蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

实验采用蕙兰传统品种''崔梅''与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照.对萌发原球茎的增殖及分化进行研究.探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响.结果表明:110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为、W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA0.5mg/L.     

虎头兰组培快繁技术体系研究

通过对虎头兰无胚乳种子无菌萌发过程中原球茎诱导、继代增殖、试管苗生根等不同发育时期的培养基配方筛选研究,初步建立了一套组培快繁技术体系,结果表明:虎头兰无胚乳种子在温度(25±2)℃、光照强度1500～2000 lx、光照时间12 h/d的条件下,较适宜的原球茎诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的生根培养基为1/2MS+NAA1.0 mg/L.     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

香草兰的组织培养试验

通过从种子→原球茎→丛生芽→完整植株的试验过程,筛选出较适合香草兰种子无菌萌发和丛生芽诱导增殖的培养条件.结果表明:在温度32～36℃的暗培养条件下,香草兰种子无菌萌发的最适培养基为VW 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L;诱导丛生芽的最适培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.1 mg/L,温度(26±2)℃,光照强度1 500～2 000 lx、每天连续光照10 h;诱导出的小芽在1/2MS NAA 1.0 mg/L的生根培养基上培养20 d左右即可长出2～4条根,生根率达100%.     

云南独蒜兰原球茎诱导与增殖的研究

为组织培养快速繁殖云南独蒜兰,对其进行了种子无菌萌发的基本培养基、添加物与激素以及原球茎增殖激素配比的优化筛选.结果表明:在KC、1/2MS、B5这3种基本培养基中,B5较适于种子萌发;添加蛋白胨5g/L、马铃薯泥50g/L或活性炭粉1 g/L均有利于种子萌发形成原球茎;生长激素NAA、2,4-D对种子无菌萌发具有促进作用,而细胞分裂素6-BA则抑制了种子萌发.在以B5附加AC(活性炭)1g/L的基础培养基中,激素组合6-Bal.5mg/L+NAA0.5mg/L更有利于原球茎的增殖与生长.     

白芨组培快繁育苗技术研究

用白芨种子无菌播种,实生苗进行增殖、生根研究,结果表明:种子成熟度对种子的萌发影响较大,促进种子萌发的培养基为1/2MS+6-BA 1 mg/L;丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L,丛芽增殖系数可达2.88,生根培养基为1/2 MS+ NAA 0.5 mg/L+香蕉泥75 g/L.     

外源激素对杂交兰组培快繁的效应

[目的]探讨杂交兰（Cymbidium hybridum×faberi）组培快繁技术,为杂交兰的工厂化生产提供技术支撑.[方法]以杂交兰茎尖和腋芽为外植体,调查不同激素与活性炭（AC）组合对原球茎诱导、增殖分化和生根培养的影响.[结果]6-BA是影响原球茎诱导的主要因素,IBA是影响原球茎增殖和分化的主要因素.原球茎诱导和增殖最适培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖;MS＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖最适于原球茎分化成苗;壮苗生根培养基为1/2MS＋ IBA 0.5 mg/L＋AC 1.0 g/L＋3％蔗糖＋0.5％琼脂.[结论]在MS基本培养基中,低量的6-BA、IBA对杂交兰原球茎诱导、增殖与分化、生根和移栽成活均有明显促进效应,原球茎不同生长阶段对AC的需求量不同.     

