒10 min,无菌水冲洗3～5次;White培养基的种子发芽率、无菌苗茎叶和根长都较为理想,是欧洲缬草利用种子获得无菌苗的理想培养基。另外,WPM培养基对种子发芽和无菌苗茎叶生长具有明显的促进作用,B_5培养基则有利于无菌苗根系生长;MS+0.1 mg/L IBA是根段为外植体诱导不定根的理想培养基,不定根诱导率高达100%。本研究为欧洲缬草无菌苗和不定根的诱导繁殖提供基础依据。     

新疆阿魏种子无菌苗制备研究

为获得供新疆阿魏组织培养无菌苗制备的方法。研究了不同的消毒方法、激素、层积温度和相对湿度等条件下,对新疆阿魏无菌苗制作的影响。结果表明:新疆阿魏种子最佳消毒方法为70%酒精30 s+12%H2O215 min;层积温度4℃,相对湿度50%,新疆阿魏种子萌发最好;新疆阿魏种子经GA3处理可打破休眠,但发芽率低于低温层积处理。     

不同消毒剂对烟草种子消毒效果及萌发的影响

为探索烟草种子最佳消毒方法,本研究进行了不同消毒剂浓度及消毒时间对烟草种子带菌率及萌发的影响试验.结果表明,10％ H202消毒20 min、0.5‰HgCl2消毒15 min、1.0‰HgCl2消毒8 min、25％ NaClO消毒30 min以及30％NaClQ和40％ NaClQ处理烟草种子都可以得到无菌苗.同时,采用不同消毒剂与75％乙醇组合,对烟草种子的消毒效果也比较好.综合来看,30％NaClO处理烟草种子30 min,消毒效果较好,发芽率最高.     

乌拉特肋脉野豌豆无菌扦插扩繁技术研究

以乌拉特肋脉野豌豆种子为材料,分别从无菌苗的培养、无菌扦插扩繁、完整植株的诱导及炼苗移栽等几方面开展研究,建立了完整的组培快繁体系。结果表明:种子最佳消毒方法为种子经过前处理后、70%乙醇浸泡1 min、0.1%HgCl_2消毒8～10 min;种子萌发最佳培养基为1/2 MS+3%蔗糖+0.7%琼脂;芽诱导最佳培养基为:MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) IBA+3%蔗糖+0.7%琼脂;根系诱导最佳培养基:1/2 MS+0.8 mg·L~(-1) NAA+3%蔗糖+0.7%琼脂;无菌生根苗开口驯化2 d,移栽成活率达80%。通过本研究能够在短时间获得大批量的肋脉野豌豆幼苗,同时后代可保持母系遗传性状。     

黄连木种子组织培养不同消毒方法的研究

黄连木是中国一种重要的木本能源植物,由于其种子存在内生菌,造成以种子为外植体的组织培养困难。为了高效获得可以用于组织培养研究的无菌种苗,笔者研究了各种消毒方法对其内生菌的抑制效果,以黄连木成熟种子为外植体,分别测试了种子浸泡与否、20% NaClO、0.1% HgCl2、10% H2O2及20% NaClO溶液与超声波相结合等消毒处理对其抑菌和发芽效果的影响。结果表明,在种子消毒之前,不经过预浸泡处理的消毒效果要远好于浸泡处理24 h的消毒效果;20% NaClO和0.1% HgCl2溶液对黄连木种子内生菌均有一定的抑制作用,但对发芽率有明显影响,最高发芽率仅为46%。10% H2O2的除菌效果好于前2种方法,且处理后的种子发芽率得到提高。而采用20% NaClO溶液与超声复合处理种子10 min,可以获得更好控制污染的效果,且有利于种子的萌发,种子发芽率可达79%。因此,NaClO溶液与超声复合处理为黄连木种子消毒的理想方法。     

正交优选川芎苓节种子消毒方案

采用3因素3水平正交实验设计建立了川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)无菌苗快速繁殖体系。结果表明,不同因素不同水平组合的消毒方法对苓种子消毒效果及发芽率影响显著(p0.05)。川芎无菌苗最佳消毒方案为中部苓节在70%酒精下消毒30 s,0.1%升汞消毒10 min,在此培养体系下可快速扩增和长期继代培养无菌苗,利用该体系、无菌苗作为外植体可诱导分化出愈伤组织。     

