碱性蛋白酶水解四棱豆蛋白质工艺条件的研究

以四棱豆的种子为原料,以水解度为衡量指标,通过单因素试验和正交试验分析,研究碱性蛋白酶Alcalase水解四棱豆蛋白质的最佳水解条件。结果表明,底物质量分数为3%,pH值为8.0,温度为60℃,水解时间为5 h,[E]/[S]为6%,在此条件下四棱豆蛋白质水解度为22.95%。     

薏米蛋白的酶水解工艺优化

为确定蛋白酶水解薏米蛋白的最佳工艺条件,以氮溶解指数(NSI)和水解度(DH)为指标对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶进行筛选,确定碱性蛋白酶为最佳水解用酶,并通过单因素和二次回归正交旋转试验,建立了碱性蛋白酶水解薏米蛋白的数学模型。结果表明,碱性蛋白酶在底物质量浓度39.95 g/L,酶用量1 201.75 U/g,温度54.61℃,pH值7.99,反应时间4 h的条件下,水解后的氮溶解指数可达95.79%。     

碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质工艺的研究

经5种蛋白酶比较试验的筛选,采用碱性蛋白酶进行水解蚕蛹蛋白的研究。在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,通过正交试验优化水解工艺条件,研究温度、底物浓度、时间、加酶量和pH值对蚕蛹蛋白质水解效果的影响。结果表明,碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质的最优工艺条件为:处理温度55℃,底物浓度3%,时间6 h,加酶量3%,pH 9.5,蚕蛹蛋白的水解度可达22.91%左右。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数(NSI)为0.9957。     

地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶改性大豆分离蛋白工艺条件的优化

研究利用基因工程菌制备的地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶水解改性大豆分离蛋白。采用正交旋转组合试验优化设计,确定地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶水解改性大豆分离蛋白的最佳工艺参数。结果表明,底物浓度为7.5%,加入酶量为3 000 U/g底物,水解温度为53℃,水解时间为2.0 h为最佳水解条件,最终得到大豆分离蛋白的水解度为30.3%,改性大豆分离蛋白的溶解度为95.68%。说明此水解条件能够较好地水解改性大豆分离蛋白,提高其溶解性。     

酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺研究

我国为玉米种植大国,玉米年产量达2.5×10~8t。在食品行业中,玉米目前主要用来生产玉米淀粉和玉米油,而副产物玉米蛋白却被丢弃掉,造成蛋白资源的极大浪费。以玉米蛋白粉为原料,首先超声预处理玉米蛋白(超声功率500 W,超声时间10 min),然后以超声预处理过的玉米蛋白为原料,采用酶解法,以水解度及体外抗氧化活性为考查指标,通过单因素试验和正交试验优化酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺参数。最终得到制备玉米蛋白抗氧化肽的最佳工艺参数为超声功率500 W,超声时间10 min,碱性蛋白酶[E]/[S]为10%,胰蛋白酶[E]/[S]为6%,酶解温度60℃,pH值9.0,酶解时间2 h。其中,酶解温度和pH值对玉米蛋白抗氧化肽的ABTS·清除活性影响最大。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

碱性蛋白酶水解烟叶蛋白工艺条件的优化

以烟叶蛋白为原料,用碱性蛋白酶进行水解。研究加酶量、pH值、温度、水解时间对烟叶蛋白水解度的影响。在单因素试验分析的基础上,进行正交试验,结合工业生产的实际情况,确定碱性蛋白酶水解烟叶蛋白的最佳工艺条件为:酶加量30 000 U,pH值9.0,温度55℃,水解时间2 h,在此条件下,水解度可达到24.719%。     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8 mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3 h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数(NSI)为0.995 7.     

鹰嘴豆短肽的分步酶解法制备及其营养价值评价

以鹰嘴豆蛋白为原料,建立复合酶分步酶解法制备鹰嘴豆短肽的工艺。在鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解的基础上,进一步采用中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme继续水解鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase酶解物,并对各影响因素进行研究,建立短肽得率与各影响因素的回归模型,利用高效液相色谱法和氨基酸自动分析仪等测定鹰嘴豆短肽的相对分子质量、氨基酸组成、一般营养成分,评价鹰嘴豆短肽的营养价值。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme制备鹰嘴豆短肽的最佳工艺参数为:复合酶添加量5 678 U/g,pH 7.0,水解时间216 min,水解温度55℃,在此条件下,短肽得率为63.79%,与碱性蛋白酶Alcalase单独酶解相比明显提高,水解度为26.74%;大部分水解产物的相对分子质量低于1 000、脂肪含量低,蛋白质、必需氨基酸等含量丰富,与FAO/WHO推荐的成人需求量模式相比,其第一限制氨基酸是蛋氨酸和半胱氨酸,与学龄儿童需求量模式相比,其第一限制氨基酸是苏氨酸,氨基酸分分别高达138.18和103.25;必需氨基酸与非必需氨基酸比值(EAA/NEAA)为0.73,接近FAO/WHO参考标准值0.6。该研究为进一步开发利用和工业化生产鹰嘴豆短肽奠定了基础。     