野生‘沉香虎头兰’种子无菌萌发及快速繁殖技术研究

对沉香虎头兰种子进行无菌萌发和快繁研究,结果表明:1/2Ms 6-BA1.0-2.0mg/L NAA1.0-2.0mg/L可使种子萌发率达95%以上,效果最好;原球茎培育以1/2MS KT2.0mg/L NAA0.5mg/L为好,增殖培养以1/2MS 6-BA3.0mg/L NAA0.2mg/L最好;而生根培养以10-6Y2[注]为宜。     

血叶兰的无菌播种与快速繁殖

[目的]研究野生中药资源血叶兰的无菌播种技术,实现其快速繁殖.[方法]以血叶兰种子为外植体,接种于4种不同的培养基MS、1/2MS、花宝1号(3.0 g/L)和1/2花宝1号(1.5g/L),80 d后统计萌发率,筛选适合血叶兰种子荫发的培养基.在培养基中添加不同激素配比,不同的有机物等,筛选适宜血叶兰原球茎增殖与分化、壮苗与生根的培养基.[结果]成熟血叶兰种子在1/2花宝1号(1.5g/L)培养基中暗培养80 d左右形成原球茎团,萌发率为86.67％,是最适于血叶兰种子萌发的培养基;而种子萌发效果较差的是MS培养基.在1/2花宝1号(1.5 g/L)+6-BA 2.0 mg/L+椰汁100ml/1培养基中添加NAA 0.4-0.6 mg/L,原球茎团转接培养45 d左右形成原球茎和小芽的混合体,最高增殖倍数为6.11倍,增殖效果显著优于添加NAA 0.2和0.8 mg/L的培养基(P＜0.05)将培养获得的小芽转接至分别添加10％土豆汁、10％香蕉汁和100 ml/L椰汁的花宝1号(3.0 g/L)+NAA l.0 mg/L+培养基中进行壮苗和生根培养,结果表明添加香蕉汁10％的培养效果最佳,培养80 d后可形成完整植株,幼苗生根率为93.33％,株高7.19 cm.经温室大棚炼苗l0d后,将血叶兰试管苗移栽至泥炭土与1 cm火山石(3∶1)的混合基质中,60 d后成活率达91.7％.[结论]该研究以血叶兰种子为外植体所建立的血叶兰无菌播种育苗技术体系可用于血叶兰的种质资源保护、种苗生产及产业化开发等.     

三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

垂花蕙兰种子无菌播种和快速繁殖

以垂花蕙兰种子为试验材料,采用种子→原球茎→完整植株的途径,研究基本培养基、植物生长调节剂、有机添加物和活性炭等关键因素对垂花蕙兰种子萌发、原球茎增殖、分化和生根等各培养阶段的影响,探讨垂花蕙兰无菌播种和快速繁殖的关键技术。结果表明,种子在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋蔗糖20 g·L-1 培养中培养60 d可形成原球茎,种子萌发数可达90粒;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 0.5 mg·L-1 ＋ KT 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 培养基上增殖效果好,增殖系数为6.8;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 0.5 mg·L-1 ＋ NAA 0.1 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 上培养分化效果好,分化率高达89.2%;幼苗在1/2MS ＋ IBA 1.0 mg·L-1 ＋50 g·L-1 土豆泥＋蔗糖20 g·L-1 上培养30 d可生根,生根率为94.5%,苗高可达5.6 cm。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的若干因素

对影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的因素进行了分析。结果表明:用营养液、10%次氯酸钠溶液、0.1mol/L NaOH溶液手工振荡对杂交种子进行预处理均能促进种子萌发,其中春兰杂交种子经10%次氯酸钠的预处理培养后萌发率最高,蕙兰杂交种子经营养液振荡预处理培养后萌发率最高;1/2MS基本培养基加2 g/L蛋白胨比较适宜春兰杂交种子萌发,H基本培养基加2 g/L蛋白胨培养基比较适宜蕙兰杂交种子萌发;以葡萄糖为碳源的培养基培养春兰杂交种子萌发率高于以蔗糖为碳源的培养基;培养基中添加NAA、6-BA对提高春兰杂交种子的萌发率无明显影响,但一定浓度配比的NAA、6-BA能促进蕙兰杂交种子的萌发率。     

