蜡封管口法保藏菌种

为保持食用菌菌种的优良种性和防止杂菌污染,较长期保藏斜面菌种,我们试用蜡封管口法,效果良好。采用此法无需专门设备、特殊药物,材料易得,操作简便。具体做法如下: 1.培养基的制备。取大型试管(口径为20～25毫米),适当加大培养基中琼脂的比例(占3％),增加注入试管中培养基的数量(占容积的1/4),棉塞要做紧。培养基的配方应根据该菌种生长发育对营养的需求,选择最佳方案,一般多采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)。 2.接种培养。在已选定的菌株中,挑取茁壮的菌丝为接种体,接种体不要过大(3×3毫米)。在该菌生长最适的温度下进行培养,长满斜面后须继续培养2～3天。 3.剪塞浸蜡。将已培养好的斜面,齐管     

用玉米粒作母种扩大培养基

食用菌母种的扩大培养基,一般都需要加入琼脂作为凝固剂。但在较偏僻的农村,往往难以买到琼脂。为此,我们试验用碎玉米粒制作母种,取得了较好的效果。具体做法是:将玉米颗粒放清水内浸4小时左右,吸水发胀后捣碎成米粒大小,分装试管(装量为试管长度的1/3),然后擦净试管壁、塞棉花塞、高压灭菌。在接种箱內,将购买来的试管母种移入玉米粒培养基上,于25℃左右培养7～10天,     

卫生纸试管的制作

常用的琼脂斜面试管,制作手续较为麻烦,为此介绍一种简易可行的卫生纸试管做法。培养基配方:取清水500毫升,加入白糖20克,维生素B_13片,维生素B_63片。搅拌溶化后备用。用卫生纸一张折裁成7厘米见方小块,取8块一摞,再折叠成2厘米宽小条块。然后分装试管,一张卫生纸可制作4支试管。小条块装入试管后,即可将培养液倒入试管浸湿卫生纸后,再将多余的培养液倒出。千万不得使试管里有流动余液。然后用一层耐高温塑料纸包扎试管口,而后再用两层牛皮纸包扎。包好后置于1.5公斤/厘米~2高压灭菌30分钟,或常压灭菌3小时。     

利用粪草培养基制作双孢菇母种

用粪草培养基制作双孢菇母种,接种块萌发早,菌丝长势旺、均匀,菌丝满管较常用的玉米粉、PDA、麦粒等培养基制种早5～10天。现将其制作方法介绍如下: 1培养基配方 干粪草料250g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.59,VB_13片,蛋白胨5g,水1000mL。 2培养基制作 粪草料(发酵好的双孢菇粪草培养料)250g,置铝锅中,加水至淹没料,煮拂保持20～25分钟,用4～6层纱布过滤,取滤液;将滤液加热至沸,加入琼脂,文火并用玻棒搅拌,待琼脂完全溶化后加入其它营养物质,使其溶化;最后补足水至1000mL,调pH值,趁热分装试管(占试管长度的1/4～1/5),注意培养液易沾附试管口壁,加棉塞,5支或10支一把用牛皮纸包扎好,高压灭菌30分钟,趁热摆斜面。 3接种培养 试管斜面冷却凝固后,放入超净工作台或接种箱接种。接种后置25～28℃温度下培养,一般12～15天满管。     

菌种培养基简易制备方法

一、母种培养基的制备和菌种的分离及培养〈一〉培养基配方:1.PDA 培养基(常规配制装管)。2.碎玉米培养基:把玉米粒粉碎成0.1—0.3厘米大小的碎粒,加水浸泡12小时后,煮沸10分钟,拌入2%的石膏粉,凉干表面水分即可装管灭菌。但玉米粒培养基要装至试管的一半,且不需摆斜面。〈二〉灭菌:把试管放入低于管口7厘米的金属器皿内(高于管口棉塞易受潮,加低于器皿3     

用玉米粒制作母种培养基

制作食用菌母种培养基,一般都需要加入琼脂作为凝固剂。随着食用菌种植户的增多,对琼脂的需求量越来越大。在较偏僻的农村,往往难于买到琼脂,影响了食用菌的发展。我们试验用碎玉米制作母种培养基,取得了成功,解决了缺少琼脂的困难。此法简便易行,成活率高,成本低廉。现介绍出来,供大家一试。方法是,将玉米颗粒放清水内浸泡4小时左右,使吸水发胀后,捣碎成米粒大小,分装入试管内,装量为试管长度的三分之一。然后擦净试管壁,塞上棉塞,置高压锅内灭菌。待指针上升至0.5公斤/厘米~2压力时,打开放气阀,排除锅内冷凝水汽。继续     

