比较两种免疫缺陷动物人肝癌模型的肿瘤生物学特性

为探讨裸小鼠和裸大鼠(rnu/rnu)两种免疫缺陷动物人肝癌皮下移植与原位移植后肿瘤生长和转移等生物学特性的差异,将Huh-7细胞株接种至裸小鼠皮下成瘤后采用组织学完整的组织块移植于裸小鼠和裸大鼠皮下和肝脏,建立皮下和原位移植模型,观察所建立模型的皮下和原位成瘤率、移植瘤生长、侵袭和转移情况,同时进行了病理组织学、超微结构、细胞增殖周期和异倍体的观察.裸大鼠皮下移植瘤模型肿瘤的生长速度远远大于裸小鼠.原位移植瘤模型裸大鼠成瘤率高达95.0%,其肺转移率形成率为50.0%,均高于裸小鼠.此实验证明应用裸大鼠较裸小鼠更适用于建立肝癌的皮下和原位移植模型,为探讨肝癌转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的动物模型.     

六种人癌细胞系裸小鼠移植瘤的转移研究

将国内自建的未经裸小鼠系统移植研究过的六种人癌细胞系接种于13只裸小鼠,均获成功。行连续鼠间传代,共皮下移植NC系裸小鼠352只。成活率99.7％,建立了六种人癌裸鼠移植瘤。对其自发转移的研究发现,其转移率上有高度(PC-84045 85.2％,CNE-2Z 81.5％),中度(CNE-1 59.3％),低度(宫-743 8.1％)和介于高、中度间(BGc-823 66.7％,MGc-803 62.5％)的转移,差异有统计学意义。CNE-2Z、CNE-1及BGc-823等移植瘤的转移均以淋巴结为主,MGc-803以肺转移为主,而PC-84045具有淋巴结及肺均高发转移的特点。六种移植瘤一般均于移植30天后表达出转移表型,并多在2～3个月充分表达。转移率高低与宿主性别无关。采用CNE-2Z裸鼠移植瘤的自发转移瘤组织进行移植并传代,获得了比用原发移植瘤更高的转移率。     

裸杂鼠自发性乳腺癌的裸鼠间移植及高转移表达

将ＮＣ系裸杂鼠（ｕｎ／＋）的自发性乳腺癌移植到同系裸小鼠皮下获成功并连续鼠间传１２代，共移植裸小鼠２７只，成活率 １００％。对该移植瘤的生长及转移特性的研究表明，其移植成功率高、潜伏期较短且相对稳定、生长迅速、间质血管丰富，并有高发的自发性肺转移的特点。该模型的建立对研究肿瘤转移的机制及肿瘤转移与血管生成等关系有一定意义。     

SCID小鼠原位接种LNCaP前列腺癌模型的建立

通过在SCID小鼠前列腺内接种LNCaP前列腺癌细胞建立了原位接种模型并探讨其应用价值。用微量注射器在SCID小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌LNCaP细胞106个建立原位移植瘤模型,以皮下移植瘤模型作为对照比较两者的生存期、肿瘤转移发生情况,并在电镜下观察LNCaP前列腺肿瘤细胞和小鼠正常前列腺组织细胞的特征。结果发现原位模型组小鼠平均生存时间为(21±2.1)d较对照组(35.0±4.5)d明显缩短,差异非常显著(P0.01);原位模型组小鼠全部发生肿瘤转移,其中盆腔淋巴和肺的转移发生率分别为100%(15/15)、60%(9/15);电镜观察发现SCID小鼠的正常前列腺细胞与癌变后的细胞体积及细胞器均有很大差异。SCID小鼠的前列腺癌原位移植瘤模型较好地模拟了人癌体内的自然生长状况,为进行前列腺癌的研究提供有用的工具。     