珠芽蓼无菌苗培养前的种子消毒方法研究

珠芽蓼是一种分布于高海拔地区的高寒蓼科植物。为获得珠芽蓼无菌苗,以珠芽蓼种子为材料,探讨了不同消毒剂组合及处理时间对种子消毒效果的影响。结果表明,用于珠芽蓼种子消毒的最佳方法为:75%酒精、1∶14新洁而灭溶液分别预处理1min,再用0.1%Hg Cl2浸种5min。处理后的种子染菌率为0,发芽率为68.3%。本研究结果为珠芽蓼组培苗快速繁育等研究提供了重要依据。     

两种灭菌方法对番茄种子灭菌效果的评价

评价番茄种子经0.1%升汞和3%～4%次氯酸钠溶液灭菌的效果.方法:将番茄种子浸于3%～4%次氯酸钠溶液中充分振荡20min,以灭茵水充分漂洗种子3～4次.另将番茄种子浸于75%酒精1～2min,弃酒精后加入足量的0.1%升汞溶液充分振荡10～15 min,再以灭菌水充分漂洗种子4～5次.将种子点播于TMT 1固体培养基中.观察记录种子经两种灭茵法后的最早出芽时间、子叶形成时间和全部出芽时间.结果:经两种灭菌剂消毒后的番茄种子的最先出芽时间、子叶形成时间及全部出芽时问均有极显著性差异(p＜0.01).结论:番茄种子消毒以3%～4%次氯酸钠溶液为佳.     

芝麻苗期抗茎点枯病鉴定技术研究

研究通过组织分离法从河南省芝麻主产区分离到5 株病原菌,并进一步进行回接鉴定和分子鉴定;通过比较不同消毒剂和消毒时间优化芝麻种子消毒技术;采用最佳消毒技术消毒芝麻种子,在MS培养基上培养无菌苗;5 株病原菌通过菌饼法对12 份芝麻种质资源无菌苗进行抗性鉴定。为芝麻直接生产应用筛选抗性品种,为抗病育种发掘抗性资源。结果表明,5 株病原菌均为芝麻茎点枯病病原菌菜豆壳球孢（Macrophomina phaseolina）;用2% NaClO消毒20 min,获得芝麻无菌苗的效果最好;菌饼法鉴定无菌苗苗期抗性,12 份资源对5 株M.phaseolina 的反应型均不同,只有ZZM0905 和ZZM1205 对5 株病原菌均表现抗病,并且抗性比较稳定。     

不同消毒方法在洋葱组织培养中的应用

本试验使用几种不同的消毒方法和杀菌剂,以及不同的消毒时间,对洋葱种子进行处理,结果是用不含洗涤剂的温水浸泡12h后,经过70%酒精体表消毒1分钟,0.1%升汞和Tween 20按比例10000：1的混合溶液消毒10分钟的效果最好,而且不影响种子发芽。     

三个大果型番茄花药愈伤组织诱导分析

本研究以3个大果型番茄杂交种F1代(‘1401’,‘1403’,‘卡莱’)的花药为试验材料,对其花药愈伤组织诱导的影响因素进行初步研究。结果表明:大果型番茄花药小孢子发育时期与花蕾长度以及花药长度呈正相关。较适番茄花蕾消毒方法为用70%酒精对番茄花蕾进行表面消毒30 s,然后再用加了0.1%吐温20的15%NaClO消毒7 min。3个供试番茄品种均能诱导产生愈伤组织,但不同番茄品种的愈伤组织诱导率不同。其中,‘1401’番茄的愈伤组织诱导率最高,为19.67%。诱导培养基中添加30 g/L蔗糖能促进愈伤组织的产生,生长素与细胞分裂素浓度比为1:2有利于愈伤组织的产生。较适愈伤组织诱导培养基为(murashige and skoog medium,MS)+0.5 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂粉。该研究为获得大果型番茄多倍体材料提供了技术支撑。     

