朝鲜淫羊藿种胚组培研究

【目的】建立朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）种胚组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以朝鲜淫羊藿种胚为外植体,研究外植体最佳消毒方式;在1/2MS基础培养基上,采用L₉(3⁴)正交试验设计,探讨6-BA、NAA、IBA和蔗糖对种胚愈伤组织诱导的影响,筛选适宜培养基,并分析不同激素组合对愈伤组织增殖、丛生芽增殖及幼芽生根的影响。【结果】朝鲜淫羊藿的最佳消毒方式为：利用体积分数0.1% HgCl₂对种子表面消毒8 min,再对种胚消毒5 s,该条件下种子存活率为71.11%;诱导种胚愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,诱导率为47.78%;愈伤组织增殖的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L KT+0.3 mg/L NAA,增长率为172.67%;丛生芽的适宜增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数为2.78;0.5 mg/L NAA的生根效果最好,生根率为43.33%。【结论】建立了朝鲜淫羊藿种胚适宜的组织培养体系,在该体系下,组培苗长势良好,但生根效果需进一步研究。     

君迁子组培体系的建立及优化

【目的】建立君迁子（Diospyros lotus L.）组培快繁体系并进行优化,为君迁子组培苗的生产应用提供技术支持及理论依据。【方法】以污染率、褐化率、成活率为考察指标,设置体积分数10% H₂O₂消毒10,20,30 min和体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min 4个处理,筛选君迁子外植体适宜的消毒方法;分别以君迁子萌动芽、春梢、腋芽和休眠芽作为外植体,筛选最合适的外植体材料;分析DKW、（1/2N）MS、1/2MS、MS培养基对组培苗启动培养的影响,筛选组培苗生长的最适培养基;增殖培养中,激素ZT、6-BA均设0,1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L 5个水平,IAA设0.05,0.1,0.2 mg/L 3个水平,筛选组培苗继代增殖最适激素配比;最后分析不同质量浓度IBA（0,1.0,2.0,3.0 mg/L）对组培苗生根的影响。【结果】君迁子外植体最适的消毒方法为体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min;最佳外植体材料为萌动芽,其成活率可达60.00%;在（1/2N）MS培养基上组培苗生长更加健壮,启动培养效果较好;增殖培养最佳的激素配比为3.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,在此处理下,组培苗2级愈伤占比79.00%,显著高于其余处理,2级和3级株高占比分别为55.33%和44.67%,长势均匀且主茎粗壮,其增殖系数达5.83;君迁子生根培养较为适宜的IBA质量浓度为1.0 mg/L,生根率可达83.33%。【结论】初步建立了较为完整的君迁子组培体系,有助于柿砧木无性系产业化扩繁的推进。     

桃无菌体系建立的影响因素

以甜桃王、曙光和97-8-4为试材，研究外植体来源和状态（包括长度和鳞片有无）、消毒处理及基本培养基等因素对其无菌体系建立的影响。结果表明，实验室水培叶芽在刚从枝条上切下时即剥除鳞片，并用 HgCl₂（w=0.1%）进行消毒，再用G培养基为基本培养基，更有利于桃无菌体系的建立。甜桃王和97-8-4适宜采用长度小于2 cm的叶芽作为外植体，曙光适宜采用2 cm以上的叶芽。适宜甜桃王的HgCl₂(w=0.1%)消毒处理时间为 10 min ，曙光的HgCl₂(w=0.1%)消毒处理时间则以8 min为宜。     

马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁研究

【目的】探索马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁技术,为实现工厂化生产脱毒种薯提供技术支撑。【方法】采用茎尖培养脱毒法,以马铃薯顶芽为外植体,按不同灭菌时间进行单因子(3%NaClO和0.1%HgCl2)和双因子(75%酒精和0.1%HgCl2)消毒处理,再剥取0.3~0.7 mm茎尖接种到分别添加了不同浓度GA3、6-BA及6-BA和NAA的诱导培养基上诱导成苗。将诱导出的苗进行单腋芽切段快繁,并接种到添加有6-BA和PP333的单因子及双因子组合MS培养基中进行无菌苗继代增殖。【结果】75%酒精+0.1%HgCl2双因子灭菌较单因子3%NaClO和0.1%HgCl2效果好,污染率降至21.67%;茎尖诱导培养中,GA3和6-BA均能诱导茎尖萌芽,诱导趋势均先增后减,而以1.5 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA配合,诱导率达53.67%;增殖壮苗阶段,0.1 mg/L PP333和2.5 mg/L 6-BA配合,增殖倍数达6.59倍,且苗长势好,茎粗壮、叶色正常。【结论】桂农薯1号外植体消毒最佳灭菌处理为:75%酒精2 min+0.1%HgCl211 min;最佳茎尖诱导配方为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;适合继代增殖壮苗培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L PP333。     