应用环孢菌素A制备BALB/C小鼠肺癌模型的实验研究

目的 探讨环孢菌素A(CsA)对建立皮下肺腺癌异种移植的BALB/C小鼠模型成瘤率的影响.方法 取50只BALB/C小鼠腋窝皮下接种人肺腺癌细胞系A549后,随机分为实验组和对照组各25只.实验组于接种第24h起每天腹腔注射CsA,连续10天.对照组则给予腹腔注射同体积的生理盐水.比较两组的成瘤率以及胸腺、脾脏重量指数、CD4+、CD8+T移植瘤免疫组化细胞数.结果 实验组移植成瘤率为88.00％,显著高于对照组的52.00％(P＜0.05).与对照组相比,实验组胸腺指数显著降低(P＜0.05),CD4+、CD8+T细胞数以及CD4+/CD8+T细胞比值亦显著降低(P均＜0.01),但脾脏指数差异无显著性(P＞0.05).结论 使用CsA可以提高人肺腺癌细胞系A549制备皮下异种移植的BALB/C小鼠肺癌模型的成功率.     

2株乳酸菌对鼠结肠癌模型的抑制效果

为比较酸奶中分离的短乳杆菌和鼠李糖乳杆菌对消化道肿瘤的潜在抑制效果,在肿瘤模型建立前2周给小鼠分别灌胃2株乳酸菌(2×108cfu),此后建立鼠结肠癌模型以比较2株乳酸菌对其是否具有抑制作用。通过给小鼠皮下注射CT26.WT细胞获得皮下增生物,经病理组织学检测为肿瘤后,通过腹部手术移植皮下瘤块至肠道表面,进而建立鼠结肠癌肿瘤模型。模型建立后通过腹部B超扫描监测肿瘤体积,并于模型建立2周后处死小鼠、分离肿瘤称重,计算抑瘤率。结果表明:皮下注射CT26.WT可以诱导获得皮下肿瘤,腹部手术、OB胶黏附瘤块建立了鼠结肠癌皮下移植瘤模型,荷瘤率为100%,术后存活率为96%以上。模型建立7 d后,腹部B超扫描检测结果表明,灌胃短乳杆菌组荷瘤鼠肿瘤的体积显著低于PBS组(P0.05),而鼠李糖乳杆菌灌胃组荷瘤鼠肿瘤体积也有下降趋势,但与PBS组相比差异不显著。分离荷瘤鼠肿瘤组织,灌胃2株乳酸菌组小鼠肿瘤重均有所下降,且短乳杆菌组更为明显,短乳杆菌抑瘤率为36.47%,鼠李糖乳杆菌抑瘤率为21.68%。构建了鼠结肠癌原位移植瘤模型,且短乳杆菌对鼠结肠癌具有较好的抑制效果,优于鼠李糖乳杆菌。     

五种人细癌胞系裸小鼠移植瘤转移特征的初步研究(摘要)

我们将五种来源于人类的低分化恶性上皮性肿瘤细胞系(鼻咽低分化鳞癌、肺低分化腺癌,宫颈低分化鳞癌各一种,胃低分化腺癌二种)移植到饲养于层流架中的1～3月龄NC 及 Swiss(nu/nu)两系裸小鼠,观察其移植瘤转移的某些生物学特性。原代接种细胞数为1～2×10~6细胞/0.5 ml,均一次获成功,共接种裸鼠10只,成活率为100%。五种人癌移植瘤鼠间连续传3～17代不等,共皮下移植两系裸鼠     

鼻咽癌克隆株及其转移灶组织裸鼠移植瘤自发性转移的研究

将鼻咽癌克隆细胞株ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５／Ｆ１移植入裸鼠痛部皮下，观察其自发性转移，进而用克隆株Ｈ５移植瘤的淋巴结及肺转移灶组织，直接接种裸鼠背部皮下，研究其转移表型的改变。结果显示：克隆株Ｈ５和Ｆ１的转移率不同；Ｈ５淋巴结转移灶及肺转移灶移植瘤，和其原代移植瘤比，其转移能力和转移途径有明显的差异。     

