广西沼泽型水牛垂体中促性腺激素释放激素的免疫组化定位及其受体基因表达

[目的]探讨广西沼泽型水牛垂体中促性腺激素释放激素（GnRH）的细胞定位以及是否存在促性腺激素释放激素受体（GnRH—R）。为GnRH-R的克隆及其序列分析提供理论依据。[方法]采用免疫组织化学ABC法,确定促性腺激素释放激素在垂体中的定位,结合图像分析系统检测GnRH在垂体中的含量,并利用RT—PCR技术扩增其受体基因片段。[结果]腺垂体远侧部中呈现较强的阳性GnRH免疫反应,阳性物质主要分布在胞质,胞核呈阴性。神经垂体中无阳性信号。同时,在垂体中扩增出大小为1008bp的GnRH—R基因片段。[结论]腺垂体远侧部边缘区中有大量GnRH及其受体存在,证实垂体前叶是下丘脑-垂体-性腺轴以及多个内分泌轴相互作用的重要部位。     

促性腺激素释放激素在不同品种公牛睾丸中的免疫组化定位

为了掌握促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体在不同品种公牛睾丸中的变化规律,采用免疫组化SP染色法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛睾丸中GnRH的分布表达进行对比研究。结果表明,不同品种公牛睾丸生精细胞和间质细胞中均有GnRH免疫阳性物质存在,经Image-Pro Plus 6.0软件统计发现,荷斯坦奶牛睾丸的GnRH阳性细胞个数最多、胞体最大,而广西本地黄牛睾丸的GnRH阳性细胞数量最少、胞体最小,说明GnRH在不同品种公牛睾丸的分布差异可能与生产性能有关,也提示GnRH在生殖调控中除能刺激垂体分泌FSH、LH外,可能直接与生殖器官发生作用,通过旁分泌、自分泌、神经分泌等多种方式调节蛋白类、多肽类激素的分泌及类固醇激素的产生,进而调节这些靶细胞和靶器官的功能活动。     

促性腺激素释放激素(GnRHs)及其Ⅰ型受体在哺乳动物中的研究进展

促性腺激素释放激素(GnRHs)是调节动物繁殖的关键激素,在哺乳动物中主要以2种形式存在.GnRHⅠ调节促性腺激素,GnRHⅡ则具有神经调节和促进性行为作用.GnRHs可通过自/旁分泌在生殖组织和肿瘤中发挥作用.但GnRH Ⅰ和GnRHⅡ似乎仍有信号的差异,通过Ⅰ型受体而产生不同的下游效应.配体受体的相互作用和受体构象变化参与受体激活原理已被部分确定.这些研究结果为选择新的促性腺激素释放激素类似物提供潜在的更广泛和更具体的应用前景.另外,通过合成新的促性腺激素释放激素类似物,可在生产中发挥更广泛和更具体的应用.     

促性腺激素释放激素在不同品种母牛垂体中的免疫组化定位

为了掌握促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体在不同品种母牛垂体中的变化规律,采用免疫组化SP染色法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛垂体中GnRH的分布表达进行对比研究。结果表明,不同品种母牛垂体中均发现有呈棕黄色或黄褐色的GnRH阳性物质存在,经Image-Pro Plus 6.0软件统计发现,摩拉杂交母水牛的GnRH免疫阳性细胞较其他3个品种的大（P〈0.05）,而平均光密度值介于荷斯坦母奶牛和广西本地母黄牛之间（P〉0.05）。在神经垂体中仅发现GnRH免疫阳性纤维,而未发现GnRH免疫阳性细胞;在腺垂体远侧部的细胞均呈GnRH免疫反应阳性,阳性物质主要分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞胞质内。说明GnRH对腺垂体激素分泌的调节可能是直接通过神经调节,而神经垂体可能只是GnRH调节过程的通路。     