福建柏组织培养体系的建立及优化

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比，为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体，在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下，研究体积分数0.1% HgCl₂浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果；以福建柏鳞叶和茎段为材料，通过单因素试验,研究生长素（NAA和2,4-D）对不同外植体愈伤组织诱导的影响，再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响；以福建柏愈伤组织为材料，采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响；以福建柏带芽茎段为材料，研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响；以福建柏分化苗为材料，采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响；以福建柏无根苗为材料，研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】（1）福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 10 min，污染率为16.67%；茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 15 min，污染率为23.33%。（2）鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，诱导率为81.67%；诱导出的愈伤组织白色近透明，长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L，诱导率为78.33%，诱导出的愈伤组织淡绿色，长势良好。（3）愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L，增殖质量为1.984 g，褐化率23.33%。（4）芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L，平均诱导芽数2.05个，平均萌动数1.70个，分化率100%。（5）分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L，平均生长长度为2.241 cm，无褐化，扩繁成活率为95.50%，扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体，鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳，长势好且稳定。     

烈香杜鹃嫩茎腋芽丛生芽诱导和植株再生

【目的】建立烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导和植株再生体系,为烈香杜鹃工厂化育苗奠定技术基础。【方法】以烈香杜鹃嫩茎为外植体,应用均匀设计法对影响烈香杜鹃腋芽丛生芽诱导和生根的各主要植物生长调节剂及其水平的作用进行探讨。【结果】适宜的烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导培养基为：1/2 DR+TDZ 2.80 mg/L+IAA 0.01 mg/L+GA₃ 1.85 mg/L,诱导率为99.8%;生根培养基为：1/2 DR+IAA 0.07 mg/L+NAA 0.02 mg/L,生根率达99.7%。在生根培养基中添加GA₃ 2.00 mg/L,再生植株茎节在35 d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上,植株再生率为97.0%。再生植株炼苗移培后成活率达95.0%以上。【结论】建立了烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽植株再生体系。     

水草石斛外植体灭菌剂筛选试验

用3%NaClO、5%NaClO、7%NaClO和0.1%升汞（HgCl2）4个处理对水草石斛外植体灭菌。结果表明：0.1%HgCl2灭菌成活率较高,成活率为100%;其次7%NaClO,成活率为35%;5%NaClO次之,成活率为25%;3%NaClO最差,成活率为15%。7%NaClO和0.1%HgCl2诱导出的不定芽长势稍弱于3%NaClO和5%NaClO诱导出的不定芽。     

华重楼组培快繁技术研究

【目的】建立华重楼组培快繁技术体系。【方法】以华重楼幼苗为试材,研究外植体预处理方式 和消毒方法,筛选适宜诱导的外植体,筛选不定芽诱导、增殖以及生根和结鳞茎最佳培养基。【结果】华重楼 外植体先经过 0.5% 多菌灵浸泡 2 h,再利用 75% 乙醇浸泡 45 s 和 0.1% HgCl2 消毒 10 min,污染率最低（1.67%）, 诱导的不定芽长势最好。高 5~10 cm、带根系的华重楼幼苗或去掉茎叶的幼苗是最适外植体,不定芽诱导最佳 培养基为 WPM+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖,诱导率达 98.33%,萌发的新芽生长更快;不定芽增殖 最适培养基为 MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+30 g/L 蔗糖,培养 90 d 后增殖系数为 3.75;不定芽生根和结鳞茎 最适培养基为 WPM+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖,生根和结鳞茎率达 96.67%,根系数 3.84 条,根长 4.15 cm,鳞茎直径 0.86 cm。生根苗 3—5 月份移栽到基质为泥炭土︰珍珠岩︰河沙 =2 ∶ 1 ∶ 1 的组合物中成活 率最高,为 30%。【结论】建立了适合华重楼幼苗组培快繁的技术体系,为华重楼的资源保护及规模化生产优 质种苗奠定了基础。     

马铃薯优良品种大西洋、云薯201茎尖诱导技术

【目的】掌握马铃薯优良品种大西洋、云薯201茎尖诱导技术,为马铃薯工厂化脱毒快繁提供技术参考。【方法】以马铃薯优良品种大西洋、云薯201的茎尖作为试验材料,从外植体的消毒灭菌、不同基本培养基、植物激素种类及浓度配比探讨对马铃薯茎尖诱导效果的影响。【结果】在两因素和3因素灭菌剂组合中,以75%酒精30 s+10%NaClO 5 min+0.1%HgCl2 5 min为外植体芽灭菌最佳组合;MS基本培养基比其他基本培养基更利于茎芽的诱导;在茎芽诱导培养基中添加0.02 mg/L GA3可以提高芽的诱导率,以6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA3 0.02 mg/L激素组合处理的效果最好。【结论】建立了适合马铃薯品种大西洋和云薯201茎尖诱导的体系,为其工厂化育苗奠定基础。     