蜂花粉多糖液抑制肿瘤作用的实验研究

通过对小鼠腋下移植肿瘤S180后给荷瘤小鼠灌胃花粉多糖液,以观察花粉多糖液对肿瘤的抑制作用。将60只荷瘤小鼠随机分为环磷酰胺组(50 mg/kg)、阴性对照组、花粉多糖实验组,实验组连续给小鼠灌胃花粉多糖液10 d。结果表明:800 mg/kg花粉多糖组可明显降低瘤体重量,抑瘤率明显提高,达43.63%,与对照组比较差异显著,并呈剂量-效应关系。同时,吞噬指数与肿瘤对照组比较差异具极显著。结果显示花粉多糖液达到一定浓度时具有抑制肿瘤和提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用。     

六种人癌细胞系裸小鼠移植瘤转移的研究

人癌裸小鼠移植瘤是目前最接近人类肿瘤的人体外的整体实验模型,但移植后能否保持其原浸润转移     

蛹虫草多糖抗乳腺癌转移作用及机制研究

目的 研究蛹虫草多糖抗乳腺癌转移的作用及机制。方法 30只小鼠随机分为3组,分别为模型组、蛹虫草多糖低剂量组（20 mg/kg）和蛹虫草多糖高剂量组（80 mg/kg）,所有动物采用尾静脉接种4T1乳腺癌细胞建立乳腺癌肺转移模型,后2组接种后连续腹腔注射给予蛹虫草多糖15 d。以肺组织表面的肿瘤结节数、血清MMP-2和MMP-9含量、肺组织病理为检测指标;采用CCK8法检测蛹虫草多糖对4T1细胞增殖的影响;采用Caspase-3/7检测试剂盒测定细胞凋亡情况。结果 与模型组比较,蛹虫草多糖高剂量组能够明显降低小鼠肺部的肿瘤结节数（P<0.01）;与模型组比较,蛹虫草多糖高剂量组能够显著降低血清MMP-2和MMP-9的含量（P<0.01）;显微镜下发现,蛹虫草多糖高剂量组的肺组织肿瘤转移灶体积和数量均少于模型组。蛹虫草多糖对乳腺癌4T1细胞增殖具有浓度依赖性趋势的抑制作用,半数抑制浓度（IC₅₀）为0.092 mg/mL;与溶媒组比较,0.10 mg/mL和0.20 mg/mL的蛹虫草多糖可以显著增加Caspase-3/7的表达（P<0.01）。结论 蛹虫草多糖可抑制乳腺癌肺转移,其作用机制可能与抑制MMP-2和MMP-9的表达和直接的抗肿瘤作用有关。     

双歧杆菌完整肽聚糖对实验性胃癌抑制作用的研究

为研究双歧杆菌完整肽聚糖(WPG)对实验性胃癌生长的抑制作用,从两歧双歧杆菌中提取完整肽聚糖,以人胃癌裸鼠移植瘤为动物模型,观察不同浓度WPG对移植瘤生长的抑制情况,绘制肿瘤生长曲线,HE染色观察WPG对移植瘤组织形态的影响。结果显示,WPG低、中、高剂量组移植瘤的生长速度、平均瘤重均明显低于阴性对照组,抑瘤率分别为62.50%、67.87%和87.50%,与阳性对照(5-氟脲嘧啶)组相比无显著性差异(P>0.05)。HE染色结果显示,WPG组移植瘤中普遍存在不同程度的坏死。结果表明,双歧杆菌WPG能抑制裸鼠体内胃癌的生长,为开发新型高效、低毒的抗肿瘤药物提供试验依据。     

气腹压力对裸鼠卵巢癌生长的影响

目的观察不同气腹压力对恶性肿瘤生长的影响。方法 45只裸鼠腹腔内种植人卵巢癌瘤块,成模后随机分为3组：无气腹组、低气腹组（5mmHg）、高气腹组（10mmHg）,每组15只,模拟不同CO2气腹压力环境,时间为1h。术后4周开腹检查肿瘤生长平均质量,评价不同气腹压力对肿瘤生长的影响。结果高气腹组的肿瘤平均质量为（3245.3±72.2）mg,明显大于无气腹组的（1830.7±69.4）mg及低气腹组的（2362.4±71.3）mg,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论气腹压力增高可促进肿瘤生长,可能增加腹腔镜手术后肿瘤生长和种植转移机会。     