促性腺激素抑制激素在公猪下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位研究

为揭示促性腺激素抑制激素(GnIH)在公猪生殖发育中的作用,本研究以15头雄性小梅山猪为研究对象,用免疫组化和半定量RT-PCR方法研究3、30、60、90和120 d的公猪(n=3)GnIH阳性细胞在下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位及在下丘脑的发育学变化。结果表明:GnIH在下丘脑主要分布于室旁核,GnIH阳性神经元呈纺锤形和多角形,且在下丘脑室旁核GnIH阳性神经元数目随日龄增长而上下波动,形态趋向成熟;在垂体分布非常广泛,无论是腺垂体还是神经垂体均有强烈的免疫阳性反应;在睾丸集中分布于生精小管内部,可见强烈的免疫阳性反应,在间质细胞也可见免疫阳性反应。GnIH mRNA的丰度随日龄增长而呈规律性波动,在120 d出现显著降低(P0.05)。结论:GnIH分布于小梅山公猪下丘脑-垂体-睾丸轴,并对其发育有调节作用。     

GnRH在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]研究促性腺激素释放激素（GnRH）在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位。[方法]采用免疫组织化学SuperPicTure^TM二步法检测5头青年摩杂一代水牛下丘脑、垂体和卵巢中GnRH的分布情况,研究GnRH在下丘脑、垂体及卵巢的分布上的联系,进而了解GnRH在下丘脑、垂体及卵巢三者之间分泌释放的途径。[结果]GnRH存在于青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节。青年摩杂一代水牛下丘脑中各主要核团都有GnRH免疫阳性神经元的分布,尤其以视上核、视前核、室旁核分布较多。对于垂体,GnRH免疫阳性产物只存在于青年摩杂一代水牛的腺垂体中。青年摩杂一代水牛卵巢中生殖上皮细胞、颗粒细胞和黄体细胞发现有GnRH免疫阳性产物。[结论]为进一步研究GnRH在生殖中的生理和作用机制提供形态学依据,并对青年摩杂一代水牛的繁殖育种起到参考指导作用。     

无脊椎动物促性腺激素释放激素研究进展

促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone,_GnRH）是下丘脑-垂体-性腺（hypothalamic-pituitary-go-nad,_HPG）轴的关键信息分子,在脊椎动物的性腺发育、性成熟和繁殖功能的维持中起着重要作用。用免疫组织化学、酶联免疫吸附测定以及高效液相色谱等方法在多种无脊椎动物中也检测到了其存在,主要分布于中枢神经以及生殖系统。可见,GnRH在无脊椎动物中具有普遍存在性。目前已至少发现28种类型的GnRH,15种来自脊椎动物,13种来自无脊椎动物。目前,无脊椎动物中除被囊动物外,仅有真蛸、海兔和商乌贼已经获得了GnRH的mRNA序列,其肽链分子结构与脊椎动物的类似。GnRH在无脊椎动物中具有广阔的研究空间,将为无脊椎动物的生殖调控的研究提供参考。     

应用LRH—A_3提高水牛受胎率研究初报

<正> 母畜下丘脑产生的促性腺激素释放激素(GnRH),通过垂体门脉到达腺垂体,刺激腺垂体促黄体素(LH)的分泌。母畜血浆中GnRH的浓度和LH的浓度呈正相关,LH对母畜的主要生理功能是引起卵巢上成熟的卵泡破裂(排卵)。本试验所用LRH—A_3的化学结构比GnRH少一个氨基酸,其活性比GnRH高数倍,且无任何不良反应。在母畜配种前给予外源性LRH—A_3,可以迅速提高其血浆中LH的浓度,并出现LH峰值,     

GnRH在广西摩拉杂交水牛乳腺中的免疫组化定位及其受体基因表达的研究

采用免疫组化及RT-PCR技术检测广西摩拉杂交水牛乳腺组织中的促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体.结果表明,15份正常乳腺组织中有13份呈GnRH免疫阳性反应,免疫阳性产物主要集中在腺泡细胞的胞质和胞膜,胞核无特异性染色;同时扩增的目的条带大小为1 008bp,与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因片段大小一致.     

GnRH主动去势免疫对公猪肝脏脂肪代谢的影响

为研究促性腺激素释放激素(GnRH)主动免疫对公猪肝脏脂肪代谢关键基因转录水平和酶含量的影响,选用36头公猪随机分为对照组、免疫组和手术组(n=12),测定血清睾酮、甘油三酯、血糖及肝脏组织中脂肪代谢关键酶含量,实时荧光定量PCR分析肝脏组织关键基因mRNA表达变化。结果显示:GnRH主动免疫后公猪血清甘油三酯含量呈上升趋势,血清睾酮含量显著下降(P0.05)。与对照组公猪相比,免疫去势显著提高肝脏脂肪酸合成酶(FAS)及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)含量(P0.05),且显著提高肝脏FAS、ACC、微粒体甘油三脂转运蛋白(MTTP)基因mRNA表达水平(P0.05),显著下调激素敏感酯酶(HSL)与过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)基因mRNA表达水平(P0.05)。但免疫公猪血清甘油三酯含量及肝脏FAS、ACC、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)mRNA表达仍显著低于手术去势公猪相应指标(P0.05)。上述结果表明,GnRH主动免疫提高了公猪肝脏脂肪合能力,但其脂肪合成能力仍低于传统手术去势公猪。     