水氮磷耦合对拔节期冬小麦根系水分调节特性的影响

【目的】研究不同水氮磷耦合条件下,冬小麦根系形态、生理和细胞结构变化与功能的关系。【方法】采用盆栽调亏灌溉的方法,以“小偃22”为试材,采用拌肥方式于播种时设低肥N₁P₁(纯氮 0.1 g/kg、P₂O₅ 0.05 g/kg)和高肥N₂P₂(纯氮0.3 g/kg、P₂O₅ 0.15 g/kg)2个氮磷肥处理;在拔节期设土壤含水量分别为田间持水量的70%～85%（正常供水,CK）、55%～70%（轻度亏缺,LS）和40%～55%（重度亏缺,SS）3个水分处理。于水分亏缺处理20 d后取样,从形态学、生理代谢和解剖学层面研究拔节期不同水氮磷耦合对冬小麦根系水分调节特性的影响。【结果】在相同营养条件下,拔节期水分亏缺会导致冬小麦地下部干物质量、地上部干物质量和总生物量减小;但根冠比增加,与CK相比,LS、SS在N₁P₁和N₂P₂ 2种氮磷肥处理条件下,根冠比分别升高了32.3%,14.3%和11.5%,4.7%;根毛密度也明显增加。水分亏缺造成冬小麦根系皮层薄壁细胞体积变大,皮层占根系直径的比例增加;木质部导管横截面积显著减小,低肥条件下LS、SS分别较CK减小17.11%,43.32%,高肥条件下分别较CK减小11.10%,46.70%,并伴随有导管变形。同时,水分亏缺可以使冬小麦根系活力提高,游离脯氨酸、可溶性糖的合成和积累增加,从而提高其水分调节特性。同一水分状况下,与低肥条件相比,高肥条件能明显提高拔节期冬小麦的抗旱性。【结论】拔节期冬小麦在高肥轻度水分亏缺条件下,能够从代谢和结构2个层面作出更为合理、协调的综合性响应来维持植物体内的水分平衡,提高其水分利用效率和抵抗干旱的能力。     

枣阳市麦后移栽棉优质高产栽培关键技术 研究与应用

枣阳市麦后移栽棉优质高产栽培关键技术的研究与应用,形成了一套适宜枣阳棉花生产高产栽培技术体系,提升了枣阳棉花的综合生产能力,为枣阳优质棉基地建设发展提供了科技支撑,达到了棉田增效,棉农增收的目的。     

不同平菇菌糠施用量对辣椒长势及生理指标的影响

以线辣椒‘8819’为试验材料,以菌糠为有机肥,采用5个不同施用量梯度,研究其对辣椒株高、茎粗、土壤微生物数量、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性、叶绿素和丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明：除对照外,施用菌糠的各处理均能促进辣椒的长势,以菌糠施用量为800 kg·667 m-2时对茎粗的生长促进作用最为显著;不同菌糠施用量对不同生长阶段辣椒叶绿素含量的影响不同,与对照相比,施用菌糠的各处理均能显著提高叶绿素的含量,综合整个生长阶段,菌糠施用量为800 kg·667m-2时比其他处理提高幅度为10%～292%;施用菌糠的各处理均能增加土壤中细菌、放线菌和真菌的数量,提高土壤的肥力,进而促进辣椒的生长;不同菌糠施用量对保护酶系的影响表明,施用菌糠的各处理均能不同程度降低POD和CAT活性,但下降程度与菌糠的施用量不呈线性关系;除处理A外,其他处理均能显著降低MDA含量;本试验证明,适宜的菌糠施用量（400～1 600 kg·667 m-2）可以提高辣椒的光合作用并提高辣椒的抗逆能力。综合各检测指标,建议在生产上选用的菌糠施用量为800 kg·667m-2。     