Concerted nonsyntenic allelic loss in human colorectal carcinoma

Familial polyposis coli (FPC) is caused by an autosomal dominant gene on chromosome 5, and it has been proposed that colorectal cancer in the general population arises from loss or inactivation of the FPC gene, analogous to recessive tumor genes in retinoblastoma and Wilms' tumor. Since allelic loss can be erroneously scored in nonhomogeneous samples, tumor cell populations were first microdissected from 24 colorectal carcinomas, an additional nine cancers were engrafted in nude mice, and nuclei were flow-sorted from an additional two. Of 31 cancers informative for chromosome 5 markers, only 6 (19%) showed loss of heterozygosity of chromosome 5 alleles, compared to 19 of 34 (56%) on chromosome 17, and 17 of 33 (52%) on chromosome 18. Therefore, it appears that (i) FPC is a true dominant for adenomatosis but not a common recessive gene for colon cancer; and (ii) simple Mendelian models involving loss of alleles at a single locus may be inappropriate for understanding common human solid tumors.     

大肠癌p53的表达与病理、PCNA、CEA及p53、PCNA、CEA与淋巴结转移的关系

目的：研究大肠癌p53的表达与病理、增殖细胞核抗原（PCNA）、癌胚抗原（CEA）及p53、PC-NA、CEA与淋巴结转移的关系。方法：应用链霉菌素-生物素（SP）免疫组化法，观察44例经病理确诊的大肠癌石腊标本中的p53表达、PCNA的阳性率和CEA的表达型式。结果：大肠癌p53阳性表达率为52．3％；大肠癌p53阳性表达与性别、年龄及肿瘤的部位、分化程度和湿润深度无关（P＞0．05），p53阳性表达者其淋巴结转移率较阴性者高（P＜0．05）；p53阳性表达及有淋巴结转移者其细胞增殖活性分别较p53阴性表达及无淋巴结转移者高（P＜0．05）；p53阳性表达及有淋巴结转移者其CEA表型均以胞浆型和间质型为主（P＜0．05）。结论：检测p53和PCNA表达及CEA表型对判断大肠癌的恶性程度、预测其林巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值。     

P53、nm23、PCNA在肺鳞癌和腺癌组织中的表达与淋巴结转移的关系

目的 :研究肺鳞癌与腺癌组织中抑癌基因 (P5 3)、转移抑制基因 (nm2 3)及增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达与淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组织化学 S- P法检测 86例肺癌标本中 P5 3,nm2 3,PCNA基因蛋白的表达。结果 :P5 3,nm2 3,PCNA在肺癌中的阳性表达率分别为 :5 7.0 % ,73.3% ,82 .5 % ,其中 P5 3在鳞癌中的阳性表达为 5 8.7% ,在腺癌中的阳性表达为 5 2 .2 % ,有淋巴结转移者 5 1.1% ,无淋巴结转移者 5 1.2 % ;nm2 3在鳞癌中的阳性表达为 74.6 % ,腺癌 6 9.9% ,有淋巴结转移者 88.9% ,无淋巴结转移者 95 .1% ;PCNA在鳞癌中的阳性表达为 92 .1% ,腺癌 5 6 .5 % ,有淋巴结转移者 80 .0 % ,无淋巴结转移者 90 .2 %。结论 :三种蛋白的表达与肺癌淋巴结转移无关。 (P>0 .0 5 )     

重组新城疫病毒对肝癌肺转移鼠的治疗效果

文章利用重组新城疫病毒(rNDA)治疗肝癌肺转移鼠,将免疫调节基因白细胞介素2(IL2)插入rNDV基因组,拯救获得rNDV-IL2。MTT法检验rNDV-IL2对肝癌HepG2细胞体外抑制效果。通过小鼠尾静脉注射H22肝癌细胞,构建肝癌细胞肺转移模型,腹腔注射rNDV和rNDV-IL2,治疗肝癌肺转移模型小鼠。结果表明,rNDV-IL2有效感染HepG2细胞,表达外源基因IL2并抑制HepG2细胞增殖。重组新城疫病毒rNDV-IL2治疗试验动物后,体内IL2基因表达量提高,重组新城疫病毒有效控制转移灶形成,且显著促进T细胞增殖,提高试验动物存活率,未治疗组、rDNV载体治疗组和rNDV-IL2治疗组30 d成活率分别为0、50%和77.8%。     