壮阳促孕散对肾阳虚大鼠垂体和睾丸组织形态的影响

[目的]研究中药壮阳促孕散对肾阳虚大鼠垂体和睾丸组织形态的影响。[方法]用氢化可的松造大鼠肾阳虚模型,造模7 d,造模同时中药治疗组和阳性对照组灌胃给药13 d。处死大鼠后迅速摘取垂体和睾丸,制作垂体、睾丸切片,观察组织形态变化。[结果]造模后,模型对照组出现明显的阳虚症表现,垂体和睾丸组织发生退行性改变,阳性对照组、中药治疗组垂体和睾丸组织退行性改变得到改善。[结论]中药壮阳促孕散可使肾阳虚大鼠垂体、睾丸组织形态的退行性改变得到改善,对垂体-性腺轴的调节功能有促进作用。     

外源激素对草鱼垂体GTH细胞影响的比较研究

通过对草鱼脑垂体ＧＴＨ细胞（促性腺激素分泌细胞）的组织化学和超微结构观察，比较研究了注射外源神经激素（ＬＲＨ－Ａ）和外源促性腺激素（ＰＧ）对ＧＴＨ细胞的影响及作用途径。结果证实：ＬＲＨ－Ａ刺激垂体ＧＴＨ细胞产生促性腺激素，ＧＴＨ细胞内分泌颗粒（ｇｒ）大量减少，分泌小球（ｇｌ）彼此融合后解体，垂体组织ＧＴＨ细胞间出现空腔，有部分ＧＴＨ细胞解体。ＬＲＨ－Ａ作用途径是通过垂体ＧＴＨ细胞起作用；ＰＧ不通过     

表面展示GnRH重组T7噬菌体构建及其免疫效果

构建展示促性腺激素释放激素(GnRH)多肽的重组T7噬菌体,检测其对小鼠的免疫效果。人工合成GnRH多肽基因序列并用柔性Linker将其串联至3拷贝,然后克隆到T7 Select 415-1b噬菌体多克隆位点,构建重组噬菌体T7-3GnRH。经PCR鉴定并序列测定筛选阳性重组噬菌体,SDS-PAGE和Western-blot检测重组噬菌体表面GnRH多肽。重组噬菌体以每只1×1010PFU剂量免疫小鼠,免疫后不同时间段采血通过ELSIA检测血清中抗GnRH抗体,检测血清中睾酮含量,免疫后12周称体质量,剖检小鼠计算睾丸指数,进行睾丸的组织学观察。结果表明,成功构建了重组噬菌体T7-3GnRH,插入拷贝GnRH基因获得表面展示。噬菌体疫苗免疫后产生高水平抗GnRH抗体,其抗体发挥中和效应显著降低血清中睾酮含量。GnRH主动免疫抑制小鼠睾丸组织的发育,使睾丸萎缩,精子生成减少。获得了展示GnRH多肽的重组噬菌体,噬菌体疫苗免疫小鼠产生较高血清抗体并发挥良好的中和作用,为激素类小分子主动免疫做出有益探索。     

外源激素对草鱼垂体GTH细胞影响的比较研究

通过对草鱼脑垂体ＧＴＨ细胞（促性腺激素分泌细胞）的组织化学和超微结构观察，比较研究了注射外源神经激素（ＬＲＨ－Ａ）和外源促性腺激素（ＰＧ）对ＧＴＨ细胞的影响及作用途径。结果证实：ＬＲＨ－Ａ刺激垂体ＧＴＨ细胞产生促性腺激素，ＧＴＨ细胞内分泌颗粒（ｇｒ）大量减少，分泌小球（ｇｌ）彼此融合后解体，垂体组织ＧＴＨ细胞间出现空腔，有部分ＧＴＨ细胞解体。ＬＲＨ－Ａ作用途径是通过垂体ＧＴＨ细胞起作用；ＰＧ不通过垂体组织起作用，注射ＰＧ以后，ＧＴＨ细胞不发生变化。     