不同调理剂对泔脚蚯蚓堆肥过程中腐熟度的影响

为探究可行的蚯蚓堆肥技术处理泔脚,以玉米秸秆、青草绿化垃圾、茶叶渣、原生质土壤作为调理剂,研究了不同调理剂对泔脚蚯蚓堆肥腐熟的影响,并尝试找出合适的腐熟度评价指标。结果表明,加入蚯蚓可缩短泔脚中有机质降解时间,提高物料总氮(TN)含量和堆肥效率;以玉米秸秆或绿化垃圾为调理剂可显著提高蚯蚓及微生物的活性,降低物料的C/N和腐熟后的毒性;但以玉米秸秆为调理剂时,堆肥过程中氮素相对易流失;以原生质土壤为调理剂时,有机质的降解速度最高,泔脚腐熟所需时间最短。     

无刺蜂蜂胶乙醇提取物的体外抗氧化及抗炎活性

【目的】 无刺蜂(stingless bees)是热带和亚热带地区重要的授粉昆虫之一,以尾部无蛰针为典型特征,其蜂胶采集量较意大利蜜蜂（ Apis mellifera ligustica ）更多,然而其蜂胶活性研究却相对匮乏。本文以来源于马来西亚无刺蜂 ( Heterotrigona itama )采集蜂胶的乙醇提取物(ethanol extract of H. itama propolis, EEHI)为研究对象,旨在探究其体外抗氧化和抗炎活性。【方法】 采用福林酚法和硝酸铝法测定EEHI中总酚酸和总黄酮含量,并采用DPPH和ABTS ^+·自由基清除能力评价EEHI的体外抗氧化能力;在此基础上,采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7炎症模型,通过CCK-8法检测EEHI对细胞相对存活率的影响,在保证EEHI对细胞无细胞毒性作用基础上,分别采用Griess法和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术评估EEHI对LPS诱导的RAW 264.7细胞中炎症介质一氧化氮（NO）释放量的影响以及其对炎症因子（ IL-1β 、 IL-10 和 INOS ）和抗氧化基因（ HO-1 ）信使RNA表达的影响;进一步利用免疫印迹和免疫荧光方法,以NF-κB炎症信号通路为切入点,研究EEHI对LPS诱导巨噬细胞中p-IκΒ α 和IκΒ α 蛋白表达以及NF-κB-p65蛋白移位的影响,从而探究EEHI潜在的抗炎机理。 【结果】 EEHI中总酚酸和总黄酮含量分别为54.70 mg GAE·g^-1和116.20 mg QE·g^-1;DPPH和ABTS^+·自由基清除能力IC₅₀值分别为275.60和 284.00 μg·mL^-1。EEHI对RAW 264.7细胞的安全浓度为0—40 μg·mL^-1。在LPS诱导的Raw 264.7细胞炎症模型中,相对于LPS刺激组,0—40 μg·mL^-1的EEHI以浓度依赖方式显著地抑制了LPS诱导的RAW 264.7细胞中NO的释放量,且降低了细胞中炎症因子 IL-1β 、 IL-10 和 INOS 的基因表达量,并增强了抗氧化基因 HO-1 的表达。进一步研究发现,0—40 μg·mL^-1的EEHI以浓度依赖方式显著抑制了LPS诱导的RAW 264.7细胞IκΒ α 蛋白的磷酸化,且40 μg·mL^-1的EEHI显著降低了NF-κB-p65蛋白的核移位现象,因此推测EEHI可能是通过抑制LPS诱导的NF-κB信号通路的激活进而发挥了体外抗炎活性。 【结论】 无刺蜂蜂胶乙醇提取物中含有大量多酚类化合物,具有较好的抗炎和抗氧化效果,极具开发利用价值。     

The Dynamics of Changes in Starch and Lipid Droplets and Sub-Cellular Localization of β-Amylase During the Growth of Lily Bulbs

The ultra-structure of mother and outer daughter scales of Lilium Oriental hybrid Sorbonne were studied using transmission electron microscope to examine the sub-cellular localization of starch and lipid droplets during growth and development from shoot emergence to senescence. The contents of starch granules and lipid droplets in the cell of the mother scales decreased significantly from shoot emergence to anthesis, indicating that these scales served as a source for growth and development. After flowering, the number of starch granules and lipid droplets increased dramatically, and finally the cells were filled with the above molecules indicating that the bulb becomes a major sink during bulb enlargement. Ultrastructure observation also showed that symplastic pathway is the main pathway in cells in the exchange and transportation of material during bulb development. The activity of β-amylase, one of the key enzymes catalyzing starch breakdown, showed a similar trend. The enzyme sub-cellular localization via immune-gold electron-microscopy showed that β- amylase was predominantly located together with starch granules, while the gold particles were scarcely found in other sub-cellular compartments. The result suggested that this enzyme is compartmented together with its functional substrate supporting its function in catalyzing starch breakdown in living plant cells.     