新型消毒剂过碳酸钠灭菌对烟草种子萌发和无菌苗生长的影响

为探索和评价新型消毒剂在植物表面灭菌中的应用方法,本研究比较过碳酸钠、次氯酸钠、升汞3种灭菌剂对烟草种子的表面灭菌效果,及对种子萌发和植株生长的影响。烟草种子分别用4.0%过碳酸钠水溶液（活性氧含量≥0.54%）处理20~40 min后直接接种于MS培养基中;33.3%次氯酸钠溶液（活性氯含量≥1.65 %）处理10 min或0.1%升汞水溶液灭菌4 min,无菌水清洗5次后接种于MS培养基中。3种方法灭菌效果相当,无污染,并且90 %的种子能萌发。过碳酸钠和次氯酸钠处理后种子萌发快、植株生长良好,且过碳酸钠灭菌组的植株生长略优;而升汞则延缓种子萌发并抑制植株生长。此外,因过碳酸钠灭菌后无需清洗,显示了其作为种子表面灭菌剂的极大优势。本研究建立了烟草种子表面灭菌的新方法,同时为其他植物的种子及外植体表面灭菌提供了参考,具有较大的实用价值。     

马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖

为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。     

湿加松外植体消毒及初始培养基筛选研究

摘 要：本文以2年生澳大利亚种源湿加松茎尖为试材,研究了不同消毒程序防控外植体污染的效果,得出最佳消毒程序为茎尖清水冲洗5min, 用含表面活化剂吐温-20的无菌水冲洗1min,70%乙醇消毒10s,0.1%HgCl2浸泡6.5min,无菌水冲洗5遍。以MS、1/2MS、GD、DCR、WPM、N6等6种针叶树常用培养基,细胞分裂素6-BA、生长素NAA进行湿加松基本培养基的筛选,调查芽的诱导、增殖、伸长和生根的情况。筛选出湿加松初始培养基为GD+BA(0.1－1.0mg/L)+NAA(0.1－0.4 mg/L)。     

吐烟花的组织培养

以吐烟花茎段为试验材料,研究其表面消毒方法和不同激素配比的培养基对吐烟花愈伤组织诱导、丛生芽扩繁以及幼苗生根的影响。研究结果表明,外植体表面消毒以70%酒精消毒15 s,无菌水漂洗1次,0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗1次后,再用0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗4次的效果最佳;同时筛选出吐烟花植株再生的较好激素浓度配比的培养基：MS+3.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA适合愈伤组织诱导,MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA对丛生芽诱导与扩繁效果较好,MS+0.3 mg/L NAA有利于生根,移栽成活率达91%,且植株生长良好。     

水稻质核互作雄性不育系选育的反向杂交法研究

不同的部分保持系可能存在不同的微效恢复基因,通过有性杂交,产生基因重组,能够获得完全保持系类型,但只有在不育细胞质中才能观察得到微效恢复基因是否存在以及它们的作用大小.反向杂交法以不育细胞质为选择背景,在杂交后代植株中直接观察到微效恢复基因的表达,获得的完全不育株,在一定程度上排除微效恢复基因,不育株再通过高温处理转换为可育后自交,来自不育株的微效恢复基因可以进一步排除掉,从而产生出没有(或很少)微效恢复基因的"亲本",利用该"亲本"高温处理后仍可转换为可育的特性,作为父本进行杂交或回交育种,在其后代中获得没有微效恢复基因的完全保持系.该研究为Cp 26不育细胞质源创造出了完全保持系.如果在田间鉴定出优异的完全不育株,对其进行单倍体育种(诱导孤雌生殖或花培),选择到没有(或很少)微效恢复基因的纯合不育株.再对其进行花培,筛选可育的突变体;或者利用纯合不育株的原生质体与一个已破坏细胞核的可育系原生质体融合,都可能得到具有纯合不育株细胞核和可育细胞质的保持系,而能够完善和改进反向杂交法.反向杂交法不但能够为所谓不能保持的不育细胞质源创造出保持系,而且有利于加强新不育系选育的目标性和预见性,提高不育系配合力和培育不同类型优异不育系.     