斑马鱼促性腺激素释放激素及相关肽基因的克隆与序列分析

从斑马鱼脑组织提取总RNA,应用RT-PCR方法克隆促性腺激素释放激素(GnRH) cDNA,其长度为646 bp,包括一个258 bp开放阅读框;编码的GnRH前体为86个氨基酸残基,由一个信号肽、GnRH十肽和一个由蛋白水解位点(Gly-Lys-Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽(GAP)组成;其中信号肽和相关肽的长度分别为24和49个氨基酸.该cDNA编码的GnRH的前体氨基酸序列与其他物种的GnRH前体基本一致.表明物种间GnRH cDNA的蛋白编码区高度保守,而非编码区的保守性程度很低.进化分析发现,斑马鱼与鲤、鲫、拟鲤、黑头软口鲦等淡水鲤科鱼类的同源性较高.     

哺乳动物促性腺激素释放激素（GnRH）研究进展

从基因结构、合成代谢、神经元分布、生物学功能及生产应用等方面对哺乳动物促性腺激素释放激素（GnRH）进行简要综述。     

促性腺激素释放激素在中国荷斯坦奶牛卵巢的免疫组化定位

为探索促性腺激素释放激素( GnRH)在中国荷斯坦奶牛卵巢中分布特点,采用免疫组化技术对中国荷斯坦奶牛卵巢中GnRH进行检测.结果表明,中国荷斯坦奶牛卵巢中存在大量GnRH阳性细胞,且主要位于颗粒层细胞和黄体细胞的胞质内.     

光照周期对动物下丘脑-垂体-性腺轴的调节机制

褪黑激素、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺和营养水平通过各自的作用方式对下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)产生综合调节作用,同时,光照周期通过改变褪黑激素、褪黑激素受体、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺的表达或脉冲方式以及营养水平的反馈效应而对这种调节作用产生影响。为深入研究光照周期对HPG轴的调节机制提供参考,对光照周期通过褪黑激素、kisspeptin、促性腺激素抑制激素、多巴胺调节HPG轴机制进行了综述。     

褪黑激素对雌性动物生殖系统调节作用的研究进展

褪黑激素的分泌具有日节律和季节性节律,对季节性繁殖动物的生殖功能具有重要的调节作用。大量研究表明,褪黑激素对生殖系统的影响因动物种类、生理状况的不同而表现出多重性,具有促进、抑制作用或无作用。褪黑激素对于牛、鼠类、禽类、人等均具有抑制生殖作用,对于绵羊、鹿等动物均具有促进生殖作用,而对光不敏感的动物无作用。光照对生殖机能的调节依靠褪黑激素介导传递到下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴。褪黑激素调节下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),而GnRH调控LH和FSH的分泌,进而调节性腺水平的生殖功能。近年来的研究表明,褪黑激素也可直接作用于卵巢,调控雌性动物的生殖系统及功能。     

GnIH和PRL与南方灰鹅繁殖活动调控之间的关系

一般认为动物的生殖发育和繁殖活动主要受下丘脑促性腺素释放激素(Gonadotrophin releasing hormone,GnRH)通过促进垂体促性腺激素的释放调控,2000年发现的促性腺素抑制激素(Gonadotrophin inhibitory hormone,GnIH)能直接抑制垂体促性腺激素的分泌,对动物繁殖活动发挥着关键抑制作用,这为研究动物繁殖活动调控开辟了新的领域;而在禽类繁殖活动调控中,除了GnIH的抑制作用外,催乳素(Prolactin,PRL)也是关键的抑制因素.文章依据现有的关于GnIH的研究报道,在分别阐明GnIH和PRL的分子结构及其与受体作用方式的基础上,充分论述了GnIH和PRL对禽类繁殖活动的调控作用,并结合南方灰鹅的繁殖特性及其相关繁殖活动调控的研究现状,探讨了GnIH和PRL在南方灰鹅繁殖活动中的可能调控机制及两者间的关系,为后期南方灰鹅的繁殖活动调控研究提供思路.