澳洲茄胺盐酸盐对小鼠肝癌H22抑制作用研究

目的研究观察澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型肿瘤小鼠肝癌H22的瘤重抑制率.方法本项研究采用肿瘤细胞悬液接种法制备小鼠移植性实体型肿瘤H22动物模型.腹腔注射给药,连续10 d.给药结束后,解剖小鼠,取瘤称质量,进行统计学处理及分析,观察药物作用,连续3次重复实验.结果经过研究发现：澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型小鼠肝癌H22抑制实验3次重复实验证实,在药物倍数剂量设置下,44 mg/kg剂量组与盐水对照组比较,有显著性差异;44 mg/kg剂量组瘤质量抑制率在55.1%～73.7%之间,平均抑瘤率为62.3%,P〈0.01.结论通过连续3次重复实验,澳洲茄胺盐酸盐对小鼠移植性实体型肿瘤肝癌H22有明显的抑制作用.     

澳洲茄胺盐酸盐注射剂对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用研究

目的通过3次抑瘤实验观察研究澳洲茄胺盐酸盐注射剂对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用.方法通过肿瘤细胞悬液接种法,制备小鼠Lewis肺癌动物模型,采用腹腔注射给药法,连续7 d,2次/d.给药结束后解剖小鼠,取瘤称重,观察药物作用.结果从给药剂量上来看,与对照组比较,11 mg/kg剂量组开始出现抑瘤作用,抑瘤率为43.82%,P〉0.05,虽有抑瘤作用,但无统计学意义;22 mg/kg组抑瘤率为65.32%,P〈0.001;33 mg/kg组抑瘤率为66.92%,P〈0.001;44 mg/kg组抑瘤率为78.53%,P〈0.001;55 mg/kg组抑瘤率为79.73%,P〈0.001.结论受试药物澳洲茄胺盐酸盐注射剂对小鼠Lewis肺癌有明显的抑瘤作用,受试药物从22 mg/kg剂量组开始到55 mg/kg剂量组为有效剂量组,4个剂量组之间呈现明显的量效关系.     

Establishment of Master Cell Stock and Working Cell Bank of MDCK Lines and Selection and Evaluation of the Lines as Candidate Viral Substrates for Approval Production of Combinational Canine Attenuated-live Virus Vaccines

Under the prerequisite that the incidence of cancer or tumor in negative-control nude mice inoculated subcutaneously with primary feline or canine kidney cell cultures purified in vitro at passage 3 was 0(0/22) and 0 (0/10), respectively. The incidence of the progressively-growing malignant tumor(MT) in positive-control nude mice inoculated subcutaneously with Hela cell cultures of KB, X, or NM20/X strain was 10/10, 25/25 and 5/51, respectively. The results showed that the incidence of tumor in nude mice with di-and hyperploid YB strain of MDCK cell during 17 - 23 passages, with hyper- and hypoploid KA strain of MDCK cell during 6 - 8 passages, with hypoploid WB strain of MDCK cell on passage 6, with hyper-and hypopioid H strain of MDCK cell during 8 - 24 passages was 2/24, 6/10, 5/10 and 10/15, respectively. The chromosomal analysis results showed that the ratio of difference in the rate of modal chromosome number between high(mcs + n) and lowest (mcs)passages was not more than 5- 15% and the structure aberrations was generally 0-3%. These results proved that the genetic characteristics of chromosomal number of cell lines determines their tumorigenicity, but it is species-specific. MDCK line has tumorigenicity no matter what its chromosome karyotype is, at least it has very low tumorigenicity even when its modal chromosome number is hypoploid. It is thus evident that MDCK cell of WB or H strain can be approved as substrate for the preparation of attenuated viral vaccines, but MDCK cell of YB or KA strain can not be approved as substrate for the preparation of attenuated viral vaccines.