酶解金枪鱼头蛋白制备羟基自由基清除物的研究

用5种蛋白酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、typsin、pepsin以及Alcalase 2.4L)分别酶解金枪鱼头蛋白,以羟基自由基清除率为指标,筛选出羟基自由基清除力最强的是Alcalase 2.4L的酶解液,通过响应面试验优化Alcalase2.4L最佳酶解条件为:酶解时间340 min,酶解温度54℃,加酶量0.38%,该条件下酶解液的羟基自由基清除率最佳,为63.67%。     

鹰嘴豆浆液蛋白发酵与酶解效果的对比分析

为对比观察国产蛋白酶酶解和益生菌发酵降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果,比较酶解法、发酵法降解鹰嘴豆浆液蛋白为小分子蛋白肽的能力,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶分别酶解,纳豆芽孢杆菌、植物乳酸菌、蛹虫草分别发酵鹰嘴豆浆液蛋白,测定不同处理时间时的可溶性氮、DH、电泳条带等的变化情况。研究结果发现,国产碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆浆液蛋白240 min,上清液的可溶性氮含量可达到0.1389%,DH为6.43%;木瓜蛋白酶酶解240 min 时的上清液可溶性氮含量达到0.0972%,DH为4.41%;而发酵法处理以纳豆芽孢杆菌效果最显著,纳豆芽孢杆菌发酵处理鹰嘴豆浆液蛋白8 h时的上清液可溶性氮含量为0.0895%,DH为4.03%。本研究表明,酶解法降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果要比微生物发酵法处理时间短,降解效果更好。     

碱性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制备ACE抑制肽

采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度(DH)及水解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明,较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为:pH值7.0,温度50℃,酶底比4%,底物质量分数为2%。该条件下经60min水解,其水解度为12.23%,得到ACE抑制肽的IC50值为0.85mg/mL。     

文蛤蛋白酶解条件的优化及酶解产物体外抗氧化活性的分析

为了制备抗氧化活性多肽,利用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合的方式水解文蛤蛋白,在单因素实验结果的基础上,选取液料比、酶解温度和酶解pH为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合设计原理进行三因素三水平实验设计,以文蛤蛋白的水解度(DH%)为响应值,运用响应面(RSM)法对双酶复合水解条件进行优化,并分析了酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明：双酶复合酶解的最优酶解条件为水解时间4 h,酶添加量3%,双酶复合比（风味蛋白酶:木瓜蛋白酶）2:1,液固比3.25:1,温度51℃,pH 6.9,在此条件下文蛤蛋白水解度为36.11%,酶解产物清除DPPH和?OH自由基的IC50值分别为2.61、3.47 mg/mL,表现出较强的体外抗氧化活性,因此,可以利用优化后的酶解条件水解文蛤蛋白制备抗氧化多肽。     

复合酶解大豆蛋白工艺的研究

以大豆蛋白为原料,采用复合蛋白酶Protamex与木瓜蛋白酶酶解,并通过单因素和正交试验分析。结果表明,Protamex酶与木瓜蛋白酶配比为6∶4,pH值为7.0,底物质量分数为5%,酶解时间为8 h,温度为60℃且水解度达到34.59%,为最佳酶解工艺。     

多肽的酶法制备

以羊脾脏为原料,用菠萝蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解,选择最佳水解条件。结果表明,温度60℃,pH值7.0,加酶量5.0%,时间5.0h为最佳水解条件。     

响应面法优化玉米芯半纤维素水解条件

为了使玉米芯中半纤维素充分水解,笔者采用响应面法（RSM）,以玉米芯中木糖得率为考察指标,对玉米芯半纤维素水解条件进行优化。结果表明,在固液比（w/v）为1:10时,玉米芯半纤维素最佳水解条件为温度119.8℃、时间1.5 h、1.16%硫酸（v/v）,在此条件下玉米芯木糖得率为0.31 g/g。通过对玉米芯半纤维素水解条件的优化,提高了玉米芯木糖得率,为玉米芯半纤维素的充分水解奠定了基础,具有重要应用价值。     

芝麻蛋白酶水解条件的研究

对芝麻蛋白的酶水解工艺进行了初步研究,结果为:①通过比较,选用木瓜蛋白酶为酶解芝麻蛋白制备功能性短肽的专用酶,其工艺参数为:底物质量浓度9.0 g/L,酶添加量20.0%,pH值6.5,温度50℃,时间6 h,在此工艺下得到的酶解产物的抗氧化活性最高,对邻苯三酚自氧化的抑制率为35.6%;②酶解前的热处理可以提高酶水解的效果,最佳的热处理条件是将蛋白溶液在90℃下加热10 min。