生物炭与不同肥料配施对镉胁迫下烟株生长的影响

以豫烟12号为供试材料,采用盆栽土培试验,探讨在重金属镉胁迫下,生物炭与不同肥料配施后,烟株根系活力、保护酶活性、烟叶中镉含量及烟叶生物量的变化。结果表明：生物炭的添加在一定程度上提高了根际土壤的pH值,添加生物炭的施肥处理土壤中的有效态镉含量和烟叶镉含量均在旺长期（60 d）后显著下降。成熟期（90 d）时,复合肥处理和有机肥+复合肥处理在添加生物炭后,土壤中的有效态镉含量分别降低了22.2%和7.14%,烟叶镉含量分别降低了61.3%和40.3%。生物炭与复合肥配施和生物炭与有机肥+复合肥配施的烟株根系活力分别较未添加生物炭的对应施肥处理提高了11.24和18.85 μg·g-1·h-1,烟叶生物量较未添加生物炭的施肥处理分别增加了67.6%和21.4%。胁迫环境下,两种施肥方式添加生物炭后显著降低了烟叶的MDA含量,减少了烟叶的膜质过氧化程度,烟叶的SOD,POD和CAT保护酶活性较未添加生物炭的施肥处理也有所增加,且以有机肥+复合肥添加生物炭的施肥处理对烟叶保护酶活性的提高较为显著。因此,在有机肥和复合肥配施的情况下添加生物炭可有效改善烟株的镉胁迫环境,降低烟叶中的镉含量。     

Characterization of dual enzyme resulted from bicistronic expression of two β-glucanases in porcine cells

Many animal feed grains contain high β-glucan in the cell wall. Pigs do not secret β-glucanase to degrade the β-glucan in their feed. The indigestible β-glucan not only blocks the release of nutrients from the grain cell wall, but also increases the digesta viscosity in the gastrointestinal tract of pigs. Therefore, dietary β-glucan significantly inhibits nutrient digestion and absorption in pigs. Transgenic expression of β-glucanase in the digestive tract of pigs may offer a solution to solve this problem. In the current study, four arti?cial codon-optimized β-glucanases genes was prepared and expressed in porcine cells. Only pBgA and pEgx showed high activity in transfected pig kidney cells. To improve the pH range and pH stability of β-glucanase, the two β-glucanases, pBgA and pEgx, were co-expressed in pig kidney cells and salivary gland cells by Linker A3 or 2A peptide. The resulting dual enzymes of pBgA3pEg and pBg2ApEg showed significantly enlarged pH range and significantly increased pH stability, as compared to parental enzymes. These results provide useful data for future study on increasing the feed digestibility of pigs by transgenic expression of β-glucanase in their salivary glands.     

α菠菜甾醇对小鼠小肠段药物转运体P-gp和PEPT1表达的影响

以酒石酸泰乐菌素为底药,探讨α 菠菜甾醇对小鼠小肠段药物转运体P gp和PEPT1表达的影响。48只小鼠分为4组：α 菠菜甾醇组,酒石酸泰乐菌素组,α 菠菜甾醇和酒石酸泰乐菌素混合组,生理盐水对照组。每组按0.2 mL·10 g-1体质量的剂量每天灌胃一次,共灌胃5 d,分别在1,3,5 d后处死1批采样。采用免疫组化的方法测定1,3,5 d的小鼠肠道上P gp和PEPT1的表达。试验结果表明,α 菠菜甾醇组和混合组相对于对照组外排性药物转运体P gp表达减少,而摄取性药物转运体PEPT1表达增多;酒石酸泰乐菌素组的外排性药物转运体P gp表达增多,摄取性药物转运体PEPT1表达减少;且都随着用药时间的延长差异增大。表明α 菠菜甾醇具有抑制药物转运体P gp表达和促进药物转运体PEPT1表达的作用。     

猪细小病毒VP2融合IFN-γ提高其在小鼠体内免疫原性

为了检验细胞因子IFN-γ与猪细小病毒VP2融合蛋白的免疫效力,通过重叠延伸PCR技术将IFN-γ与PPV的VP2基因融合到一起,利用杆状病毒表达系统构建了重组杆状病毒r Bac-VP2、r Bac-VP2-IFN-γ,并在小鼠上验证了免疫原性。猪细小病毒ELISA抗体和中和抗体检测结果显示,VP2-IFN-γ组明显高于VP2和PPV灭活苗组;淋巴细胞增殖试验结果表明,VP2-IFN-γ组淋巴细胞数明显高于不加IFN-γ组。上述结果表明IFN-γ可提高猪细小病毒亚单位疫苗体液和细胞免疫应答,为重组IFN-γ的猪细小病毒病亚单位疫苗开发提供理论依据。