平菇孢子简易分离法

笔者将多孢子分离与组织分离有机结合 ,使退化品种的优良特性得以恢复。现简介如下 ,以供同行参考。1　制备培养基　马铃薯 2 0 0 g,葡萄糖 2 0 g,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5 g,VB1微量 ,琼脂 18g。水 10 0 0 m L,p H值自然。按常规方法制试管斜面。2　选择种菇　选取生长健壮、八成熟 ,无病虫害的平菇一朵 ,用锋利小刀在其上切取菇形美观的菇肉组织一片待用。3　收集孢子及培养纯化　在无菌条件下 ,拨出斜面试管口的棉塞 ,用试管口从菇种菌褶处顶穿菇种片 ,使一小片菇种陷入管口以内 ,迅速塞好棉塞。于 2 4～ 2 6℃条件下恒温培养 6小时后…     

食用淀粉可配制斜面培养基

我们用市售以豌豆为原料制成的烹调用淀粉(俗称豆粉)配制成淀粉斜面培养基进行试验,效果良好。方法去皮马铃薯200克切碎,加水800毫升煮沸20分钟,四层纱布过滤,滤液中加入蔗糖20克。待滤液温度降至30℃左右时加入食用淀粉250～300克,加水至1000毫升,搅匀,立即分装试管,塞好棉塞,将其置于搪瓷盘中摆成斜面。将盛试管的搪瓷盘移入1000℃烘箱中烘烤30分钟形成斜面。取出试管     

失水空白琼脂培养基恢复试验

空白琼脂培养基存放久了由于失水干裂,无法使用,造成很大浪费。如何使培养基恢复,还要保证其营养成分不变,笔者就这一问题进行了试验。(一)用品无菌水,接种箱,70％酒精液,酒精灯,酒精棉球,注射器,铝锅,平菇菌株F_3,失水空白琼脂PDA培养基。(二)做法试验的全过程必须在灭菌接种箱内完成。注射器先吸入70％酒精液进行内部消毒,然后吸入无菌水清洗2次。根据失水多少注入水量也不同。一般18×180mm试管每支注入2～3ml。用酒精棉球先擦试管口,再用酒精灯烧棉塞外层,然后将已吸入无菌水的注射器针头灼烧灭菌后,沿管壁插入试管内,注水后迅速抽出,…     

黑木耳菌种母种的生产技术

<正>1母种培养基配方母种培养基用试管作培养容器,装入培养液并经过高压灭菌后摆成斜面,所以又称试管斜面培养基,常用于母种扩大培养及菌种保存。1.1生产母种配方1.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。1.1.2马铃薯葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:马铃薯200克,蛋白胨10克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。     

酒瓶代试管生产母种

在偏避山区的菇农,购买试管困难,而酒瓶几乎家家都有。为此,我们进行了酒瓶代试管生产母种试验,取得了较好效果。具体做法是:选无色透明酒瓶,洗净后沥干,将煮好的马铃薯琼脂培养基趁热分装于瓶中,每个容量为500ml 的酒瓶装培养基100ml(不要将培养基沾在瓶口上,以免污染),然后塞棉花,     

污染食用菌母种的纯化

1.细菌污染提纯法: (1)材料:含量为4万单位/1毫升的庆大霉素一支;经高压灭菌的PDA斜面培养基10支(试管规格18×180毫米);高压灭菌的1毫升注射器一支;6号针头一个。 (2)方法:在无菌箱(室)内,把4万单位/1毫升的庆大霉素液用砂轮割开,用无菌注射器分别注入10支冷却至45℃左右的斜面试管培养基中,摇动培养基使之充分混匀,立即摆成斜面。然后把被细菌污染的菌种以无菌操作移入该斜面培养基中,置25℃下培养。2次即可把细菌甩掉,效果甚佳,对食用菌菌丝无抑制作用。 2.霉菌污染提纯法: (1)试管棉塞受潮污染了霉菌,大都出现在斜面前端,可在酒精灯火焰上连同培养基一块灼     

胡萝卜可作食用菌母种培养基

经我们近二年多次反复试验证明,胡萝卜用于制作平菇、黑木耳、金针菇等食用菌母种培养基效果较好(金针菇略差一点),其发菌速度与PDA 培养基相仿,菌丝粗壮、浓白,有的还优于PDA 培养基。胡萝卜母种培养基的具体制作方法为:将新鲜胡萝卜、纵切开,在太阳下晒1天或自然干燥,让水分蒸发掉,然后按试管大小将胡萝卜削成斜面形状,装入试管、塞上棉塞,按常规灭菌,即在1kg/cm~2压力下,灭菌20     

