催乳素释放肽在青年摩杂一代水牛下丘脑一垂体一卵巢轴的免疫组化定位

[目的]探索催乳素释放肽（PrRP）在青年摩杂一代水牛生殖调控和泌乳中的作用。[方法]应用石蜡切片、HE染色、Nissl染色、免疫组化染色,对5头雌性的青年摩杂一代水牛下丘脑一垂体一卵巢轴上PrRP的分布进行定位,并与LEICA图像分析系统和sPSSl3．0统计分析软件相结合进行统计。[结果]在下丘脑内,PrRP免疫反应阳性神经元主要分布在视上核,在后核分布最少;PrRP免疫反应阳性纤维在室旁核高度密集,在弓状核、乳头体核密集,在视前核、前核、视交叉上核、腹内侧核、腹外侧核、背内侧核、背外侧核只有少量分布．在视上核无免疫反应阳性纤维。在垂体,在腺垂体部只观察到PrRP免疫反应阳性细胞,无免疫反应阳性纤维;在神经垂体部,有大量的免疫反应阳性纤维,无免疫反应阳性细胞。在卵巢的卵泡和间质中未见PrRP免疫反应阳性产物,仅在黄体的粒性细胞中发PrRP．癌反应阳性产物．[结论]PrRP广泛分布在青年靡杂一代水牛下丘脑一垂体一卵巢轴上的各个环节。     

GnRH在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]研究促性腺激素释放激素（GnRH）在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位。[方法]采用免疫组织化学SuperPicTure^TM二步法检测5头青年摩杂一代水牛下丘脑、垂体和卵巢中GnRH的分布情况,研究GnRH在下丘脑、垂体及卵巢的分布上的联系,进而了解GnRH在下丘脑、垂体及卵巢三者之间分泌释放的途径。[结果]GnRH存在于青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节。青年摩杂一代水牛下丘脑中各主要核团都有GnRH免疫阳性神经元的分布,尤其以视上核、视前核、室旁核分布较多。对于垂体,GnRH免疫阳性产物只存在于青年摩杂一代水牛的腺垂体中。青年摩杂一代水牛卵巢中生殖上皮细胞、颗粒细胞和黄体细胞发现有GnRH免疫阳性产物。[结论]为进一步研究GnRH在生殖中的生理和作用机制提供形态学依据,并对青年摩杂一代水牛的繁殖育种起到参考指导作用。     

促性腺激素释放激素在不同品种母牛垂体中的免疫组化定位

为了掌握促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体在不同品种母牛垂体中的变化规律,采用免疫组化SP染色法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛垂体中GnRH的分布表达进行对比研究。结果表明,不同品种母牛垂体中均发现有呈棕黄色或黄褐色的GnRH阳性物质存在,经Image-Pro Plus 6.0软件统计发现,摩拉杂交母水牛的GnRH免疫阳性细胞较其他3个品种的大（P〈0.05）,而平均光密度值介于荷斯坦母奶牛和广西本地母黄牛之间（P〉0.05）。在神经垂体中仅发现GnRH免疫阳性纤维,而未发现GnRH免疫阳性细胞;在腺垂体远侧部的细胞均呈GnRH免疫反应阳性,阳性物质主要分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞胞质内。说明GnRH对腺垂体激素分泌的调节可能是直接通过神经调节,而神经垂体可能只是GnRH调节过程的通路。     

青年期广西本地水牛下丘脑催产素的免疫组化定位

为研究青年期广西本地水牛催产素能神经元的表达特点,试验采用免疫组织化学技术中的PicTureTM二步法对广西本地水牛催产素神经元的定位及分布进行了研究.结果表明:下丘脑分泌催产素的神经元主要分布在室旁核、视上核和弓状核,在视前内侧核、视交叉上核、下丘脑前核、下丘脑后核、背内侧核、腹内侧核和乳头体核等核团也有一定数量的阳性神经元;阳性神经纤维仅见于室旁核、弓状核、乳头体核,在正中隆起第三脑室室管膜附近有较多数量的阳性神经纤维.观察结果提示:下丘脑催产素经神经垂体、第三脑室、血管3条途径释放;不同种属动物下丘脑催产素存在差异.     

摩杂一代水牛脑垂体前叶的超微结构研究

利用超薄切片对摩杂一代水牛脑垂体前叶的腺细胞进行透射电镜观察,发现5种腺细胞各有其超微结构特征：促性腺激素细胞胞体呈圆形,直径为7.6～9.0 μm;分泌颗粒分为明显的大小2种颗粒,且电子密度高。促甲状腺激素细胞的直径为6.0～7.5 μm;分泌颗粒少而最小,且大小无显著差异,多沿质膜分布;细胞核小,多位于中央。促肾上腺皮质激素细胞多在邻近垂体神经部的腺体前叶中,细胞核不规则,常偏向一侧,分泌颗粒常于细胞周边或一端;胞体直径为7.1～8.5 μm。促生长激素细胞数量多,核大而圆,分泌颗粒多且均一,充满胞质。催乳素细胞胞体最大,直径为11.2～13.4 μm,数量多,核小,常偏于一侧;分泌颗粒多而大小不等,充满胞质。旨在为研究摩杂一代水牛生殖泌乳的内分泌调控机制提供形态学基础资料。     

