鹰嘴豆短肽的分步酶解法制备及其营养价值评价

以鹰嘴豆蛋白为原料,建立复合酶分步酶解法制备鹰嘴豆短肽的工艺。在鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解的基础上,进一步采用中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme继续水解鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase酶解物,并对各影响因素进行研究,建立短肽得率与各影响因素的回归模型,利用高效液相色谱法和氨基酸自动分析仪等测定鹰嘴豆短肽的相对分子质量、氨基酸组成、一般营养成分,评价鹰嘴豆短肽的营养价值。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme制备鹰嘴豆短肽的最佳工艺参数为:复合酶添加量5 678 U/g,pH 7.0,水解时间216 min,水解温度55℃,在此条件下,短肽得率为63.79%,与碱性蛋白酶Alcalase单独酶解相比明显提高,水解度为26.74%;大部分水解产物的相对分子质量低于1 000、脂肪含量低,蛋白质、必需氨基酸等含量丰富,与FAO/WHO推荐的成人需求量模式相比,其第一限制氨基酸是蛋氨酸和半胱氨酸,与学龄儿童需求量模式相比,其第一限制氨基酸是苏氨酸,氨基酸分分别高达138.18和103.25;必需氨基酸与非必需氨基酸比值(EAA/NEAA)为0.73,接近FAO/WHO参考标准值0.6。该研究为进一步开发利用和工业化生产鹰嘴豆短肽奠定了基础。     

不同提取方法对甜杏仁蛋白形态及其功能性的影响

以甜杏仁粕为原料,研究碱溶酸沉法、酶法、碱酶二步法、超声辅助碱法和超声辅助酶法5种提取方法对甜杏仁蛋白形态和功能性的影响。结果表明,不同提取方法制备的甜杏仁蛋白表观聚集程度为:碱溶酸沉法超声辅助碱法碱酶二步法酶法超声辅助酶法。酶法制备甜杏仁蛋白的溶解性、泡沫稳定性和乳化性最高,碱酶二步法制备的甜杏仁蛋白在持水性、起泡性上均优于其他4种方法,碱溶酸沉法和超声辅助碱法的吸油性和乳化稳定性较好。该研究结果可为甜杏仁蛋白功能性改性提供理论依据。     

甜杏仁粕蛋白的碱性蛋白酶酶解动力学研究

为了探究甜杏仁粕蛋白酶解动力学特性,实现对冷榨甜杏仁粕的广泛利用及其生物活性肽的推广,从酶解反应机理出发,应用数学推导的方法,于pH 8.0、温度50℃条件下,以碱性蛋白酶为工具酶,研究甜杏仁粕蛋白在不同初始底物浓度和初始蛋白酶浓度下的水解进程并建立动力学模型。结果表明:甜杏仁粕蛋白的水解度随着初始底物浓度的上升而减小,随着初始蛋白酶浓度的上升而增大,碱性蛋白酶水解甜杏仁粕蛋白的速率动力学模型为:R=(27.035 E_0+0.498 8 S_0)exp[-0.173 3(DH)],酶解反应速率常数K_2为27.035 min~(-1);水解度-水解时间的动力学模型为:DH=5.77 ln[1+(4.69 E_0/S_0+0.086)t],酶失活的动力学常数K_4为2.992 min~(-1)。与试验结果相比,模型值与试验值吻合较好,表明所建动力学模型对甜杏仁肽产业化具有一定的指导作用。     

鹰嘴豆蛋白提取工艺优化及亚基组成分析

以鹰嘴豆为原料,采用碱溶酸沉法提取鹰嘴豆蛋白,考察料液比、碱溶pH、提取时间、提取温度四个因素对蛋白提取率的影响,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化鹰嘴豆蛋白提取的最佳条件,并利用SDS-PAGE凝胶电泳对鹰嘴豆蛋白进行亚基组成分析。结果表明,鹰嘴豆蛋白提取的最佳条件为:料液比1∶10(g/mL),碱溶pH 10.0,提取时间82 min,提取温度30℃,在此条件下,鹰嘴豆蛋白提取率可达83.29%,鹰嘴豆蛋白其分子质量主要分布在157、75、52、48、37、28、18 kDa七个区域。此研究结果可为鹰嘴豆蛋白工业化生产和进一步研究提供理论依据。