云南独蒜兰组培快繁技术研究

目的:通过研究云南独蒜兰种子萌发、小苗增殖和生根的适宜培养基,建立一套独蒜兰组织培养的快速繁殖体系。方法:以独蒜兰种子为外植体,研究激素(6-benzylaminopurine和1-naphthlcetic acid)不同质量浓度配比对云南独蒜兰小苗增殖和壮苗生根的影响。结果:云南独蒜兰小苗增殖最适培养基为1/2MS+NAA1.5mg/L+6-BA0.5mg/L,壮苗与生根最适培养基为1/2MS+NAA2.0mg/L+6-BA0.3mg/L。结论:建立了一套云南独蒜兰组培快繁体系,可用于大规模生产云南独蒜兰组培苗。     

春兰与大花蕙兰杂交种原球茎增殖研究

以春兰"紫萼"×大花蕙兰"日本绿"杂交种子萌发所得的原球茎为材料,采用N6、KC、1/2MS等3种基本培养基配合以6-BA、KT和NAA的不同浓度设计正交试验,筛选杂交种原球茎增殖的适宜培养基。结果表明:基本培养基是影响杂种后代原球茎增殖的首要因素,N6增殖效果最好;3种外源激素对原球茎的增殖率影响都极显著,影响由大到小顺序为NAAKT6-BA,NAA与6-BA浓度为1∶5或1∶15的比例,对原球茎增殖效果最好;春兰"紫萼"×大花蕙兰"日本绿"杂交种原球茎增殖最适宜培养基为N6+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L 6-BA或N6+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L KT+1.5 mg/L 6-BA。     

竹叶兰的无菌播种快繁技术研究

以竹叶兰种子为外植体进行无菌播种,成功诱导原球茎并再生植株,建立其快繁体系。试验结果表明：（1）1／2MS＋香蕉泥30．0g／L为最佳种子萌发与原球茎诱导培养基;（2）1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋香蕉泥30．0g／L为最佳芽增殖培养基,且芽生长健壮;（3）1／2MS＋IBA0．5mg／L为最适生根培养基。     

三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎,萌发率超过80％以上;诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4．5;原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后,再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100．0％,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

云南独蒜兰×陈氏独蒜兰种子萌发与幼苗生长研究

以云南独蒜兰(Pleione yunnanensis)×陈氏独蒜兰(P.chunii)授粉120 d成熟未开裂蒴果的种子作为试验材料,研究不同浓度6-BA、NAA和花宝2号对其种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:种子萌发的适宜培养基为3 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+50 g/L马铃薯+50 g/L香蕉+2 g/L蛋白胨+2 g/L活性炭+7 g/L琼脂,萌发率(94.45%)显著高于其他处理组,且萌发后植株生长速度最快;NAA对该杂交种无菌萌发具有明显的促进作用,而细胞分裂素6-BA则在一定程度上抑制其萌发。针对假鳞茎膨大和植株高度2个指标,幼苗生长的适宜培养基为1 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+1 g/L蛋白胨+1 g/L活性炭+7 g/L琼脂,在所研究的3个因素中花宝2号对该杂交种假鳞茎膨大作用最大,NAA对植株高度促进作用最大。     

独花兰组织培养研究简

[目的]研究独兰花的组织培养方法.[方法]以独兰花假鳞茎为外植体,以1/2MS ＋0.5 mg/L 6-BA ＋0.05 mg/L NAA为芽诱导培养基,以1/2MS＋ 1.5 mg/L 6-BA＋ 0.05 mg/L NAA为生根培养基,研究外植体的芽诱导和生根情况.[结果]外植体消毒的最佳方式为75％酒精30 s＋0.2％ HgCl 6～7 min;试验外植体的污染率、诱导率、死亡率、成活率、生根率分别为14.3％、57.1％、28.6％、50.0％、33.9％.[结论]该研究为独花兰的规模化生产提供了技术指导.     

碧玉兰的组培快繁技术研究

以碧玉兰的茎尖、茎段作为外植体进行组织培养,结果表明:适宜的起始培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;生根培养基是1/2MS+NAA 1.0 mg/L。