小麦K型(Ae.kotschi)雄性不育性育性 恢复的遗传分析

该研究选用3个高恢复度K型小麦杂交种的F2群体、1个化杀杂交种F2群体、1个K型杂交种F3高恢复度株系及1个常规品种群体,以自交结实率作为育性判断标准,通过对分离群体的田间育性调查,对小麦K型不育系的育性恢复机理进行研究。结果表明：在三个K型胞质雄性不育的F2群体中,可育单株与不育单株的比例经卡方检验符合63：1的理论比例,因此可以推断小麦K型胞质雄性不育的恢复由3对主效恢复基因控制,并表现为孢子体不育类型。     

Chromosomal location of fertility restoring genes for ‘wild abortive’ cytoplasmic male sterility using primary trisomics in rice

Summary Identification and location of fertility restoring genes facilitates their deployment in a hybrid breeding program involving cytoplasmic male sterility (CMS) system. The study aimed to locate fertility restorer genes of CMSWA system on specific chromosomes of rice using primary trisomics of IR36 (restorer), CMS (IR58025A) and maintainer (IR58025B) lines. Primary trisomic series (Triplo 1 to 12) was crossed as maternal parent with the maintainer line IR58025B. The selected trisomic and disomic F₁ plants were testcrossed as male parents with the CMS line IR58025A. Plants in testcross families derived from disomic F₁ plants (Group I crosses) were all diploid; however, in the testcross families derived from trisomic F₁ plants (Group II crosses), some trisomic plants were observed. Diploid plants in all testcross families were analyzed for pollen fertility using 1% IKI stain. All testeross families from Group I crosses segregated in the ratio of 2 fertile: 1 partially fertile+partially sterile: 1 sterile plants indicating that fertility restoration was controlled by two independent dominant genes: one of the genes was stronger than the other. Testcross families from Group II crosses segregated in 2 fertile: 1 partially fertile+ partially sterile: 1 sterile plants in crosses involving Triplo 1, 4, 5, 6, 8, 9, 11 and 12, but families involving triplo 7 and triplo 10 showed significantly higher X² values, indicating that the two fertility restorer genes were located on chromosome 7 and 10. Stronger restorer gene (Rf-WA-1) was located on chromosome 7 and weaker restorer gene (Rf-WA-2) was located on chromosome 10. These findings should facilitate tagging of these genes with molecular markers with the ultimate aim to practice marker-aided selection for fertility restoration ability.     

中国首例燕麦雄性不育的发现及遗传鉴定

对1994年发现的我国首例燕麦雄性不育材料进行了特征特性的观察和细胞学鉴定、以及不育性遗传的研究,结果表明:(1)该材料不育度为100%,属“无花粉型”的雄性不育,不育株小抱子败育发生在四分体形成后期到花粉粒形成早期阶段。(2)不育株与不同品种测交的F1代,6个组合表现育性恢复,2个组合出现一些完全不育株;恢复育性的植     

Development of dominant nuclear male-sterile lines with a blue seed marker in durum and common wheat

In order to develop genie male‐sterile lines with a blue seed marker, male‐sterile plants, controlled by a dominant nuclear gene Ms2, were used as female parents against a 4E disomic addition line ‘Xiaoyan Lanli’(2n= 44, AABBDD+4EII) as the male parent to produce monosomic addition lines with blue seed. Male‐sterile plants from the monosomic addition lines were pollinated with durum wheat for several generations and in 1989 a male‐sterile line with the blue grain gene and the male‐sterile gene Ms2 on the same additional chromosome was detected and named line 89‐2343. Using this line, the blue seed marker was successfully added to a short male‐sterile line containing Ms2 and Rht10. The segregation ratios of male sterility and seed colour as well as the chromosome figurations of different plants indicated that the blue grain genes, Ms2 and Rht10 were located on the same additional chromosome. Cytological analysis showed that the blue marker male‐sterile lines in durum wheat and common wheat were monosomic with an additional chromosome 4E. The inheritance ratio for blue seed male‐sterile plants and white seed male‐fertile plants was 19.7% and 80.3%, respectively, in common wheat. The potential for using blue marker sterile lines in population improvement and hybrid production is discussed.