用麦粒替代琼脂制试管母种

琼脂斜面母种,易失水、老化,保存时间较短,且在转接时有的琼脂块不萌发,有的长势较弱。为此,我们于1993年初试用麦粒培养基制试管母种,经三年多的实践证明,用麦粒生产试管母种具有诸多优点:原料价廉,操作简单,对菌种有复壮作用,菌丝萌发快且粗壮,抗老化,室温保藏一年左右也不会影响菌种质量。具体操作:称取干小麦1kg,加水煮至无白心(全张而不破皮),沥水后凉晒干至麦粒抓在手里不湿手为宜,装管至1/2,加棉塞,每公斤小麦可装150支试管,每10支扎成一捆用薄膜包住棉塞,高压灭菌1.5小时或常压灭菌6小时,自然冷却后即可用于接种。     

用碎玉米粒扩繁食用菌母种

常规母种培养基为ＰＤＡ，这对一般生产者很难办到，笔者用碎玉粒扩繁母种，收到较好效果。 选择无霉变的干燥玉米粒，经粉碎机去皮粉碎成米粒大小，在石灰水中浸２～３小时，水洗无混浊时，调ｐＨ值，沥水３～５分钟，象蒸馍一样隔水蒸５～１５分钟至８成熟，取出放入盆内，趁热按每公斤干粒加入白糖２０ｇ、食盐少许，拌匀待玉米粒不互相粘连似河沙状，分装至试管的１／２（干粒约１０ｇ），用木棒轻轻医平压实，粒面盖湿棉花垫，然后加棉塞，用牛皮纸７～１０支一捆扎好，高压灭菌５０分钟或常压９０分钟。按常规接种、培养，一般７～１…     

快速制作斜面培养基方法

制作斜面是制备菌种不可缺少的一步,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。我们在实践中摸索出一种简捷快速制斜面培养基的方法,现介绍如下: 1 将胶合板截成长18cm(与试管长度相等或略短),宽9cm(比排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。 2 在并排5支试管上面平置截好的胶合板,再在胶合板上面并放5支试管,然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好,用线扎紧,使胶合板两侧的试管保持平行,置高压锅中灭菌。 3 高压灭菌后,经自然冷却,待气压降至零时,将高压     

食用菌无琼脂培养基

琼脂是制备母种培养基试管斜面的必要原料。但它价贵,且小城镇不易见到。为此,想用资源丰富、价廉易得的原料来代替琼脂制备母种培养基斜面。 (一) 材料与方法:试验揉用大米粉、面粉和木薯粉三种为原料,以马铃薯葡萄糖琼脂培养基为对照,共设四个处理。马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)的制作方法同一般,三种无琼脂培养基的制作方法如下:分     

米饭培养基常温保存平菇菌种

笔者用米饭培养基室温保存耐温平菇HP—1菌种7个月,取得了较好效果,现简介如下:先要配备营养汁,其配方为马铃薯200克、葡萄糖10克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克,加水至1000毫升。然后在试管中装1/3大米,加入营养汁,以高出大米2～3毫米为宜。置锅内蒸熟,取出用筷子将饭粒扒松,加棉塞后常规灭菌。于1986年10月底接入耐温平菇HP—1组织块,在室温下培养10天,当菌丝长至培养基的4/5时,用塑料薄膜包扎试管口后,子常温保存。87年5月底检查,培养基剩下的1/5已长满菌丝,色泽没有变化,也无子实体发生。取其     

菇耳组织分离的技术改进

试管组织分离常常由于细菌、酵母菌污染导致失败,既耽误了时间又浪费了培养基,实是遗憾。现将此法操作略作改进,可达到分离成功的目的。(一)试管组织分离培养法:子实体选取、消毒、培养基制作均同常规,只是在接种时,使试管培养基的斜面朝下,将组织块放于试管棉塞前的内壁上,塞好棉塞后竖立试管让组织块沿壁下滑达管的底部并接触培养基。注意组织块下滑时不能接触到培养基,这样即使组织块带菌也不至于污染整个培养基斜面。接种后将试管立放或斜放,斜放程度不得低于培养基在     

菇菌简易分离法

为了适应食菌生产发展和野外分离菌种的需要,我们进行了菇菌简易分离法试验,取得了良好效果。试验培养基为试管斜面,其配制:鲜蘑菇片250g,琼脂18g,葡萄糖20g,KH_2PO_40.5g,MgSO_4.7H_2O0.5g,水1000ml,用NaOH调pH7.5。操作方法为:①管内贴褶法,取经酒精和火焰消毒过的接种针,挑取种菇菌褶一小片,贴附在试管斜面正上方壁上,管口对准火焰塞紧棉塞。