广西本地水牛垂体的形态学与组织学观察

本研究采用HE染色和Masson特殊染色方法对广西本地水牛垂体的形态学和组织学结构特征进行了观察分析,结果表明:广西本地水牛垂体呈卵圆形,重约1.19g,大小约为1.43cm×1.07cm×0.74cm。广西本地水牛的神经部在正中矢状面所占比例约为10%～15%。嗜酸性细胞、嗜碱性细胞的比例分别为42%和9.3%;母牛的嗜酸性细胞比例比公牛的高。观察结果揭示广西本地水牛垂体的结构与形态特征与其长期繁衍进化所处生态环境变化相适应,并与其生长、生产规律相一致。这些结果将为改良广西本地水牛提供形态学和组织学的理论依据。     

图像分析对免疫组化染色结果的影响

为了探讨图像分析系统中光密度和灰度值对免疫组化图像判别方面的异同,采用SuperPicTureTM通用试剂二步法对沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛下丘脑视上核催产素进行了检测.结果显示,与沼泽型水牛相比,彩色图片转化为八位灰度图片后,摩拉杂交水牛由差异不显著(P=0.143)转变为差异显著(P=0.03),荷斯坦奶牛差异性增强,由P=0.04至灰度图片的P=0.01.前后测得阳性面积并无明显差异.结果表明,在转化灰度图片前后,光密度和灰度值对于同一种染色结果得出不同的差异性结论,对阳性面积无显著影响.     

催产素在广西本地水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]研究催产素(OT)在广西本当水牛下丘脑、垂体及卵巢的分布上的联系,进而了解OT在下丘脑、垂体及卵巢3者之间分泌释放途径.[方法]采用免疫组织化学SuperPicTureTM二步法检测5头广西本地水牛的下丘脑、垂体和卵巢中催产素(OT)的分布情况.[结果]下丘脑中分泌OT的神经元主要分布在弓状核、视上核及室旁核,在腹内侧核、腹外侧核、交叉上核、背内侧核、乳头体、下丘脑前核等核团也有一定数量的阳性神经元;在腺垂体发现OT免疫反应阳性产物,自垂体柄和正中隆起的一侧可见到平行排列的OT阳性神经纤维断续地延伸至神经部;卵巢中只在生殖上皮、卵泡颗粒细胞和黄体细胞发现有大量OT免疫阳性产物.[结论]首次发现OT存在于广西本地水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节,并且下丘脑中各主要核团均有OT免疫阳性神经元的分布,尤其以弓状核、视上核、室旁核分布最多,为进一步研究OT的合成和作用机制提供形态学依据,并对广西本地水牛的繁殖育种及泌乳起到一定的参考指导作用. Abstract： To study the association of oxytocin (OT)'s distribution in hypothalamatic,pituitary and ovary,and understand how the OT secrete releasing in hypothalamus,pituitary and ovaries,the paraffin section immunohistochemistry SuparPicTureTM two step method was used to detect the distribution of OT in hypothalamatic-pituitary-ovary axis of five femal Guangxi local buffalo.The test results could provide morphology according to study the OT's synthesis and mechanism of action ,and could play reference and directions part in breeding Guangxi local buffalo.The test results display:oxytocin immuno reactive (OT-IR) neuronsw eremainly distributed arcuate nucleus,supraoptic nucleus and paraventricular nucleus,and OT-IR neurons was also found in ventrornedial nucleus,ventrolateralis nucleus,suprachiasrnaticus nucleus,dorsomediai nucleus,mamillary body,anterior hypothalamic nucleus and so on.The OT immunoactive production was found in pituitary and few OT-IR nerve fibers extended to post pituitary from hypophyseal stalk and medium eminence.In ovaries,OT immunoactive productions were only distributed in germinal epithelium cells,granulosa cells and lutein ceils.The OT was first discovered in singulorum link of hypothalamatic-pituitary-ovary axis of Guangxi local buffalo.The OT immunoactive neurons were first discovered in every main nucleus of Guangxi local buffalo hypothalamus,especially distributed in arcuate nucleus,supraoptic nucleus and paraventricular nucleus.     

摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛肾上腺组织结构比较学研究

为探讨摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛生产性能的差异,对其肾上腺组织结构进行比较研究。结果表明:水牛两侧肾上腺的形状大小不同,不同个体同侧的形状也不同,其被膜可清晰地分为外环层和内纵层,且广西沼泽型水牛被膜比摩杂一代水牛厚。广西沼泽型水牛比摩杂一代水牛的肾上腺球状带细胞长轴长2.00~4.00μm,网状带细胞长轴长4.00~5.00μm、短轴长2.00~3.00μm。由于广西沼泽型水牛肾上腺的被膜、球状带和束状带均比摩杂一代水牛厚,且网状带细胞显著大于摩杂一代水牛。因此可以推断,广西沼泽型水牛在调节心脏的活动和血管压力、抵御冷应激、对抗药物毒副作用等方面均优于摩杂一代水牛。     

摩杂一代水牛肌肉组织学特性与品质关系的对比

采用二因子多水平有重复的试验设计,通过石蜡切片法和透射电镜技术.利用DPS统计软件分析了摩杂一代水牛、广西本地水牛与广西本地黄牛的背最长肌和股四头肌的肌纤维直径、肌纤维密度和肌节长度.结果表明,摩杂一代水牛的肌肉品质比广西本地水牛的肌肉品质要好,同品种间股四头肌的肌肉品质比背最长肌要好.